急性T淋巴细胞白血病细胞系JM分泌抑制因子在体外对T细 …

研究急性Ｔ淋巴细胞白血病细胞系ＪＭ分泌的抑制因子在体外对Ｔ细胞凋亡及细胞周期的影响。方法以ＴＬＳＦＪＭ作用于有丝分裂原ＰＨＡ蛋白激酶Ｃ活化剂ＰＭＡ和同种异体抗原（ａｌｌｏａｎｔｉｇｅ）活化的或小鼠Ｔ细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期。结果ＴＬＳＦＪＭ体外在体外可诱导ＰＨＡ／ＩＬ－２活化的小鼠胸腺细胞的凋亡。ＴＬＳＦＪＭ在体外可诱导ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎ活化的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的     

超抗原葡萄球菌肠毒素A在体外激活淋巴细胞抗成骨肉瘤的作用

目的：探讨超抗原葡萄球菌肠毒素Ａ（ＳＥＡ）对成骨肉瘤患者外周血淋 寺殖及伤活性的调节作用。方法：分离成骨肉瘤患者外周血淋巴细胞,体外分别经ＰＨＡ,ＳＥＡ和ＳＥＡ加ＩＬ－２刺激后,＾３Ｈ－ＴdＲ参入法检测淋巴细胞对人成骨肉增殖水平,ＭＴＴ间接比色法检测活化的淋巴细胞对人成骨肉瘤细胞（ＳＯＳＰ－９６０７）的杀伤活性。结果：淋巴细胞经ＳＥＡ刺激２４h后增殖和钉伤活笥明显增强且呈剂量信依赖性（Ｐ〈０．０５     

γδT淋巴细胞与常规LAK动物学特性的比较研究

用自建体外快速扩增人γδＴ细胞法，对正常人γδＴ细胞和常规ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ细胞的生物学特性比较。结果：γδＴ细胞在体外的增殖能力、生存时间、细胞毒活性明显优于Ｃ－ＬＡＫ；免疫表型分析；γδＴ细胞高表达ＣＤ３、ＣＤ８、ＣＤ２５分化原，不表达或低表达ＣＤ１６、ＣＤ５６，而Ｃ－ＬＡＫ细胞则以ＣＤ１６、ＣＤ５６表型为主；γδＴ细胞经反复冻存，复苏后，上述生物学特性无明显变化。表明，γδＴ细胞作为一种新     

特异性体外扩增人γδT淋巴细胞及其生物学特性的研究

探讨人γδＴ淋巴细胞体外特异性激发的方法，及其杀伤肿瘤细胞的分子机理。方法采用人多发性骨髓瘤细胞株ＸＧ－７细胞作为刺激细胞，与人外周血单个核细胞体外共同培养，激发和扩增人γδＴ淋巴细胞。以流式细胞仪或间接免疫荧光技术分析细胞表型；再以５１Ｃｒ４小时释放试验检测γδＴ淋巴细胞对肿瘤细胞的杀伤效应。结果（１）采用本培养系统，可以使来自健康人或肿瘤患者的外周血γδＴ淋巴细胞得以选择性激发和扩增，由４．８％±３．４％增加至４６．０％±８．３％，在白细胞介素２（ＩＬ－２）的作用下，能迅速、大量地增殖，３周内可达１０１０以上数量级。（２）所扩增的γδＴ淋巴细胞，对肿瘤细胞株（天然杀伤细胞敏感株Ｋ５６２和淋巴因子激活的杀伤细胞敏感株Ｄａｕｄｉ）皆可介导高效杀伤活性，而对正常淋巴母细胞则无明显细胞毒作用。（３）抗热休克蛋白（ＨＳＰ）－７０单克隆抗体可阻断γδＴ淋巴细胞对ＸＧ－７细胞的反应。结论本室建立的人γδＴ淋巴细胞体外激发、扩增的方法，具有简便、迅速、重复性好的特点，对肿瘤细胞具有广谱的细胞毒活性，在肿瘤的过继免疫治疗中具有潜在的临床应用价值。     

不同T细胞亚群在抗结核杆菌感染中的作用

观察ＣＤ＾４αβ细胞和γδＴ细胞对结核杆菌不同抗原的增殖反应，以及活动性肺结核患者外周血中这两类Ｔ细胞各的数量和功能的变化。方法用Ｍｔｂ分泌性蛋白抗原和耐热性低分子多肽抗原刺激健康人和肺结核患者的外周血Ｔ细胞，用荧光标记特异性单抗在流式细胞仪上检测新鲜分离和培养１０ｄ后的细胞表型，以计数扩增的Ｔ细胞亚群数量。结果活动性肺结核患者外周血中ＣＤ４＋αβＴ细胞的数量比正常对照明显减低，而γδＴ细胞的数量     

