慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因对大肠癌裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 探讨慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因表达,对大肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤生长及放射敏感性的影响。 方法 选取36只BALB/c(nu/nu)裸鼠,按随机区组法分为空白对照组、阴性对照组及实验组,将HT-29细胞接种于裸鼠,建立皮下移植瘤裸鼠模型,观察裸鼠体重及瘤体积的变化。RT-PCR、免疫组织化学分析Livin mRNA及蛋白表达的变化,原位末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡的变化;瘤内注射生理盐水、空载慢病毒和干扰慢病毒,同时均给予10 Gy 6 MV X射线照射,绘制裸鼠体重和移植瘤生长曲线。结果 实验组体积抑瘤率为(50.04±0.07)%,瘤体重量明显减轻(F=4.85,P<0.05), 瘤重抑瘤率为(50.27±0.17)%。实验组Livin mRNA表达水平为(17.75±0.08)%,明显低于空白对照组的(67.60±0.05)%和阴性对照组的(68.54±0.03)% (F=89.97, P<0.01)。实验组Livin蛋白表达水平为(36.00±3.40)%,明显低于空白对照组的(85.00±3.15)%和阴性对照组的(80.33±3.08)%(F=107.32,P<0.01)。实验组凋亡率为(23.67±2.25)%,明显高于空白对照组的(5.00±1.50)%和阴性对照组的(8.33±1.82)%(F=56.94,P<0.01)。与射线联合时,裸鼠移植瘤体积在分组之间总体存在差异(F=10.70,P<0.01),实验组肿瘤体积变化小于阴性对照组和空白对照组(F=7.01~9.32,P<0.01)。结论 慢病毒载体介导RNA干扰沉默Livin基因表达能抑制大肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤的生长,并增加移植瘤对放疗的敏感性。     

沉默食管癌ECA109细胞H2AX基因对裸鼠移植瘤放射敏感性的影响

目的 研究受照前后沉默H2AX基因对裸鼠移植瘤的影响.方法 将60只裸鼠按随机数字表法分为空白组、照射组、空载体组、空载体照射组、沉默(H2AX)组和沉默(H2AX)照射组,每组10只.于裸鼠皮下接种相应细胞,制备裸鼠模型.接种21 d后,给予6 MV X射线15 Gy单次照射,受照后48 h每组处死5只裸鼠,将肿瘤标本按Western blot、RT-PCR及流式细胞分析要求处理,检测蛋白水平、RNA水平及细胞周期的改变.结果 沉默组肿瘤体积为(42.76±4.40) mm³,明显小于空白组(73.18±8.80) mm³和空载体组(71.27±8.40) mm³(F=67.8,P<0.01).沉默组组织中H2AX蛋白表达(0.12±0.03)明显低于空白组(1.12±0.11)和空载体组(1.16±0.08,F=34.27, P<0.01).沉默组RNA水平(0.85±0.31)明显低于空白组(1.86±0.26)和空载体组(1.82±0.24,F=39.45, P<0.01).组织的免疫共沉淀显示,照射使γ-H2AX与MDC1、53BP1发生明显相互作用.沉默H2AX后,其相互作用减弱.受照后各组肿瘤体积在分组之间总体存在差异(F=13.56,P<0.01).沉默照射组凋亡率为(24.15±2.25)%,较照射组(13.26±1.54)%和空载体照射组(12.78±1.47)%明显增高(F=54.33,P<0.01).照射后引起G₂/M期阻滞,沉默照射组较照射组阻滞减轻(F=10.21,P<0.01).结论 体内研究显示沉默H2AX基因可以提高食管癌放射敏感性.     

