红毛五加有效成分的抗炎机制初步研究

目的对红毛五加茎皮中有效成分的抗炎机制进行初步研究。方法以LPS刺激小鼠巨噬细胞样细胞RAW264.7,测定红毛五加萃取物氯仿洗脱部分对细胞上清液PGE2、TNF-α、NO、IL-10水平的影响。结果纯氯仿洗脱部分40mg/L剂量组产生的PGE2为(79.57±12.50)pg/mL,TNF-α为(291.6±40.7)pg/mL,NO为(26.2±2.9)μmol,与LPS刺激组相比,差异均有统计学意义。10mg/L剂量组产生的PGE2为(95.20±11.20)pg/mL,TNF-α为(358.6±37.9)pg/mL,NO为(28.3±3.2)μmol,与LPS刺激组相比,差异均有统计学意义。纯氯仿洗脱部分40mg/L剂量组、10mg/L剂量组产生的IL-10分别为(229.4±39.0)pg/mL、(243.7±47.7)pg/mL,与LPS刺激组相比,无统计学意义。结论红毛五加正丁醇萃取部分经氯仿洗脱部分能够抑制炎症因子PGE2、TNF-α、NO的产生而发挥抗炎作用。     

蟛蜞菊内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞环氧化酶2、NO及TNF-α的影响

目的:研究蟛蜞菊内酯对脂多糖(lipopo-lysaccharide,LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞环氧化酶2(COX-2)、NO及TNF-α的作用。方法:ELISA方法检测0.2、2、20μmol/L不同浓度蟛蜞菊内酯对终浓度为10μg/mL LPS诱导RAW264.7细胞产生TNF-α、NO及前列腺素E2(PGE2)的影响,Western blot方法检测蟛蜞菊内酯对LPS诱导COX-2酶蛋白表达的影响。结果:LPS能够明显诱导小鼠RAW264.7细胞产生的COX-2酶蛋白,蟛蜞菊内酯低中高3个浓度均能抑制LPS诱导产生的COX-2酶蛋白表达。PGE2可以被LPS诱导增加,与空白组比有显著差异。蟛蜞菊内酯低中高3个浓度均能抑制LPS诱导产生的PGE2、NO和TNF-α,呈现剂量依赖性。结论:蟛蜞菊内酯抗炎的作用机制可能为抑制COX-2的蛋白表达,进而抑制PGE2的生成,也可能与抑制NO和TNF-α生成有关。     

原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1表达的影响

目的探讨原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)表达的影响。方法酶免疫测定法(EIA)检测原花青素对PGE2生成的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mPGES-1mRNA的表达,Western blotting检测mPGES-1蛋白的表达。结果脂多糖(LPS)可以促进RAW264.7细胞PGE2的生成同时上调mPGES-1mRNA和蛋白的表达,而原花青素(4、20 mg.L-1)下调LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1mRNA和蛋白的表达,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成。结论原花青素在mRNA和蛋白水平抑制LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1表达从而减少PGE2的合成,这可能是原花青素抗炎的机制之一。     

穿心莲内酯对巨噬细胞环氧化酶2及其产物表达的影响

目的研究穿心莲内酯对巨噬细胞环氧化酶2(COX-2)表达及其主要产物前列腺素E2(PGE2)生成的影响。方法取生长良好的小鼠巨噬细胞RAW264.7,加入不同浓度的穿心莲内酯(终浓度1、10、50μmol/L)进行预干预,1h后再加入脂多糖(LPS,终浓度1μg/mL)刺激,并设空白组和穿心莲内酯单独作用组作为对照组。取培养18h细胞上清,用Elisa法检测PGE2生成量;取培养24h细胞,提取总蛋白,用WesternBlot法检测穿心莲内酯对COX-2蛋白表达的影响。结果 LPS可以显著诱导RAW264.7细胞COX-2表达和PGE2的生成,与对照组比较P<0.01;穿心莲内酯预干预可以抑制LPS诱导的COX-2蛋白表达,下调PGE2的生成。结论穿心莲内酯可通过降低LPS诱导的巨噬细胞COX-2表达和PGE2生成,发挥抗炎作用,这可能是其抗炎的作用机制之一。     

