核苷酸对大鼠心肌[3H]格列本脲结合位点的影响

目的：研究核苷酸类物质对心肌膜[^3H]格列本脲([^3H]Gli)特异性结合位点的影响。方法：制备心肌膜标本，采用竞争结合和／或动力学试验，分别研究ATP、ADP、UDP、AMP和腺苷(Ade)等核苷酸物质对心肌[^3H]Gli结合特性的影响。结果：[^3H]Gli与心肌膜标本呈特异性、可逆性结合，非标Gli可剂量依赖性地取代[^3H]Gli与心肌膜标本的结合，IC50值为195nmol／L。在相同条件下，ATP、ADP和LIDP均可抑制[^3H]Gli结合，IC50值分别为1．68、O．80和2．08mmol／L，；而AMP和Ade对心肌[^3H]Gli结合无明显影响。动力学试验表明：[^3H]Gli与心肌膜标本的结合和解离均符合一级动力学，ATP、ADP和UDP能减慢[^3H]Gli与心肌膜结合，并降低最大结合容量，但不影响解离动力学过程。结论：ATP、ADP和UDP可诱导SUR构象的改变，从而对心肌[^3H]Gli特异性结合位点具有负性变构调节作用。     

芦丁拮抗血小板活化因子与受体结合的作用

目的　观察芦丁对血小板活化因子(PAF)与受体结合的拮抗作用。方法　以放射配基结合试验观察[3H]PAF与家兔血小板受体特异性结合的作用;体外以分光光度法测定PAF介导血小板黏附的强度;以Fura- 2荧光分光光度法测定PAF介导的兔多形核白细胞(PMNs)内钙离子浓度的升高。结果　芦丁可浓度依赖地抑制1、2、4 nm ol/L [3H]PAF与血小板受体的特异性结合,其IC50 分别为7.3、8.7、17.2 mm ol/L ;芦丁可明显抑制PAF介导的血小板黏附,IC50 为1.5 1mm ol/L;芦丁浓度为6 8.2～5 4 6 μm ol/L 时可浓度依赖地抑制PAF介导的PMNs内游离钙浓度的升高。结论　芦丁具有抗PAF作用,为一种新的PAF受体拮抗剂。     

高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响

目的：探讨高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响。方法：利用HG预处理人体主要的炎症细胞多形核白细胞(PMN),测定PAF刺激下PMN产生的炎症介质IL-1B、IL-6、IL-8、TNF-α和白三烯B4(LTB4)。结果：PAF可刺激PMN产生炎症介质TNF-α、LTB4;HG能完全抑制PAF所致的PMN产生TNF-α,HG能部分抑制PAF所致的PMN产生LTB4;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6及IL-8无影响。结论：HG作为PAF拮抗剂,可抑制炎症介质产生而发挥抗炎作用。     

硝普钠对大鼠肾组织块细胞增生及蛋白合成的双向性作用以及环鸟核苷酸环化酶特异性抑制剂ODQ对其影响

目的,探讨一氧化氮（NO）对孵育的肾组织块细胞增生和蛋白合成的影响。方法：取正常Wistar大鼠肾组织块40－70mg,置于Krebs-Henseleit溶液中,放入37度恒温并带有摇床（频率100次／分）的孵 箱中孵育2h,孵育液中持续通入混合氧（O2：CO2＝95：5）,细胞增生和蛋白合成分别采用[^3H]－胸腺嘧啶和[^14]－亮氨酸掺入法测定。结果：本研究结果显示,低浓度硝普钠（SNP,0．5umol.L^-1)分别引起[^3H]－胸腺嘧啶和[^14C]－亮氨酸掺入增加（P＜0．01）,而高浓度SNP（50－500umol.L^-1)显著抑制[^3H]－胸腺嘧啶和[^14C]－亮氨酸掺入（P＜0．01）ODQ（1－H－[1,2,4]oxadiazolo[4,3-1]quinoxalin-1-one)可显著防止SNP对[^3H]-胸腺嘧啶和[^14H]－亮氨酸掺入的刺激作用（P＜0．01）,而对高浓度SNP所导致的[^3H]胸腺[嘧啶和－[^14C]－亮氨酸掺入抑制作用无影响。结论：本研究结果提示NO对肾脏细胞增生和蛋白合成有双向性调节作用,其刺激作用可能由cGMP介导。     