低管电压结合低对比剂量技术在颈部CTA检查中的应用

目的 评价低管电压扫描方法结合精确计算对比剂量与常规扫描方法在颈部CT血管造影(CTA)辐射剂量及图像质量上的差异.方法 前瞻性连续选择2012年10月至2013年6月颈部CTA受检患者90例.随机数字表法分为A、B、C组,每组30例,分别为A组(常规组):120 kV,对比剂用量70~80 ml;B组:100 kV,精确计算对比剂用量; C组: 80 kV,精确计算对比剂用量.分别对各组辐射剂量、对比剂用量、对比噪声比(CNR)进行单因素方差分析.由两名资深影像学医师以5分制对3组的图像质量进行主观评价.结果 B与C组的有效剂量较A组明显下降,分别为(6.6±0.9)、(4.5±0.7)和(2.1±0.4)mSv,差异有统计学意义(F=72.4,P<0.05);B与C组的对比剂用量较A组均明显下降(73.2±8.2)、(48.2±5.1)和(48.6±5.4)ml,差异均有统计学意义(F=56.8,P<0.05).B组与C组较A组CNR分别提高42.2%、64.8%,差异有统计学意义(F=72.6,P<0.05).A组中有10例患者的图像出现静脉伪影对影像质量有不同程度的影响,B组与C组均未出现静脉伪影.结论 采用精确计算对比剂量结合80 kV扫描方法与常规组相比较不仅辐射剂量与对比剂用量大幅降低,并且图像质量得到提高.     

先心病双源CT血管造影前瞻性序列扫描与大螺距扫描的对照研究

目的 对比分析婴幼儿先心病双源CT(DSCT)前瞻性心电触发血管造影中,Flash(大螺距扫描)与序列扫描两种模式的辐射剂量和图像质量。方法 60例临床拟诊先天性心脏病并进行DSCT前瞻性心电触发扫描的患儿纳入研究并随机分为2组,A组30例采用Flash扫描模式, B组30例采用序列扫描模式。比较两组容积CT剂量指数(CTDI_vol)、剂量长度乘积(DLP)、有效辐射剂量(E)以及CT图像质量,并以手术或心脏造影(DSA)结果为标准,比较两组诊断符合率。结果A、B两组CTDI_vol分别为(0.32±0.10)和(1.40±0.43)mGy(t=13.32,P<0.05); DLP分别为(6.46±1.92)和(17.91±4.80)mGy·cm(t=7.97,P<0.05);E分别为(0.19±0.05)和(0.45±0.12)mSv(t=16.64,P<0.05);图像质量评分分别为(4.03±1.15)和(3.13±1.38)(t=3.55,P<0.05);A、B两组总诊断符合率分别为100%和93%,差异无统计学意义;但A组畸形检出率(91%)高于B组(75%)(χ²=7.72,P<0.05)。结论 在婴幼儿先心病DSCT血管造影中,采用Flash扫描模式时畸形检出率高于序列模式,且有效辐射剂量降低。     

HIF-1α基因沉默对人肺癌放射敏感性及移植瘤生长的影响

目的 探讨HIF-1α基因沉默对A549肺癌细胞放射敏感性及裸鼠移植瘤生长的影响。方法 采用克隆形成实验,评价A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞对X射线的敏感性。将A549/HIF-1α(-)细胞及A549细胞接种于BALB/C雄性裸小鼠,观察肿瘤生长情况。免疫组织化学法检测肿瘤内HIF-1α蛋白的表达及瘤内微血管密度。结果 HIF-1α基因沉默在常氧条件下放射增敏比 (SER) 为1.06,乏氧条件下为1.65。A549/HIF-1α(-)组移植瘤体积明显小于A549组,A549/HIF-1α(-)组肿瘤细胞HIF-1α蛋白表达显著下降, A549组肿瘤微血管密度为19.83±4.09,而A549/HIF-1α(-)组为11.61±3.04(F=15.57,P<0.05)。结论 HIF-1α基因沉默可以逆转乏氧诱导的A549肺癌细胞对X射线敏感性的降低,并延缓裸鼠移植瘤的生长,使HIF-1α蛋白表达下降和血管生成减少。     

