利用LC-MS/MS法解析化学修饰型胰岛素类似物的氨基酸序列

目的:德谷胰岛素和地特胰岛素是以长链脂肪酸化学修饰为代表的第3代胰岛素类似物,有必要建立专属性强、灵敏度高的LC-MS/MS法测定化学修饰型胰岛素类似物的氨基酸序列。方法:氨基酸序列测定方法的色谱参数为ACQUITY UPLC peptide BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm, 300?),流动相A为0.1%甲酸/水溶液,流动相B为0.1%甲酸/乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^-1;质谱参数为MS^E采集模式,碰撞能量为30～40 eV。结果:德谷胰岛素和地特胰岛素序列覆盖率良好,化学修饰位点的碎片离子y1&可检出,中高强度离子的离子强度RSD在15%之内,可有效区分与其他未修饰胰岛素的序列。结论:建立了重复性好、专属性强和耐用性好的脂肪侧链修饰型胰岛素类似物氨基酸序列LC-MS/MS方法,为该类产品序列结构的研究方法提供了借鉴意义。     

UPLC-MS/MS法同时测定经典名方实脾散中20个化学成分的含量

目的:建立UPLC-MS/MS法同时测定实脾散中20个化学成分(槟榔碱、环磷酸腺苷、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、甘草苷、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、异甘草苷、苯甲酰次乌头原碱、甘草素、异甘草素、甘草酸、6-姜辣素、和厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香内酯、厚朴酚、白桦脂酸)的含量。方法:采用岛津Shim-pack GIST C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2μm),流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0～12 min, 2%B→14%B;12～24 min, 14%B→51%B;24～26 min, 51%B→70%B;26～36 min, 70%B;36～37 min, 70%B→2%B;37～40 min, 2%B),柱温为35℃,流速为0.3 mL·min^-1,进样量为1μL;采用电喷雾电离源(ESI源),多重反应监测(MRM)模式正负离子检测。结果:20个化学成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均>0.997 6;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为93.4%～108.7%,RS...     

基于酶解法采用超高效液相色谱-串联质谱法检测阿胶、黄明胶、鹿角胶中猪皮特征肽

目的:建立基于酶解法采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS法)检测阿胶、黄明胶和鹿角胶中猪皮特征肽。方法:采用胰蛋白酶进行酶解处理;使用Xbridge BEH-C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm, 2.5μm),柱温30℃,以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～1 min, 95%A;1～5 min, 95%A→70%A;5～5.1 min, 70%A→10%A;5.1～7 min, 10%A;7～7.1 min, 10%A→95%A;7.1～10 min, 95%A),流速0.4 mL·min^-1,进样量为2μL;电喷雾离子源(ESI~+),采用多重反应监测模式(MRM),正离子模式,对猪皮特征肽目标离子m/z 406.5(双电荷)→657.3和m/z 406.5(双电荷)→556.3进行检测。结果:阿胶、黄明胶、鹿角胶中分别掺入猪皮特征肽,质量浓度范围为5～500 ng·mL^-1时,测得浓度与色谱峰面积成正比,线性方程分别为Y=3.020 4X+8.998(...     

UPLC-MS/MS法测定半枝莲中4个二萜烟酸酯的含量

目的:建立同时测定半枝莲中半枝莲碱A、半枝莲碱B、半枝莲萜C和半枝莲萜F含量的UPLC-MS/MS分析方法。方法:采用ACQUITY UPLC?BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~7 min,48%B→100%B;7~8 min,100%B;8~8.5 min,100%B→48%B;8.5~10 min,48%B),流速0.2 mL·min^-1,柱温30℃;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测(MRM)正离子模式进行扫描。结果:半枝莲碱A、半枝莲碱B、半枝莲萜C、半枝莲萜F质量浓度分别在0.3344~13.38、0.2231~8.923、0.1624~6.496、0.1988~7.954μg·mL^-1的范围内线性关系良好(r皆大于0.999);平均回收率(n=9)分别为98.2%、98.6%、99.9%、93.3%,RSD分别为4.2%、6.2%、4.6%、6.3%;27批样品中上述4个成分含量范围分别为15.44~168.4、14.98~118.23、13.31~62.40、12.37~117.67μg·g^-1。结论:所建立的方法可用于半枝莲中主要二萜烟酸酯类成分的定量分析。     