肾上腺素致心肌细胞肥大的机制

目的：探讨肾上腺素致心肌细胞肥大中的机制。方法：在培养新生大鼠心肌细胞上,通过测量心肌细胞表面积和[^3H]—Leu的掺入量来判断心肌细胞肥大。结果：肾上腺素能明显增加心肌细胞表面积和[^3H]—Leu的掺入量,α受体阻滞剂(酚妥拉明)、β受体阻滞剂(心得安)、百日咳毒素(FIX)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂(calphostin C)均可抑制肾上腺素诱导的心肌细胞表面积和[^3H]—Leu的掺入量增加。结论：肾上腺素诱导的心肌细胞肥大与肾上腺能受体(α受体和β受体)激动有关,并通过G蛋白和PKC介导。     

不同剂量抗纤复方药物血清对正常大鼠肝细胞增殖与活力的影响

目的：探讨大鼠给予不同剂量抗纤复方药物后其血清对培养正常大鼠肝细胞增殖与活力的影响。方法：常规培养在鼠肝细胞，用5、10与20倍剂量抗纤复方药物血清分别温育肝细胞48h，同时以对照血清作为参照，用[^3H]-TdR掺入法测定细胞增殖，[^3H]-Pro掺入法测定细胞活力。结果：各剂量组抗纤复方药物血清均能增加肝细胞[^3H]－TdR（20％的20倍剂量组除外）和[^3H]-Pro掺入量，其中10％的10倍剂量抗纤复方药物血清作用最满意。结论：抗纤复方药物血清能促进正常肝细胞增殖和活力，最佳剂量为10倍剂量。     

参附注射液对肺组织表面活性物质合成的影响

目的：探讨参附注射液对肺表面活性物质合成(PS)的影响。方法：采用无血清成年大鼠肺组织培养，液体闪烁计数测定肺组织[^3H]胆碱掺入量，化学定磷法及薄层层析法测定总磷脂(TPL)及磷脂酰胆碱(PC)。结果：参附注射波以剂量依赖方式促进肺组织[^3H]胆碱的掺入，并提高肺组织总磷脂、PC的含量及PC／TPL比值，该效应可被蛋白激薄C(PKC)抑制剂H7和钙调蛋白抑制剂W7阻断。人参总皂甙及单体Rb1，Rgl均可促进[^3H]胆碱的掺入。结论：参附注射液可以促进PS的合成，其效应有赖于PKC及钙调蛋白的介导，人参皂甙是参附注射液促PS合成的有效成分之一。     

血小板激活因子对小鼠脾细胞增殖以及产生IL—2,NKCF和CSF的影响

本文研究了PAF对BALB/c小鼠脾细胞增殖以及产生IL-2,NKCF和CSF的影响。[~3H]TdR掺入法检测脾细胞增殖结果表明PAF在10~(-10)～10~(-7)mol/L范围内显著抑制ConA诱导的脾细胞增殖。用CTLL-2细胞测定IL-2,YAC-1细胞检测NKCF,小鼠骨髓细胞测定CSF,结果表明当PAF浓度为10~(-7)mol/L时,三种因子的产生均被明显抑制。PAF对小鼠脾细胞功能的抑制可能与其广泛的病理生理作用有关。     

AP921抗炎机制的研究

目的观察特异性的血小板激活因子(platelet-activatmg factor,PAF)受体拮抗剂AP924的抗炎机制.方法观察经PAF受体拮抗剂(AP921,10-6M)预处理的人体多形核白细胞(PMN).在PAF刺激下,产生炎症性介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、LTB4及超氧自由基的改变,探讨AP21的抗炎机制结果PAF可刺激PMN产生炎症介质IL-8、TNF-α、LTB4及超氧自由基;HG能完全抑制PAF所致的PMN的IL-8产生,HG能部分抑制PAF所致的PMN的TNF-α、LTB4及超氧自由基产生;PAF和H(G均对PMN产生IL-Iβ、IL-6无影响.结论AP921是通过PAF受体抑制炎症细胞产生炎症介质而发挥抗炎作用.     

