来氟米特对类风湿关节炎患者外周血Thl/Tcl细胞的影响

目的探讨来氟米特对类风湿关节炎(RA)患者外周血T淋巴细胞亚群的影响.方法采用细胞内细胞因子染色、三色流式细胞分析法检测单个细胞分泌细胞因子的情况.收集25位RA患者和10例接受来氟米特治疗前及治疗3个月后的RA患者的外周血,对CD4+、CD8+细胞分泌IL-4和IFN的情况进行检测.结果RA患者和健康对照组的外周血CD4+/CD8+T淋巴细胞中,分泌IFN(的细胞群均比分泌IL-4的细胞群多,同健康对照组相比,RA患者外周血中Th1型细胞明显减少.产生IFN的Th1型、Tc1型细胞和产生IL-4的Th2型细胞在接受来氟米特治疗后明显减少,而Tc2型细胞则无明显增加或减少.结论来氟米特可能通过抑制Th1型和Tc1型的分化、减少Th1/Tc1型细胞因子如IFN(的分泌而发挥抗炎及改变类风湿关节炎病程的作用.     

晚期大肠癌手术后奥沙利铂联合方案化疗对患者T辅助淋巴细胞的影响

目的探讨晚期大肠癌手术后进行奥沙利铂联合方案化疗对患者外周血T辅助淋巴细胞的影响及其临床意义。方法运用ELISA法和流式细胞技术检测晚期大肠癌手术后化疗患者化疗前后外周血白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素4(IL-4)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)及Th1/Th2比值并进行比较。结果晚期大肠癌手术后患者第1、2次化疗结束时外周血IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-6及IL-10外周血浓度与化疗前及对照组相比均显著降低(P<0.05),Th1/Th2比值较化疗前比较差异有统计学意义(P<0.05);第2、3次化疗开始前及第3次化疗结束后IL-2、IFN-γ、TNF-α外周血浓度与化疗前比较显著升高(P<0.05),Th1/Th2比值较化疗前相比有显著性差异(P<0.05)。结论晚期大肠癌手术后化疗第1、2次结束时,Th1、Th2表达被抑制,机体细胞免疫及体液免疫能力下降;化疗间歇期及机体耐受力增强后Th1类细胞因子逐渐升高,Th1/Th2比值趋向于正常,肿瘤免疫能力增强。     

NSCLC患者术后CIK细胞免疫治疗联合化疗疗效观察

目的评价细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）免疫治疗联合化疗治疗术后非小细胞肺癌（NSCLC）患者的近期疗效。方法选取82例Ib-IIIa期NSCLC患者,经手术治疗后随机分为两组,常规化疗组和CIK细胞治疗联合化疗组,每组41例。观察比较两组患者生活质量及外周血CD3＋,CD4＋,CD4＋/CD8＋比值,自然杀伤细胞（Na-ture-Kille）r比率以及Th1/Th2细胞因子水平免疫功能指标的变化。结果生活质量：CIK细胞治疗联合化疗组和常规化疗组生活质量总提高率分别为90.0%与73.2%,研究组患者生活质量高于对照组（P〈0.05）。免疫功能指标：CIK细胞治疗联合化疗组于CIK细胞治疗后2周,外周血CD3＋,CD4＋T细胞,NK细胞和CD4＋/CD8＋的比值、白细胞介素-2,干扰素γ水平较治疗前升高（P〈0.01）,于治疗后4周达高峰,此后逐渐回落;而Th2细胞因子于CIK细胞治疗后2周下降,治疗后4周降至低谷。CIK细胞治疗联合化疗组于CIK细胞治疗后2、4、8周CD3＋,CD4＋,CD4＋/CD8＋,NK细胞,IL-2,IFN-γ,白细胞介素-4和白细胞介素-10与常规治疗组各时点比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 CIK细胞免疫治疗联合化疗能增强NSCLC患者术后的免疫功能,改善其生活质量。     

皮肌炎患者外周血CD4+Th1/Th2细胞因子及转录因子的表达

目的 探讨Th1/Th2细胞分化趋势在活动性皮肌炎(DM)发病机制中的作用.方法 分别采集15例活动性DM患者(DM组)和15例健康人(对照组)外周血,采用免疫磁珠分离获得CD4 T细胞(Th细胞),逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测两组Th1、Th2转录因子T-bet、GATA3及细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的表达强度.分析T-bet和IFNγ、GATA3和IL-4的相关性;IFN-γ、IL-4表达与血清肌酸激酶(CK)含量的相关性.结果 DM组IFN-γ、GATA3及II-4表达均明显高于对照组(P＜O.05);DM组IL-4与GATA3、血清CK呈正相关(P＜O.05).结论 DM患者Th1/Th2无明显极化现象,Th1/Th2细胞因子表达均增强.     