肾上腺素原料药及盐酸肾上腺素注射液杂质的HPLC-QTOF MS分析

目的:建立HPLC-QTOF MS法测定肾上腺素原料药及盐酸肾上腺素注射液杂质。方法:采用Eclipse plus C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm),以5 mmol.L-1甲酸铵水溶液-0.1%甲酸水溶液(A)/乙腈(B)为流动相,流速为0.3 mL.min-1,梯度洗脱,梯度条件如下:0→4 min,2%B;4→10 min,2%～50%B;10→12 min,50%～90%B;12→15 min,90%B;柱温为30℃。采用正离子模式采集数据。结果:原料药和注射液中共检出3个杂质,分别为肾上腺酮、肾上腺素磺化物和4-[2-(丁基-2-基氨基)-1-羟乙基]苯酚。结论:本法简便、灵敏,准确,可用于肾上腺素原料药及制剂的杂质定性分析。     

UHPLC法同时测定铁苋菜中4种成分含量

目的 采用UHPLC法构建铁苋菜中没食子酸,原儿茶酸,没食子酸甲酯,芦丁等4种成分的含量测定方法。方法 固定相为Poroshell 120 SB-C₁₈ (3.0 mm×150 mm,2.7 μm)色谱柱;流动相为A相0.1%甲酸-水,B相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱（0~3 min,5%B→10%B;3~5 min,10%B→25%B;5~10 min,25%B→30%B）柱温40 ℃,流速0.6 mL·min^-1,检测波长265 nm。结果 4种成分的线性关系良好,平均加样回收率为100.5%~100.9%,RSD 均小于3.0%;10批样品中4种成分的含量分别为0.27~0.71,0.57~1.64,2.15~4.36,0.53~1.65 mg·g^-1。结论 该方法简便高效,稳定准确,有助于铁苋菜药材的全面质量控制。     

超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测复方阿胶浆中阿胶

目的:建立复方阿胶浆中阿胶的专属性检测方法。方法:采用胰蛋白酶对复方阿胶浆中阿胶成分进行酶解,利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)对阿胶的专属性特征分子离子峰进行检测。采用Agilent SB-C18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,以乙腈为流动相B,梯度洗脱(0~25 min,95%A→80%A,5%B→20%B;25~40 min,80%A→50%A,20%B→50%B)。流速0.3 m L·min-1,柱温40℃,进样量5μL;选择阿胶特征分子离子峰m/z 539.8(双电荷)→612.4和m/z 539.8(双电荷)→923.8作为检测离子对,离子化模式为ESI+,进行多反应监测。结果:3批市售样品中均可检出阿胶的特征分子离子峰,即同时检出m/z 539.8(双电荷)→612.4和m/z 539.8(双电荷)→923.8离子对。结论:所建立的方法经方法学验证,阴性样品及其他胶类如黄明胶、龟甲胶和鹿角胶等对复方阿胶浆样品测定无干扰,样品检出浓度为含5%阿胶的复方阿胶浆样品。方法专属性强,可用于复方阿胶浆中阿胶的检测。     

UFLC-MS/MS法同时测定黄芪建中汤中6个活性成分的含量

目的:建立一种同时测定黄芪建中汤中6个活性成分(毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、桂皮酸、芍药苷、芍药内酯苷、甘草苷和甘草酸)含量的超快速液相色谱-串联质谱法。方法:采用Shim-Pack XR-ODS色谱柱(75 mm×3.0 mm, 2.2μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～6.0 min, 12%B→25%B;6.0～7.0 min, 25%B→45%B;7.0～11.0 min, 45%B→60%B;11.0～13.0 min, 60%B→70%B),平衡时间5 min,流速0.4 mL·min^-1,柱温30℃,进样量5μL;采用电喷雾电离源(ESI源),负离子模式检测,多反应监测(MRM)。结果:毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、桂皮酸、芍药苷、芍药内酯苷、甘草苷和甘草酸质量浓度分别在0.2～10μg·mL^-1(r=0.999 6)、0.5～25μg·mL^-1(r=0.999 5)、2～100μg·mL^-1(r=0.999 6)、0.5～2...     