全中枢神经系统肿瘤放疗技术的剂量学研究

目的 以三维适形放疗技术为参照,探讨中枢神经系统肿瘤简单调强(sIMRT)放疗技术的剂量学特性。方法 选取5名已行全脑全脊髓放疗患者,为每位患者设计3D-CRT计划、3野和5野sIMRT计划。利用剂量分布和剂量体积直方图(DVH),评价不同照射技术的靶区和正常器官的照射剂量、靶区剂量均匀性(HI),通过总的机器跳数(MU)间接比较不同照射技术的治疗时间。结果 3D-CRT在射野衔接处只有处方剂量的70%。计划靶区后缘的正常组织接受的剂量达到处方剂量的140%。3野和5野sIMRT计划的靶区剂量均匀性分别为0.09±0.01和0.08±0.01,优于3D-CRT计划的0.18±0.02 (t=7.80、7.65,P<0.05);心脏V₁₀分别为(8.4±1.9)%和(8.4±2.0)%,低于3D-CRT计划的(36.0±6.0)%(t=13.3、13,0,P<0.05);甲状腺V₂₀分别为(12.4±1.5)%和(12.4±1.6)%,低于3D-CRT计划的(69.4±5.7)%(t=26.3、26.4,P<0.05);喉V₂₀分别为(17.2±1.2)%和(17.9±1.5)%,低于3D-CRT计划的(89.4±7.0)%(t=25.5、26.5,P<0.05);靶区后缘正常组织V₃₀分别为(4.4±1.4)%,(4.9±1.9)%,低于3D-CRT计划的(31.9±6.1)%(t=8.5、10.1,P<0.05);平均机器跳数(MU)分别为1100±106和1160±129,高于3D-CRT计划的640±78。结论 3野和5野sIMRT计划在剂量分布、危及器官(OAR)保护、靶区剂量均匀性等方面均好于3D-CRT计划。     

电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响

目的 研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响。方法 0、0.5、3和8 Gy ⁶⁰Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化;使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响;利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数。结果 在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变（F=243.44,P<0.05）,与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高（t=-10.12、-5.59,P<0.05）,而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低（t=15.22,P<0.05）,照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常（F=10.36,P<0.05）;照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致（F=97.08,P<0.05）,其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高（t=1.66、7.27,P<0.05）,8 Gy照射组降低（t=-8.24,P<0.05）;照射后48 h,ATP水平也发生变化（F=39.49,P<0.05）,0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组（t=4.60、8.53,P<0.05）。照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍（t=0.02,P<0.05）,3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍（t=9.68、15.10,P<0.05）。结论 大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高。     

计算点阵网格大小对125I粒子植入剂量计算精度的影响

目的 观察 ¹²⁵I 粒子植入时,计算机治疗计划系统（TPS）软件中计算点阵网格大小对剂量计算精度的影响。方法 采用随机数字表法抽取10例粒子植入患者的验证计划,将点阵网格调整为128×128、96×96、64×64、32×32共4组,在粒子数目、位置、活度及靶区大小相同的条件下,应用TPS计算每个计划的剂量,分别得出4组D₉₀、V₉₀、V₁₀₀及V₁₅₀,并计算D₉₀的误差。结果 128×128、96×96、64×64、32×32 4组点阵网格D₉₀平均数分别为（7 178.8±2 237.7）、（7 072.7±2 240.8）、（6 889.1±2 305.5）、（6 351.0±2 515.7）cGy;D₉₀误差百分比分别为（0.74±0.6）%、（-0.89±2.2）%、（-3.85±4.7）%、（-10.46±4.8）%,组间差异有统计学意义（F=8.95,P<0.05）。4组点阵网格V₉₀分别为（93.12±0.32）%、（92.75±0.29）%、（91.87±1.28）%、（88.06±5.06）%,组间差异有统计学意义（F=7.85,P<0.05）;V₁₀₀分别为（90.21±0.14）%、（89.67±0.64）%、（88.68±1.80）%、（84.10±6.56）%,组间差异有统计学意义（F=6.64,P<0.05）;V₁₅₀分别为（73.48±3.49）%、（72.66±3.96）%、（71.33±4.83）%、（65.41±9.49）%,组间差异有统计学意义（F=3.90,P<0.05）。结论 计算点阵网格大小明显影响TPS计算剂量的准确性,在保证运算速度同时应尽量应用128×128的计算点阵网格。     

榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性影响及其机制的研究

目的 探讨榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响及其分子机制。方法 克隆形成实验检测10、20 μg/ml榄香烯乳对人肺腺癌A549细胞的放射敏感性影响。细胞分为空白对照组、单纯照射组(4 Gy X射线照射)、单纯药物组(给予10、20 μg/ml榄香烯乳);联合照射组(给予10、20 μg/ml 榄香烯乳24 h后4 Gy X射线照射)。Western blot检测DNA-PKcs、Bcl-2及P53蛋白的表达变化,并分析DNA-PKcs与Bcl-2、P53表达之间的相关性。结果 10 μg/ml榄香烯乳的放射增敏比SER_D0、SER_Dq 为1.54±0.20和1.43±0.15;20 μg/ml榄香烯乳SER_D0、SER_Dq 为1.63±0.32及1.75±0.19。与单纯照射组相比,10、20 μg/ml榄香烯乳联合照射组细胞的DNA-PKcs蛋白表达明显减少(t=7.52、8.33, P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显减少(t=10.74、11.33, P<0.05),P53蛋白表达明显增加(t=-9.25、-7.66P<0.05)。DNA-PKcs与P53蛋白表达显著负相关(r=-0.569,P<0.05),与 Bcl-2蛋白表达显著正相关(r=0.755, P<0.05)。结论 榄香烯乳可增加人肺腺癌A549细胞的放射敏感性,其机制与下调DNA-PKcs表达抑制DNA双链损伤修复和上调p53,下调Bcl-2表达促进细胞凋亡有关。     

siRNA抑制TPP1对人骨肉瘤端粒酶阴性细胞U2OS放射敏感性的影响

目的 观察人骨肉瘤细胞U2OS中TPP1表达受抑制后其端粒长度和放射敏感性变化,探讨在端粒酶阴性肿瘤细胞中TPP1与端粒长度及放射敏感性之间的关系。方法 根据TPP1 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列,瞬时转染U2OS细胞;使用RT-PCR和Western blot分别在基因和蛋白水平检测干扰前后TPP1表达量的变化;利用Real-time PCR检测细胞端粒长度的变化;运用流式细胞术（Annexin V-FITC法）检测细胞凋亡情况;采用克隆形成实验分析放射敏感性的变化。结果 siRNA转染U2OS细胞后,siRNA干扰组的mRNA基因表达抑制率为（65.70±2.10）%,蛋白表达抑制率为（74.80±3.20）%;siRNA干扰组相对端粒长度（0.99±0.07）明显短于阴性对照组（1.64±0.05）及空白组（1.55±0.05）（F=113.68,P<0.01）,而阴性对照组与空白组间端粒长度差异无统计学意义;siRNA干扰组细胞凋亡率为（13.67±0.85）%,高于阴性对照组（8.59±0.38）%及空白组（8.18±0.21）%（F=92.32,P<0.01）;siRNA干扰组细胞株SF₂ 值（0.6074±0.0115）较空白组（0.8062±0.0056）降低显著（F=246.45,P<0.01）,放射增敏比为1.33。结论 在端粒酶阴性细胞U2OS中,特异性地沉默TPP1能够引起端粒长度的缩短,并且增加了细胞的放射敏感性,推测干扰TPP1引起端粒缩短很可能是其放射增敏的机制之一。     

乳腺癌保乳术后部分乳腺三种放疗计划的剂量学比较

目的 比较容积弧形调强（VMAT）、固定野动态调强（IMRT）及三维适形放疗（3D-CRT）技术对乳腺癌保乳术后采用部分乳腺放疗的剂量学差异。方法 选取20例临床分期为T_1-2N₀M₀的早期乳腺癌保乳术后患者进行VMAT,并同时设计IMRT及3D-CRT,比较3种计划的剂量学参数,包括剂量-体积直方图（DVH）、靶区剂量适形度、靶区及危及器官的剂量、机器跳数及治疗时间。结果 IMRT及VMAT计划靶区剂量分布优于3D-CRT计划,其中最大剂量,平均剂量及适形指数（CI）组间比较差异具有统计学意义（F=14.86、8.57、18.23,P<0.05）。正常组织受量：VMAT计划在患侧乳腺V₅上优于IMRT及3D-CRT计划（F=5.83,P<0.05）;IMRT在患侧肺V₂₀、V₅及D₅上有优势（F=16.39、3.62、4.81,P<0.05）;在对侧肺的统计中,IMRT计划在最大剂量及D₅上可以得到比VMAT和3D-CRT更低的剂量（F=3.99、3.43,P<0.05）;VMAT、3D-CRT和IMRT计划所需机器跳数值分别为621.0±111.9、707.3±130.9、1161.4±315.6,计划间的差异有统计学意义（F=31.30,P<0.05）。VMAT、3D-CRT和IMRT计划所需治疗时间分别为（1.5±0.2）、（7.0±1.6）、（11.5±1.9）min。结论 IMRT和VMAT计划靶区剂量分布优于3D-CRT计划,而不提高患侧肺剂量。对于部分乳腺癌的放疗,容积弧形调强放疗在降低机器跳数和减少治疗时间方面具有明显优势。     