原发性胆汁性肝硬化43例外周血相关细胞因子表达变化观察

目的观察原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血相关细胞因子表达水平变化。方法连续选择新近就诊或住院治疗的43例PBC患者,其中晚期PBC患者(Harada方法Ⅲ和Ⅳ期,26例)接受了外周血相关细胞因子[白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α]浓度检测,并与早期PBC患者(Harada方法Ⅰ和Ⅱ期,17例)及同期参加我院体检且结论健康自愿者(对照组,19名)比较。结果不同分期PBC患者外周血IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α浓度均明显高于对照组,而IL-10浓度则显著低于后者(P均<0.05～0.01)。晚期PBC组外周血外周血IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α浓度均明显高于早期PBC组,而IL-10浓度则显著低于早期患者(P均<0.05～0.01)。结论晚期PBC患者外周血多数相关细胞因子表达更为活跃。     

结肠癌患者外周血Th1/Th2细胞因子的漂移及临床意义

目的检测结肠癌患者外周血CD3T细胞分泌细胞因子的水平变化,分析Thl和Th2细胞的细胞因子免疫活动为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法首先用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,然后加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,最后应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。同时用酶联免疫吸附法ELISA检测相应的细胞因子。结果结肠癌患者Thl型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)表达水平较正常对照组显著降低;Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常对照组升高,差异有显著性意义。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平较正常对照组升高差异有显著性。结论结肠癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸,从而导致肿瘤的发生或者转移的一种原因之一。     

参麦注射液对CPHD患者细胞免疫功能的影响

目的 通过观察参麦注射液对慢性肺原性心脏病(CPHD)患者细胞免疫功能的影响,探讨CPHD患者的发病与机体免疫的关系.方法 采用流式细胞术检测20例CPHD患者外周血T淋巴细胞亚群和NK(CD3-/CD16 56 )细胞;RT-PCR方法检测IL2 、IFNγmRNA的表达.结果 CPHD患者CD3 、CD4 和CD4/CD8比值明显低于对照组并有统计学意义,而CD8 细胞高于对照组(P<0.01),参麦注射液治疗后CD3 、CD4 、CD3-/CD16 56 细胞和CD4/CD8比值都升高,其中CD4 、CD3 细胞与治疗前比较有统计学意义(P<0.05),而CD8 细胞与治疗前比较降低(P<0.05).参麦注射液能促进T细胞分泌细胞因子IL2、IFNγmRNA的表达.结论 当CPHD患者免疫功能低下时,选用参麦注射液治疗能够提高机体的细胞免疫功能.     

1型糖尿病外周血Th1/Th2细胞因子表达水平的研究

目的检测1型糖尿病患者外周血CD_4~+T细胞分泌细胞因子的水平变化,探讨患者Th1/Th2细胞因子的平衡状态及其在1型糖尿病中的作用。方法对49例1型糖尿病患者和30例健康时照组外周血用刺激物刺激细胞,增加细胞内细胞因子的表达,再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体,特异性抗原抗体结合,以流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。结果1型糖尿病患者Th1型细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)表达水平较正常对照组升高,差异有统计学意义(P<0.01)。Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平较正常时照组显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论1型糖尿病患者Th1/Th2平衡失调,Th1型反应模式处于优势状态,Th2型反应模式处于弱势状态。Th1/ Th2平衡向Th1方向漂移。     

树突状细胞在变应性鼻炎发病中的作用

目的 探讨树突状细胞(DC)在变应性鼻炎患者外周血中的变化及对Th1/Th2细胞诱导分化的效应.方法 用流式细胞术分析变应性鼻炎组(15例)、慢性鼻炎组(15例)及对照组(15例)患者外周血CD3-CD64+细胞和CD4+ CD3-CD11c-细胞.将培养成熟的两种细胞分别与CD4+ CD45RA+T细胞和抗CD3及抗CD28单抗共同培养,用ELISA法检测上清液细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-5和IL-10的含量.结果 在变应性鼻炎组外周血中,以CD4+ CD3-CD11c-细胞百分率增高为特征,经IL-3和CD40L等细胞因子培养后分化成熟成淋巴样细胞来源的树突状细胞(DC2);而慢性鼻炎组外周血中以CD3-CD64+细胞占优势,经用粒细胞集落因子(GM-CSF)+CD40L培养后分化成熟成髓样细胞来源的树突状细胞(DC1).结论 变应性鼻炎组外周血中DC的前体细胞(pDC1)/(pDC2)的失衡可能是导致变应性鼻炎患者外周血Th1/Th2失衡的重要原因之一,可能与变应性鼻炎发生密切相关.     