苹果多酚对脂多糖刺激的RAW264.7细胞COX-2/PGE2和iNOS/NO表达的研究

目的 研究苹果多酚(APE)对脂多糖(LPS)诱发的RAW264.7细胞炎症COX-2/PGE2和iNOS/NO表达的抑制作用.方法 采用APE干预LPS刺激的小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7,然后用Griess Reagent法和ELISA法检测细胞分泌的一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)的水平,并且采用RT-qPCR和Western blotting技术检测APE对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧化酶-2(COX-2)水平的影响以及核转录因子(NF-κB)的蛋白表达.结果 APE能显著抑制LPS刺激的RAW264.7细胞中NO、PGE2的含量,下调iNOS及COX-2的表达及NF-κB的磷酸化.结论 APE通过下调NF-κB的活性及iNOS与COX-2表达而发挥抗炎作用.     

原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1表达的影响

目的 探讨原花青素对RAW264.7细胞膜相关前列腺素E2合成酶-1(mPGES-1)表达的影响.方法 酶免疫测定法(EIA)检测原花青素对PGE2生成的影响,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测mPGES-1mRNA的表达,Western blotting检测mPGES-1蛋白的表达.结果 脂多糖(LPS)可以促进RAW264.7细胞PGE2的生成同时上调mPGES-1mRNA和蛋白的表达,而原花青素(4、20mg·L-1)下调LPS诱导的RAW264.7细胞mPGE-1mRNA和蛋白的表达,从而抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成.结论 原花青素在mRNA和蛋白水平抑制LPS诱导的RAW264.7细胞mPGES-1表达从而减少PGE2的合成,这可能是原花青素抗炎的机制之一.     

安儿宁颗粒的体外抗菌、抗炎和免疫增强活性研究

目的:评价安儿宁颗粒的体外抗菌、抗炎和免疫增强活性。方法:采用微量稀释法检测安儿宁颗粒(1.562 5～100 mg/mL)对10种临床常见致病菌的抑制作用并计算其最低抑菌浓度(MIC);以RAW 264.7细胞(单核巨噬细胞)为对象,采用脂多糖(LPS)诱导建立细胞炎症模型,以MTT法考察安儿宁颗粒(0.312 5～20 mg/mL)对细胞增殖及其释放一氧化氮(NO)的影响;以BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞为对象,以MTT法考察安儿宁颗粒(0.312 5～20 mg/mL)对细胞增殖的影响。结果:安儿宁颗粒对表皮葡萄球菌和肺炎链球菌的MIC均为6.25 mg/mL,对变形杆菌、肺炎克雷伯菌、枯草芽孢杆菌和大肠埃希菌(标准菌株)的MIC均为12.5mg/mL,对铜绿假单胞菌、粪肠球菌、蜡样芽孢杆菌的MIC均为25 mg/mL,对大肠埃希菌(临床分离菌株)、伤寒沙门菌的MIC均为50 mg/mL。与LPS模型组比较,安儿宁颗粒在0.312 5～1.25 mg/mL的剂量下能显著降低LPS诱导的RAW 264.7细胞中NO的释放(P<0.05);与空白对照组比较,安儿宁颗粒在试验剂量下对RAW 264.7细胞和小鼠脾脏淋巴细胞增殖无干扰或有促增殖趋势,其在0.625、0.312 5 mg/mL剂量下能显著促进淋巴细胞增殖(P<0.05)。结论:安儿宁颗粒在体外对临床常见的革兰氏阳性和革兰氏阴性致病菌均有一定的抑制作用,并具有抗炎和免疫增强作用。     

甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响

目的探究甘草次酸及其衍生物TY501对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的影响。方法以小鼠巨噬细胞RAW264.7为靶细胞,设置空白组,脂多糖(LPS)1μg/mL处理组(模型组),LPS1μg/mL加80、40、20、10μg/mL药物处理组(受试药物TY501,对照药物泼尼松龙、甘草次酸、吡罗昔康),每组设置4个复孔在给药刺激24h后按照CCK-8试剂盒说明测定各药物对细胞增殖抑制率。结果TY501半数抑制浓度(IC50)为233μg/mL,泼尼松龙IC50为1571μg/mL,甘草次酸IC50为31μg/mL,吡罗昔康IC50为14187μg/mL。结论甘草次酸对RAW264.7巨噬细胞的增殖具有明显的抑制作用,甘草次酸衍生物TY501也可抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的增殖,在同等质量浓度条件下其对小鼠巨噬细胞增殖的抑制程度强于泼尼松龙,弱于甘草次酸,表明甘草次酸及其衍生物TY501对于小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖的抑制作用可能是其发挥抗炎作用的机制之一。     

菥蓂正丁醇部位抑制TLR-4/NF-κB信号通路抗脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症反应作用研究

目的 研究菥蓂Thlaspi arvense水提醇沉部位、正丁醇部位的抗炎活性以及正丁醇部位的作用机制。方法 将菥蓂水提物经过乙醇、正丁醇萃取后制得菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位。采用MTT法确定水提醇沉部位、正丁醇部位（15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000 μg/mL）对RAW264.7细胞的毒性。采用脂多糖（LPS）1 μg/mL诱导RAW264.7细胞产生炎性反应,建立体外炎症细胞模型。Griess法检测水提醇沉部位、正丁醇部位（7.812 5、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1 000 μg/mL）对LPS诱导RAW264.7细胞后NO释放量的影响;ELISA法检测水提醇沉部位、正丁醇部位（125、250、500 μg/mL）对白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放量的影响;Western Blotting法检测正丁醇部位（125、250、500 μg/mL）对环氧合酶-2（COX-2）、一氧化氮合酶（iNOS）、白细胞介素1β（IL-1β）、核因子-κB（NF-κB）p-P65、Toll样受体4（TLR-4）、磷酸化NF-κB抑制蛋白（p-IκBα）蛋白表达的影响。结果 菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位质量浓度在1 000 μg/mL以下时对RAW264.7细胞几乎无毒性作用。与模型组比较,菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位62.5、125、250、500、1 000 μg/mL组NO释放量显著下降（P<0.01）;菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位125、250、500 μg/mL组IL-6、TNF-α的分泌量显著降低（P<0.01）,且正丁醇部位作用优于水提醇沉部位;菥蓂正丁醇部位500 μg/mL组的iNOS和250、500 μg/mL组COX-2、IL-1β、NF-κB p-P65、TLR-4、p-IκBα蛋白表达量显著降低（P<0.01）,作用均呈浓度相关性。结论 菥蓂正丁醇部位显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌以及COX-2、iNOS蛋白的表达,其抗炎作用机制可能与抑制TLR-4/NF-κB信号通路相关。     

山萘酚对脂多糖诱导RAW264.7细胞中COX-2和iNOS表达及产物生成的影响

目的探讨山萘酚对脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导RAW 264.7细胞COX-2及iNOS表达的影响。方法四氮唑盐法(monote-trazolium test,MTT)检测山奈酚对RAW264.7细胞生长增殖的影响,放射免疫测定法(RIA)检测山萘酚对PGE2和NO生成的影响,免疫印迹法(western blotting)检测COX-2及iNOS蛋白的表达。结果山萘酚抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞PGE2和NO的生成,同时下调LPS诱导的RAW 264.7细胞COX-2及iNOS蛋白的表达。结论山萘酚抑制2个诱导酶COX-2和iNOS的表达,从而减少炎性产物PGE2和NO的生成,这可能是山萘酚抗炎的机制之一。     