UPLC-MS/MS法同时测定黄芪水提液中3种成分的含量

目的 建立UPLC-MS/MS法同时测定黄芪水提液中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮和黄芪甲苷含量的方法.方法 黄芪药材经水进行提取后采用UPLC-MS/MS法进行测定,色谱条件:安捷伦SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm)用于进行分离,采用梯度洗脱方式进行分离,乙腈和0.1％甲酸水溶液作为流动相,...     

香薷HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析

目的:建立香薷的HPLC指纹图谱及其咖啡酸、迷迭香酸、木犀草素、芹菜素、黄芩素-7-甲醚、香荆芥酚、麝香草酚7个成分的HPLC含量测定方法。方法:采用Eclipse XDB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0～17 min, 12%B→20%B;17～30 min, 20%B→30%B;30～40 min, 30%B→45%B;40～55 min, 45%B→54%B),流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280、330 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:建立了香薷HPLC指纹图谱，共确定了14个共有峰，并指认其中5个共有峰，分别为咖啡酸(5号峰)、迷迭香酸(10号峰)、黄芩素-7-甲醚(12号峰)、香荆芥酚(13号峰)、麝香草酚(14号峰),17批香薷样品的相似度均>0.910;对17批药材中指认的7个成分进行含量测定，其质量浓度分别在1.04～52.0μg·mL^-1(r=0.999 3,n=5)、6.0～300.0μg·...     

氯胺酮、去甲氯胺酮、氟胺酮3个苯环利定类物质的毛发质控样品制备研究

目的:探究氯胺酮、去甲氯胺酮、氟胺酮3个苯环利定类物质毛发质控样品的制备方法和规律,分析不同制备条件和贮存条件对毛发质控样品的性能影响。方法:通过比较空白毛发(不含氯胺酮、去甲氯胺酮和氟胺酮的毛发)浸泡在不同种类的浸泡溶剂、不同目标物(氯胺酮、去甲氯胺酮、氟胺酮)浓度、不同酸度的浸泡试液和不同空白毛发浸泡量等条件下制备的毛发质控样品中目标物含量,系统分析了不同制备条件对毛发质控样品性能的影响,并按照研究规律采用乙腈-DMSO(1∶1,含0.02 mol·L^-1盐酸)为浸泡溶液,将空白毛发浸泡不同时间段制备含量覆盖面较广的毛发质控样品;采用高效液相色谱-质谱联用仪,应用BEH C₁₈(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,在柱温40℃,以0.1%(v/v)甲酸水溶液(A)-0.1%(v/v)甲酸乙腈溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～9 min, 5%B→100%B;9～11 min, 100%B;11～11.1 min, 100%B→5%B;11.1～13 min, 5%B),流速0.4 mL·min^-1,进样...     

HPLC法测定复方草珊瑚含片中反丁烯二酸与异秦皮啶的含量

目的:测定复方草珊瑚含片中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量。方法:HPLC 法,采用 Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);以流动相乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)进行梯度洗脱[0～8 min,100%B,流速0.5 mL·min~(-1);8～13 min,100%B→95%B,流速0.5 mL·min~(-1);13～43 min,95%B→80%B,流速0.7 mL·min~(-1);43～51 min,80%B→30%B,流速0.7 mL·min~(-1);51～52 min,30%B→100%B,流速0.5 mL·min~(-1);52～57 min,100%B,流速0.5 mL·min~(-1)];柱温38℃;检测波长:210 nm。结果:反丁烯二酸和异秦皮啶的线性良好,相关系数分别为0.9996和0.9999;平均回收率(n=9)分别为99.3%(RSD=0.35%)和101.2%(RSD=0.56%)。结论:该方法可行,准确度、重复性良好,可用于控制该产品的质量。     

UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中的豆腐果苷

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中的豆腐果苷.方法 蛋白沉淀法分离血浆样品;采用BEH C18色谱柱,0.1％甲酸-乙腈-水为流动相,梯度洗脱,离子化方式为负离子电喷雾,多反应监测,药物的监测离子对为m/z329→121.结果 豆腐果苷浓度在2～1000 ng/mL范围内线性关系良好,日内及日间精密度均小于15％,基质效应小于15％.结论本研究建立的方法 可应用于豆腐果苷药动学和生物利用度研究.     

基于UHPLC-Q-TOF/MS技术对扶正化瘀胶囊入血成分的快速鉴别

目的本研究运用超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)联用技术鉴别扶正化瘀胶囊入血成分。方法色谱分离采用ACQUITY UPLCHSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm);流动相0.1%甲酸水溶液(A)?0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱条件:0~3 min,2%B;3~18 min,2%~50%B;18~22 min,50%~95%B;22~25 min,95%B。平衡时间为10 min,流速为0.4 ml/min,分析时间为25 min。质谱定性电喷雾离子源采用在正、负离子模式扫描,采集范围从100~1100 m/z。结果在血清样品中一次性鉴别出49个成分,其中正、负离子模式下均有响应的有4个。结论本研究较全面地阐明了扶正化瘀胶囊的入血成分,丰富了扶正化瘀胶囊的科学内涵,为该复方的深入研究奠定了基础。     

LC-MS测定甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质的含量

目的:建立LC-MS法测定甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质的含量。方法:采用Inertsil ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为10 mmol.L-1甲酸铵溶液(用甲酸调pH至3.2),流动相B为甲醇,梯度洗脱(0～10 min,45%B;10～17 min,45%→80%B;17～22 min,80%B;22～23 min,80%→45%B;23～33 min,45%B);流速为1.0 mL.min-1;柱温为35℃;采用正离子模式采集数据。结果:杂质507-00进样是在0.018～0.734 ng范围内,与峰面积呈良好线性关系,线性方程为Y=8.909×104X-453.2,r=0.9999;检测限0.007 ng;定量限为0.018 ng;平均回收率为90.9%,RSD为3.6%(n=9)。结论:本方法简便准确,可用于甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质的检测。     

亲水作用色谱-质谱法检测牛磺酸颗粒中的牛磺酸北大核心CSCD

目的:建立牛磺酸颗粒中牛磺酸的含量测定方法。方法:采用亲水作用色谱-质谱法,以HYPERSIL APS-2(氨丙基)为色谱柱固定相,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,进行梯度洗脱(0~10 min,90%B→80%B;10~15 min,90%B),流速为0.4 mL·min^(-1),柱温箱温度35.0℃,进样量1.0μL,单次运行时间为15 min;用ESI离子源,以m/z=+126.0选择离子监测模式进行质谱定量。结果:本分析条件下,牛磺酸颗粒中的牛磺酸可以实现较好的分离,且具有较高的分子离子丰度,牛磺酸质量浓度与峰面积在测定范围内线性关系良好(r=0.999 6);准确度良好,平均加样回收率在97.7%~100.7%之间,测定3批牛磺酸颗粒中含牛磺酸的量分别为标示量的100.6%、100.2%、100.7%。结论:经方法学验证,该方法可应用于牛磺酸颗粒中牛磺酸的含量测定。     

