褪黑素通过抑制JAK2/STAT3通路抑制IL-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化

目的探究褪黑素对白细胞介素(IL)-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化(EMT)的作用和机制。方法首先用不同浓度的褪黑素(1、2、4、6和8 mM)与50 ng/mL重组IL-6蛋白处理SKOV3细胞,CCK-8检测细胞活力,选择两个褪黑素浓度,进行后续实验。然后将SKOV3细胞随机分成四组:对照组(不进行任何处理)、IL-6组(加入50 ng/mL IL-6)、IL-6+褪黑素低剂量组(同时加入50 ng/mL IL-6和2 mM褪黑素)、IL-6+褪黑素高剂量组(同时加入50 ng/mL IL-6和4 mM褪黑素)。IL-6加入48 h后,Transwell检测迁移细胞数目,Real-time PCR检测E-cadherin和Vimentin mRNA表达,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化JAK2(p-JAK2)、信号传导和转录激活因子3(STAT3)和磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。结果褪黑素能够抑制IL-6增加的细胞活力,且呈现剂量依赖性。后续选择2 mM和4 mM褪黑素进行实验。与对照组相比,IL-6组中迁移细胞数目、Vimentin mRNA和蛋白水平、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3增加,E-cadherin mRNA和蛋白水平降低,差异均有统计学意义(P均0.05);与IL-6组相比,IL-6+褪黑素组迁移细胞数目、Vimentin mRNA和蛋白水平、p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3降低,E-cadherin mRNA和蛋白水平增加,且高剂量组中变化更加明显,差异均具有统计学意义(P均0.05)。结论褪黑素能够抑制IL-6诱导的卵巢癌SKOV3细胞EMT,可能是通过抑制JAK2/STAT3通路发挥作用。     

siRNA抑制卵巢癌细胞株SKOV3 HPA基因表达的研究

目的: 〖HT5"SS〗研究siRNA对卵巢癌细胞株SKOV3中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)基因表达的抑制作用。〖HT5W〗方法: 〖HT5"SS〗设计合成两对HPA编码基因的反向重复序列,中间间隔9个核苷酸序列,通过定向克隆至载体PGenesil1,构建siRNA真核表达载体,经稳定转染SKOV3细胞后应用RTPCR、realtime PCR及免疫组化技术检测卵巢癌细胞中HPA基因mRNA及蛋白表达水平的抑制情况。〖HT5W〗结果: 〖HT5"SS〗测序证实成功地构建了编码2条shRNA的siRNA真核表达载体。通过RTPCR、realtime PCR及免疫组化技术检测转染siRNA的SKOV3细胞,与对照组相比,HPA mRNA表达水平和蛋白表达水平明显降低。〖HT5W〗结论:〖HT5"SS〗构建的PGenesil1(+)HPA重组质粒能有效的抑制HPA基因在卵巢癌细胞株SKOV3中的表达,为研究HPA基因在肿瘤细胞中的调节途径和肿瘤的基因治疗提供了新的方法。     

缺氧诱导因子1α在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的差异表达

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白及其mRNA在妊高征和正常妊娠胎盘组织中的表达的差异。方法:应用Westernblot检测10例妊高征和10例年龄匹配的正常妊娠的胎盘组织中HIF-1α蛋白表达的水平;应用实时定量PCR,检测两种组织中HIF-1αmRNA表达的水平。结果:与正常妊娠胎盘组织相比较,妊高征胎盘组织中HIF-1α蛋白和mRNA的表达水平明显增加(P<0.05)。结论:HIF-1α在妊高征胎盘组织中表达增高,可能与妊高征的病因及病理生理有关。     

妇产科专科医师规范化培训的实践与探讨

专科医师规范化培训是完善我国毕业后医学教育的重要工作,既能培养优秀合格的专科医生,也符合国际医学教育的发展趋势。根据目前妇产科专科医师规范化培训的开展情况及存在的问题,本文提出了进一步完善妇产科专科医师规范化培训的建议。     