苍耳子醇提取液的乙酸乙酯、正丁醇、水萃取物对大鼠肝脏的毒性作用

目的：研究苍耳子65%乙醇提取液的乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物对大鼠肝脏的毒性作用,为探讨苍耳子的毒性成分提供实验依据。方法：苍耳子碎粉22kg,用8倍量乙醇浸泡6h回流加热提取2h,共提取2次,合并提取液,减压回收乙醇至无醇味,浓缩,浓缩液用石油醚萃取,回收石油醚;依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取,回收有机溶剂,水层减压干燥。取苍耳子干燥乙酸乙酯萃取物4.8g,正丁醇萃取物24g和水萃取物56g,各加含3%吐温-80生理盐水2000mL,分别配成浓度为0.0024、0.0120和0.0280g/mL的混悬液。将SPF级雄性大鼠40只随机分成4组,每组10只。3个给药组大鼠分别用乙酸乙酯、正丁醇和水萃取物的混悬液2.5mL灌胃,2次/d（剂量分别为每天0.06g/kg、0.3g/kg、0.7g/kg）,空白对照组给予等体积的吐温80生理盐水灌胃,2次/d,均连续灌胃28d。观察给药后大鼠外观、饮食和活动情况;并于给药前和给药开始后7、14、21、28d称体重。第29天检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（AKP）、总胆红素（TBil）和直接胆红素（DBil）的水平;之后,处死大鼠,计算肝脏指数,并进行肝脏组织学形态观察。结果：水萃取物组大鼠给药后7d皮毛无光泽,活动及摄食量减少。正丁醇和水萃取物组大鼠给药后14、21d出现皮毛枯黄,精神萎靡,28d出现竖毛,倦卧少动。乙酸乙酯萃取物组大鼠未见明显改变。正丁醇萃取物组大鼠给药开始后21、28d体重分别为（240.6±24.1）和（255.1±21.3）g,水萃取物组大鼠给药开始后14、21、28d体重分别为（214.4±20.5）、（230.7±21.2）和（239.1±18.5）g,均明显低于同时间点空白对照组大鼠体重[分别为（251.7±27.2）、（280.7±38.2）和（306.2±36.5）g,（P〈0.05,P〈0.01）]。正丁醇萃取物组AST为（112.6±24.3）U/L,明显高于空白对照组[（79.9±20.4）U/L,P〈0.01];水萃取物组ALT、AST和AKP分别为（51.1±3.9）、（112.9±16.6）和（198.4±41.8）U/L,明显高于空白对照组[（44.3±6.2）、（79.9±20.4）和（152.2±39.9）U/L,（P〈0.01,P〈0.05）];正丁醇萃取物组和水萃取物组肝脏指数分别为4.71±0.89和5.80±0.64,明显高于空白对照组3.14±0.33（P〈0.01）。各给药组大鼠的TBil和DBil值有所增加,但与空白对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。光镜观察可见正丁醇萃取物和水萃取物组大鼠肝细胞间隙增大、细胞核溶解、炎细胞浸润等病理改变。结论：苍耳子乙醇提取液的正丁醇萃取物及水萃取物对大鼠具有明显肝毒性作用。     

脂多糖对肺泡巨噬细胞自噬水平的影响

目的观察脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞(NR8383)后,对细胞自噬水平的影响。方法 将体外培养的NR8383细胞分成LPS处理组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,培养8h后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白水平,自噬体检测:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测细胞LC3 mRNA的转录水平、采用Western blot检测细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平。结果 LPS处理组细胞培养上清液中TNF-α含量(pg/ml)较PBS对照组明显升高(639.20±43.49 vs 6.47±1.23,P<0.01),细胞LC3 mRNA转录水平较PBS对照组上调(3.4±0.36倍,P<0.01),细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ较PBS对照组升高(1.03±0.15 vs 0.53±0.12,P<0.01)。结论 LPS刺激NR8383细胞后,细胞自噬体形成增多,其可能参与了NR8383肺泡巨噬细胞的炎症反应调控。     

