血竭活血化瘀作用的GC-MS代谢组学初步研究北大核心CSCD

目的:利用代谢组学技术,从内源代谢产物的角度探讨传统药材—血竭的活血化瘀作用。方法:将大鼠分组,分别为正常对照组、血瘀证模型组(血瘀证模型大鼠)和血竭给药组(血瘀证大鼠灌胃给予血竭),采集血浆并采用GC-MS方法检测各组大鼠血浆中的内源代谢产物。通过主成分分析和偏最小二乘法等数据分析方法寻找血瘀证大鼠的血浆的差异代谢物,分析大鼠给药后血浆内源代谢产物的变化趋势。结果:建立了基于GC-MS的大鼠血浆内源性代谢产物分析方法,并进行了方法学的确证;采用该方法在大鼠血浆中分析得到约200个数据点,其中约有30个数据点在与NIST库的匹配中得到了初步的鉴定。通过多元数据分析发现了若干血瘀证大鼠差异代谢物,包括乳酸、D-3-羟基丁酸、缬氨酸、异亮氨酸等,这些差异性代谢物与血瘀证相关的代谢通路有密切的联系;血瘀证大鼠经过血竭给药之后,其血浆中的差异代谢物的浓度发生明显的变化,即各差异代谢物指标与血瘀证模型组相比都有一定的恢复作用,代谢组学研究结果与血瘀证大鼠血液流变学实验结果相吻合。结论:建立了血瘀证大鼠的血浆内源代谢产物的研究方法,并将该方法应用于血竭活血化瘀作用的研究中,从代谢组学的角度证实了血竭对血瘀证的治疗作用。     

脾气虚证模型大鼠尿液的~1H-NMR代谢组学研究

目的建立脾气虚证大鼠模型,分析脾气虚证的代谢通路,探究内源性代谢产物变化与脾气虚证的关系。方法采用苦寒泻下、劳倦过度和饥饱失常复合因素方法建立并评价脾气虚证大鼠模型,检测其血清中肌酸磷酸激酶活性;对大鼠尿液进行~1H-NMR检测,以变化倍数(fold change,FC)>1.2,结合独立样本t检验(P<0.05)的统计学方法筛选脾气虚证模型组和对照组的差异代谢物,进行代谢通路分析与富集分析。结果脾气虚证模型建立成功;模型组的肌酸磷酸激酶活性低于对照组(P<0.05);从主成分分析(PCA)结果得出模型组和对照组的代谢产物得到明显区分;筛选出33种差异代谢物,主要参与的代谢通路涉及能量代谢、氨基酸代谢、核苷酸代谢,同时对肠道菌群存在干扰。结论脾气虚主要扰乱了大鼠的能量代谢通路(三羧酸循环、糖酵解、脂质氧化),抑制了供能作用,导致大鼠出现疲乏和体质量增长抑制的症状。     

基于血浆代谢组学和网络分析研究柴归颗粒的抗抑郁作用机制

本研究整合代谢组学和生物网络分析工具从生物代谢网络角度系统分析柴归颗粒的抗抑郁作用机制。建立慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)抑郁大鼠模型,采用基于LC-MS的血浆代谢组学发现柴归颗粒抗抑郁作用的关键代谢物和代谢途径。整合生物网络分析工具对柴归颗粒调节的关键代谢物进行网络分析,聚焦关键代谢通路,挖掘柴归颗粒抗抑郁作用的潜在靶点。结果显示与对照组相比,模型组大鼠血浆中20个代谢物含量有显著差异(P <0.05),柴归颗粒能显著回调二十二碳三烯酸、3-羟基丁酸、4-羟基苯甲醛、鹅去氧胆酸、胆酸、L-谷氨酰胺、乙醇酸、亚油基肉碱、L-酪氨酸、N-乙酰缬氨酸、棕榈酰肉碱和花生四烯酸等12种代谢物。对柴归颗粒调控的关键代谢物进一步网络分析表明花生四烯酸代谢可能是柴归颗粒发挥抗抑郁作用的重要通路,花生四烯酸代谢途径上的CYP2B6、CYP2E1、CYP2C9、CYP2C8、PLA2G6、PTGS2、ALOX15B、PTGS1、ALOX12和ALOX5等10个蛋白为柴归颗粒发挥抗抑郁作用的潜在靶点。本文涉及的动物实验操作均遵...     

