鼻咽癌组织库及其信息管理系统的建立

鼻咽癌好发于我国南方,是一种相对独特的肿瘤.研究显示,不同地区鼻咽癌的遗传和发病机制各不相同.要研究和探讨鼻咽癌的发病及遗传机制、筛选其早期诊断或预后相关的标志物、探寻其个体化治疗方案等,必须有充足的、合格的组织样本及其完整的临床资料;同时保护我国现存的、有限的疾病资源是每一个医务工作者的责任和义务[1-2].为此,我们收集并建立了规范化、标准化的鼻咽癌组织标本库及其信息管理系统.     

MTDH促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的实验研究

目的探讨星形胶质细胞上调基因1（astrocyte elevated gene 1,AEG 1,又称MTDH）对头颈部鳞状细胞癌（简称头颈鳞癌）放疗抵抗的影响。方法Western blotting检测放射线照射后头颈鳞癌细胞MTDH蛋白表达的改变。通过脂质体转染的MTDH cDNA和慢病毒介导的MTDH shRNA,分别在不同头颈鳞癌细胞中过表达和抑制MTDH,平板集落形成实验检测头颈鳞癌细胞放疗抵抗能力的改变,细胞免疫荧光染色检测DNA双链损伤指标γH2AX的表达。结果MTDH在头颈鳞癌细胞中的表达随着放射性照射剂量的增加和时间的延长逐渐升高。在CNE 2细胞中过表达MTDH,其体外集落形成能力增强;相反,在Tu686细胞中抑制MTDH的表达,其体外集落形成能力减弱。同时,细胞免疫荧光显示Tu686细胞在MTDH抑制后,其DNA双链损伤指标γH2AX的表达增加,表明DNA双链损伤修复过程受阻。结论MTDH能促进头颈鳞癌细胞放疗抵抗的形成,与其对DNA双链损伤修复的调控作用相关。     

PBL教学法在耳鼻咽喉科临床教学中的应用

以问题为基础的学习(problem-basedlearning,PBL)是一种以讨论问题为核心进行研究性学习的教学模式,是由美国神经病学教授Barrows于1969年在加拿大首创,目前已成为国际上较为流行的教学方法[1]。     

Beclin1调控鼻咽癌细胞放疗抵抗的体外研究

目的探讨Beclin1基因对鼻咽癌细胞放疗抵抗的影响。方法Western blotting法检测CNE2、6 10B及其放疗抵抗细胞CNE2 Rs、6 10BRs中Beclin1蛋白的表达，CNE2细胞经不同条件放射线照射后Beclin1蛋白的表达改变；通过脂质体转染Beclin1 cDNA和慢病毒介导的Beclin1 shRNA，在6 10B细胞和CNE2 Rs细胞中分别过表达及沉默Beclin1基因，平板克隆集落形成实验检测鼻咽癌细胞的放疗抵抗能力的改变；细胞免疫荧光法检测DNA双链损伤相关指标γ H2AX表达的改变。结果Beclin1蛋白在放疗抵抗细胞中表达增加，同时随着放疗时间的延长及放疗剂量的增加，Beclin1蛋白表达迅速升高，随后趋于基础水平；Beclin1过表达后6 10B细胞克隆集落形成能力增强，生存分数增加，γ H2AX焦点数量减少；相反，Beclin1沉默后，CNE2 Rs细胞克隆集落形成能力下降，生存分数下降，γ H2AX焦点数量增加。结论Beclin1能促进鼻咽癌细胞的放疗抵抗性，其与放疗后DNA双链损伤修复调控可能相关。     

新型冠状病毒肺炎疫情下气管切开术适应证的总结与防护建议

2019年底，由新型冠状病毒（SARS CoV 2）引起的新型冠状病毒肺炎属于乙类传染病甲类管理，从武汉开始席卷全国，目前疫情还在持续。病毒主要通过呼吸道飞沫及接触传播，密闭环境下存在气溶胶传播可能，人群普遍易感；传染源主要是新型冠状病毒肺炎感染者，但无症状感染者也可能成为传染源；其潜伏期1~14 d，且部分患者可无明显症状。气管切开术，尤其是局麻下进行者，可产生大量飞沫和气溶胶，疫情期间存在巨大的院内感染的风险。本文依据国家卫健委新型冠状病毒肺炎相关的诊疗方案和措施，结合中南大学湘雅医院耳鼻咽喉头颈外科在隔离病房行气管切开术的经验，探讨新型冠状病毒肺炎疫情期间气管切开术的基本原则，总结不同类型患者的手术适应证，并提出在隔离区进行气管切开术时的操作及防护建议。     

