罗格列酮对慢性胰腺炎大鼠肝细胞Glut2表达的调节

目的:建立慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)大鼠模型,观察其空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、血清胰岛素水平、以及肝脏葡萄糖运载体-2(glucose transporter-2,Glut2)表达的改变,探讨罗格列酮的改善和调节作用。方法:用油酸经胰胆管插管灌注的方法诱导CP,将6周后成模大鼠随机分成模型组和治疗组,治疗组以罗格列酮灌胃治疗7 d,模型组以蒸馏水灌胃7 d。对照组以同样方法经胰胆管插管灌注生理盐水,6周后蒸馏水灌胃对照。试验结束时测定FBG和血清胰岛素水平,Westernblots法测定各组大鼠肝细胞Glut2表达的改变。结果:模型组、治疗组和对照组的FBG分别为(8.0±1.50)、(6.4±0.76)和(5.8±0.40)mmol/L;血清胰岛素分别为(6.7±0.79)、(7.3±0.78)和(8.7±0.70)μIU/ml;Glut2条带的光密度积分值分别为(28.28±2.36)、(32.47±2.16)和(39.25±3.08),模型组肝细胞Glut2表达较对照组降低27.95%,治疗组肝细胞Glut2表达较模型组上调14.82%。结论:模型组空腹血糖较对照组明显升高(P<0.05),胰导素水平和肝细胞Glut2表达较对照组有明显降低(P<0.05);治疗组FBG明显降低(P<0.05),Glut2表达较模型组有明显的上调(P<0.05)。罗格列酮能够增加CP大鼠Glut2在肝细胞表面的数目,改善胰岛素信号转导,降低CP大鼠的空腹血糖。     

白细胞介素6对2型糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的影响

目的：通过研究白细胞介素6（IL－6）对2型糖尿病（T2DM）大鼠骨骼肌葡萄糖转运体4（GLUT4）和糖原含量的影响,探讨其影响T2DM糖代谢的机制。方法：健康雄性SD大鼠随机分为4组：正常对照组（N组）10只,糖尿病IL-6抗原干预组（A组）10只,糖尿病IL－6抗体干预组（B组）8只,糖尿病对照组（C组）8只。测定血糖、血清胰岛素、血脂等指标;取股四头肌比色法测定肌糖原含量,免疫组化法测定骨骼肌GLUT4蛋白表达。结果：T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达较正常大鼠明显降低,IL-6抗体干预可以升高T2DM大鼠骨骼肌糖原含量和GLUT4蛋白表达。结论：T2DM大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达减少;IL－6抗体阻滞通过增加GLUT4蛋白表达促进骨骼肌对糖的利用。     

D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺Bcl-2和Bax的表达

目的探讨D-半乳糖衰老大鼠下颌下腺凋亡相关蛋白表达的影响。方法雌性SD大鼠36只,随机分为正常组（N组）,模型组（M组）,阴性对照组（NC组）,自然恢复组（S-R组）4组,每组9只。腹腔注射D-半乳糖制造衰老大鼠模型,麻醉,开胸,经左心室插管入主动脉,〈4%多聚甲醛灌注,固定取双侧下颈下腺,用免疫组织化学方法观察衰老大鼠下颌下腺Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果Bcl-2蛋白阳性表达以N组最高,M组最低（P〈0.05）。Bax蛋白的阳性表达以M组最高,N组最低（P〈0.05）。结论衰老大鼠下颌下腺Bcl-2表达减少、Bax表达增加。     

基于TNF-α和FABP4蛋白探究长期服用奥氮平导致胰岛素抵抗的作用机制

目的：探究在长期服用奥氮平诱导的胰岛素抵抗过程中，TNF-α和FABP4的相互作用。方法：选择SD大鼠连续灌胃给予奥氮平8周，建立奥氮平诱导胰岛素抵抗的大鼠模型，期间分别对大鼠体质量、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（Fins）和胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）进行测定比较；ELISA测定大鼠血清和白色脂肪中的TNF-α表达量；通过Western Blot对3T3-L1细胞模型中的研究蛋白（FABP4和GLUT4）进行分析比较。结果：与对照组相比，长期服用奥氮平诱导胰岛素抵抗的大鼠血清和白色脂肪内TNF-α表达量显著升高（P<0.05），且在3T3-L1脂肪细胞模型中，随着TNF-α浓度增加，FABP4的表达量显著上升（P<0.05），GLUT4的上膜量显著降低（P<0.05）。结论：长期服用奥氮平可能引起机体产生炎症反应，激活TNF-α的表达，进而上调FABP4蛋白，最终降低GLUT4上膜量，导致胰岛素抵抗的发生。     