基于代谢组学木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤作用机制研究

目的初步阐释木蝴蝶总黄酮抗肝肿瘤的作用机制,为木蝴蝶总黄酮作为抗肝癌药物的开发和临床应用提供实验依据。方法采用二乙基亚硝胺(DEN)诱发大鼠肝癌模型,随机分为空白组,模型组,阳性对照组,木蝴蝶总黄酮高、中、低剂量组,从造模第6周开始给药,每日1次,连续10周。第17周眼球取血,分离各组血浆。采用HPLC-QTOF-MS联用技术分析木蝴蝶总黄酮干预后各组大鼠血浆中代谢物的变化,利用Agilent Mass Profiler Professional 12.6软件结合相关数据库进行主成分分析(PCA)、差异代谢物分析及代谢通路分析。结果与模型组比较,木蝴蝶总黄酮干预后共有285种代谢物发生变化,其中上调的有41种,下调的有244种。主要与色氨酸代谢、丝氨酸代谢、胆汁酸合成、花生四烯酸代谢、亚油酸代谢等途径有关。结论木蝴蝶总黄酮发挥抗肝肿瘤作用可能与调节氨基酸代谢、脂肪酸代谢、胆汁酸合成等代谢途径有关。     

基于血浆代谢组学的新生化颗粒对急性血瘀大鼠作用机制研究

目的 研究新生化颗粒对急性血瘀大鼠血浆中内源性代谢物的影响,探讨新生化颗粒治疗急性血瘀证的可能机制。方法 将50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、复方丹参滴丸（阳性药,0.10 g·kg^-1）组和新生化颗粒低、高剂量（4.86、9.72 g·kg^-1）组,给药体积10 mL·kg^-1,对照组和模型组大鼠ig给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）,每天早晚各ig给药1次,共7次。第5次给药后,除对照组外,采用sc盐酸肾上腺素和冰水浴制备大鼠急性血瘀模型。通过测定全血黏度（WBV）、血浆黏度（PV）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）,观察不同剂量的新生化颗粒对急性血瘀大鼠血液流变学和凝血功能的影响;采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用（UHPLCQTOF-MS）法检测各组大鼠血浆中的内源性代谢物,通过多变量统计分析筛选潜在生物标志物,结合质谱信息、数据库检索和标准品比对鉴定潜在生物标志物,并将鉴定到的生物标志物导入MetaboAnalyst 5.0数据库推测其可能的代谢通路。结果 与模型组比较,新生化颗粒显著降低急性血瘀大鼠WBV、PV和FIB,显著延长APTT、PT和TT（P＜0.05、0.01）。代谢组学结果显示,从急性血瘀大鼠血浆中共鉴定出21个差异代谢物（准确鉴定7个）,与对照组比较,模型组大鼠血浆中乳酸、肉碱和肌酐等10个内源性代谢物显著上调,苹果酸、琥珀酸和色胺等11个内源性代谢物显著下调（P＜0.05、0.01）;除了硫酸吲哚酚和脱氧胞苷外,新生化颗粒对其他19个生物标志物均有显著回调作用（P＜0.05、0.01）。这些标志物主要涉及苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成、苯丙氨酸代谢、亚油酸代谢、三羧酸循环和色氨酸代谢。结论 新生化颗粒对急性血瘀大鼠体内紊乱代谢物有较好的回调作用,其作用机制主要与调节苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,苯丙氨酸代谢,亚油酸代谢,三羧酸循环和色氨酸代谢通路有关。     