RNA干扰抑制c-jun基因表达对放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R放射敏感性的影响

目的 利用RNA干扰技术抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,研究其对CNE-2R细胞放射敏感性的影响及其潜在机制.方法 设计合成3组特异性针对c-jun基因的siRNA,构建慢病毒vshRNA载体,感染CNE-2R细胞,采用RT-PCR和Western blot方法检测各组对目的基因的抑制效果;并通过克隆形成实验测定其放射敏感性,CCK-8实验检测细胞的存活能力,流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 重组慢病毒c-jun-RNAi-LV2能明显下调CNE-2R细胞中c-jun的mRNA和蛋白水平的表达(F=217.20、42.07, P<0.05).6 MV X射线联合c-jun-RNAi-LV2组在0、2、4、6和8 Gy照射后细胞的吸光度值均显著低于未转染组和阴性对照组(F=42.70~200.67, P<0.05).克隆形成实验显示,c-jun-RNAi-LV2组与未转染组及阴性对照组相比,SF₂、D₀和D_q值均减小,放射增敏比(SER_D0)为1.41.细胞凋亡实验结果显示,未经照射的c-jun-RNAi-LV2组与联合2 Gy照射的凋亡率分别为(20.93±1.99)%和(38.17±0.83)%,均高于未转染组和阴性对照组的凋亡率[0 Gy:(10.97±0.70)%和(20.43±0.25)%;2 Gy:(10.80±1.25)%和(19.53±1.50)%;F=50.54、330.14, P<0.05].结论 RNA干扰技术可有效抑制放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R中高表达的c-jun基因,使细胞放射敏感性增高,其作用可能与c-jun基因的下调使细胞增殖能力减弱,细胞凋亡增多有关.     

LncRNA CRNDE靶向miR-384影响结直肠癌细胞放射敏感性的研究

目的 研究长链非编码RNA （Lnc RNA）结直肠肿瘤差异表达基因（CRNDE）对结直肠癌细胞放射敏感性的影响及其机制。方法 以结直肠癌HT-29细胞作为体外研究对象,转染CRNDE shRNA,实时定量PCR测定干扰效果。以8 Gy X射线照射转染CRNDE shRNA后的HT-29细胞,四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡水平。平板克隆实验检测放射敏感性。生物信息学软件预测CRNDE与miR-384有互补结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。将CRNDE shRNA和miR-384 inhibitor共转染至HT-29细胞中,以8 Gy剂量照射处理,MTT和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡变化。结果 CRNDE shRNA能够降低HT-29细胞中CRNDE表达水平（1.00±0.08 vs. 0.42±0.06,t=10.051,P<0.05）。CRNDE shRNA和放射均可以抑制HT-29细胞增殖并诱导细胞凋亡,并且二者联合具有协同作用[凋亡率：（2.27±0.13）%、（23.58±2.35）%、（26.91±2.81）%、（36.84±3.24）%,F=24.66,P<0.05;吸光度（A）值：0.45±0.06、0.30±0.02、0.28±0.03、0.20±0.02,F=106.21,P<0.05]。CRNDE shRNA转染后可以提高HT-29细胞放射敏感性,放射增敏比为1.374。CRNDE靶向负调控miR-384表达。miR-384 inhibitor能够拮抗CRNDE shRNA对放射处理的结直肠癌细胞增殖抑制和凋亡促进的作用。结论 下调LncRNA CRNDE表达可增强结直肠癌细胞的放射敏感性,其作用机制与靶向负调控miR-384表达有关。     