再生障碍性贫血患者细胞免疫功能及抗T细胞单克隆抗体的…

观察了再生障碍性贫血１６５例的淋巴细胞比值，用ＡＰＡＡＰ法和ＥＬＩＳＡ法测定敢１３８例的Ｔ细胞亚群、８９例ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表态及１６例ＰＢＭＮＣ培养上清的ＴＮＦα水平，用抗Ｔ淋巴细胞单克隆抗体ＳＭＵ３和ＳＭＵ８治疗了ＡＡ患者６３例。结果表明，ＡＡ患者体内细胞免疫功能紊乱，表现为Ｔ细胞亚群比例换衡，ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达增高，ＴＮＦα分泌增加。     

人外周血淋巴细胞化学发光的实验研究

目的研究各种有丝分裂原诱导的Ｌｙ－ＣＬ反应动力学特征和参与ＣＬ反应的细胞类型。方法从正常人外周血分离ＰＢＭＣ、淋巴细胞和Ｍｏ,经各种有丝分裂原诱导,测定和比较ＰＢＭＣ、淋巴细胞和Ｍｏ的ＣＬ反应强度及动力学。结果ＣｏｎＡ、ＰＨＡ、ＳＰＡ和ＰＷＭ均能诱导淋巴细胞产生ＣＬ反应,其最适刺激浓度分别为：ＣｏｎＡ１００μｇ／ｍｌ、ＰＨＡ１００μｇ／ｍｌ、ＳＰＡ１２５μｇ／ｍｌ、ＰＷＭ＞８００μｇ／ｍｌ。用平皿粘附法去除ＰＢＭＣ中的Ｍｏ,对Ｌｙ－ＣＬ反应无明显影响。Ｍｏ本身对ＣｏｎＡ只能产生缓慢、微弱的ＣＬ反应,而且其动力学与Ｌｙ－ＣＬ具有显著性差异。结论淋巴细胞是有丝分裂原诱导的ＰＢＭＣ－ＣＬ反应的主要产生细胞,Ｌｙ－ＣＬ测定是一种简便、快速检测淋巴细胞早期活化的有效方法。     

特发性肺纤维化患者IL—6水平与T细胞功能的检测

采用生物活性检测法，观察特发性肺纤维化（ＩＰＦ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）自泌白细胞介素６（ＩＬ－６）水平及白细胞分化抗原３（ＣＤ３）单克隆抗体（ＭｃＡｂ）诱导下的Ｔ细胞功能，结果表明：ＩＰＦ患者ＩＬ－６自泌水平明显高于正常对照组（Ｐ〈０．００１）；在体外ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导下，ＩＰＦ患者Ｔ细胞对抗原免疫应签能力与Ｔ细胞在体内的活化过程大致相符，且对ＩＬ－６分泌呈异常高表达，提示ＩＬ－６分泌水     

树突状细胞刺激γδT细胞扩增诱导干细胞移植时GVL研究

目的：研究γδＴ细胞的体外生存期,抗白血病活性及可能引起的移植物抗宿主反应（ＧＶＨＤ）,为自体及异体移植后输注γδＴ细胞诱导移植物抗白血病反应作前期基础研究。方法：对移植患者采集物用ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－４进行培养,使其分化和扩增为树突状细胞（ＤＣ）;然后用ＤＣ和细胞因子ＩＬ－２刺激其ＣＤ４＾＋Ｔ细胞扩增后,协同ＤＣ共同刺激γδＴ细胞扩增,进而用ＭＴＴ比色法和ＣＦＵ－ＧＭ集落培养研究其功能。结果：γ     

柯萨基B3病毒感染对心肌细胞ICAM-1表达和粘附作用的影响

目的：探讨柯萨基Ｂ３病毒（ＣｏｘＢ３）感染心肌细胞对细胞膜细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ－１）表达和与淋巴细胞粘附的影响。方法：采用ＥＬＩＳＡ法观察心肌细胞ＩＣＡＭ－１的表达；采用粘附试验和单克隆抗体抑制观察受染心肌细胞与淋巴细胞的粘附。结果：１００和２００ＴＣＩＤ５０／ｍｌＣｏｘＢ３感染心肌细胞２４～４８ｈ，均可明显诱导ＩＣＡＭ－１表达（Ｐ＜０．０５）；增强受染心肌细胞与活化淋巴细胞的粘附（Ｐ＜０．０１，０．０５）。抗白细胞相关抗原１（ＬＦＡ－１）或抗ＩＣＡＭ－１单克隆抗体均可抑制淋巴细胞与心肌细胞的粘附，抑制率为２６．４５％～４０．４６％。结论：ＣｏｘＢ３感染增强受染心肌细胞与淋巴细胞的粘附效应，与病毒感染诱导心肌细胞ＩＣＡＭ－１表达增多有关     

