次声对成年大鼠脑室下区神经前体细胞增殖的影响

目的探讨次声作用对成年大鼠脑室下区（SVZ）神经前体细胞增殖的影响。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠（n=24）随机分为正常对照组、对照组和次声组,次声组动物置于次声压力仓（16Hz、130dB）内连续作用7d（2h/d）。照射结束后,分别于3d、7d、10d和14d处死。处死前各组大鼠腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶尿苷（BrdU）3次,以BrdU免疫组织化学法检测各组SVZ内增殖细胞数目的变化。结果次声照射结束后3d,次声处理组动物SVZ区的BrdU阳性细胞数目较对照组显著减少（P〈0.01）,7d时阳性细胞数继续降低（P〈0.01）,但10d时开始逐渐恢复,14d时达到正常水平（P〉0.05）。结论16Hz、130dB次声可抑制成年大鼠SVZ神经前体细胞增殖。     

16Hz 130dB次声预处理对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的观察次声预处理对大鼠大脑中动脉阻闭（MCAO）模型致脑缺血的保护作用。方法SD雄性大鼠随机分为三组（每组10只）：对照组、假次声预处理组和次声预处理组。次声预处理组大鼠行16 Hz 130 dB的次声作用2 h/d,连续作用7 d;假次声预处理组大鼠每日放入次声仓但不接受次声,亦连续7 d;对照组大鼠正常饲养。最后一次预处理后24 h时,三组大鼠分别做MCAO模型,再灌注24 h后处死动物,观察脑梗死容积及神经功能学评分。结果与对照组相比,次声预处理组大鼠脑梗死容积明显减小（P〈0.05）,神经功能学评分明显提高（P〈0.05）。而假次声预处理组大鼠脑梗死容积和神经功能学评分与对照组相比无明显差异（P〉0.05）。结论16 Hz 130 dB次声预处理可明显减轻大鼠脑梗塞的容积,改善神经功能学评分。     

16Hz次声作用对大鼠海马TRPV4、GFAP和fos蛋白表达的影响

目的研究16Hz，90dB和130dB次声作用后，大鼠海马瞬时感受电位香草酸家族4（TRPV4）通道蛋白、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和fos蛋白的表达情况。方法16Hz，90dB和130dB次声作用于大鼠，2h／d，作用7d后采用免疫组织化学染色方法，观察大鼠海马中TRPV4蛋白、GFAP和fos蛋白表达的情况。结果16Hz，130dB次声作用7d后，与对照组相比较大鼠海马中显著表达TRPV4阳性神经元，GFAP阳性星形胶质细胞和fos阳性神经元（P〈0．05），三者分布一致，关系密切；90dB组大鼠的上述三种蛋白表达均较130dB组弱（P〈0．05）。结论16Hz，90dB和130dB次声作用可以引起大鼠海马TRPV4阳性细胞表达增多，且能够激活神经元和星形胶质细胞。     

卡马西平对匹罗卡品诱导成年癫间疒大鼠海马齿状回神经前体细胞增殖的影响

目的研究卡马西平对成年癫大鼠海马齿状回内源性神经前体细胞增殖的影响。方法采用氯化锂和匹罗卡品联合诱导大鼠癫模型,将癫大鼠随机分为癫对照组和癫卡马西平组,正常大鼠随机分为正常对照组和正常卡马西平组。癫对照组和正常对照组给以蒸馏水灌胃,同时癫卡马西平组和正常卡马西平组给予卡马西平灌胃。于灌胃后第6d腹腔注射5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记海马齿状回的内源性神经前体细胞的增殖情况;用免疫组化方法观察各组大鼠在注射BrdU后第1d、第7d齿状回BrdU阳性细胞数量的表达。结果①注射BrdU后第1d,癫对照组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组明显增加(P<0.01),癫卡马西平组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较癫对照组减少(P<0.05);②注射BrdU后第7d,癫对照组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组明显增加(P<0.01),癫卡马西平组大鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较癫对照组明显减少(P<0.05)。结论卡马西平抑制癫大鼠海马齿状回内源性神经前体细胞增殖。     

