拓扑异构酶Ⅰ和Ⅱ双重抑制剂的研究进展

拓扑异构酶(topoisomerases,Tops)是参与调节细胞内DNA复制、转录、重组和修复等过程的必需酶。Tops分为TopⅠ和TopⅡ,两者通过DNA切断和连接,维持DNA正常拓扑结构和代谢过程。由于Tops在DNA代谢过程的重要作用,干扰Tops的催化活性或者诱导产生Tops介导的DNA损伤已经成为抗肿瘤治疗的重要策略。Tops已经成为最重要的抗肿瘤靶点之一。综述近年来Tops双重抑制剂的研究进展。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株杀伤和诱导凋亡作用的研究

目的 研究拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对耐阿霉素淋巴瘤细胞株(L1210/ADM)的杀伤和诱导凋亡的作用.方法 采用噻唑蓝(MTT法)、钙依赖性磷脂结合蛋白(Annexin V)染色、梯状DNA电泳与细胞形态学观察等方法分析不同浓度(0.05、0.10、0.20、0.40μmol/L)拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞的杀伤和凋亡作用,采用半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)8、Caspase-3抑制剂IETD-fmk、DEVD-CHO分析拓扑异构酶Ⅰ抑制剂介导的靶细胞杀伤和凋亡作用与Caspase的关系.结果 0.10 μmol/L拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对靶细胞株的杀伤作用,与对照组和0.05 μmol/L组之间差异均有统计学意义(均P＜0.05).加用Caspase酶特异性抑制剂3组各时间点的靶细胞存活率均高于单用拓扑异构酶Ⅰ抑制剂组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).靶细胞株经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理后,部分靶细胞株出现了细胞凋亡;加用Caspase酶特异性抑制剂组中,有部分细胞死亡,但无凋亡小体形成,死亡细胞均为锥虫蓝染色.经拓扑异构酶Ⅰ抑制剂处理的靶细胞株大部分细胞出现胞体解离,并彼此黏附成簇状的、锥虫蓝拒染的凋亡小体,靶细胞株DNA电泳表现为特征性梯状图谱;加入Caspase酶特异性抑制剂的各组可以看到阻断了梯状DNA的产生.结论 拓扑异构酶Ⅰ抑制剂对L1210/ADM细胞株具有较强的杀伤和诱导凋亡作用,其机制可能涉及Caspase-8、Caspase-3的有序性活化.     

EGFR酪氨酸激酶及其抑制剂的研究进展

表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶是细胞外信号传递到细胞内的重要枢纽,它在信号传导、细胞增殖、分化以及各种调节机制中发挥重要作用,并在多种癌细胞中过度表达。许多研究表明,抑制EGFR酪氨酸激酶活性,可抑制肿瘤生长。本文对EGFR酪氨酸激酶及其几种小分子抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。     

大鼠在体血管紧张素Ⅰ转化酶活性检测新方法

目的　用血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)抑制药雷米普利 (Ram)建立一种新的大鼠在体ACE生物活性检测方法。方法　比较不同剂量 (0 0 5、0 1mg·kg- 1 ,iv)Ram在给药后1、2 4、48h对血管紧张素Ⅰ (AngⅠ )升压和缓激肽 (BK)降压效应的影响 ,以AngⅠ的升压百分率 (% )或BK的降压百分率 (% )间接反映ACE活性变化。结果　大鼠给予Ram后1、2 4h ,静脉注射AngⅠ和心肌匀浆上清液 (含AngⅠ )的升压作用均降低 (P <0 0 5) ,且呈剂量依赖性 ,但在 48h后Ram对AngⅠ和心肌匀浆上清液 (含AngⅠ )的升压作用无影响。比较给予Ram后 1hAngⅠ的升压作用和缓激肽(BK)的降压作用 ,发现BK的降压作用比AngⅠ升压作用更明显 (P <0 0 5)。结论　大鼠静脉注射Ram后 2 4h内心肌和血浆中ACE活性显著被抑制 ,48h后ACE活性基本恢复 ;AngⅠ升压、BK降压效应的变化可作为ACE生物活性的在体检测指标 ,后者更为敏感     