微量血锌原卟啉测定在围产期中的应用

本文对我院产科门诊行产前检查的1124名健康孕妇进行了微量血锌原卟啉(ZPP)及血红蛋白(Hb)测定,同时.把两项均异常的孕妇409例随机分两组:治疗组108例、对照组301例。产后测定胎儿脐血ZPP,Hb值并分3组:正常组20例、治疗组23例、未治组25例。发现孕妇铁缺乏症发病率达40.2％,隐性缺铁3.8％。经补铁治疗贫血程度明显减轻,所生胎儿铁缺乏症明显减少,其差异非常显著(P<0.01)。因此,孕妇产前有效的补铁可预防婴儿铁缺乏症的发生,微量血ZPP测定可以做为孕期检查的敏感铁指标,值得推广。     

SDF-1α和HIF-1α在上皮性卵巢癌组织中表达的相关性

目的 观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在上皮性卵巢癌患者组织中的表达及其相关性分析. 方法 采用免疫组织化学SP法检测97例上皮性卵巢癌患者及9名正常卵巢组织SDF-1α和HIF-1α的表达. 结果 上皮性卵巢癌组织中SDF-1α与HIF-1α呈高表达,阳性率分别为70.1％和67.1％,明显高于正常卵巢组织;在上皮性卵巢癌组织中二者表达呈正相关(r=0.475). 结论 SDF-1α和HIF-1α在卵巢上皮性癌组织中联合表达增强,二者在上皮性卵巢癌的发生、发展中起到重要作用,有望探究在卵巢癌侵袭中是否存在HIF-1α-SDF-1α通路.     

两种来源的树突状细胞体外培养及免疫学特征比较

目的对脐血(UCB)和外周血(PB)体外诱导培养成树突状细胞(DC),并进行免疫学特征的比较,探索更好的DC来源。方法UCB和正常成人PB各10例为UCB组和PB组,分离出单个核细胞后,分别加入粒细胞巨细胞集落刺激因子(GM-CSF),白介素4(IL-4)和肿瘤坏死因子(TNF-α)培养基中,培养12d,每天用光镜观察细胞形态,于第3、6d和10d,用流式细胞仪进行CD11c、CD80、CD86及HLA-DR表型分析,于第10d透射电镜和扫描电镜观察细胞形态,并在第12d与淋巴细胞混合培养,对比两种源性DC激发淋巴细胞增殖能力。结果两者均诱导出具有典型形态的DC,UCB组诱导的DC细胞数量明显多于外周血诱导的细胞数(P<0.01)。激发淋巴细胞增殖能力,两者无区别(P>0.05)。结论UCB和PB中的MNs均可在体外诱导为成熟DC,UCB诱导的DC细胞数高于PB,两者激发淋巴细胞增殖能力相同,故UCB有可能成为免疫治疗DC的丰富来源。     

FAP-1在卵巢癌细胞株中的表达与意义

目的 :探讨Fas相关磷酸酯酶 -1(FAP 1)在卵巢癌细胞株SKOV3、HO 8910、TC 1和 3AO中的表达与意义。方法 :采用免疫印迹法和逆转录聚合酶链式反应方法 ,检测了 4种卵巢癌细胞株中FAP 1蛋白与核酸的表达水平 ;应用四唑盐比色法和流式细胞术检测了经抗Fas激活性抗体DX2诱导凋亡后 ,FAP 1分子与 4种细胞对凋亡敏感性的关系。结果 :FAP 1蛋白与mRNA的表达结果一致 ,均在SKOV3和HO 8910细胞中有表达 ,以SKOV3表达最强 ,而在TC 1和 3AO中未见表达。当用DX2以不同时间诱导凋亡后 ,FAP 1阴性株的细胞抑制率与凋亡率均高于FAP 1阳性株 ,P<0 0 5 ,P <0 0 1;而FAP 1阳性株中 ,HO 8910的生长抑制率又高于SKOV3 ,P <0 0 5。同时 ,FAP 1阴性株对DX2的反应具有时间依赖性 ,而FAP 1阳性株却表现出对DX2的逐渐耐受性。结论 :FAP 1对细胞凋亡的敏感性具有负性调控作用 ,可能对卵巢癌的发病和耐药具有重要意义