行为学训练对海马损伤梗死大鼠齿状回区BrdU和Nestin表达的影响

目的 探讨行为学训练对海马损伤梗死大鼠齿状回区神经干细胞增殖的影响。方法 采用光化学法制成单侧海马损伤梗死模型大鼠72只,随机分为训练组（n=36）和自由活动组（n=36）,每个组设1、7、14、21、28及35d 6个亚组。另设正常对照组36只,与模型组对应分为1、7、14、21、28及35d 6个亚组。训练组大鼠于造模1d后给予水迷宫训练,自由活动组大鼠自由活动,不予水迷宫训练。免疫荧光双标记法观察各不同时间点大鼠海马齿状回区溴脱氧尿嘧啶核苷（Bromodeoxyuridine,BrdU）与巢蛋白（Nestin）的双标记表达情况。结果 正常对照组大鼠海马齿状回区有少量BrdU/Nestin双标记阳性细胞,训练组及自由活动组大鼠在7、14、21及28d海马损伤梗死侧齿状回区BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量均有显著增多（P <0.01）;训练组大鼠7、14、21、28d时海马损伤梗死侧齿状回区的BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量显著高于自由活动组（P <0.01）;至35d时,训练组及自由活动组大鼠海马损伤梗死侧齿状回区BrdU/Nestin双标记阳性细胞数量与正常对照组无明显差异（P >0.05）。结论 行为学训练能显著增强海马损伤梗死大鼠齿状回区神经干细胞的增殖,促进神经功能恢复。     

不同浓度人参皂甙Rd对次声性脑损害的保护

目的观察次声对大鼠记忆功能的影响及不同剂量人参皂甙Rd对其脑损害的治疗作用。方法通过Y型电迷宫训练将成绩相近的SD大鼠随机分为5个组，除正常对照组以外均接受16Hz 130dB的次声作用gh／d。3个药物组在次声作用前3d开始分别给予不同剂量（30mg／kg、10mg／kg、2mg／kg）的人参皂甙Rd。次声作用7d后再次评定每组大鼠的迷宫成绩，并用单链DNA（Single-stranded DNA，ssDNA）免疫标记法检测海马内ssDNA（凋亡细胞）数。结果与正常对照组相比单纯次声组大鼠学习记忆功能下降、标记的ssDNA阳细胞数明显增多（P〈0．05）；与单纯次声组相比人参皂甙（30mg/kg、10mg／kg组）有明显的保护作用，减轻了学习记忆功能下降，ssDNA阳性细胞数明显减少（P〈0．05）。结论16Hz 130dB次声可引发大鼠海马损伤、细胞凋亡、记忆功能减退，人参皂甙可明显减轻这些损害。     

8Hz次声对大鼠海马和颞叶皮层RyR的表达影响

目的研究8 Hz,90 dB、100 dB、130 dB的次声对SD大鼠海马及颞叶皮层兰尼定受体(RyR)表达的影响. 方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、8 Hz,90 dB、100 dB、130 dB的1、7、14、21、28、35、42 d组共28组.最后一次作用结束后立即取脑组织并进行RyR免疫组织化学染色,光学显微镜下观察海马及颞叶皮层RyR表达的变化. 结果次声作用组大鼠脑组织海马及颞叶皮层RyR表达均较对照组减少, 8 Hz, 90 dB组、100 dB组以21 d减少最为明显,而130 dB组变化较为复杂,有2个峰值,14 d和42 d,其中42 d阳性表达最少(均 P <0.01),且21 d时,100 dB组的表达减少较90 dB组为少,90 dB组和100 dB组阳性表达在21 d后均有所回升. 结论 8 Hz,90 dB、100 dB和130 dB次声可引起大鼠海马及颞叶皮层RyR表达减少,其变化规律与次声作用参数有关.     

成年大鼠脑创伤后神经前体细胞的增殖及迁移

目的 研究液压冲击性脑损伤后成年大鼠神经前体细胞的增殖及迁移。方法 制作液压冲击性脑损伤模型，免疫组织化学方法动态检测巢蛋白（Nestin）和5溴脱氧尿苷（BrdU）的表达。BrdU标记方法确定增列殖的前体细胞；Nestin的表达用于确定神经前体细胞。结果 同正常对照组相比较，伤侧皮层、海马及室下区的Nestin阳性细胞数于伤后1d明显增多，7d达高峰,30d消失；BrdU阳性细胞数于作后3d达高峰，而7d以后逐渐减小，室下区BrdU阳性细胞及Nestin阳性细胞经胼胝体向对侧迁移。结论 液压冲击性脑损伤可激发成年大鼠神经前体细胞增殖及迁移。     