化疗联合CIK输注对晚期NSCLC患者T细胞哑群及生存的影响

目的：探讨化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞（ cytokine induced killer ,CIK）治疗晚期非小细胞肺癌（ non small cell lung cancer,NSCLC）患者的近期疗效。方法将61例确诊的晚期非小细胞肺癌患者给予化疗联合CIK治疗,观察治疗前后外周血中T细胞亚群及细胞因子的变化和临床疗效,并观察其对1年总生存率和无进展生存期的影响。结果 CIK回输后患者CD3、CD8、CD56的比例较治疗前明显上调（P＜0．05）,且CIK输注可明显提高患者Th1类细胞因子IFN-γ和TNF-α的水平（P＜0．05）。治疗总体有效率为47．3％,临床获益率为67．3％。该研究患者的中位总生存期为10．3个月,1年生存率为22．9％,而无进展生存期7．2个月,1年无进展生存为14．0％。结论化疗CIK治疗能提高患者的免疫功能及生活质量,有望成为非小细胞肺癌有效的过继免疫治疗方法。     

儿童肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中细胞因子分析

目的 研究儿童肺炎支原体肺炎（MPP）肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子的表达,以进一步研究MPP的发病机制。方法 以90例MPP患儿作为研究对象（MPP组,A组）,依据病程分为A1组（<7 d）、A2组（7～14 d）和A3组（15～30 d）,每组30例。对照组（B组,30例）为同期非MPP且需经纤维支气管镜检查或者治疗的患儿。留取BALF进行相关细胞因子的测定。结果 A组患儿BALF中肿瘤坏死因子（TNF）-α、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素（IL）-2、IL-4、IL-6和IL-10水平均高于B组,差异有统计学意义（P＜0.05）。TNF-α、IFN-γ、IL-2在A1组升高最明显;IL-4、IL-6在A2组最高。结论 病程7 d以细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-2升高为主,病程7～14 d以细胞因子IL-4、IL-6升高为主,提示细胞因子在MPP的发展过程中有重要意义。     

HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗HER-2阳性乳腺癌的初步研究

目的 探讨HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗HER-2阳性乳腺癌的安全性和有效性.方法 15例HER-2阳性及HLA-A2阳性的乳腺癌患者（Ⅱ～Ⅲ期）经标准治疗后行HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗.检测治疗前后患者外周血淋巴细胞亚群、Th1型和Th2型细胞因子水平,以及IFN-γ分泌型CD8＋T淋巴细胞比例,观察治疗相关毒副反应及近期临床疗效.结果 治疗后外周血CD3＋比例、CD3＋CD4＋比例和CD4＋/CD8＋比值较治疗前明显升高（P〈0.05）,治疗后血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ较治疗前明显上升（P〈0.05）,IL-4、IL-10、IL-12无明显变化（P＞0.05）,IL-10/TNF-α比值较治疗前显著下降（P〈0.05）.IFN-γ分泌型CD8＋T淋巴细胞比例较治疗前也显著上升（P〈0.05）.在治疗结束后的随访时间内,15例患者取得了13例病情稳定,2例病情进展的近期临床疗效.所有治疗患者均未出现3～4级不良反应.结论 HER-2阳性乳腺癌行HER-2多肽负载自体树突状细胞治疗是安全可行的,可改善患者细胞免疫功能并提高Th1型细胞因子水平,促进特异性抗肿瘤细胞免疫应答并产生一定临床获益.     