感染性休克患者心肌损伤程度与预后分析

目的探讨感染性休克患者心肌损伤程度与预后的关系。方法将2011年1月至2014年1月收治的36例伴心肌损伤的感染性休克患者分为A、B组各18例。两组患者均有不同程度心肌损伤,A组患者肌钙蛋白I（cTnI）≥2.00μg/L（正常值：0.00～0.03μg/L）、脑钠肽（BNP）≥300 pg/mL（正常值：〈100 pg/mL）及肌酸激酶同工酶（CK-MB）≥40 U/L（正常值：〈25 U/L）,B组患者cTnI 0.03～〈2.00μg/L、BNP 100～〈300 pg/mL及CK-MB 25～〈40 U/L,两组患者均给予液体复苏、血管活性药物、抗菌药物、氧疗（加压吸氧、有创或无创机械通气）、营养心肌,以及根据不同病情部分患者选用床边血液净化治疗（16例）等。观察两组患者治疗前后急性生理和慢性健康状况Ⅱ（APACHEⅡ）评分、cTnI、BNP、CK-MB、血乳酸（Lac）、降钙素原（PCT）、白介素（IL）-6、平均动脉压（MAP）、病死率等变化。结果两组患者治疗前APACHEⅡ评分,PCT、IL-6水平比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;治疗14 d后,B组患者APACHEⅡ评分,cTnI、BNP、CK-MB、PCT、Lac、IL-6水平,病死率[分别为（6.36±3.62）分、（0.36±0.25）μg/L、（152.65±12.84）pg/mL、（16.48±5.26）U/L、（1.25±0.50）ng/L、（1.32±1.06）mmol/L、（8.26±3.34）pg/mL、11.11%]较A组[分别为（20.49±7.43）分、（2.48±1.34）μg/L、（324.13±64.31）pg/mL、（26.34±8.67）U/L、（3.16±2.24）ng/L、（3.65±2.16）mmol/L、（10.38±4.36）pg/mL、33.33%]显著下降,MAP[（75.36±9.86）mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）]较A组[（68.38±8.75）mm Hg]明显上升,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论感染性休克患者病死率与心肌损伤程度呈正相关,一旦出现严重心肌损伤导致心力衰竭,即使应用床边血液净化治疗等先进措施仍无法有效提高患者生存率,预后差于心肌损伤较轻的患者。     

灯盏花素对大鼠急性肝细胞损伤的保护作用

目的探讨灯盏花素对大鼠急性肝损害的保护作用。方法取Wistar大鼠18只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3组各6只。胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞后于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别加入PBS 20mmol/L、LPS 3mg/L、LPS 3mg/L+灯盏花素20mmol/L,于施加因素后2、4、6、8、12、24h分别收集肝细胞和肝细胞培养液进行各指标测定。用透射电镜观察肝细胞形态学变化,用Fura-2-AM测定细胞内游离钙离子浓度,用[3H]油酸标记的生物膜法测定分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2),用Elisa法检测前列腺素E2(PGE2)的活性。结果Ⅱ组凋亡细胞与坏死细胞数均多于Ⅰ、Ⅲ组,差异均有统计学意义(P<0.01)。LPS加入肝细胞培养液2h、8h,Ⅱ组大鼠肝细胞中Ca2+浓度高于Ⅰ、Ⅲ组(P<0.05);Ⅱ组sPLA2、PGE2水平均高于Ⅰ组、Ⅲ组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论灯盏花素能显著抑制急性肝损害,可能与其对钙的拮抗和对sPLA2的抑制作用有关。     