Sm^3＋及其柠檬酸配合物与人红细胞的相互作用

目的：研究了Sm^3 及其柠檬酸配合物[Sm(Cit)2]^3-与人红细胞的相互作用。（2）方法：利用分光光度屯Sm^3 及其柠檬酸配合物[Sm(Cit)x]^3-与人红细胞相互作用的相对溶血率。（3）结果：稀土离子和人红细胞的作用曲线与其柠檬酸配合物的作用曲线不同。（4）结果：溶血与浓度和物种有关。     

M3R介导逼尿肌细胞收缩的信号传导途径的实验研究

目的 探讨M3R介导逼尿肌细胞收缩的信号传导途径。方法 MR非选择性的激动剂（carbachol)、拮抗剂（atropine)及M2R拮抗剂（methoctramine)、M3R拮抗剂（4－DAMP）刺激原代培养人逼尿肌细胞，通过[^3H]掺入法，检测磷脂酰肌醇（PI）的代谢产物[^3H]-IP含量。结果 [^3H]-IP的含量随carbachol刺激浓度的增加而增加；atropine和4－DAMP能显著抑制carbachol诱导的代谢反应（P＜0.01)，而methoctramine不能显著抑制carbachol的作用；atropine与4－DAMP的作用相比无显著性差异（P＞0.05)。结论 M3R与PI分解及信号分子密切相关。     

PAF受体及其信号传导研究进展

血小板活化因子(plateletactivatingfactor,PAF)是一种具有多种生物学活性的内源性磷脂介质,其化学名称为1-0 -烷基-2 -乙酰基-Sn -甘油-3 -磷酸胆碱。PAF在体内主要来源于中性粒细胞,血小板,肥大细胞,吞噬细胞,血管内皮细胞,参与多种生理和病理过程。其生物学效应包括强烈的血小板激活作用、中性粒细胞聚集、趋化产生自由基及“呼吸爆发”、低血压、血液浓缩、血管通透性增加、肺动脉高压、过敏反应等,其在生理方面对生殖系统、心血管系统、中枢神经系统也有一定作用。PAF的这些生物学效应是通过与其受体结合产生的。因此国内外许多学者就PAF受体的分布、亚型、结构与构效关系、理化特征、表达调控及细胞内信号传导机制进行了研究,现概述如下。1PAF受体的组织细胞分布近年来,用[3H] -PAF和PAF受体拮抗剂[3H] -WEB2086进行了配体结合试验,证实了PAF受体存在于人与动物的许多细胞上,如血小板、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、枯否细胞、平滑肌细胞、血管内皮细胞。1991年Honda等建立了豚鼠肺PAF受体的cDNA克隆,并成功的进行了表达。以后相继有人从白细胞、心肌细胞、Eol-1...     

AP921抗炎机制的研究

目的：观察特异性的血小板激活因子（platelet-activating factor,PAF)受体拮抗剂AP921的抗炎机制。方法：观察经PAF受体拮抗剂（AP921,10^-6M)预处理的人体多形核白细胞（PMN）,在PAF刺激下,产生炎症性介质IL-1β、IL-6,IL-8,TNF-α、LTB4及超氧自由基的改变,探讨AP921的抗炎机制。结果：PAF可刺激PMN产生炎症介质IL-8、TNF-α、LTB4及超氧自由基;HG能完全抑制PAF所致的PMN的IL-8产生,HG能部分抑制PAF所致的PMN的TNF-α、LTB4及超氧自由基产生;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6无影响。结论：AP921是通过PAF受体抑制炎症细胞产生炎症介质而发挥抗炎作用。     

人参皂苷Re对ADP、PAF、AA诱导家兔血小板聚集功能的影响

[目的]研究人参皂苷Re对血小板聚集功能的影响。[方法]采用体外实验通过Born法观察人参皂苷Re对二磷酸腺苷钠盐(ADP)、血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集率的影响。[结果]人参皂苷Re体外抑制ADP、PAF、AA诱导的家兔血小板聚集差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。半数抑制浓度(IC50)分别为0.197、0.242、0.443 g/L。[结论]人参皂苷Re呈剂量依赖性抑制体外ADP、PAF、AA诱导的血小板聚集,且抗ADP诱导的血小板聚集作用强于PAF、AA。     

TGF-β1及其信号蛋白Smad2,3在大鼠心肌细胞肥大中的作用

目的 探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)及其信号蛋白Smad2，3在诱导大鼠心肌细胞肥大中的作用。方法 培养新生大鼠心肌细胞，用不同剂量TGF-β1刺激，检测[^3H]-Leu掺入量，RT—PCR检测信号蛋白Smad2，3mRNA的表达。结果 不同剂量的TGF-β1均能明显增加心肌细胞[^3H]-Leu掺入量，TGF-β1增加肥大心肌细胞Smad2，3mRNA的表达。结论 TGF-β1能诱导大鼠心肌细胞肥大，信号蛋白Smad2，3在其中发挥了重要作用。     