喜树碱药效构象及分子内氢键对抗肿瘤活性的影响

喜树碱类抗肿瘤药物是临床广泛使用的DNA拓扑异构酶Ⅰ（topoisomerase Ⅰ,Topo Ⅰ）的特异性抑制剂。为从原子水平阐明喜树碱的作用模式,设计结构新,知性更高、毒性更低的TopoⅠ抑制剂,本研究采用ab initio方法RHF／3－21G对喜树碱分子构象空间进行了系统研究,并与半经验量化AM1、PM3方法比较,所得构象均采用密度泛函方法B3LYP／6－31G（d)计算单点能,并进行频率检查验证。结果发现,A型构象可恰好氢键,较B型构象能量更低,为喜树碱药效构象。喜树碱E环形成分子内氢键,能量约为29.31kJ/mol,这是该分子发挥药效的结构基础,同时使得它易于受溶剂水影响而裂解,生成无活性的羧酸盐形式。本研究还表明,喜树碱与TopoⅠ－DNA复合物作用,需破坏分子内氢键,能量补偿较大,提示设计更为高效的TopoⅠ抑制剂具有可能性。     

DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂研究进展

DNA拓扑异构酶Ⅰ（TopoⅠ）参与DNA复制、转录、重组、修复等所有关键的细胞核内过程,已成为极其重要的抗癌药物研究新靶点。目前,美国立意味着研究所药物机制分析电脑网络系统已将TopoⅠ抑制剂为列为重点研究的六大类抗肿瘤药物之一。近年来,TopoⅠ抑制剂研究出现了新的高潮,已有数个喜树碱类化合物进入临床研究,还发现了一些结构新颖、活性较好的非喜树碱类TopoⅠ抑制剂。本文简单介绍TopoⅠ的拓扑结构与活性位点,重点综述了各类TopoⅠ抑制剂研究的最新进展。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂研究进展

拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase,Topo)参与DNA复制、转录、重组、修复等所有关键的细胞核内过程,是抗肿瘤研究的重要靶点,以TopoⅠ为靶点的药物在肿瘤化疗中被广泛应用。目前临床使用或处于临床前研究的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂主要分为喜树碱类和非喜树碱类化合物。该文主要介绍了近年来TopoⅠ抑制剂研发领域的最新进展和发展趋势,并就近年来涌现出的一些新的TopoⅠ抑制剂的抗肿瘤活性和药理学特性做一总结。     

Ⅰ型人类免疫缺陷病毒整合酶及其抑制剂研究进展

目的为研究新型Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type-1,HIV-1)整合酶抑制剂提供参考。方法根据查阅的文献从HIV-1整合酶的结构与功能、HIV-1整合酶的催化机制、HIV-1整合酶抑制剂对整合酶作用环节的影响等方面进行综述。结果HIV-1整合酶是由288个氨基酸残基组成的蛋白质,由病毒pol基因编码,相对分子质量约为32000;HIV-1整合酶抑制剂通过干扰整合酶的多聚化、竞争性结合病毒DNA长末端重复序列、阻断整合酶的"3′-加工"(切割病毒DNA)和"链转移"等影响整合酶的作用。结论利用先进的计算机辅助药物设计手段,通过对现有抑制剂构效关系以及抑制剂与大分子作用方式的研究可以逐步阐明整合酶抑制剂的作用机制;应着眼于寻找高活性的整合酶抑制剂,为治疗艾滋病提供新的途径。     

酪氨酸激酶抑制剂类新药的研发现状

蛋白激酶在多种疾病,特别是肿瘤发生发展过程中起重要作用,以其为药物靶点的激酶抑制剂则成为近年药物研发的热点。目前已有11个小分子激酶抑制剂上市,其中9个为酪氨酸激酶抑制剂。激酶抑制剂具有高选择性、副作用少的特点。已上市药物已经在慢性粒细胞白血病、非小细胞肺癌、肾细胞癌等多种疾病的治疗中显示出其较传统治疗药物的优越性,部分已成为治疗肿瘤的一线用药。本文对小分子酪氨酸激酶抑制剂类新药的研发现状进行综述。     

HPLC法测定盐酸利多卡因胶浆(Ⅰ)的含量

目的建立用高效液相色谱法测定盐酸利多卡因胶浆(Ⅰ)含量的方法.方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,醋酸溶液(取冰醋酸50ml,加水930ml,混匀,用lmol·L-1氨氧化钠溶液调节pH值至3.40)-甲醇(4060)为流动相,检测波长为254nm,流速为1.0ml·min-1,柱温为30℃.结果利多卡因在13.6～68.0μg范围内呈现良好的线性关系(r=0.9984),平均回收率为99.9%,RSD为0.7%.结论本方法结果准确,重现性好,可用于盐酸利多卡因胶浆(Ⅰ)的含量测定.     

