类模板分子印迹整体柱识别人血清中甲氨蝶呤的研究

目的制备分子印迹整体柱,实现对人血清中甲氨蝶呤(MTX)的选择性富集,为其HPLC法分析提供便利。方法以三聚氰胺为类模板,甲基丙烯酸为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂,聚乙二醇和甲醇为致孔剂,采用原位聚合法在不锈钢空色谱柱管内合成了分子印迹(MIP)整体柱。以该MIP柱为色谱柱,通过HPLC法分析考察其选择性识别MTX的效果。结果在依次经过甲醇-水(体积比1∶9)和乙腈-水-乙酸(体积比96∶3.5∶0.5)2种流动相的洗脱后,MTX依然能在MIP柱上保留而不出峰,人血清样中的基质干扰成分则能被完全清除,最后吸附在MIP柱上的MTX可用甲醇洗脱出峰。结论在选定的最佳色谱流动相条件下,制备的MIP整体柱对MTX显示良好的选择性识别作用,同时可将血清中的基质干扰组分除去。该MIP柱有望用于在线或离线选择性富集人血样中的MTX,为RP-HPLC法提供了便利。     

分子印迹聚合物在中药研究中的应用

分子印迹聚合物(MIP)是一种在空间结构和结合位点上与模板分子完全匹配的高分子聚合物,该聚合物留有模板分子的"印迹",因此对模板分子具有专一的选择性结合能力.对MIP的原理、制备、特点及其在中药有效成分的分离、有效组分群的分离、活性成分的筛选、复杂样品的处理以及目标分子的分析等方面的应用进行综述.     

紫外光聚合法制备L-DBTA手性分子印迹聚合物的研究Ⅱ.聚合物性能

以丙烯酸为功能单体,二苯甲酰-L-酒石酸(L-DBTA)为模板分子,三羟甲基丙烷三丙烯酸酯(TMPTA)为交联剂,采用紫外光聚合方法合成了L-DBTA手性分子印迹聚合物.通过HPLC表征,表明合成的手性分子印迹聚合物对L-DBTA模板分子具有很好的识别性,L-DBTA的选择性比二苯甲酰-D-酒石酸(D-DBTA)高.通过Scatchard分析表明,L-DBTA手性分子印迹聚合物中只存在一类影响聚合物识别能力的结合位点.293.15K时,结合位点的平衡离解常数为0.064mmol/L,最大表现结合容量为6.4mg/g.MIPs结合热力学研究表明,印迹分子L-DBTA与分子印迹聚合物手性识别基团之间的识别机理可以用Langmuir等温吸附描述,结合热力学参数为△H=7.40 kJ/mol,△S=42.74 J/(mol·K),△G298=-5.34kJ/mol.L-DBTA与MIPs相互作用速率快,表观活化能为7.40 kJ/mol.     

配合物分子印迹聚合物的识别性能

以乙酸镍和2,2′-联吡啶配合物为模板、4-乙烯吡啶为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了具有类似金属螯合抗体结合位点的金属配合物印迹聚合物,系统研究了金属离子对模板聚合物选择性结合2,2′-联吡啶的调节作用。结果表明:印迹聚合物对N i(Ⅱ)-2,2′-联吡啶配合物有选择性识别能力。采用Scatchard模型评价分子印迹聚合物的结合特性,得到高亲和力结合位点的平衡离解常数Kd1=0.082 mm o l/L,表观最大结合量Qm ax1=82.2μm o l/g,低亲和力结合位点的Kd2=0.400 mm o l/L,Qm ax2=91.3μm o l/g。     

水相中制备硅胶表面分子印迹聚合物及色谱性能研究

目的： 结合β-环糊精在水相中制备以硅胶为骨架的苯丙氨酸分子印迹聚合物,并进行色谱性能研究。方法： 在乙烯基硅胶表面,结合丙烯酰化β-环糊精,以苯丙氨酸为模板分子,2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸（AMPSA）为功能单体,N,N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)为交联剂,采用热聚合法在水相中制得以硅胶为骨架的苯丙氨酸分子印迹聚合物,并以此固定相装填不锈钢色谱柱,以乙腈-水-甲酸（10∶90∶0.1）为流动相,流速1.0 mL/min,200 nm为检测波长,进行高效液相色谱分析,并与空白分子印迹聚合物柱进行比较。结果： 苯丙氨酸在印迹柱上的保留比在空白印迹柱上强,与赖氨酸、脯氨酸达到基线分离。结论： 在水相中采用硅胶表面印迹法结合环糊精制备的分子印迹聚合物对模板分子具有良好的特异选择性。     