慢性强迫游泳应激对大鼠海马神经元再生和p-CREB表达的影响

目的 研究慢性强迫游泳应激模型大鼠海马神经元再生和磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（p-CREB）的表达.方法 30只雄性SD大鼠随机分为3组：强迫游泳7 d组（S1组）、强迫游泳14 d组（S2组）和对照组.S1组和S2组分别连续强迫游泳7 d和14 d,每天5 min,水温（10±0.5）℃.采用免疫组化半定量测定大鼠海马5-溴脱氧尿苷（BrdU）和p-CREB阳性细胞表达情况.结果 免疫组化结果 显示,在整个海马结构中BrdU及p-CREB的阳性细胞主要集中于齿状回的颗粒细胞下层.与对照组比较,S1组、S2组大鼠海马齿状回BrdU和p-CREB阳性细胞数均明显减少（P＜0.01）;而与S1组比较,BrdU阳性细胞数无统计学差异（P＞0.05）,S2组p-CREB阳性细胞数进一步减少（P＜0.01）.结论 慢性强迫游泳应激可导致海马神经元再生功能障碍,其机制可能与p-CREB信号转导通路有关. 基金项目：     

次声对大鼠海马5-HT、5-HTR、RyR表达及恢复的研究

目的研究大鼠海马5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺受体(5-HTR)、兰尼定受体(RyR)表达在8 Hz、130 dB的次声作用后1周和2周时的恢复情况. 方法大鼠暴露于8 Hz、130 dB次声1、7、14、21、28、35、42 d后置安静环境观察1周或2周,取脑组织并进行免疫组织化学染色,光学显微镜下观察海马5-HT、5-HTR、RyR表达. 结果次声作用组大鼠脑组织海马5-HT、5-HTR、RyR表达均较对照组减少,最低值分别出现于21 d、28 d和42 d(P<0.01).次声停止作用后,5-HT、5-HTR、RyR表达均逐渐回升,且随时间延长大部分恢复到正常对照水平.结论 8 Hz、 130 dB次声可引起大鼠海马5-HT、5-HTR、RyR表达减少,其变化规律与观察指标有关;次声引起的5-HT、5-HTR、RyR表达减少在停止次声作用后可逐渐恢复正常.     

大鼠次声脑损伤后EAAT_2的改变及意义

目的探讨8 Hz 130 d B次声作用后谷氨酸转运蛋白2(EAAT2)在脑组织中表达的改变及其意义。方法 SD大鼠40只随机分为对照组及次声作用1,7和l4次共4组,次声作用组用8 Hz130 d B的次声接规定次数作用,每次2 h。采用Western blot法进行蛋白测定。用实时逆转录酶-聚合酶链式反应法进行mRNA测定。结果次声作用后EAAT2在蛋白和mRNA水平均呈下调趋势。结论在次声脑损伤后,谷氨酸在细胞外堆积,可能与EAAT2下调导致谷氨酸重吸收障碍有关。上调EAAT2可能对次声脑损伤后脑组织有保护作用。     

130dB次声作用后大鼠下丘脑神经细胞钙离子分布

目的观察16Hz、130dB次声连续作用后大鼠下丘脑内钙离子的分布变化规律。方法用16Hz、130dB次声连续作用1、7、14、21次，2h／次／d。分别于作用后0．5、12h观察大鼠下丘脑内钙离子的分布。结果空白组、对照组下丘脑神经细胞结构正常，钙离子呈规则的圆形黑色小颗粒，边缘整齐。主要分布于神经细胞核、线粒体、内质网、神经细胞和胶质细胞的突起中。次声组下丘脑神经细胞的超微结构都有损伤改变伴随钙离子颗粒减少。结论次声可损伤大鼠下丘脑内神经细胞，损伤程度和次声作用参数及机体代偿作用有关。     

大鼠下丘脑室旁核小胶质细胞对次声的反应

目的探讨次声作用后大鼠下丘脑室旁核小胶质细胞与星形胶质细胞的变化及其相互关系。方法将SD大鼠反复暴露于声压级16Hz130dB的次声环境中。用抗大鼠Ⅲ型补体受体标志物（0X42）和抗胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）的免疫组化方法，观察次声作用后即刻，7d，14d大鼠下丘脑室旁核小胶质细胞与星形胶质细胞的变化及其相互关系。结果正常大鼠下丘脑室旁核的小胶质细胞和星形胶质细胞的数量较少，一般为静息性形态，胞体小，突起细长，染色浅淡。次声作用后大鼠下丘脑小胶质细胞被激活，胞体变大，突起短粗，染色深，7d以后逐渐减弱；次声作用后第7d起星形胶质细胞变多，胞体变大，突起变粗，染色深，第14d达到高潮；小胶质细胞和星形胶质细胞之间的关系密切。结论次声作用后小胶质细胞比星形胶质细胞早被激活；两者的关系密切。     