返流性肾病淋巴细胞经活化后CD69、CD71和HLA-DR表达及其意义

操探讨返流性肾病的发病与免疫致病的关系。方法：通过全血体外培养法,对１２例返流性肾病患儿外周血淋巴细胞体外活化,并用流式细胞仪测定淋巴细胞活性化抗原ＣＤ６９、ＣＤ７１和ＨＬＡ－ＤＲ。结果：在分裂原ＰＤＢ或ＰＨＡ刺激下,正常组淋巴细胞与Ｃｏｎｔｒｏｌ组对比,ＣＤ６９＋、ＣＤ７１＋、ＨＬＡ—ＤＲ十显著增殖（Ｐ＜００５）,返流性肾病组则无明显差异（Ｐ＞０．０５,ＣＤ６９除外）。结论：返流性肾病存在细胞免疫调节功能失调,与该病发病密切相关。     

“急淋”白血病细胞与高内皮小静脉及骨髓基质细胞粘附行为的…

采用改进的小鼠肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）冰冻切片粘附结合实验法和ＭＴＴ法，观察白血病患者尤其是Ｂ细胞急性淋巴细胞性白血病（Ｂ－ＡＬＬ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）体外粘附小鼠ＭＬＮ高内皮小静脉（ＨＥＶ）的活性变化及患者骨髓血单个核细胞（ＢＭＭＣ）体外粘附患者骨髓基质细胞（ＳＣ）的活性变化，结果：１Ｂ－ＡＬＬ患者ＰＢＭＣ粘会ＨＥＶ的阳性率和强阳性率均低于正常组；２．经抗淋巴细胞功能相关抗原－１（ＬＦ     

抗人CD3,CD7—PAPs免疫毒素对T细胞的联合杀伤效应

免疫毒素杀伤试验分８组进行。主要采用改进的ＭＴＴ法测定不同浓度的抗ＣＤ３－ＰＡＰｓ、抗ＣＤ７－ＰＡＰｓ１抗ＣＤ３－ＰＡＰｓ＋抗ＣＤ７－ＰＡＰｓ、爽抗ＡＨＴＧ－ＰＡＰｓ杀伤Ｔ细胞的效率，同时以Ｂ细胞作非靶细胞对照。结果证实，两种抗人Ｔ细胞单抗和多抗ＩＴ均具有特异性杀伤Ｔ细胞的作用。     

返流性痛病淋巴细胞经活化后CD69,CD71和HLA—DR表达及其意义

目的：探讨返流性肾病的发病与免疫致病的关系。方法：通过全血体外培养法,对１２例返充性肾病患儿中血淋巴细胞体外活化,并用流式细胞仪测定淋巴细胞活性化抗原ＣＤ６９,ＣＤ７１和ＨＬＡ－ＤＲ。结果：在分裂原ＰＤＢ或ＰＨＡ刺激下,正常组淋巴细胞与Ｃｏｎｔｒｏｌ组对比,ＣＤ６９＋、ＣＤ７１＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋显著增殖（Ｐ〈０．０５）,返流性肾病组则无明显差异（Ｐ〉０．０５,ＣＤ６９除外）。结论：返流性肾病存在细     

葡萄球菌肠毒素A的细胞增殖诱导能力

目的：观察葡萄球菌肠毒素Ａ的细胞增殖诱导能力及其抗肿瘤作用。方法：ＭＴＴ微量酶反应比色法。结果：纯化ＳＥＡ在１０＾－１２￣１０＾－１５ｇ／ｍｌ浓度范围对体外培养的ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞表现了细胞增殖诱导能力,并呈剂量依赖关系,其中１０＾－７￣１０＾０５ｇ／ｍｌＳＥＡ的作用强于最适量（２５μｇ／ｍｌ）ＰＨＡ。在Ｅ／Ｔ为５￣２０：１条件下,１０＾－５ｇ／ｍｌＳＥＡ活化４８小时的ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞对Ｙａｃ－１细胞的杀伤活性高于ＮＫ细胞,但ＳＥＡ未能增强ＢＡＬＢ／Ｃ鼠脾细胞对Ｂ１６细胞的杀伤活性。结论：葡萄球菌肠毒素Ａ具有较强的细胞增殖诱导能力,据此超抗原特性可应用于肿瘤的生物治疗。     

川崎病患者外周血淋巴细胞凋亡降低及其机理的研究

为探讨外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡在川病（ＫＤ）发病中的作用。以正常儿童ＰＢＭＣ为对照,观察ＫＤ患者ＰＢＭＣ体外经ａｎｔｉ－ＣＤ３刺激培养后的凋亡细胞百分率和片断ＤＮＡ分析;测定ＰＢＭＣ体外ＰＨＡ导培养产生ＩＬ－６水平,并利用流式细胞你和斑点杂交检测外周血淋巴细胞Ｐ＾５３基因表达水平。与正常对照比较,ＫＤ患者ＰＤＭＣ体外培养产生ＩＬ－６水平明显增高,凋亡细胞百分率降低,片断ＤＮＡ出现时间延迟,     