依达拉奉分子印迹聚合物的制备及选择吸附性研究

目的以依达拉奉(Edaravone)为模板分子,合成依达拉奉分子印迹聚合物(MIP)。方法研究不同功能单体对依达拉奉分子印迹聚合物的影响,并通过Scatchard方程研究依达拉奉分子印迹聚合物选择吸附特性。结果以甲基丙烯酸(MAA)为功能单体合成的分子聚合物具有较高的选择性。结论依达拉奉分子印迹聚合物有望用于临床对依达拉奉的富集与检测。     

左氧氟沙星分子印迹膜固相萃取选择性分离氧氟沙星

以聚偏氟乙烯中空纤维超滤膜为支撑膜,左氧氟沙星(LVFX)为模板分子,采用热聚合方法制备了分子印迹聚合物膜,并应用于固相萃取选择性分离氧氟沙星外消旋体(OFLX)。通过紫外光谱法研究了模板分子与功能单体之间的相互作用,得到了单体α-甲基丙烯酸和模板分子LVFX缔合的化学计量数2和结合常数K=3.83×105L2/mol2;用扫描电镜表征膜的表面形貌;固相萃取实验结果表明:分子印迹聚合物膜中存在着空间结构和大小均与模板分子LVFX互补的孔穴组成的通道,该通道可选择性地透过底物分子,得到的LVFX和OFLX的最大分配系数KL和KO分别为2.7和2。该方法为分子印迹膜萃取技术用于手性药物拆分提供了理论和实验方法。     

抗坏血酸分子印迹聚合物胶束及其电化学传感器的制备

以二甲胺乙基甲基丙烯酸酯（DMA）、丙烯酸羟乙酯（HEA）、丙烯酸二异辛酯（EHA）和苯乙烯（St）为原料合成双亲性无规聚合物P(DMA-co-HEA-co- EHA-co-St),将其与抗坏血酸在选择性溶剂中进行自组装,制得分子印迹聚合物胶束(MIPMs)。利用动态激光光散射(DLS)和透射电镜(TEM)进行表征。将MIPMs电沉积在金电极表面,用紫外光交联后洗脱除去抗坏血酸得到分子印迹电化学传感器。经循环伏安法(CV)及差分脉冲溶出伏安法(DPSV)研究表明,该传感器对抗坏血酸浓度在0.1~8.0 mmol/L具有良好的线性响应。     

罗红霉素分子印迹聚合物的合成及其特性研究

目的 探讨采用分子印迹技术合成罗红霉素分子印迹聚合物的方法，并对其特性进行研究。方法 以罗红霉素为模板分子，α-甲基丙烯酸为功能单体，以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，采用分子印迹技术合成分子印迹聚合物。通过特异性吸附实验研究分子印迹聚合物的特性。结果 通过静态平衡吸附法研究了模板聚合物的结合动力学以及该聚合物的结合能力和选择特性，通过Scatchard分析法研究了印迹聚合物对模板分子的结合特性，经计算聚合物的最大表观结合量(Q_max)和平衡离解常数(Kd)分别为90.3 mg·g^-1和1.35 mg·mL^-1。结论 合成的分子印迹聚合物有形状、大小以及识别位点都与模板分子相匹配的空穴，即具有印迹作用。     

硅胶表面抗蚜威分子印迹聚甲基丙烯酸的制备及识别特性

通过γ-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷的媒介作用,将功能大分子聚甲基丙烯酸(PMAA)逐步接枝到硅胶微粒表面,形成了表面接枝聚甲基丙烯酸的硅胶微粒(PMAA/SiO2);以抗蚜威为模板分子、乙二醇二缩水甘油醚(EGDE)为交联剂,通过氢键和静电作用,对接枝到硅胶表面的PMAA进行分子印迹,制备了抗蚜威分子表面印迹材料硅胶表面分子印迹聚甲基丙烯酸MIP-PMAA/SiO2;采用静态与动态两种方法研究了 MIP-PMAA/SiO2 对抗蚜威的结合特性,并考察了主要印迹条件 pH、混合溶剂中乙醇含量以及交联剂用量对印迹材料结合选择性能的影响.结果表明:表面印迹材料 MIP-PMAA/SiO2对抗蚜威具有特异的结合选择性,相对于参比物残杀威,印迹前 PMAA/SiO2对抗蚜威的吸附选择系数为 1.52,而表面印迹材料 MIP-PMAA/SiO2 对抗蚜威的吸附选择系数提高到 12.2.另外该印迹材料具有优良的洗脱与再生性能.     