非喜树碱类DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂的研究进展

DNA拓扑异构酶Ⅰ（TopoⅠ）是抗肿瘤治疗的重要靶点。喜树碱类TopoⅠ抑制剂已在肿瘤的临床治疗中被广泛使用,但受分子骨架制约,其存在水溶性低、稳定性差、毒副作用大等缺点,而具有新颖结构的非喜树碱类TopoⅠ抑制剂则有望克服这些缺点。按结构分类综述非喜树碱类TopoⅠ抑制剂的抗肿瘤活性及构效关系研究新进展。     

谷氨酸触发大鼠大脑皮质神经元Ca~(2+)内流与PTK的关系

目的　研究谷氨酸 (glutamate,Glu)触发大鼠大脑皮质神经元Ca2 + 内流特性 ,蛋白酪氨酸激酶 (PTK)抑制剂genistein及蛋白酪氨酸磷酸酶 (PTP)抑制剂vanadate对其影响 ,揭示PTK与Glu触发大鼠大脑皮质神经元Ca2 + 内流的内在联系。方法　采用Fura 2 /AM荧光测定胞浆Ca2 + 变化技术 ,在原代培养的大鼠大脑皮质神经元上观察药物对Glu触发Ca2 + 内流的影响。结果　Glu触发的Ca2 + 内流不受电压依赖性钙通道 (VDCC)阻断剂尼莫地平影响 ,亦不受非VDCC阻断剂SK&F96 36 5影响 ,但可被PTK抑制剂genis tein抑制 ,被PTP抑制剂vanadate增强。genistein(1～ 30μmol·L-1)呈浓度依赖性抑制Glu触发的Ca2 + 内流。vana date则浓度依赖性增强Glu触发的Ca2 + 内流。结论　对尼莫地平敏感的VDCC及对SK&F96 36 5敏感的非VDCC没有参与Glu触发的Ca2 + 内流。PTK激活参与了Glu触发的Ca2 + 内流     

大麻Ⅰ型受体抑制剂研究进展

临床试验表明,大麻Ⅰ型受体(CB1)抑制剂利莫那班(rimonabant)在治疗肥胖和戒烟方面具有良好效果[1],CB1受体抑制剂还具有治疗药物成瘾、认知和记忆紊乱、神经错乱等疾病的潜力。CB1受体抑制剂与诸多疾病的相关性大大推进了新的CB1受体抑制剂的发展。本文主要对各种CB1受体抑制剂的结构及活性研究的最新进展进行综述。     

人体端粒G4-DNA稳定剂的研究进展

端粒长度的维持在肿瘤细胞的永生化过程中起到至关重要的作用。约85%的人体肿瘤细胞通过端粒酶延伸端粒,从而获得持续的增殖能力。另外,15%的人体肿瘤细胞通过端粒替代延伸机制(alternative lengthening of telomeres,ALT)延伸端粒。这两种机制对于维持肿瘤细胞中端粒的长度具有同等重要的意义。人体端粒由富含鸟嘌呤(G)的DNA重复序列组成,该序列在特定的条件下可以形成G-四链体(G4)的结构。此结构的形成可以从根本上抑制端粒酶和ALT对端粒的延伸而达到抗肿瘤的目的。因此,人体端粒G4-DNA作为抗肿瘤靶点的研究是近年来抗肿瘤研究的重要前沿领域之一。该文重点综述人体端粒G4-DNA稳定剂研发的最新研究进展。     

拓扑异构酶Ⅰ抑制剂研究进展*

拓扑异构酶Ⅰ(topoisomeraseⅠ,TopoⅠ)是抗肿瘤研究的重要靶点,以TopoⅠ为靶点的药物在肿瘤化疗中被广泛应用。目前临床使用或处于临床前研究的拓扑异构酶Ⅰ抑制剂主要分为喜树碱类(camptothecin,CPT)和非喜树碱类(non-camptothecin TopoⅠinhibitor)化合物。本文主要介绍了近年来TopoⅠ抑制剂研发领域的最新进展和发展趋势,并重点就近年来涌现出的一些新的TopoⅠ抑制剂的抗肿瘤活性和药理学特性做一综述。     

拓扑替康与顺铂联用治疗恶性肿瘤研究进展

拓扑替康 (Topotecan ,TPT)为新一代半合成、水溶性喜树碱类抗肿瘤药 ,是细胞核内拓扑异构酶Ⅰ的特异性抑制剂 ,其与拓扑异构酶Ⅰ (TopoⅠ )和DNA形成的复合物结合 ,以阻止断裂的DNA单链重新聚合 ,进而在DNA合成过程中导致DNA双链的破坏。 1996年拓扑替康被美国FDA批准上市以来 ,此药在世界各国陆续应用于临床 ,已有大量临床报告显示其对小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、消化道肿瘤有较好疗效。顺铂 (DDP)为铂的金属络合物 ,抗癌作用的主要靶点为DNA ,在鸟嘌呤胞嘧啶位点与DNA发生交联 ,阻止其复制和转录 ,造成细胞死亡。二者作用…     