先天性外鼻发育不良并喙突畸形1例报告

先天性外鼻发育不良并喙突畸形发生率不高，文献尚无明确统计。其原因为胚胎在发育过程中额鼻突和上颌鼻突接合处的中胚层发育不良及原始胚胎组织残留引起。我科现遇1例，报道如下。     

Fascin1和E-cadherin在鼻咽癌组织中的表达及意义

[目的]探讨fascin1及E-cadherin蛋白的表达与鼻咽癌(NPC)临床病理特征及预后的相关性。[方法]应用免疫组化SP法检测fascin1及E-cadherin蛋白在51例鼻咽癌组织中的表达情况。[结果]Fascin1及E-cadherin蛋白在鼻咽癌组织中的表达均与颈淋巴结的转移、临床分期密切相关(P<0.05)。Fascin1与E-cadherin的表达呈负相关(r=-0.58,P<0.05)。Fascin1的表达与鼻咽癌患者的5年生存率相关(P<0.05),与1、3年生存率无相关性(P>0.05)。而E-cadherin与患者的预后无关。[结论]Fascin1的过表达可能是鼻咽癌早期颈淋巴结转移的重要因素,有可能作为检测鼻咽癌区域淋巴结转移潜力的重要指标之一,也为评价鼻咽癌预后提供参考价值,其调节机制可能与E-cadherin下调有关。     

全反式维甲酸诱导喉癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)诱导人喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2产生凋亡及对角蛋白基因13(Cytokeratin 13,CK13)mRNA表达的影响。方法ATRA作用Hep-2细胞72 h后,分别用光学显微镜、电镜观察细胞形态及超微结构改变;并用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测CK13mRNA的表达。结果ATRA作用72 h后的Hep-2细胞在光学显微镜及电镜下细胞逐渐变圆,生长减缓、细胞表面绒毛消失,核染色质致密,浓缩成块,胞质中有空泡形成,细胞表面出泡,脱落形成膜包裹的凋亡小体等细胞凋亡典型的形态学改变;CK13 mRNA表达水平随ATRA浓度的增高而逐渐上调(P<0.05)。结论ATRA可以诱导喉癌细胞凋亡及CK13mRNA表达上调,并呈时间和浓度依赖性。     

腰椎间盘突出症合并马尾神经损伤41例分析

目的探讨腰椎间盘突出症合并马尾神经损伤手术后的远期疗效。方法对41例腰椎间盘突出症合并马尾神经损伤患者的临床表现、影像学特征及手术情况进行分析。结果平均随访4年7个月。腰背痛伴间歇性跛行、下肢肌肉瘫痪、马尾神经功能完全恢复12例，部分恢复25例，无改变4例。结论早期诊断，48h内手术较晚期手术有较低的并发症发生率，尤其是括约肌功能及鞍区症状恢复。诊断主要依靠临床表现、CT、CTM及MRI。同时腰椎间盘摘除及腰椎管减压必须考虑脊柱的稳定性。马尾神经功能恢复取决于病理类型、原有椎管狭窄程度等。     

激光捕获显微切割及基因芯片技术构建喉鳞状细胞癌全基因组表达谱

目的 通过全基因组寡核苷酸基因芯片构建喉部纯化组织基因表达谱,筛选与喉癌相关的候选靶基因.方法 采用RNA保护技术保护组织标本,激光捕获显微切割纯化分离8例声门型喉癌标本中癌细胞及其相对应的癌旁相对正常的黏膜上皮细胞,结合HG U133.Plus2.0芯片技术,构建16例喉部纯化组织标本全基因组表达谱,筛选出喉癌相关靶基因;选择部分特异性的候选靶基因通过荧光定量PCR在mRNA水平检测基因的表达情况.结果 对16例喉部纯化组织基因组表达谱进行统计学处理及聚类分析,筛选出与喉癌发病相关的候选靶基因2351个;假阳性率为0.63%.对特异性候选基因MMP12、KRT16、RARB、PRB1 mRNA的荧光RT-PCR检测结果与基因表达谱的结果具有一致性.结论 利用全基因组基因芯片构建基因表达谱,可准确、高效地筛选出喉癌相关的候选靶基因,为寻找喉癌临床早期诊断的分子标记物及喉癌潜在的药物作用靶分子奠定坚实的理论基础.