多分类变量逻辑回归及数据拟合在眩晕患者中的运用

眩晕是临床中常见症状之一,可发生于各个年龄。采用多分类变量逻辑回归探讨年龄、性别、慢性病等因素对前庭功能的影响,并利用数据拟合分析眩晕患者年龄分布趋势。结果发现听力下降侧更容易出现前庭功能下降,同时还发现7.6岁和45.4岁为眩晕发病的高峰期。     

抗汉滩病毒双链抗体重组杆状病毒在昆虫细胞中的表达

目的应用Bac—to-Bac杆状病毒表达系统构建具有抗汉滩病毒(HTNV)G2糖蛋白(GP)鼠源性mAb 3G1与抗HTNV核蛋白(NP)鼠源性mAb 1A8嵌合基因的重组杆状病毒,在昆虫细胞中表达抗HTNV双链抗体并对表达产物进行初步鉴定。方法构建含有嵌合基因的杆状病毒表达载体ScFv-pFBD-ScFv‘,转化DH10Bac致敏菌,利用其含有的细菌Tn7转座系统将嵌合基因重组至穿梭质粒Bacmid上,快速筛选出含有抗HTNV双链抗体嵌合基因的重组杆状病毒,在昆虫细胞中进行表达,并利用间接免疫荧光试验检测表达产物。结果构建了含抗HTNV双链抗体嵌合基因之重组杆状病毒,并在昆虫细胞中表达出特异性抗体,该抗体能被兔抗人Q抗体所识别并可与HTNV NP和GP特异性结合。结论成功地在昆虫细胞中表达出抗HTNV双链抗体,且该抗体具有与HTNV NP抗原和GP抗原结合的活性。     

抗HFRS病毒McAb 1A8可变区基因的克隆及序列分析

抗ＨＦＲＳ病毒ＭｃＡｂ１Ａ８可变区基因的克隆及序列分析阎岩徐志凯姜绍谆尹文吴兴安王海涛薛小平（第四军医大学微生物学教研室，西安７１００３２）基因工程小分子抗体由于分子小，免疫原性弱，穿透力强，易于抵达抗原“峡谷”位点，因此对于研究病毒及肿瘤分子的结构...     

贵州省2009年手足口病流行病学分析

手足口病是由多种肠道病毒引起的常见传染病,以婴幼儿发病为主.大部分患者症状轻微,以发热和手、足、口腔等部位的皮疹或疱疹为主要特征.少数患者可并发脑膜炎、脑炎、急性迟缓性麻痹、呼吸道感染、心肌炎,个别重症患儿可发生死亡[1].     

抗汉坦病毒鼠/人嵌合抗体真核表达载体的构建及表达

目的:构建抗汉坦病毒鼠/人嵌合抗体真核表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中获得稳定、高效表达,并对其生物学活性进行初步鉴定。方法:利用基因重组技术将本室前期构建的含有轻、重链嵌合基因的载体PMD18-T-VH和PMD18-T-VL双酶切获得重链、轻链基因后,克隆到前期改构的高效真核表达载体pCI-neo-M中,用脂质体法转染野生型CHO-K1细胞,在G418和氨甲喋呤(MTX)双筛选压力下筛选稳定高效表达细胞株,ELISA方法检测重组蛋白的表达,用Protein A HP Spin Trap纯化目的蛋白后进行SDS-PAGE和Western blot法检测,并通过体外中和实验检测其中和活性。结果:成功构建了抗汉坦病毒鼠/人嵌合抗体真核表达载体,转染CHO-K1细胞后经过3轮亚克隆筛选获得稳定表达抗汉坦病毒鼠/人嵌合抗体的细胞系,表达量约为1 mg/L,SDS-PAGE和Western blot法检测到目的蛋白的表达,微量细胞中和实验检测其中和活性,与亲本单克隆抗体(mAb)的中和活性相近。结论:抗汉坦病毒鼠/人嵌合抗体在CHO-K1细胞中成功表达,并具有良好的中和活性,为该抗体进一步的实验研究和临床应用奠定了基础。     