Pro-inflammatory and potential allergic responses resulting from B cell activation in mice treated with multi-walled carbon nanotubes by intratracheal instillation

The increased application of engineered carbon nanotubes (CNTs) has also raised the level of public concern regarding possible toxicities caused by exposure to these nanostructures. In this study, pulmonary and systemic immune responses induced by intratracheal instillation of multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs) were investigated in mice. Total numbers of immune cells in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid were significantly increased in treated groups (5, 20, and 50 mg/kg doses of MWCNTs) and the distribution of neutrophils was elevated at day 1 after instillation. Pro-inflammatory cytokines (IL-1, TNF-α, IL-6, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, and IFN-γ) were also increased in a dose-dependent manner, both in BAL fluid and in blood. Most of the cytokines showed the highest levels at day 1 after instillation and then decreased. Th2-type cytokines (IL-4, IL-5, and IL-10) were elevated in the treated group to levels higher than those of the Th1-type cytokines (IL-12 and IFN-γ). Furthermore, distributions of B cells in spleen and blood were significantly increased at day 1 after instillation, indicating that Th2-type cytokines had activated B cells, causing them to proliferate. Along with the additional numbers of B cells, granuloma formation in the lung tissue and IgE production were also observed, with an intensity dependent on the dose of MWCNTs instilled. Based on these observations, it is suggested that MWCNTs may induce allergic responses in mice through B cell activation and production of IgE.     

Immunotoxicity effects of carbaryl in vivo and in vitro

Carbaryl is a pesticide for controlling pests in agricultural industry. To determine of immunotoxicity effects of carbaryl, rats were exposure with carbaryl for 28 days. The lymphoid organ weight, lymphocyte proliferation, IL-2, IFN-γ, IL-4, IL-10, IL-1β and TNF-α cytokines level were measured, respectively. Exposure with carbaryl significantly reduced both thymus and spleen weight and also suppressed lymphocyte proliferation. In addition, carbaryl significantly decreased IL-2, IFN-γ, IL-1β and TNF-α and also increased IL-4, IL-10 cytokines. These findings suggest that exposure to carbaryl can induce immunotoxicity effects on lymphoid organ weight, suppresses the functions of lymphocyte and macrophage, Th2 polarization in Th1/Th2 balance by reducing of IFN-γ and increasing of IL-4 and IL-10 cytokines. Therefore, carbaryl can contribute to the development of allergic, autoimmune, cancer or infection diseases through immunotoxicity effects and unbalancing of Th1/Th2 immune response however, further study is necessary.     

布鲁氏菌病患者外周血树突状细胞、Th1／Th2细胞因子含量的检测及意义

目的：观察布鲁氏菌病患者外周血树突状细胞表型、Th1／Th2细胞含量的检测及意义。方法选取诊治的布鲁氏菌病患者50例为病例组,另选取同期进行健康体检的正常人50例作为正常组。采用Real time-PCR测定2组Th1相关转录因子T细胞表达的T盒（T-bet）、GATA连接蛋白3（GATA-3）、维A酸相关核孤儿受体γt（RORγt）、叉头蛋白3（Foxp3）及Th1／Th2细胞因子肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）mRNA含量。酶联免疫吸附实验（ELISA）测定TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-10蛋白表达及补体C3、C4含量。流式细胞术测定树突状细胞表型、Th1、Th2及T淋巴细胞亚群（ CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、NK细胞）含量。结果病例组外周血Th1细胞相关转录因子T-bet、RORγt、Foxp3及Th1细胞、Th1／Th2、TNF-α、IFN-γ含量较对照组显著降低,Th2细胞及IL-6、IL-10含量较对照组显著升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）;病例组CD8＋3、CD8＋0、CD8＋6阳性的树突状细胞比例、CD4＋T细胞、NK细胞及补体C3、C4含量较对照组显著降低,CD8＋T细胞含量较对照组显著升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）;TNF-α、IFN-γ含量与CD4＋T细胞、NK细胞、C3、C4含量呈正相关性（ r值分别为2．879、3．214、3．255和2．978, P ＜0．05）,与CD8＋T细胞含量呈负相关性（ r值分别为－3．146和－3．011, P ＜0．05）。 IL-6、IL-10含量与CD4＋T细胞、NK细胞、C3、C4含量呈负相关性（ r值分别为－2．124、－2．343、－3．423、－2．789、－2．993、－2．566、－3．758, P ＜0．05）,与CD8＋T细胞含量呈正相关性（ r值分别为3．465、3．129, P ＜0．05）。结论布鲁氏菌病患者外周血成熟树突状细胞数目减少,同时Th1／Th2细胞及相关细胞因子失衡,且与机体天然免疫和细胞免疫功能降低有关,这可能在布鲁氏菌病发生发展过程中发挥重要作用。     