基于GC-TOF-MS代谢组学研究栝楼桂枝汤对脑缺血大鼠的作用机制

目的 研究栝楼桂枝汤对脑缺血MCAO模型大鼠的神经保护作用机制。方法 运用气相色谱-飞行时间质谱联用的代谢组学技术及多元统计分析方法分析正常组、模型组和栝楼桂枝汤给药组大鼠血清中内源性代谢物的变化,筛选差异代谢物,并分析差异代谢物代谢途径。结果 代谢组学研究结果显示各组间大鼠代谢谱出现显著差异,在大鼠血清质谱图中共筛选鉴定得吲哚乙酸、丙二酸、乙醇胺、肉豆蔻酸、鸟氨酸等13个差异代谢物,涉及的相关的代谢途径包括糖-葡萄糖醛酸相互转化途径,色氨酸代谢途径,嘧啶代谢和甘油磷脂代谢途径。结论 栝楼桂枝汤可使造模后大鼠的体内代谢物有不同程度的恢复,其对缺血性脑卒中的保护作用主要反映在能量代谢、脂质代谢、氨基酸代谢等代谢途径的变化,改善大鼠脑缺血再灌注损伤症状。     

基于非靶向代谢组学的促乳腺癌曲妥珠单抗耐药 代谢产物分析

摘 要 目的：探究人类表皮生长因子受体2（HER2）阳性乳腺癌曲妥珠单抗（trastuzumab）耐药细胞（HCC1954）和敏感细胞（SK-BR-3）之间的代谢物差异。方法：利用超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）非靶向代谢组学方法进行代谢物的鉴定与定量,结合多元统计方法主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）以筛选差异代谢物,并对差异代谢物进行KEGG通路富集分析。结果：在正负离子模式下鉴定筛选出15种显著性变化差异代谢物,在曲妥珠单抗耐药细胞中丙酰肉碱和谷胱甘肽等7种代谢物上调,肉豆蔻酸和D-葡萄糖酸等8种代谢物下调。KEGG通路富集分析发现,9条代谢通路具有统计学意义（P<0.05）,其中氮代谢和谷氨酰胺与谷氨酸代谢最为显著,P值为0.001 3,还发现谷氨酸和谷氨酰胺均在这两条通路中发挥作用。结论：本研究初步揭示了HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗耐药和敏感细胞之间的代谢物差异,为HER2阳性乳腺癌细胞曲妥珠单抗诊断标志物进一步研究提供了代谢组学的数据支持。     

逍遥散治疗抑郁症代谢网络的模块划分与生物学机制研究

逍遥散的抗抑郁作用已经明确,应用代谢网络的功能模块划分方法,从功能模块角度探究逍遥散治疗抑郁症的生物学机制具有重要意义和价值。通过数据库收集逍遥散调节差异代谢物、差异代谢物相关的酶以及与抑郁症相关的蛋白,对逍遥散调节差异代谢物进行通路富集分析和交互分析,利用STRING工具构建差异代谢物相关的酶与抑郁症的蛋白网络,应用CNM分解算法提取网络蛋白功能模块并进行功能模块富集分析。结果发现,逍遥散调节差异代谢物97个、差异代谢物相关酶234个、抑郁症相关蛋白258个。通路交互分析划分为2个子网络,其中一个为神经系统和细胞信号转导相关通路,另一个为内分泌系统和代谢途径相关通路。对蛋白网络以及使用CNM算法从中提取的9个蛋白功能模块进行KEGG通路富集分析,结果发现模块1和模块3属于可用较少的蛋白富集到较多的通路,这些通路对应的功能包括内分泌系统、氨基酸代谢、神经系统和信号转导等。本研究采用通路交互分析和代谢网络模块划分策略阐释逍遥散治疗抑郁症的生物学机制,为从代谢调控角度深入研究中药复方药理作用机制提供思路参考和方法借鉴。     