红车轴草提取物中多环芳烃脱除工艺的研究

目的 优选红车轴草提取物中多环芳烃(PAHs)脱除工艺。方法 以PAHs脱除率为指标，考察提取物粒度、脱除溶剂、脱除方法对PAHs脱除工艺的影响。结果 最佳工艺为：红车轴草提取物超微粉碎至300目以上，用六号溶剂超声提取，对PAHs的脱除率达到98.0%以上，PAHs的残留量为10.0 ng/g以下。结论 超微粉碎-六号溶剂-超声提取法脱除红车轴草提取物中PAHs脱除率高，工艺稳定、可行。     

ASE-GC-MS分析莪术的挥发性成分

目的建立一种莪术挥发性成分的提取和分析的方法。方法加速溶剂萃取法(ASE)提取莪术挥发性成分,气质联用(GC-MS)进行定量分析。结果最佳的提取工艺条件:萃取溶剂乙酸乙酯,萃取温度80℃,静态时间6min,循环2次。气质联用条件:进样1μl,初始温度60℃,终止温度290℃;质谱扫描范围50～500m/z,扫描间隔0.5s,采用NIST和Wiley谱库对检测物进行在线检索。结论采用优化后的ASE可快速提取莪术挥发性成分,结合GC-MS检测。该方法显著优于传统提取和分析方法,具有高效、无污染、工艺简单和高实用等优点。     

高效液相色谱—荧光法检测血浆中普萘洛尔

普萘洛尔是常用的β受体阻断剂,对心律失常、心绞痛、高血压、偏头痛等心血管疾病具有有效的预防和治疗作用,目前国内临床上仅用普通片剂,而国外尚有控释片、控释胶囊等剂型。普萘洛尔的HPLC-UV法检测曾有报道,最     

顺铂、盖诺支气管动脉导管介入灌注治疗肺癌疗效评价

目的　观察支气管动脉灌注顺铂 ( DDP 1 0 0 mg/m2 )、盖诺 ( 4 0 mg)治疗中、晚期肺癌的疗效。方法　 80例中晚期肺癌病人随机分为支气管动脉灌注治疗组 ( A组 ) 40例 ,静脉注射治疗组 ( V组 ) 40例。结果　 A组缓解率 77.5 % ,中位缓解期 7个月 ,中位生存期 1 0个月 ,生存 1年以上患者占 5 2 .5 % ;V组缓解率45 % ,中位缓解期 5个月 ,中位生存期 6个月 ,生存 1年以上患者占 2 2 .5 %。结论　支气管动脉灌注治疗肺癌的临床疗效优于静脉滴注。     

正交试验法提取鼠尾腱胶原工艺的优化

目的: 探讨浸提时间、乙酸浓度及料液比对鼠尾腱胶原提取的影响,建立并优化鼠尾腱胶原的提取工艺,提高胶原提取效率。方法: 选取健康SD大鼠鼠尾,采取酸溶法提取鼠尾腱胶原,观察不同浸提时间(12、24、48、72和96 h)、乙酸浓度(0.10、0.25、0.50、0.75和1.00 mol·L^-1)及料液比(g:mL)(1:5、1:10、1:20、1:40和1:80)对胶原提取率的影响,利用正交试验判断浸提时间、乙酸浓度及料液比等影响因素的最佳工艺参数。通过SDS-PAGE电泳实验、单宁酸沉淀实验和傅里叶红外光谱实验等对提取的胶原进行鉴定。结果: 单因素分析,胶原提取率在一定参数范围内随浸提时间、乙酸浓度及料液比的增加而增加。正交试验,鼠尾腱胶原提取的最佳工艺参数为浸提时间72 h、乙酸浓度0.5 mol·L^-1、料液比为1:40。SDS-PAGE电泳显示,样品为Ⅰ型胶原,单宁酸沉淀实验显示胶原降解程度低,傅里叶红外光谱显示胶原结构完整。样品氨基酸含量测定符合胶原蛋白的成分特征。中性胶原溶液在37℃时能够形成固态胶原凝胶,胶原凝胶经过碳化二亚胺(EDC)交联后,扫描电镜下显示内部相互连接,构成孔径适中的蜂窝状多孔结构。结论: 成功建立并优化鼠尾腱胶原蛋白的提取工艺,得出浸提时间、乙酸浓度及料液比等因素的最佳工艺参数,有效提高了鼠尾腱胶原的提取效率。     

钩藤药材中钩藤碱含量测定方法的建立

目的：建立钩藤药材钩藤碱含量HPLC测定方法。方法：分别对HPLC的色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件进行摸索,对样品索式、回流和超声提取方法进行摸索,并采用正交设计的方法考察超声提取的药材破碎度、溶剂浓度、溶剂量和时间。结果：HPLC色谱条件为色谱柱：Gemini C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相∶甲醇—水（含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）（64∶36）,流速：1.0 mL/min,检测波长：254 nm。样品供试液制备方法为：药材破碎度为过60目筛的粉末,提取溶剂为75%甲醇,溶剂加入量为15 mL,超声处理40 min。该方法钩藤碱在0.020 9-1.672 0μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.96%,RSD=0.69%（n=6）。结论：建立的含量测定方法简易、准确,可作为钩藤药材钩藤碱含量测定方法。     