Orexin-1受体拮抗剂对慢性点燃癫大鼠学习记忆的影响及海马神经细胞的增殖变化

目的:研究orexin-1受体(OX1R)拮抗剂(SB334867,SB)对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫大鼠空间学习记忆能力及海马齿状回神经细胞增殖的影响。方法:Wistar大鼠随机分为①对照组[腹腔和侧脑室均注射生理盐水(NS)];②PTZ组(腹腔注射PTZ+侧脑室注射NS);③PTZ+orexin-A(OXA)组(腹腔注射PTZ+侧脑室注射OXA);④PTZ+SB组(腹腔注射PTZ+侧脑室注射SB);⑤PTZ+SB+OXA组(腹腔注射PTZ+侧脑室注射SB和OXA)。观察各组大鼠的空间学习记忆能力及海马齿状回区BrdU+和BrdU+/NeuN+细胞的表达。结果:与PTZ+OXA组比较,PTZ+SB+OXA组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台象限的次数减少(P<0.05)。免疫荧光显示,PTZ+OXA组大鼠齿状回区BrdU+和BrdU+/NeuN+细胞表达增多(P<0.01),而PTZ+SB+OXA组大鼠齿状回区BrdU+/NeuN+细胞表达比PTZ+OXA组减少(P<0.01)。结论:OXA通过OX1R能改善癫大鼠的空间学习记忆能力,可能与OX1R介导的海马齿状回神经细胞增殖与分化作用有关。     

头针诱导神经干细胞的增殖分化

目的研究脑缺血再灌注大鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）增殖、分化情况及头针对其影响。方法将Wistar大鼠70只,随机分为假手术组10只、模型组和头针组各30只;模型组和头针组采用线栓法制作大脑中动脉闭阻（middle cerebralartery occlusion,MCAO）模型,各组大鼠又按照缺血时间（7、14、28d）分为3个亚组,每个时相点10只。头针组大鼠于缺血再灌注成功后即行头针治疗,每日1次,直至处死前;各组大鼠处死前1d腹腔注5-溴脱氧尿核苷（bromodeoxyuridine,BrdU）液;对各亚组大鼠行神经功能缺损评分（neurological severity score,NSS）,免疫荧光法计数各组大鼠海马（dentate gyrus,DG）BrdU阳性细胞和BrdU/NeuN阳性双标细胞。结果第28d头针组的NSS显著低于模型组（P〈0.05）。大鼠缺血再灌注后各组阳性细胞有明显表达,而头针组在不同时相的阳性细胞数较同时相模型组有明显增加。结论头针能促进神经干细胞的增殖和分化,改善神经功能缺损评分,从而促进神经功能的修复。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑神经干细胞的增殖

目的通过建立实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型,检测EAE神经干细胞的增殖。方法以豚鼠脑脊髓匀浆加完全弗氏佐剂作为抗原．给予Wistar大鼠四足垫皮内注射,建立EAE模型,对正常组、免疫后7d组、EAE发病后3,7,14,21d组,分别进行5一溴脱氧尿嘧啶（BrdU）免疫组织化学染色,以观察正常大鼠脑内Brdu、EAE免疫损伤后BrdU的变化规律。结果在正常组大鼠,Brdu阳性细胞主要分布在室管膜下区（SVz）及海马齿状回的颗粒层（SGZ）;Brdu阳性细胞教在免疫后呈现先上升后下降的变化趋势,于发病后3d达高峰,21d恢复正常。结论EAE可以诱导大鼠脑内神经干细胞的增殖。     

Dentate granule cell neurogenesis after seizures induced by pentylenetrazol in rats

Epileptic seizures originating from the limbic system have been shown to stimulate the proliferation rate of granule cell precursors in the adult brain, but it is not clear if other type(s) of seizures have the similar effects. This study examined the effects of pentylenetrazol (PTZ)-induced generalized clonic seizures on dentate granule cell neurogenesis in adult rats. Using systemic bromodeoxyuridine (BrdU) to label dividing cells, we studied the proliferation rate of neural precursor cells in the dentate gyrus at various time points after PTZ-induced seizures. The double-label immunofluorescence with confocal microscopy was used to determine the newborn cell phenotypes. Quantitative analysis of BrdU labeling revealed a significant increase in the proliferation rate of neural precursor cells in the dentate gyrus 3, 7, and 14 days after seizures. The number of BrdU-labeled cells in the dentate gyrus returned to baseline levels by 28 days after the initial seizures. Most of newborn cells migrated into the granule cell layer from the subgranular zone, displayed the neuronal phenotype, and developed morphological characteristics of differentiated dentate granule cells. These results indicated that neuron proliferation in the dentate gyrus was enhanced during a time window (3-14 days) after PTZ-induced seizures. Its underlying mechanism is discussed.