盐酸班布特罗改善慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的作用机制研究

目的:研究盐酸班布特罗对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠的改善作用机制,并寻找潜在的生物标志物。方法:将30只大鼠随机分为正常组、模型组和盐酸班布特罗组(3.3 mg/kg),每组10只。模型组、盐酸班布特罗组大鼠采用烟熏联合脂多糖滴注法建立COPD模型。造模成功后,盐酸班布特罗组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,每天给药1次,连续给药45 d。末次给药后,采集各组大鼠血清样品及肺泡灌洗液,采用酶联免疫吸附法检测肺泡灌洗液中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用液质联用(LC-MS)技术检测血清代谢物并进行代谢组学分析。采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法筛选并鉴定差异代谢物,再结合相关文献找出潜在生物标志物,并利用MetPA分析平台对其进行代谢通路富集分析。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,盐酸班布特罗组大鼠肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05)。代谢组学、OPLS-DA结果显示,共发现21个差异代谢物,其中12个为潜在生物标志物(包括马来酰丙酮酸、羟基丙酮酸、羟基丙二酸半醛等),且盐酸班布特罗可显著降低马来酰丙酮酸、甲基硒代半胱氨酸、5-脱氧-D-葡萄糖醛酸等标志物的水平(P<0.05),升高羟基丙酮酸、羟基丙二酸半醛、丙二酸等标志物水平(P<0.05);生物标志物主要富集于戊糖磷酸途径、乙醛酸和三羧酸代谢通路,其次富集于肌醇磷酸代谢通路、精氨酸与酪氨酸代谢通路和甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢通路。结论:盐酸班布特罗改善COPD的机制可能与降低细胞调节因子IL-6、TNF-α水平有关,还可能与氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢等通路有关。     

基于核磁共振的益母草碱抗急性心肌缺血的代谢组学研究

目的应用核磁共振(NMR)代谢组学技术研究急性心肌缺血以及益母草碱给药大鼠血浆中代谢物组的变化,探讨益母草碱抗心肌缺血作用的机制。方法应用1H NMR分析假手术组、模型组、益母草碱给药组大鼠血浆代谢物组,应用模式识别多变量统计方法研究模型组与假手术组及给药组之间的代谢物组差异。结果正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)结果显示,模型组与假手术组相比有6个代谢物(丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸、肌酸、N-乙酰化及O-乙酰化糖蛋白)水平明显增加,而益母草碱干预治疗能明显降低模型组丙氨酸、赖氨酸、甘氨酸水平,并增加胆碱、磷酸胆碱、鲨肌醇含量。结论益母草碱能通过纠正急性心肌缺血氨基酸代谢紊乱,上调胆碱以及肌醇代谢通路发挥心肌保护作用。该研究为评价益母草碱抗心肌缺血作用提供了有力分析手段,并为研究其作用机制提供新的思路。     

肝纤胶囊对急性血瘀症模型大鼠全血黏度和血浆黏度的影响

目的研究肝纤胶囊对急性血瘀证模型大鼠血液流变学的影响。方法采用肾上腺素和冰水冷刺激造成急性血瘀证大鼠模型,观察肝纤胶囊对全血黏度和血浆黏度的影响。结果与模型对照组比较,肝纤胶囊可使急性血瘀证模型大鼠高、中、低切变率下的全血黏度和血浆黏度明显降低。结论肝纤胶囊能改善血液流变学异常。     

二咖啡酰基奎宁酸对脑缺血大鼠转录组学的研究

目的研究二咖啡酰基奎宁酸(MQA)对脑缺血大鼠RNA表达的影响作用。方法将24只雄性大鼠随机分为正常组、模型组与MQA组。各组大鼠术前连续灌胃6 d,再采用线栓法制备大鼠左侧脑缺血模型,术后24h将造模成功的大鼠进行解剖,取脑。将脑组织切块后进行RNA测序,检测模型组、正常组与MQA组的基因表达情况,再将数据进行基因表达丰度分析、GO富集分析及KEGG通路富集分析。结果模型组与MQA组之间存在762个差异基因,其中包括显著差异基因124个,极显著差异基因51个。通过GO富集分析发现,生物学过程相关基因整体呈现上调趋势,细胞组分相关的基因既有显著上调趋势也有显著下调趋势,分子功能相关的基因整体上呈现上调趋势,但也存在显著下调基因的项目;通过KEGG通路分析发现甲状腺激素信号通路相关基因呈显著下调,核糖体通路相关基因呈现部分上调及部分下调趋势。结论 MQA抗脑缺血可能跟改善纤溶系统、提高细胞骨架的稳定性、下调甲状腺激素信号通路有很大的关系。     