α3、α7-nAChRs缺损AD模型的建立及茶多酚的干预

目的 建立β-Amyloidpepfides(Aβ)诱导α3、α7-烟碱型胆碱能受体nAChRs受体亚型缺失AD病理模型，探讨Aβ的毒性作用机理，并观察茶多酚(EGCG)的可能干预。方法 纳摩尔Aβ慢性处理PC12细胞建立ct3、唧亚单位缺失细胞模型。用MTT比色法、Annexin V-FITC、配体结合实验、Western Blot、RPA法深入探讨Aβ损伤α3、α7 nAChRs亚型的机制以及EGCG的保护作用。结果 用纳摩尔浓度Aβ1-40和Aβ25-35能明显降低PC12细胞[^125I]α—Bungarotoxin和[^3H]Epibatidine结合位点数量，α3、α7亚单位蛋白和mRNA水平，但不诱导凋亡，却明显抑制MTT。而预先加入10μM EGCG几乎完全抑制Aβ对[^3H]epibatidine和[^125I]α-BTX的结合力的影响，可显著抑制Aβ对α3、α7 nAChRs受体亚单位蛋白的损伤。结论 Aβ诱导nAChRs缺损神经细胞模型，是目前较理想研究AD的细胞模型；EGCG可干预Aβ对nAChRs的神经毒性作用。     

局灶性脑缺血大鼠体内与体外结合[^3H]MK—801放射自显影的差别和意义

目的：比较体内与体外两种结合[^3H]MK－801的方式放射自显影在反映局灶性脑缺血大鼠脑内N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体状态上的差别和意义。方法：线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉,制成局灶性脑缺血模型。以[^3H]MK－801为配基,分别进行体内与体外受体结合实验,然后做放射自显影。结果：体内结合实验中,缺血1h、2h、4h组缺血侧损伤区纹状体、皮层[^3H]MK-801结合位点密度显著高于非缺血侧（P＜0．05）。体外结合实验中,缺血侧半脑[^3H]MK-801结合位点分布与非缺血侧无显著性差别（P＞0．05）。结论：体内受体结合实验可反映局灶性脑缺血大鼠脑内NMDA受体活性的变化,体外受体结合实验仅反映脑内存在的受体的总数量。     

核磁共振法确定4，6—二甲基—5—氨甲基—1—氮二环[3．3．O]庚烷的结构

目的：确定4，6—二甲基—5—氨甲基—1—氮二环[3．3．0]庚烷的构造和构型。方法：核磁共振法，包括氢谱（^1H)，碳谱(^13C)，氢氢相关谱(2D-COSY)，异核多量子相关谱(HMQC)，异核多键相关谱(HMBC)及差谱(NOE)。结果：证实了所合成的4，6—二甲基—5—氨甲基—1—氮二环[3．3．0]庚烷的构造及顺反两种构型。结论：在无对照品的情况厂对新合成的化合物采用多种核磁波谱的方法确定其结构是可行的。     

银杏制剂对大鼠急性肝坏死的保护作用

血小板活化因子 (plateletactivting factor,PAF)是一生物活性很强的脂质介质 ,与内毒素密切相关 [1]。新近我们发现 PAF在急性肝损害中有重要的介导作用[2 ] ,且可被特异性 PAF拮抗剂 WEB2 170 部分阻断。本实验应用具有 PAF拮抗作用的银杏制剂观察对急性肝损害大鼠的保护作用。1　材料与方法1 .1　药物和试剂　银杏制剂 (贵州兴邦制药公司生产 ) ,用前与纤维素混匀后用蒸馏水配制所需浓度 ;PAF标准品购自美国 Sigma公司。PAF受体拮抗剂 WEB2 170 由德国 Zimmer博士惠赠。 D-氨基半乳糖购自重庆医科大学化学教研室。1 .2　器　…     

应用NMDA受体拮抗剂MK-801治疗局灶性脑缺血的实验研究

目的：研究N－甲基－D－门冬氨酸（NMDA）受体拮抗剂MK－801对大鼠局灶性脑缺血模型的治疗作用和治疗时窗,为临床治疗提供依据。方法：采用线栓法阻塞大鼠右侧大脑中动脉制成局灶性脑缺血模型。以[^3H]噻吩环己哌啶（[^3H]TPC）为配基,采用宏观和微观放射自显影术观察不同时间缺血组和给药组NMDA受体通道的活性变化。结果：缺血前及缺血2h内给予MK－801（0.8mg/kg体重）可有效拮抗NMDA受体的过度激活。而缺血3h后给药则无此作用。结论：MK－801对局灶性脑缺血的治疗时窗在3h以前。