Caspase-1抑制剂对实验性重症急性胰腺炎肝损伤的保护作用

目的：评价Caspase-1抑制剂二甲基苯甲酰羟甲酮对实验性重症急性胰腺炎（SAP）肝损伤的保护作用。方法：SD大鼠42只,随机分为3组：健康对照组（HC组,n=6）,SAP造模＋生理盐水组（SAP-S组,n=18）,SAP造模＋ICE抑制剂组（SAP-ICE-I组,n=18）。以5%牛磺胆酸钠逆行注入胰胆管诱发SAP模型。SAP-S组于造模后2h腹腔注射生理盐水1mL,12h后重复一次;SAP-ICE-I组于造模后2h腹腔注射ICE抑制剂。HC组模拟胰胆管穿刺操作,但不注射药物。结果：SAP-S组血清ALT、AST及IL-1β水平在6h时分别为（216±58）、（372±38）U/L、（277±45）pg/mL,12h时分别为（397±70）、（548±75）U/L、（309±35）pg/mL,18h时分别为（425±86）、（666±84）U/L、（312±46）pg/mL,显著高于HC组（P〈0.01）;SAP-ICE-I组3者水平显著降低（P〈0.01vsSAP-S）。HC组肝组织可见Caspase-1、IL-1β及IL-18 mRNA表达;SAP-S组3者表达水平显著上调（P〈0.01vsHC）;SAP-ICE-I组IL-1β及IL-18 mRNA的表达显著下调（P〈0.01 vs SAP-S）,Caspase-1 mRNA表达则无显著改变（P〉0.05）。结论：Caspase-1激活、IL-1β及IL-18的过度表达在SAP肝损伤过程中发挥重要的作用;ICE抑制剂可有效地改善肝脏功能损害。     

高效液相色谱-串联质谱法研究环维黄杨星D分散片的生物利用度

目的建立人血浆中环维黄杨星D的测定方法,评价环维黄杨星D分散片与普通片剂在中国健康成年男性志愿者中的生物等效性。方法以左羟丙哌嗪为内标,血浆样品经氯仿萃取,Hyperity C18柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离后,采用高效液相色谱-串联质谱法检测。18名健康男性志愿者采用双周期随机交叉试验设计,分别单剂量口服环维黄杨星D分散片与普通片剂2 mg。结果环维黄杨星D与内标分离度好,内源性杂质不干扰测定,质量浓度在10～320 pg/mL(r=0.996 9)与峰面积比的线性关系良好,定量下限为10 pg/mL,萃取回收率为82.66%～89.58%(n=5),日内RSD为4.17%～9.96%(n=5),日间RSD为5.21%～10.31%(n=15)。单次服用2 mg环维黄杨星D分散片和普通片剂后的0～144 h药时曲线下面积(AUC0～144)分别为(5679.83±1548.21)pg.h/mL和(5 243.65±1 317.39)pg.h/mL,0～∞药时曲线下面积(AUC0～∞)分别为(7 464.21±2 128.08)pg.h/mL和(7 021.43±2 076.12)pg.h/mL,峰浓度(Cmax)分别为(202.81±43.30)pg/mL和(222.10±50.90)pg/mL,达峰时间(tmax)分别为(5.76±1.93)h和(5.22±1.03)h,半衰期(t1/2)分别为(54.67±12.43)h和(50.66±13.63)h。与普通片剂相比,环维黄杨星D分散片的相对生物利用度为(100.5±10.1)%。结论该方法准确度高、灵敏度好,可用于环维黄杨星D人体内过程研究。两种制剂为生物等效制剂。     