液相色谱-串联质谱法测定策划药物MDPV及其代谢物

目的:建立日益流行的策划药物亚甲二氧吡咯戊酮(MDPV)及其体外代谢产物的液相色谱-质谱(LC-MS)联用测定方法。方法:采用Thermo Gold ODS色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm),以0.1 mmol·L-1醋酸铵-甲酸缓冲溶液(p H 4.5)为流动相A,甲醇为B进行梯度洗脱(0~1 min,10%B;1~6 min,10%B→90%B;6~14 min,90%B),流速0.20 m L·min-1;采用电喷雾离子化源,正离子检测方式,全离子扫描、选择反应监测扫描模式检测并鉴定MDPV及其代谢产物。结果:在大鼠肝微粒体S9组分中鉴定得到MDPV的4种体外代谢产物。结论:所建立的方法用于策划药物及其代谢物的分析,不仅可以节省分析时间、减少实验成本,而且具有高效、灵敏和选择性好等特点。     

UPLC-MS/MS测定布洛芬中的潜在遗传毒性杂质(2RS)-2-(4-甲酰基苯基)丙酸

摘要：目的:建立UPLC-MS/MS法测定布洛芬中潜在基因毒性杂质（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸。方法:色谱柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18柱（150 mm×4.6 mm, 2.7μm）,柱温：40℃;流动相A:0.1%甲酸水溶液,流动相B:0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱;流速0.5 ml·min-1;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测模式（MRM）进行正离子扫描,定量离子对为m/z 179→105,定性离子对为m/z 179→133。结果:在该色谱条件下,（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸专属性好,在1.160 5～29.012 5 ng·ml-1浓度范围内线性关系良好（r=0.997 1）,平均回收率为109.1%（RSD=3.9%,n=9）,检测限为0.464 2 ng·ml-1,方法检测限为0.000 001 9%。结论:该分析方法简便高效,能有效准确的测定布洛芬中的潜在基因毒性杂质（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸。     

UPLC-MS/MS法同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度

目的 建立同时测定人血浆中卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮及其代谢物奥沙西泮浓度的方法。方法 采用超高效液相色谱-质谱联用法（UPLC-MS/MS）,以磺胺甲噁唑（SMZ）为内标,血浆经甲醇直接沉淀后进样分析。色谱柱为WatersACQUITYUPLCHSSPFP柱（2.1mm×100mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸的5mmol·L1乙酸铵水溶液-0.1%甲酸的甲醇溶液（0~5min,35∶65→10∶90）,流速为0.2mL·min1。电喷雾离子源,正离子多反应监测扫描分析,卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮的离子对分别为m/z237.0→194.06、m/z255.98→144.95、m/z316.01→270.0、m/z285.04→193.07和m/z287.02→241;内标磺胺甲噁唑的离子对为m/z253.96→91.97。结果 卡马西平、拉莫三嗪、氯硝西泮、地西泮和奥沙西泮血药浓度分别在2.4~600ng·mL1（r=0.9997）,2.52~630ng·mL1（r=0.9920）,2.08~520ng·mL1（r=0.9979）,2.28~570ng·mL1（r=0.9982）,8.0~800ng·mL1（r=0.9992）线性关系良好;最低检出限分别为0.24,0.63,0.52,0.57,3.2ng·mL1。日内、日间精密度均〈15%;提取回收率均〉70%,且RSD〈15%。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可用于临床血药浓度测定及药动学研究。     

HPLC法测定注射用泮托拉唑钠中乙二胺四乙酸二钠的含量

目的:建立注射用泮托拉唑钠中乙二胺四乙酸二钠的含量测定方法。方法:色谱柱为Shim-Pack VP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.025 mol.L-1硫酸铵(用稀硫酸调节pH至3.0)(B),梯度洗脱(0～5 min,100%B;5～10 min,100%B→50%B;10～15 min,50%B;15～20 min,50%B→100%B),柱温为25℃,检测波长为254 nm,流速为1.0 mL.min-1,进样量为20μL。结果:乙二胺四乙酸二钠进样量在0.083～0.83μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为99.9%(n=9)。结论:本法简便、准确,灵敏度高,重复性好,可用于注射用泮托拉唑钠中乙二胺四乙酸二钠的含量测定。