口服髓鞘碱性蛋白与T细胞疫苗接种联合诱导免疫耐受防治实验性自身免疫性脑脊髓炎

目的：口服髓鞘碱性蛋白（ｍｙｅｌｉｎｂａｓｉｃｐｒｏｔｅｉｎ,ＭＢＰ）与Ｔ细胞疫苗接种（Ｔｃｅｌｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ,ＴＣＶ）联合应用诱导免疫耐受,以提高特异性的免疫疗法对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ,ＥＡＥ）的防治效果。方法：从ｇｐＳＣＨ／ＣＦＡ诱发ＥＡＥ的ＤＡ大鼠体内取淋巴细胞,体外再以ＭＢＰ刺激,并用ｒＩＬ２促进增殖,反复数个循环,可获得ＭＢＰ特异的Ｔ淋巴细胞系。将此Ｔ细胞系经照射（１５Ｇｙ）灭活处理后,静脉接种至同基因正常ＤＡ大鼠体内,同时给此ＤＡ大鼠多次口服ＭＢＰ诱导耐受,最后以脊髓匀浆／完全福氏佐剂（ＳＣＨ／ＣＦＡ）攻击经上述处理的大鼠,以观察其ＥＡＥ的发病情况。结果：单独口服ＭＢＰ诱导耐受及单独ＴＣＶ处理的ＤＡ大鼠对随后诱发的ＥＡＥ的抑制率分别为６７％和５０％,而将二者联合应用,则抑制率可达８０％。结论：口服ＭＢＰ与ＭＢＰ特异的Ｔ细胞疫苗接种联合应用,可获得更深程度的耐受效果,多种手段联合应用可能成为临床今后通过诱导耐受防治自身免疫病的新策略。     

GM—CSF诱导红白血病细胞向树突状细胞分化及其抗原提呈功能的研究

目的探讨粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）诱导小鼠红白血病细胞分化过程中，树突状细胞的产生及其抗原提呈功能的变化。方法采用流式细胞仪分析、电镜技术和４小时５１Ｃｒ释放法等，进一步观察了ＧＭ－ＣＳＦ的诱导分化作用。结果１００ｎｇ／ｍｌＧＭ－ＣＳＦ处理３天后的ＦＢＬ－３细胞，树突状细胞的特异性标志３３Ｄ１和ＮＬＤＣ１４５的表达阳性率显著升高；同时，ＭＨＣ－Ⅱ、Ｂ７－１、Ｂ７－２、Ｉ－ＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１和ＣＤ４０表达水平均增加；扫描电镜显示ＧＭ－ＣＳＦ处理的ＦＢＬ－３细胞，表面出现许多树突状突起，透射电镜下可见细胞浆内有丰富的线粒体，核呈分叶状。同时，能够显著刺激同种异体Ｔ淋巴细胞增殖，促进ＩＬ－２的产生；可显著提高细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）细胞对ＦＢＬ－３细胞的特异性杀伤活性。结论ＧＭ－ＣＳＦ诱导的红白血病细胞可向树突状细胞分化，本身具有抗原提呈功能。     

口服髓鞘碱性蛋白与T细胞疫苗接种联合诱导免疫耐受防治？…

目的：口服髓鞘碱性蛋白（ｍｙｅｌｉｎ ｂａｓｉｃ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＢＰ）与Ｔ细胞疫苗接种（Ｔ ｃｅｌｌ ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ，ＴＣＶ）联合应用诱导免疫耐受，以提高特异性的免疫疗法对实验性自身免疫性脑脊髓膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，ＥＡＥ）的防治效果。方法：从ａｐＳＣＨ／ＣＦＡ诱发ＥＡＥ的ＤＡ大鼠体内取淋巴细胞，体外再以ＭＢＰ刺激，并     

人参皂甙与LAK细胞联合治疗恶性脑胶质瘤的实验研究

目的：探索提高恶性脑胶质瘤治疗效果的新途径。方法：用人参皂甙（Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ,ＧＳ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）协同诱导人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）制成ＧＣ－ＬＡＫ细胞,用ＭＴＴ法测定其对恶性脑胶质瘤细胞（ＢＴ３２５）的杀伤活性,并与ＬＡＫ细胞相比较;结果：效应细胞ＧＳ－ＬＡＫ在增殖数量和杀伤恶性脑胶质瘤细胞活性等方面均优于ＬＡＫ细胞,且ＩＬ－２用量减少;