不同波段电磁辐射致大鼠Sertoli细胞SOX9和WT1表达的影响

目的 探讨不同波段电磁辐射对大鼠睾丸支持细胞(Sertoli细胞)性别决定相关基因SOX9和WT1表达的影响。方法 原代分离3周Wistar大鼠的Sertoli细胞,应用WT1免疫细胞化学染色鉴定细胞纯度;Sertoli细胞经平均功率密度为100 mW/cm²的S波段微波和X波段微波及场强6×10⁴ V/m的电磁脉冲辐射4 min。应用实时RT-PCR和Western blot方法,检测SOX9、WT1的mRNA和蛋白质的变化。结果 3种波段电磁辐射后Sertoli细胞SOX9 mRNA和蛋白表达在辐射后6和12 h及辐射后的6和24 h均见不同程度的降低(F=15.20和4.84, P<0.05;F=8.46和7.47,P<0.05);WT1 mRNA和蛋白表达在辐射后6和12 h及辐射后的24 h出现不同程度降低(F=13.46、5.08和10.26,P<0.05)。结论 3种波段电磁辐射后Sertoli细胞性别决定相关基因(SOX9、WT1)表达呈不同程度的降低。Sertoli细胞SOX9、WT1的变化可能参与了电磁辐射致生殖危害的病理生理过程。     

X射线对人外周全血细胞nm23-H1基因表达的影响

目的 应用实时荧光定量反转录PCR的方法,分析不同剂量X射线对人外周全血细胞nm23-H1基因表达的影响,探讨运用nm23-H1基因表达变化作为电离辐射生物剂量计的可行性。 方法 采用X射线照射人外周全血细胞,于不同剂量(0～5 Gy)照射后不同时间点(0、6、12和24 h)收集细胞提取总RNA,并反转录为cDNA,利用实时定量PCR检测不同剂量照射后nm23-H1基因表达变化,分析其剂量-效应关系及时间-效应变化。结果 照后0 h,各剂量组之间nm23-H1基因表达变化差异无统计学意义(F=0.478,P> 0.05),照后6 h,在1～3 Gy照射剂量范围内,nm23-H1基因表达水平随剂量增加有增高的趋势(F=15.064,P<0.05),照后12 h,在1～5 Gy照射剂量范围内,nm23-H1基因表达水平随剂量增加而增高(F=3.435,P<0.05);照后24 h,各剂量组之间差异无统计学意义(F=0.444,P>0.05)。0、4 和5 Gy照射后,nm23-H1基因表达水平随时间的推移降低 (F=8.636、4.112、5.411,P<0.05);1 Gy照射后,不同时间点nm23-H1基因表达水平差异无统计学意义,仅12 h的 nm23-H1基因表达水平与0 h的表达水平差异有统计学意义(t=-2.527,P<0.05);2和3 Gy剂量照射后,nm23-H1基因表达水平均于24 h时降至最低点(F=12.517、6.622,P<0.05)。结论 电离辐射可诱导人外周血nm23-H1基因的表达改变,该基因的表达变化具有作为电离辐射生物剂量计应用于核辐射事故早期生物剂量估算的潜能。     

慢病毒介导的DKC1基因沉默对人宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响

目的 探讨降低角化不良蛋白基因（DKC1基因）表达对人宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响。方法 以慢病毒为载体通过shRNA技术建立DKC1基因低表达的细胞模型,并利用RT-PCR、Western blot验证干扰效率。将细胞分为干扰组、空白对照组和阴性对照组,通过端粒重复序列扩增酶联免疫吸附试验（TRAP-ELISA法）检测端粒酶活性,实时PCR检测相对端粒长度,克隆形成实验计算克隆形成率,并利用单击多靶模型拟合细胞存活曲线、计算放射生物学相关参数（D₀、D_q、N、SF₂）及放射增敏比（SER）。结果 以慢病毒为载体的DKC1干扰序列（Lv-shDKC1）转染HeLa细胞后,与空白对照组相比,干扰组DKC1 mRNA及蛋白表达水平均明显下降,其表达抑制率分别为（71.330±4.112）%（t=25.53,P<0.05）、（35.520±3.804）%（t=4.833,P<0.05）。与空白对照组及阴性对照组相比,干扰组端粒酶活性从0.900±0.044、0.897±0.031降到0.713±0.021（F=31.44,P<0.05）,相对端粒长度从4.233±0.306、4.633±0.379降到2.667±0.404（F=39.15,P<0.05）,而空白对照组及阴性对照组间端粒酶活性和相对端粒长度差异均无统计学意义（P>0.05）。干扰组存活分数（SF₂）（0.571±0.006）明显低于空白对照组（0.861±0.009）及阴性对照组（0.807±0.002）（F=1 812,P<0.05）,SER为1.508。结论 干扰DKC1的表达对人宫颈癌HeLa细胞有放射增敏作用,可通过抑制端粒酶活性、缩短相对端粒长度而发挥放射增敏作用,有望成为新的放射增敏靶点。     