2型糖尿病大鼠模型GLUT4 mRNA表达的研究

目的：研究葡萄糖转运体4（GLUT4）mRNA表达在2型糖尿病胰岛素抵抗中的分子机制。方法：采用高脂高糖饲养，一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）制备2型糖尿病大鼠模型。逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析大鼠骨骼肌、心肌和脂肪组织中GLUT4 mRNA的表达量变化与差别。结果：正常对照组和2型糖尿病大鼠模型组GLUT4 mRNA在骨骼肌中有相对较高表达，在心肌中表达次之，在脂肪组织中表达相对偏低。2型糖尿病大鼠模型组骨骼肌中GLUT4 mRNA表达量只有对照组骨骼肌的48％、心肌的44％、脂肪组织的38％。结论：GLUT4 mRNA表达量下降导致骨骼肌、心肌和脂肪组织对葡萄糖摄取利用减少是胰岛素抵抗的重要分子基础，是诱发2型糖尿病原因之一。     

过表达KLF4对棕榈酸所致L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗的影响

目的探讨Krtippel样因子4（KLF4）过表达对大鼠L6骨骼肌细胞胰岛素抵抗的影响。方法采用棕榈酸诱导法建立大鼠IJ6骨骼肌细胞的胰岛素抵抗模型,随机分为对照组和转染组。对照组转染腺病毒空载体（Ad）,转染组转染KLF4腺病毒表达载体（Ad—KLF4）。采用Real—timePCR和Western—blot检测两组KLF4、胰岛素受体（IR）和葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）的表达水平,采用葡萄糖氧化酶法检测两组培养液中的葡萄糖浓度。结果与对照组比较,棕榈酸诱导组对葡萄糖的摄取量显著降低（P〈0．05）,KLF4、IR、GLUT4表达显著下调（P〈0．05）。KLF4过表达可显著提高细胞对胰岛素的敏感性,并上调IR、GLUT4表达。结论过表达KLF4可导致IR、GLUT4表达上调,并改善骨骼肌细胞的胰岛素抵抗。     

茶多酚对胶原诱导性关节炎大鼠足爪组织MMP-2蛋白表达水平的影响

目的：探讨茶多酚对Ⅱ型胶原乳化剂诱导关节炎大鼠的治疗作用及机制。方法 SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松对照组（2 mg·kg－1·d－1）和茶多酚治疗组（200 mg·kg－1·d－1）,采用Ⅱ型胶原弗氏完全佐剂法（collagen-in-duced arthritis,CIA）建立类风湿性关节炎大鼠模型。记录大鼠足趾体积的变化,酶联免疫法（ELISA）检测大鼠血清IL-1β、PGE2水平,免疫组化法检测大鼠足爪组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白水平的表达。结果与模型组比较,茶多酚治疗组大鼠踝关节肿胀明显减轻（P＜0．05）,大鼠血清IL-Iβ、PEG2水平明显降低（P＜0．05）,足爪组织细胞中MMP-2蛋白表达明显下降（P＜0．05）。结论茶多酚对CIA大鼠关节炎有抑制作用,其机制可能与抑制炎症介质IL-1β、PEG2,下调MMP-2蛋白表达有关。     

脂联素影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4表达的研究

目的：通过建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗模型,探讨骨骼肌L6细胞中脂联素（ APN）的分泌,以及脂联素对骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化后,给予不同浓度的棕榈酸（PA）,测定不同时间细胞培养上清液葡萄糖浓度,观察PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响,建立胰岛素抵抗模型;（2）根据实验条件的不同分为三组：NC组（正常对照组,即骨骼肌L6细胞组）;IR组（胰岛素抵抗模型组）;IR＋PIO组（胰岛素抵抗模型＋吡格列酮组）。应用Western blot方法分别测定上述三组APN和GLUT4表达水平。结果（1）0．4 mmol· L^-1的棕榈酸在作用12、24、36 h以及0．6～0．8 mmol· L^-1棕榈酸作用8～36 h后,细胞培养上清液中葡萄糖含量,明显高于对照组。胰岛素抵抗模型建立;（2）Western blot结果显示：①与NC组比较,IR组APN和GLUT4表达均减少,差异有统计学意义;②与IR组比较,IR＋PIO组其APN和GLUT4表达均增加,差异有统计学意义。结论（1）大鼠L6成肌细胞培养并诱导分化后,经过一定条件下PA刺激,可以建立胰岛素抵抗模型;（2）大鼠L6细胞可分泌和表达脂联素,骨骼肌源性脂联素上调L6细胞GLUT4的表达;（3）吡格列酮作为PPAR-γ激动剂,可增加大鼠L6细胞脂联素的分泌,进而改善胰岛素敏感性。     