洛伐他汀对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及对脂联素表达的影响

目的：观察洛伐他汀对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及对脂联素表达的影响。方法健康雄性清洁级Wistar大鼠54只,体质量250～300 g,采用数字表法随机分为三组：假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、洛伐他汀处理组（LOV组）。 Sham组及LOV组术前1周腹腔注射洛伐他汀4 mg／kg,CLP组则注射等体积的溶剂0．5％缩甲基纤维素钠（CMC）。各组术后4 h、12 h和24 h取支气管肺泡灌洗液（BALF）测定TNF-α及IL-6水平;取肺组织观察组织病理学改变及检测髓过氧化物酶（MPO）及丙二醛当量（MDA）含量;另取血标本检测血清脂联素水平。结果 Sham组4 h、12 h和24 h TNF-α含量分别是（1．80±0.13）pg／mL、（2．04±0．15）pg／mL和（1．93±0．19）pg／mL;IL-6含量分别是（20．56±0．23）pg／mL、（18．35±0．15）pg／mL和（21．23±0．20）pg／mL;MPO含量分别是（2．82±0．14）U／g组织、（2．88±0．07）U／g组织和（2.76±0．18）U／g组织;MDA含量分别是（3．32±0．12）nmol／mg、（3．09±0．11）nmol／mg和（3．21±0．08）nmol／mg;脂联素浓度分别是（2．68±0．14）μg／mL、（2．80±0．07）μg／mL和（2．86±0．18）μg／mL。与Sham组相比：（1）CLP组及LOV组肺损伤形态学改变明显,CLP组BALF中TNF-α含量[4 h、12 h和24 h分别是（4.23±0．18） pg／mL、（5．62±0．24）pg／mL和（5．14±0．10）pg／mL,t＝28．41、30．98、36．62]及IL-6含量[4 h、12 h和24 h分别是（39．12±0．17）pg／mL、（47．25±0．21）pg／mL和（44．69±0．27）pg／mL,t＝158．90、273．40、127．28]增高,肺组织匀浆中MPO水平[4 h、12 h和24 h分别是（4．85±0．13） U／g组织、（6．17±0.08） U／g组织和（7．84±0．10）U／g组织,t＝26．39、79．40、60．43]及MDA水平[4 h、12 h和24 h分别是（6．24±0．06）nmol／mg、（7．56±0.15）nmol／mg和（8．43±0．10）nmol／mg,t＝53．31?     

短期与长期烟草烟雾暴露小鼠中CD4＋Foxp3＋调节性T细胞的变化及意义

目的：观察短期与长期烟草烟雾暴露小鼠肺组织和外周血CD4^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg细胞）及相关细胞因子的变化,探讨Treg细胞在烟草诱导气道慢性炎症发生中的作用。方法：将60只健康清洁级雄性BALB／c小鼠随机分为长期暴露24周组、短期暴露4周组和对照组,每组20只。用烟草烟雾暴露法建立小鼠气道炎症模型。收集支气管肺泡灌洗液（BALF）进行细胞学计数和分类;用流式细胞术检测Treg／CD4^＋T细胞比例;用实时荧光定量PCR法检测肺组织Foxp3mRNA的表达;采用ELISA检测小鼠血清和BALF中IL-6、TGF-B和IL-10水平。结果：短期暴露组肺组织和外周血中Treg细胞比例分别为（5．24±0．86）％和（5．24±1．23）％,均显著高于对照组厂（2．52±0．62）9／5和（3．54±0．87）％];而长期暴露组肺组织和外周血中Treg细胞比例分别为（1．83±0．39）％和（1．88±0．25）％,均显著低于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。短期暴露组肺组织Foxp3mRNA表达量为2．67±0．73,显著高于对照组（1．49±0．37）;而长期暴露组Foxp3mR-NA表达量为0．61±0．21,显著低于对照组（1．49±0．37）（均P〈0．01）。长期暴露组外周血IL-6和TGF-β分别为（56．47±19．41）pg／mL、（144．22±43．19）ng／mL,均显著高于短期暴露组L（6．22±2．06）pg／mL、（23．32±8．32）ng／mL]和对照组[（5．12±1．48）pg／mL、（18．14±13．00）ng／mL],差异均有统计学意义（均P〈0．01）。长期暴露组外周血IL-10浓度为（4．04±2．57）pg／mL,显著低于对照组的（8．26±2．02）pg／mL;而短期暴露组外周血IL一10浓度为（10．42±2．45）pg／mL,显著高于对照组（P〈0．01）。结论：短期与长期烟草暴露可导致小鼠Treg细胞比例和相关细胞因子改变,提示Treg细胞可能参与气道炎症发生的免疫调节。对烟草暴露引起