T辅助细胞亚型细胞相关因子在类风湿关节炎发病中的作用

目的探讨T辅助细胞(Th)1、Th2、Th17、调节性细胞(Treg)相关细胞因子在类风湿关节炎(RA)发病中的作用。方法选取71例RA患者作为研究对象,并根据DAS28评分,分为高、中、低活动组,采集试验对象及健康对照组(18名)外周血,采用微量样本多指标流式蛋白定量技术(CBA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、干扰素(IFN)-γ、肿瘤坏死因子(TNF)-α和转化生长因子(TGF)-β8种细胞因子血清浓度。结果 RA患者IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、IFN-γ、TNF-α血清浓度与健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);TGF-β血清浓度与健康对照组比较差异无统计学意义(P=0.078);并且随着DAS28的不同其血清浓度也不同。结论推测Th1、Th2、Th17、Treg细胞的相关因子均参与了RA的致病过程,并且在不同的发病阶段发挥不同的作用。     

紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠足肿胀度和细胞因子的影响

目的研究紫花牡荆素对佐剂性关节炎小鼠血浆炎症相关细胞因子的作用及其与足跖肿胀度的相关性。方法 36只Bal b/c小鼠,随机分为6组:空白对照组、模型组、阳性药物组、紫花牡荆素12.5,25.0和50.0mg·kg~(-1)剂量组;小鼠右足垫皮内注射弗氏完全佐剂后连续灌胃给药12d,每日1次。第13天测量小鼠后足爪的肿胀度,第14天采血,用流式细胞仪的微球阵列(CBA)法检测佐剂性关节炎小鼠外周血中的致炎性细胞因子(IL-2、IFN-γ和TNF-α)和抗炎性细胞因子(IL-4和IL-5)的水平。结果紫花牡荆素可剂量依赖性地抑制Bal b/c小鼠后足爪的肿胀度;明显降低致炎性Th1细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平,显著提高抗炎性Th2细胞因子IL-4和IL-5的水平;小鼠后足爪肿胀度与血清细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的水平呈正相关,与IL-4和IL-5的水平呈负相关。结论紫花牡荆素改善佐剂性关节炎小鼠足跖肿胀度,可能是通过增加血液IL-4和IL-5含量,降低IL-2、IFN-γ和TNF-α含量,调节细胞因子平衡的结果。     

参麦注射液对AL化疗患者Th_1/Th_2细胞因子水平的影响

目的探讨参麦注射液对急性白血病（AL）化疗患者Th1/Th2细胞因子水平的影响。方法将20例AL患者按入院先后顺序随机分为参麦联合化疗组（试验组）和单纯化疗组（对照组）,分别于化疗前、化疗第1个疗程结束后1周采集外周血,分离血清。采用ELISA检测白介素（IL-2）,肿瘤坏死因子（INF-γ）、白介素-4（IL-4）、白介素-10（IL-10）含量。结果 2组患者经化疗后,外周血中IL-2、IFN-γ含量较治疗前均显著增加（P〈0.01）,IL-4、IL-10含量显著下降（P〈0.01）。化疗后,试验组与对照组比较,IL-2、IFN-γ含量显著增加（P〈0.05）,IL-4、IL-10含量显著下降（P〈0.05或〈0.01）。结论参麦联合化疗可以显著改善白血病化疗患者Th1和Th2细胞因子失衡状况,提高机体免疫力。     

细胞因子微球检测技术测定异种脱细胞真皮基质口腔修复膜的细胞因子水平

目的:采用细胞因子微球检测技术测定异种脱细胞真皮基质口腔修复膜免疫评价中细胞因子的含量。方法:将异种脱细胞真皮基质口腔修复膜为试验样品,按照高、中、低剂量组植入至Balb/C小鼠皮下28 d。28 d后用细胞因子微球检测技术测定IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-23、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)、β干扰素(IFN-β)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF),将试验组与对照组的数据进行统计学分析。结果:阳性对照组中IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-17A、TNF-α、IFN-γ、MCP-1、GM-CSF含量显著性高于假手术组(P<0.01),而IL-10、IL-23、IFN-β含量未见明显差异;被测样品植入试验组中,除MCP-1和TNF-α高剂量组显著性高于假手术组(分别为P<0.01和P<0.05),其他组的IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-10、IL-17A、IL-23、TNF-α、IFN-γ、IFN-β、MCP-1、GM-CSF含量没有明显变化(P>0.05)。结论:采用细胞因子微球检测技术测定细胞因子水平,异种脱细胞真皮基质口腔修复膜对机体细胞因子无明显影响。