神效托里散对CCl4诱导的大鼠肝纤维化作用及代谢组学研究

目的 探讨神效托里散对CCl₄所致大鼠肝纤维化的作用及其可能的作用机制。方法 采用40% CCl₄(2 mL·kg^–1)诱导大鼠肝纤维化模型，每周2次，共计8周。造模第6周开始灌胃给予神效托里散，给药时间为8周。采用脏器指数及Masson染色评价抗肝纤维化的药效；采用HPLC-QTOF-MS联用技术检测神效托里散干预后各组大鼠血浆中代谢物的变化，利用Ropls软件进行偏最小二乘法判别分析、差异代谢物筛选及代谢通路分析。结果 脏器指数结果显示，神效托里散可以不同程度地降低大鼠的肝指数、脾指数，升高胸腺指数，与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.01)；Masson染色结果表明，神效托里散干预后肝脏中纤维结缔组织增生变浅变窄，与空白组大鼠较接近；代谢组学分析显示，与模型组比较，神效托里散干预后共有385种代谢物发生变化，其中上调的有20种，下调的有365种，如花生四烯酸、皮质酮、胆汁酸、亚油酸等。主要与脂解的调节、亚油酸代谢、胆汁分泌、鞘脂信号通路、不饱和脂肪酸的生物合成等代谢途径有关。结论 神效托里散对CCl₄所致大鼠肝纤维化具有很好的防治作用，其作用机制可能与脂解的调节、胆汁酸代谢、脂肪酸代谢等途径有关。     

基于血浆代谢组学的附子脂溶性生物碱对佐剂性关节炎模型大鼠的毒性作用机制研究

目的:研究附子脂溶性生物碱对佐剂性关节炎(AIA)模型大鼠的毒性作用机制。方法:将40只大鼠随机分为空白组(超纯水)、模型组(超纯水)和附子脂溶性生物碱低、高剂量组(12.5、35 mg/kg),每组10只。除空白组外,其余各组大鼠均于右后足垫部位注射0.1 m L完全弗氏佐剂复制AIA模型。造模19 d后开始灌胃给药,每天1次。连续给药14 d后,采用超高效液相色谱-线性离子阱/静电场轨道阱结合高分辨质谱技术分离并鉴定血浆中内源性代谢物,然后对数据进行主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA),通过变量投影重要度值(VIP)>1和P值(<0.05)筛选血浆中的差异代谢物;并根据差异代谢物查阅京都基因与基因组百科全书数据库,推测附子脂溶性生物碱对AIA大鼠的毒性作用机制。结果:共鉴定出57个血浆代谢物,并确定了L-脯氨酸、6-羟基烟酸、腺苷等11个差异代谢物。AIA造模后可引起大鼠血浆中L-脯氨酸和尿苷酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),脱氧胞苷含量显著升高(P<0.01)。低剂量附子脂溶性生物碱给药后可使模型大鼠血浆中腺苷和L-脯氨酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),血浆中脱氧胆酸含量显著升高(P<0.05);而高剂量附子脂溶性生物碱给药后可使模型大鼠血浆中6-羟基烟酸、腺苷、肉碱、L-脯氨酸、N-甲酰氨基苯甲酸含量显著降低(P<0.05或P<0.01),血浆中脱氧胆酸、L-精氨酸、脱氧胞苷、L-赖氨酸含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:低剂量附子脂溶性生物碱对AIA模型大鼠的毒性较小;高剂量附子脂溶性生物碱对AIA模型大鼠的毒性作用可能与其引起胆汁分泌异常及赖氨酸生物合成及嘌呤、嘧啶、色氨酸、脯氨酸、精氨酸代谢紊乱有关。     

慢性阻塞性肺病稳定期模型大鼠支气管肺泡灌洗液的代谢组学研究

目的：基于代谢组学方法研究慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）稳定期大鼠支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid，BALF）的潜在生物标志物。方法：采用烟熏联合细菌反复感染的方法制备COPD稳定期模型大鼠。采用超高效液相色谱-串联质谱技术采集大鼠的BALF数据，利用多元统计分析软件筛选差异代谢物，再结合数据库鉴定潜在生物标志物，并进行代谢通路分析。结果：多元统计分析结果显示，正常组与模型组BALF代谢物发生显著变化。通过比对数据库，共鉴定出30个差异性代谢物，主要涉及到体内的氨酰基-tRNA的生物合成，甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸的代谢，鞘脂代谢，苯丙氨酸代谢和花生四烯酸代谢等8条代谢通路。结论：基于代谢组学研究COPD稳定期的BALF代谢物变化，寻找COPD稳定期相关代谢标志物，为治疗COPD提供理论参考。     