乳腺癌根治术后双弧VMAT与IMRT计划的剂量学比较

目的 比较乳腺癌根治术后双弧的容积旋转调强放射治疗(VMAT)与5野的静态调强放射治疗(IMRT)2种计划之间的剂量学差异,评估VMAT技术在乳腺癌根治术后的剂量学特点与应用能力.方法 选取28例乳腺癌根治术后患者(左侧10例,右侧18例),分别制定双90度弧段的VMAT与5野的IMRT 2种计划,主要的计划评估参数为靶区的肿瘤控制概率(TCP)、适形指数(CI)、均匀指数(HI)以及接受相应处方剂量水平照射体积百分比V₉₅、V₁₁₀,危及器官(OAR)评估包括患侧肺的正常组织并发症概率(NTCP)、D_mean、V₅、V₂₀、V₃₀,心脏的NTCP值、D_mean、V₂₅,健侧乳腺的D_mean、机器跳数(MU)以及治疗时间.结果 VMAT计划与IMRT计划的TCP值分别为(96±2)%、(90±2)%(t=-6.28,P<0.01);HI值分别为0.15±0.04,0.22±0.02(t=13.29,P<0.05);肿瘤位于左侧时,心脏NTCP值在VMAT计划与IMRT计划中分别为(1.0±0.12)%,(1.7±0.13)%(t=2.14,P<0.05);肿瘤位于右侧时,2种计划心脏的NTCP差异无统计学意义,平均剂量分别为(3.27±0.26)、(6.0±0.47)Gy(t=9.21, P<0.01);VMAT计划在MU少于IMRT计划(t=9.58,P<0.01),治疗时间短于IMRT计划(t=8.40,P<0.05).结论 乳腺癌根治术后,VMAT计划具有更强的临床应用能力,且表现出更优的剂量学特点.     

基于肺通气功能图像引导的调强放疗射野角度优化研究

目的 探讨基于肺通气功能图像引导的肺癌调强放疗中射野角度优化对保护功能肺的剂量学优势。方法 选取拟行调强放疗的非小细胞肺癌患者16例,分别行双相位(呼气末和吸气末)CT定位扫描,将图像传至肺通气功能分析软件系统,获取肺通气功能的三维分布,确定功能肺(FL)区域,并传至治疗计划系统与呼气末CT定位图像进行图像融合。分别设置剂量约束参数制定两类计划:常规的调强放疗(IMRT)计划和肺通气功能图像引导的调强放疗(f-IMRT)计划,每一类计划再分别设计5野均分角度和手动设野两种子计划。IMRT以降低全肺(TL)受量为目标,f-IMRT则以降低功能肺剂量为目标。对比分析IMRT和f-IMRT两类计划中5野均分角度和手动设野之间靶区和正常组织受照的剂量差异。结果 同一类调强放疗计划下,5野均分角度和手动设野之间的PTV剂量学参数差异无统计学意义;手动设野的脊髓、食管和心脏的受量较5野均分角度均有程度不等的变化,但仅食管的平均剂量和心脏V₆₀差异有统计学意义(t=4.33、-2.37,P<0.05)。在IMRT中,5野均分角度中功能肺(FL)的低剂量区受照体积FLV₅、FLV₁₀、FLV₂₀分别为(54.2±29.1)%、(42.5±22.1)%、(26.3±20.7)%,手动设野的分别为(30.2±18.5)%、(24.1±12.0)%、(17.8±8.9)%(t=4.87、 4.74、 2.33,P<0.05)。在f-IMRT中,5野均分角度中功能肺(FL)的FLV₅、FLV₁₀、FLV₂₀分别为(52.4±20.7)%、(37.1±12.2)%、(21.1±5.8)%,手动设野的分别为(29.2±18.3)%、(23.0±14.8)%、(16.7±9.7)%(t=5.30、4.84、2.23,P<0.05)。全肺(TL)低剂量区剂量学参数也不同程度下降(t=7.96 ~ 6.07,P<0.05)。结论 在肺癌的调强放疗中,结合肺通气功能图像优化放疗计划,并进一步优化射野方向,能有效地降低功能肺的受照剂量,可降低放射性肺炎的发生率和严重程度,改善患者的生活质量。