天麻中天麻素的提取与含量测定

目的:建立天麻素的提取工艺和含量测定方法。方法:HPLC法测定天麻素含量,采用Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(5∶95),检测波长220 nm,流速1.0 m L·min-1。以天麻素提取量为评价指标,正交试验法优化回流提取天麻中天麻素的工艺。结果:测定方法的专属性、精密度和回收率良好。最佳提取条件为:提取时间为60 min、提取次数3次、料液比1∶6,在此条件下天麻素提取率为20.05 mg·g-1。结论 :该工艺提取率高,含量测定方法学考察良好。     

组织神经节苷脂的简易快速薄层分离纯化法

组织神经节苷脂(Gls)传统的分析方法,是用薄层层析,在分析之前要先进行操作步骤繁杂的分离纯化。Harth等于1978年报告用组织粗提液直接点样于层析薄板,再以三种不同的溶剂系统展开的方法,得清晰的薄板层析图谱。它们的展开剂为:1.氯仿;2.氯仿-甲醇-水(70:30:4,V/V/V);3.氯仿-甲醇-0.25%KCl(60:35:8,V/V/V)。此法简便,但未能推广采用。根据我们的经验它未能推广的原因是粗提液颜色较深,对唾液酸测定干扰甚大,薄板上的点样量较难掌握。我们用硅胶G层析薄板(5×20厘米),将组织的氯仿-甲醇粗提液直接点样于其上,以Harth的前两种展开剂展开后,用问苯二酚显色,参考定位,刮下含Gls部分硅胶,经洗脱、离心、氮气吹干后,溶于C:M(1:1),以唾液酸含量为参数,点样于高效层析(HPTLC)薄板上,在氯仿-甲醇-0.15%CaCl_2(60:40:9,V/V/V)展开,可得良好的图谱。这一改良可去掉呈色物质,大大减少HPTLC板的用量,降低了成本,同时本法未经Folch分配,有可能获得比传统方法更为真实的结果。     

Prolongation of AV nodal refractoriness by Ruta graveolens in isolated rat hearts. Potential role as an anti-arrhythmic agent

OBJECTIVE: To evaluate concentration-dependent effects of total extract of Ruta graveolens and its purified alkaloid fraction on the nodal basic and functional properties. METHODS: In the present experimental study, we used the Langendorff model for perfusion of isolated rat hearts to determine the effects of various concentrations of methanolic extract of Rue (1.25 x 10(-6) % weight per volume percent [W/V]; 2.5 x 10(-6) % W/V; 3.75 x 10(-6) % W/V) and total alkaloid of Rue (0.25 x 10(-6) % W/V; 0.5 x 10(-6) % W/V) on electrophysiological properties of cardiac tissue. Selective stimulation protocols were used to independently quantify atrioventricular AV nodal recovery, facilitation, and fatigue. We used 3 groups (N=24) of isolated perfused rat AV nodal preparations to assess the effect of Rue extracts. The study was carried out in October 2006 in the electrophysiology laboratory of the Cardiovascular Research Center of Golestan University of Medical Sciences, Golestan, Gorgan, Iran. RESULTS: Our results showed that both the total plant extract and the alkaloid fraction of Ruta graveolens had a similar trend of action on nodal conduction time and refractoriness. Furthermore, we observed increased atrioventricular conduction time (83+/-4 to 108+/-5) msec and functional refractory period (157.6+/-3 to 163.7+/-4 msec) at a maximum concentration of 3.75 x 10(-6) % W/V. CONCLUSION: The above results indicated a potential antiarrhythmic effect of Ruta graveolens in treating supra ventricular tachyarrhythmia.     

黄芩指纹图谱的研究

目的：建立黄芩药材的HPLC指纹图谱,优化黄芩的提取方法和色谱条件,确定某些化学成分。方法：采用梯度洗脱方法进行色谱分离,AgilentTC-C18柱（4.6mm×250mm,5μm）,流动相：乙腈与0.1％冰醋酸溶液进行梯度洗脱,检测波长276nm,流速1.0ml／min,柱温25℃,使用标准品对其化学成分进行确定。结果：以水：乙醇：乙酸乙酯：冰醋酸（50：49：5：1）为提取溶剂,以乙腈与0.1％冰醋酸溶液进行梯度洗脱色谱峰分离效果较好并确定7种化学成分,优化了黄芩药材的HPLC指纹图谱。结论：本文建立的方法能较多的分离出色谱峰,可为黄芩药材的指纹图谱评价及物质基础的确定提供依据。