骨髓间充质干细胞移植对慢性胰腺炎大鼠模型胰腺纤维化的影响

摘要： 目的 观察骨髓间充质干细胞 （BMSCs） 移植对慢性胰腺炎大鼠模型胰腺纤维化的影响, 并探讨其作用机制。方法 将 30 只健康雄性 SD 大鼠随机分为对照组、 模型组和移植组, 每组 10 只。模型组采用胆胰管逆行注射油酸法制备大鼠慢性胰腺炎模型, 对照组以同样方式仅注射相同体积生理盐水, 移植组在造模后 1 周和 5 周经尾静脉注射 BMSCs。分别于造模后第 1、 4 和 8 周称量 3 组大鼠体质量, 于第 8 周后剖杀动物, 取胰腺组织行 HE 染色和饱和苦味酸-天狼猩红染色观察胰腺组织病理学改变并评分, 采用 ELISA 法检测胰腺组织转化生长因子 （TGF） -β1、 Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量。结果 造模后第 4 周, 模型组和移植组大鼠体质量均低于对照组 （P＜0.05）, 模型组与移植组间差异无统计学意义（P＞0.05）; 至第 8 周, 模型组和移植组大鼠体质量仍低于对照组, 而移植组高于模型组（P＜0.05）。模型组大鼠胰腺组织纤维化评分升高、 TGF-β1、 Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量均高于对照组和移植组（P < 0.05）; 移植组胰腺组织纤维化评分高于对照组, TGF-β1、 Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量与对照组差异无统计学意义。结论 BMSCs 移植能减少慢性胰腺炎大鼠胶原分泌, 降低胰腺纤维化程度, 其机制可能与抑制 TGF-β1分泌有关     

妊娠期缺氧对子代大鼠脑皮质肾素-血管紧张素系统的影响

目的 探讨妊娠期慢性缺氧对子代大鼠脑皮质血管紧张素转换酶（ACE）及血管紧张素Ⅱ受体1、2（AT1R、AT2R）表达的影响.方法 建立SD雌鼠妊娠期缺氧模型.采用RT-PCR、Western bot法检测子代大鼠大脑皮质ACE mRNA表达以及AT1R、AT2R蛋白表达.结果 缺氧组子代大鼠大脑皮质ACE mRNA表达比对照组增强（P＜0.05）,AT1R蛋白表达比对照组减少（P＜0.05）,而AT2R蛋白表达却增多（P＜0.05）,以上改变随年龄增长仍持续性存在.结论 妊娠期缺氧可增强子代大鼠成年后大脑皮质ACE及AT2R表达并抑制AT1R表达,这可能与妊娠期缺氧引起子代大鼠脑皮质神经元变性、凋亡有关.     

Chronic acarbose-feeding increases GLUT1 protein without changing intestinal glucose absorption function.

As alpha-glucosidase inhibitor, the antidiabetic drug acarbose reduces postprandial glucose levels by retarding the intestinal digestion of polysaccharides. However, it is unknown if acarbose also affects the expression of intestinal glucose transporters, especially the Na(+)-glucose cotransporter (SGLT1) and the glucose transporters GLUT1 and GLUT2. To unravel this question, Wistar rats received standard powdered chow either without (control) or with acarbose (40 mg acarbose/100 g chow) for 40 days. While food intake was slightly enhanced by acarbose, the drug had no influence on weight gain or plasma glucose and insulin levels. The acarbose-treatment did not alter the SGLT1 and GLUT2 gene expression in both upper and middle small intestine, whereas GLUT1 protein was increased by 75% in middle small intestine. Despite the territorial change in GLUT1 protein, the intestinal glucose absorption in an acarbose-free perfusion study was unaltered. In conclusion, the chronic use of acarbose did not alter the acarbose-free glucose absorption profile.     