急性A型主动脉夹层术后肾衰竭的危险因素分析

目的 探讨急性A型主动脉夹层术后急性肾衰竭（acute renal failure,ARF）的危险因素。方法 回顾性分析2002年1月至2013年3月间接受手术的266例急性A型主动脉夹层患者资料,根据患者术后是否发生ARF分为ARF组和无ARF组,比较两组间一般临床特征间的差异,并采用多因素条件logistic回归方法分析术后ARF的独立危险因素。结果 18例（6.77%）患者术后发生ARF。两组患者在术前心功能不全（NYHA Ⅲ～Ⅳ级,P=0.024）、肾功能不全（P=0.002）、术中体外循环时间≥190 min（P=0.000）、主动脉阻断时间≥90 min（P=0.015）及术后二次开胸止血（P=0.004）、脑损伤（P=0.013）和急性呼吸功能障碍（P=0.000）的人数分布差异有统计学意义。ARF组患者的体外循环时间、主动脉阻断时间和围术期红细胞输注量高于无ARF组,差异有统计学意义（P均<0.05）。多因素条件logistic回归分析显示术前肾功能不全（OR=6.978,95% CI为1.874～25.997）、体外循环时间≥190 min（OR=5.663,95% CI为1.621～19.781）、围术期大量输注红细胞（OR=1.071,95% CI为1.030～1.113）和术后急性呼吸功能障碍（OR=4.853,95% CI为1.467～16.053）是术后ARF发生的独立危险因素。结论 ARF是多种因素共同作用导致的严重并发症。术后早期应严密观察患者病情变化,及时进行ARF评估并个体化干预,以减少住院死亡率并改善预后。     

影响医务工作者应对突发公共卫生事件能力的路径分析

目的 探讨医务工作者应对突发公共卫生事件能力的影响因素及相互关系.方法 通过调查问卷进行资料收集,对影响医务工作者应对突发公共卫生事件能力的相关因素作路径分析.结果 路径分析结果显示,医务工作者的健康状况是最强的影响因素,其次是年龄,月收入,医疗机构级别等.结论 医务工作者的应对能力首先是建立在健康的条件下才能得到充分的发挥.年龄越长,能力相对要强,因此,要加强对年轻人的培训,丰富他们的经验.     

抗HFRS病毒单抗1A8鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体的构建及表达

目的 构建HFRS病毒mAb1A8鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体，并进行表达。方法 将抗HFRS病毒mAb1A8的VH基因和人重链CH1基因加接，VL基因和人Ck基因连接，分别构建了鼠/人嵌合重链Fd基因和轻链基因，将它们克隆人pComb3，构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗表达载体，用辅噬菌体VCSM13超感染，ELISA间接夹心法检测抗体活性。结果 经多种限制性内切酶酶切鉴定载体构建正确，ELISA间接夹心法检测超感染上清为阳性。结论 成功构建了鼠/人嵌合Fab噬菌体抗体表达载体，并在噬菌体表面表达出可结合HFRS病毒抗原的鼠/人嵌合Fab抗体。     

汉滩病毒结构蛋白昆虫细胞融合表达产物的免疫原性评价

目的：研究汉滩病毒（HTNV）囊膜糖蛋白G1与核蛋白（NP）部分片段在昆虫细胞中融合表达产物的免疫学特性，为HTNV基因工程疫苗的研制提供依据。方法：构建含有HTNV G1S0.7嵌合基因的重组杆状病毒Bac-G1S0.7，用其感染的Sf9细胞免疫Balb/c小鼠。用间接免疫荧光法、ELISA法、微量细胞培养中和试验及T淋巴细胞增殖试验对被免疫小鼠的体液免疫及细胞免疫应答效果进行检测。结果：Bac-G1S0.7感染的昆虫细胞免疫小鼠后，测得免疫鼠血清抗HTNV抗体滴度最高达1：3200，含有特异性抗HTNV NP及抗HTNV糖蛋白G1的抗体，被免疫小鼠中有部分产生了较低滴度的中和抗体，免疫鼠脾细胞对HTNVNP或糖蛋白的增殖反应指数均高于阴性对照组。结论：G1S.07嵌合基因的昆虫细胞表达产物具有较好的免疫原性，可刺激机体同时产生针对HTNV NP与囊膜糖蛋白G1的细胞及体液免疫应答。     

抗HSV—糖蛋白（gp30）单克隆抗体重键可变区基因的克隆及序列分析

获得鼠抗ＨＳＶ－２型特异性糖蛋白单抗重链可变区基因，为基因工程改建及表达奠定基础。从分泌高中和活性的鼠抗ＨＳＶ－２型特异性单抗杂交瘤细胞系中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，用ＰＣＲ法扩增出抗体重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑选阳性克隆进行核酸序分析。