D-半乳糖衰老大鼠粪便代谢组学研究

目的研究D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老大鼠的胃肠动力、粪便中内源性代谢物变化规律及代谢通路的变化。方法将12只雄性SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,每组6只。模型组大鼠连续皮下注射D-gal,300 mg·kg~(-1)11周,正常对照组注射等量的生理盐水,收集大鼠粪便。排便实验、小肠推进率和胃排空实验检测大鼠胃肠动力。1H NMR技术表征粪便代谢物轮廓,采用多变量统计学方法分析差异代谢物。结果 Morris水迷宫实验结果表明,与正常对照组相比,D-gal衰老大鼠的学习和记忆功能均显著降低;旷场实验结果显示,D-gal衰老大鼠的直立次数和穿越格数明显降低;与正常对照组相比,D-gal衰老大鼠的小肠推进率和胃排空率均显著降低。大鼠粪便中共指认出31中内源性代谢物,与正常对照组大鼠相比,18种代谢物发生显著改变。差异代谢物主要富集在氨基酸代谢、能量代谢以及短链脂肪酸代谢等。结论长期给予D-gal可引起大鼠胃肠动力减弱,学习记忆能力下降,活动能力减弱。同时,D-gal能显著引起大鼠粪便代谢物质含量异常,代谢通路紊乱。这些物质的异常代谢反过来也对大鼠胃肠功能、学习记忆及活动能力产生显著影响。     

基于活血化瘀功效的川芎酚酸组分治疗大鼠偏头痛作用机制研究

目的探讨川芎酚酸组分通过活血化瘀功效治疗大鼠偏头痛的机制。方法采用代谢组学方法,获得正常组、模型组以及川芎酚酸给药组的血浆代谢物谱,结合主成分分析、聚类分析方法分析其血浆中代谢物的变化并鉴定差异化合物,分析相关代谢通路,并采用ELISA法加以验证。结果在负离子模式下共发现了9个与偏头痛疾病相关的代谢物,包括1-磷酸鞘氨醇、花生四烯酸等重要川芎酚酸组分敏感内源性差异代谢物,主要调节炎症代谢发挥活血化瘀的功效从而起到对偏头痛的治疗作用。结论川芎酚酸组分可通过改善血管舒缩、减少炎症介质释放等多种途径产生活血化瘀功效缓解并治疗偏头痛疾病。     

基于超高效液相色谱 -质谱联用技术的慢性肾脏病骨代谢异常大鼠血清代谢组学研究

目的通过超高效液相色谱 -质谱( UHPLC-MS)联用技术探索慢性肾脏病骨代谢异常( CKD-BD)大鼠血清代谢组学变化。方法该研究于 2021年 1月至 2022年 4月进行,选择 16只 8周龄 SPF级 SD雄性大鼠经过 1周适应性喂养后,采用随机数字表法分为两组,每组 8只。健康对照( NC)组:使用普通大鼠饲料喂养 90 d;CKD-BD组:采用高磷高腺嘌呤饲料喂养 60 d之后更换高磷饲料喂养 30 d后处死,并通过生化检测及骨形态计量学方法对模型进行验证。造模成功后通过 UHPLC-MS比较 CKD-BD组大鼠与 NC组大鼠血清代谢产物变化,通过多元统计分析等方法鉴定两组间差异代谢物,并通过生物信息学方法对差异代谢产物进行功能注释。结果与 NC组大鼠相比, CKD-BD组大鼠血肌酐、血磷显著升高,血钙显著降低( P<0.01)。骨形态计量学检测 NC组大鼠骨矿化沉积率( MAR)为( 1.90±0.61)μm/d,CKD-BD组大鼠 MAR为( 2.80±0.73)μm/d,差异有统计学意义( P<0.05)。 NC组大鼠骨形成率 /骨体积( BFR/BV)为( 0.41±0.20)%/d,CKD-BD组大鼠 BFR/BV为( 1.25±0.41)%/d,差异有统计学意义( P<0.05)。代谢组学检测结果提示,与 NC组相比, CKD-BD组糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白合成等通路上调。自噬、胆汁酸合成分泌、胆固醇代谢、牛磺酸和次级牛磺酸代谢、甘油磷脂代谢等通路下调( P<0.05)。结论通过 UHPLC-MS技术比较 CKD-BD大鼠与正常大鼠血清代谢产物,发现 CKD疾病状态下血清代谢产物发生变化, CKD-BD组糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白合成通路上调,与自噬相关的代谢通路下调,这些可能参与了 CKD-BD发生。     