重点补充维生素E、C和βC提高机体素质的动物实验

目的通过重点补充维生素E、C和β胡萝卜素(βC)的动物实验,探讨提高机体抗自由基、抗氧化能力的途径,为保障长期在海上作业舰艇人员的身体素质而设计食谱和补充辅助营养素提供理论和实验依据。方法①用过氧化氢(H2O2)诱导DNA损伤,采用单细胞凝胶电泳方法测定DNA氧化损伤程度,同时测定大鼠血清丙二醛(MDA)和脂褐质(LPO)的含量;②应用Fenton体系产生羟自由基,制备大鼠红细胞膜氧化损伤模型,采用荧光偏振法测定荧光偏振度、微粘度等膜脂流动性指标。同时测定红细胞膜中MDA含量。通过以上方法观察补充抗自由基抗氧化营养素对生物大分子和生物膜损伤的影响。结果①H2O2浓度为10μmol/L时,实验Ⅱ、Ⅲ两组受试动物DNA损伤程度较对照组明显降低(P<0.01);②Fenton体系作用后,受试Ⅰ、Ⅱ两组细胞膜中MDA和LPO较对照组降低均有显著性差异(P<0.05)。结论补充维E、C和βC能够降低H2O2引起的DNA损伤程度、降低血清和细胞膜中MDA和LPO含量。可见补充维E、C和βC有抗自由基、抗氧化、保护DNA和生物膜免受损伤和防止脂质过氧化的效应。     

PTP-1B及其抑制剂与2型糖尿病的研究现状

蛋白酪氨酸磷酸酶-1B (PTP-1B)是蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)家族中的一员,在胰岛素信号转导途径中发挥重要作用.经研究发现,PTP-1B与2型糖尿病的发生、发展有密切关系. 本文按PTP-1B 小分子抑制剂的结构类别对近年来文献报道的代表性小分子PTP-1B 抑制剂进行综述.表明深入研究PTP-1B及其有效的抑制剂对于2型糖尿病治疗具有良好的发展前景.     

GDP对柴胡皂甙(Ⅰ)促大鼠胰腺腺泡酶分泌和升高[Ca~(2 )]_i的影响

目的:研究鸟苷二磷酸(GDP)对柴胡皂甙(Ⅰ)[SA(Ⅰ)]刺激大鼠胰腺腺泡酶分泌和胞内钙离子升高的影响。方法:分离大鼠胰腺腺泡细胞,用链球菌溶血素-O(SLO)通透细胞膜,检测腺泡分泌蛋白量标志腺泡酶分泌功能。用钙离子荧光指示剂Fluo-3和荧光光谱测定胞内钙离子浓度。结果:GDP可抑制SA(Ⅰ)促胰腺腺泡的酶分泌作用,抑制作用随剂量增加而加强;SA(Ⅰ)10μmol/L以双峰值为特征使[Ca~(2 )]_i显著上升;GDP5mmol/L,导致[Ca~(2 )]_i逐步升高且两个峰值消失。细胞通透以后,与正常细胞相比,SA(Ⅰ)刺激的30min酶分泌的累积量下降了57％;GDP5mmol/L使SA(Ⅰ)刺激的早期酶分泌速率进一步降低。结论:GDP通过抑制细胞[Ca~(2 )]_i的升高抑制了SA(Ⅰ)刺激的胰腺腺泡酶分泌作用。     

synapsinⅠ参与(-)黄皮酰胺增强齿状回突触传递功能

目的观察synapsinⅠ在(-)黄皮酰胺促进大鼠海马齿状回突触传递功能中的作用。方法用电生理方法观察(-)黄皮酰胺对基础突触传递功能的影响;采用Westernblot方法及共聚焦显微镜检测了(-)黄皮酰胺对synapsinⅠ磷酸化的时间、浓度依赖关系,以及确定促进synapsinⅠ激活的上游蛋白激酶。结果在整体动物中,(-)黄皮酰胺可明显增加海马齿状回群峰电位,并且脑室给药5 min即可促进海马synapsinⅠ磷酸化增强,15 min时皮层synapsinⅠ磷酸化增强最明显。0.1、1、10μmol.L-1(-)黄皮酰胺可浓度依赖性促进PC12细胞中synapsinⅠ激活,且10μmol.L-1(-)黄皮酰胺在1~2 min均可激活突触体和PC12细胞中synapsinⅠ。PKA抑制剂H89可抑制(-)黄皮酰胺对synapsinⅠ的磷酸化。结论(-)黄皮酰胺通过PKA促进synapsinⅠ磷酸化而增强基础突触传递活动。