小檗碱改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗与PI-3K、GLUT4蛋白相关性的研究

目的观察小檗碱对2型糖尿病大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI-3K)之p85亚基、葡萄糖转运子4(glucose transporter4,GLUT4)蛋白表达的影响,以探讨小檗碱改善胰岛素抵抗,防治2型糖尿病的分子机制。方法采用尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30mg.kg-1)加高脂高热量饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,以小檗碱干预10wk,检测血糖和血清胰岛素,用Western blot方法检测小檗碱干预后2型糖尿病大鼠骨骼肌组织PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平。结果小檗碱干预的2型糖尿病大鼠骨骼肌组织PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平均较模型组显著增加。结论小檗碱对2型糖尿病的治疗效应可能与提高骨骼肌组织中PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平有关。     

早产儿重度脑室内出血脑脊液糖浓度的变化及机制探讨

目的：探讨早产儿重度脑室内出血脑脊液糖浓度的变化及可能机制。方法对解放军白求恩国际和平医院17例早产儿重度脑室内出血( IVH)脑脊液糖浓度进行客观描述;通过早产兔重度IVH模型,应用蛋白印迹方法,定量分析脑室周围脑组织葡萄糖转运体GLUT1和GLUT3蛋白表达。结果17例重度IVH早产儿脑脊液平均糖浓度降低,尤以出血后16~20 d降低更明显,随后逐步恢复,26~30 d仍低于文献给出的正常范围;重度IVH早产兔脑组织标本中GLUT1蛋白表达量生后24 h最高,其次是生后48 h,最后是生后72 h,3个时间点间两两比较差异有统计学意义(P<0．05);重度IVH早产兔脑组织标本中GLUT1蛋白表达量在生后72 h低于同一时间点的对照组(P<0．01),而24、48 h均高于同一时间点的对照组(P<0．01);重度IVH早产兔脑组织中GLUT3蛋白表达量在生后24、48、72 h 3个时间点两两比较,差异有统计学意义(P<0．05),以生后48 h蛋白表达量最高,其次是生后24 h,最后是生后72 h,而GLUT3蛋白表达量在生后24 h与对照组同一时间点相比较,差异无统计学意义(P>0．05),生后48 h的蛋白表达量高于同一时间点的对照组(P<0．01),生后72 h时蛋白表达量低于同一时间点对照组(P<0．01)。结论重度IVH早产兔脑部GLUT1蛋白表达量有暂时性升高,随后表达降低,推测由此导致脑脊液糖浓度降低;脑内GLUT3蛋白的相对表达量有暂时性升高,之后下调,可能导致葡萄糖供应不足,提示有可能参与了早产儿基质-脑室内出血后继发性脑损伤。     

二甲双胍与罗格列酮对2型糖尿病大鼠GLUT4表达的比较

目的比较二甲双胍与罗格列酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响.方法以低剂量链脲佐菌素(STZ)加高热量饲料喂养制作模型,灌胃给药4周,检测糖耐量、空腹血清胰岛素(Ins)及骨骼肌GLUT4 mRNA表达量的变化.结果造模后大鼠注射葡葡糖后30,60,120min血糖显著升高,空腹Ins无明显变化,骨骼肌GLUT4 mRNA表达量显著降低.两药均可使注糖后120min血糖下降;罗格列酮尚可降低空腹血糖.二甲双胍可使骨骼肌GLUT4 mRNA表达量明显升高,但罗格列酮对骨骼肌GLUT4 mRNA表达的降低无影响.结论本造模方法可导致大鼠产生类似2型糖尿病的变化,两药均可改善此模型糖耐量异常,二甲双胍的作用与增强骨骼肌GLUT4基因表达有关,而罗格列酮的作用可能与其它环节有关.     

Effects of Hachimi-jio-gan (Ba-Wei-Di-Huang-Wan) on hyperglycemia in streptozotocin-induced diabetic rats

The present study investigated the effects of Hachimi-jio-gan (HJ) on diabetic hyperglycemia in streptozotocin (STZ)-induced diabetic rats. After STZ administration, rats had free access to pellets containing 1% HJ extract powder for four weeks. HJ markedly suppressed hyperglycemia in STZ-induced diabetic rats at three and four weeks after the start of administration. There were also significant increases in serum and pancreatic immunoreactive insulin levels in STZ and HJ co-administering rats. However, in the present study, the number of beta cells in the pancreatic Langerhans' islets did not increase. Next, in order to investigate the action mechanism besides the glycemic control action of insulin, the expression of glucose transporter 2 (GLUT2) protein, which is involved in glucose uptake and release in the liver, was investigated. GLUT2 protein expression was increased by STZ administration but was normalized after four weeks of HJ administration. Therefore, irrespective of the structural changes in pancreatic beta-cells due to STZ, HJ increased insulin production and secretion by the pancreas and significantly suppressed GLUT2 synthesis in the liver. Amylase secretion from the pancreas was measured to assess pancreatic secretion. Amylase activity was decreased by STZ but was increased by HJ. Therefore, the effects of HJ on STZ-induced hyperglycemia in rats could be summarized as follows: besides increasing insulin synthesis and release, HJ normalizes GLUT2 protein expression in the liver to suppress hyperglycemia. Hence, the results of the present study suggest for the first time that HJ affects not only the production and secretion of insulin, but also the release of glucose from the liver.     