血必净注射液改善早期脓毒症代谢紊乱的机制研究

目的 用代谢组学方法探究血必净注射液改善早期脓毒症代谢紊乱的作用机制。方法 将雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组。模型组用盲肠结扎穿刺(CLP)构建脓毒症大鼠模型，假手术组只游离盲肠，不予以结扎穿孔；实验组在手术后立即腹腔注射血必净注射液4 mL·kg^-1,12 h后通过腹主动脉取血收集血清。用UPLC-QTOF-MS法分析大鼠血清代谢物变化，用偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),筛选血必净注射液治疗脓毒症的差异代谢物(P<0.05, FC>1.2或<0.8, VIP>1)。用KEGG数据库筛选出关键代谢通路。结果 血必净注射液可以显著提高脓毒症大鼠存活率，建模后7 d,模型组生存率为4.5%,实验组生存率为36.4%,差异有统计学意义(P<0.05)。与假手术组相比，模型组共鉴定出24个差异代谢物，涉及半胱氨酸和蛋氨酸代谢、半乳糖代谢等12条代谢通路；与模型组相比，实验组共鉴定43个差异代谢物，涉及18条代谢通路；将模型组与实验组差异代谢物取交集，共获得8个共同差异代谢物，...     

理气活血颗粒对气滞血瘀证大鼠调节作用的血清代谢组学研究

目的基于LC-MS技术的血清代谢组学方法,研究理气活血颗粒对气滞血瘀证大鼠的调节机制。方法 SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组和给药组,每组10只。除正常组外,其余2组大鼠进行3周无规律的睡眠剥夺昼夜颠倒方式造模,保证每天16 h,给药组大鼠从第2周开始灌胃理气活血颗粒,给药剂量为0.32 kg·L~(-1),每天1次,连续14 d。3周后腹主动脉取血,离心取上清,通过UPLC-TOF/MS分析各组大鼠血清中内源性代谢物,应用主成分分析(PCA)和偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)进行模式识别及生物标志物的鉴定。结果 PCA结果显示,正常组与模型组呈现明显的区别,而给药组有向正常组回调的趋势,提示模型组的内源性代谢成分和生物代谢途径受到了干扰而给药组具有一定的回调作用。以VIP>1,P<0.05为条件筛选了17个气滞血瘀证大鼠与正常大鼠的差异代谢物,其中模型组2-oxo-heptadecanoic acid,18-oxo-nonadecanoic acid,betaine,glycerophosphocholine,1-linoleoylphosphatidylcholine,PAF(C16),linolenoyl lysolecithin、GPCho[16∶0/18∶2(2E,4E)],GPCho(15∶0/0∶0),1-monopalmitin和proline较正常组含量上升,palmitoylcarnitine,isovalery-L-carnitine,dihydrosphingosine,histidine,1-methyhistidine,pyroglutamic acid较正常组含量下降。而理气活血颗粒可使其中betaine和histidine等11个异常变化的生物标志物向正常组方向显著回调。结论理气活血颗粒对气滞血瘀证大鼠有较好的治疗作用,主要通过调节组氨酸、甘油磷酸胆碱和二氢鞘氨醇物质在胆碱代谢、组氨酸代谢、脂肪酸转运和脂肪酸氧化代谢途径来达到治疗作用。