Berberine activates GLUT1-mediated glucose uptake in 3T3-L1 adipocytes

It has recently been known that berberine, an alkaloid of medicinal plants, has anti-hyperglycemic effects. To explore the mechanism underlying this effect, we used 3T3-L1 adipocytes for analyzing the signaling pathways that contribute to glucose transport. Treatment of berberine to 3T3-L1 adipocytes for 6 h enhanced basal glucose uptake both in normal and in insulin-resistant state, but the insulin-stimulated glucose uptake was not augmented significantly. Inhibition of phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-K) by wortmannin did not affect the berberine effect on basal glucose uptake. Berberine did not augment tyrosine phosphorylation of insulin receptor (IR) and insulin receptor substrate (IRS)-1. Further, berberine had no effect on the activity of the insulin-sensitive downstream kinase, atypical protein kinase C (PKCzeta/lambda). However, interestingly, extracellular signal-regulated kinases (ERKs), which have been known to be responsible for the expression of glucose transporter (GLUT)1, were significantly activated in berberine-treated 3T3-L1 cells. As expected, the level of GLUT1 protein was increased both in normal and insulin-resistant cells in response to berberine. But berberine affected the expression of GLUT4 neither in normal nor in insulin-resistant cells. In addition, berberine treatment increased AMP-activated protein kinase (AMPK) activity in 3T3-L1 cells, which has been reported to be associated with GLUT1-mediated glucose uptake. Together, we concluded that berberine increases glucose transport activity of 3T3-L1 adipocytes by enhancing GLUT1 expression and also stimulates the GLUT1-mediated glucose uptake by activating GLUT1, a result of AMPK stimulation.     

阿魏酸对脑梗死大鼠的神经功能、GLUT蛋白与神经元葡萄糖代谢的影响

目的 探究阿魏酸在减轻大鼠脑梗死过程中对葡萄糖转运蛋白（GLUTs）和神经元葡萄糖代谢的影响。方法 72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组以及阿魏酸25、50、100 mg/kg组。采用Longa线栓法构建脑梗死模型，梗死期间，模型组尾iv生理盐水，阿魏酸组分别尾iv 25、50、100 mg/kg的阿魏酸治疗，尼莫地平组尾iv 20 mg/kg尼莫地平，给药3 d。完成给药后24 h，对各组大鼠开展神经功能评分，完成后取大鼠血液检测外周血糖值，再通过PET/CT实验检测缺血区葡萄糖摄取水平。将大鼠处死后全脑组织进行TTC染色，取缺血核心区组织，通过比色法检测ATP含量，采用Western blotting法检测GLUT蛋白表达水平。结果 与假手术组比较，模型组大鼠神经功能评分增加，出现明显梗死区域，缺血核心区葡萄糖摄取量减少，ATP含量降低，GLUT1、GLUT3、PFKFB3蛋白表达降低（P＜0.05）。与模型组比较，阿魏酸50、100 mg/kg组大鼠神经功能评分减少，梗死区域面积占比减少，缺血核心区葡萄糖摄取量增加，ATP含量升高，GLUT1、GLUT3、PFKFB3蛋白表达升高（P＜0.05）。结论 阿魏酸对脑梗死大鼠的治疗效果与尼莫地平相似，其机制可能与提高GLUT1和GLUT3蛋白表达，促进葡萄糖向中枢神经元转运，提高葡萄糖代谢相关。     

转化生长因子β及大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响(英文)

目的:对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白-1(GLUT1)进行鉴定。研究转化生长因子(TDF-β_1)对GLUT1表达和功能的影响及大黄酸的干预作用。方法:分别用RT-PCR、免疫荧光染色、流式细胞仪、Northern杂交和[~3H]-2脱氧葡萄糖摄入率对系膜细胞GLUT1 mRNA表达、蛋白质分布和功能进行了研究。观察不同浓度TGF-β_1在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及GLUT1 mRNA表达的影响。结果:研究发现人类肾小球系膜细胞上存在功能性的GLUT1。TGF-β_1能上调系膜细胞GLUT1 mRNA的表达和增加系膜细胞葡萄糖摄入率。大黄酸对正常糖浓度培养条件下系膜细胞葡萄糖摄入无影响,但能明显抑制TGF-β_1增加系膜细胞GLUT1 mRNA表达和葡萄糖摄入的作用。结论:TGF-β_1增加人肾小球系膜细胞GLUT1 mRNA的表达和细胞葡萄糖的摄入,该作用能够明显地被大黄酸所拮抗。