羟基红花黄色素A抑制PAF诱发的家兔血小板活化的研究

目的观察了红花活血化瘀有效成分羟基红花黄色素A(HSYA)抑制血小板活化因子(PAF)诱发的家兔血小板粘附、5-羟色胺(5-HT)释放及血小板内游离Ca2 浓度升高的作用.方法荧光分光光度法检测PAF激活血小板释放的5-HT,Fura-2荧光分光光度法观察PAF诱发家兔血小板内游离Ca2 浓度的升高及以分光光度法检测PAF所致家兔血小板粘附性的升高.结果 479.6～1918.3 μmol/L的HSYA抑制PAF诱发的家兔血小板粘附呈明显的量效关系; 280～1320 μmol/L的HSYA抑制PAF诱发的家兔血小板5-HT释放呈明显的量效关系; 6.29～201.2 μmol/L的HSYA抑制PAF诱发的家兔血小板内游离Ca2 浓度的升高呈明显的量效关系.结论 HSYA 可明显抑制PAF诱发的家兔血小板粘附、5-HT释放及血小板内游离Ca2 浓度升高.     

老鹳草素对血小板聚集和血小板-中性粒细胞之间相互作用的影响

目的 研究老鹳草素抗血小板聚集作用及其对血小板与中性粒细胞之间相互作用的影响.方法 采用Born方法观测老鹳草素在体内和体外对家兔血小板聚集功能的影响,运用玫瑰花结实验测定血小板与中性粒细胞的黏附反应,以Fura-2-AM为荧光指示剂,检测老鹳草索对激活的血小板内钙水平的影响.结果 老鹳草素在体外呈浓度依赖性明显抑制花生四烯酸(AA)、腺苷二磷酸(ADP)及血小板活化因子(PAF)诱导的血小板聚集功能.其半数抑制浓度(IC50)分别为2.4、0.4和1.1μmol/L;5 mg/kg的老鹳草素灌胃亦明显抑制AA、ADP和PAF诱导的血小板聚集;老鹳草素显著降低洗涤血小板内钙离子浓度、减少细胞外钙内流及内钙释放,其IC50分别为71.9、84.9、62.9 μmol/L.老鹳草素明显阻抑凝血酶激活的血小板与中性粒细胞之间的黏附作用,并抑制肉豆蔻佛波醇(fMLP)激活的中性粒细胞上清液诱导的血小板聚集功能,其IC50分别为3.2和10.2 μmol/L.结论 老鹳草素明显抑制血小板聚集功能,降低血小板内钙水平,同时阻抑血小板与中性粒细胞之间的相互作用.     

高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙抗血小板活化因子的竞争抑制实验

探讨槲寄生抗血小板活化因子(PAF)的有效活性成分高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)的作用机制。方法：利用不同浓度HG对^[3H]PAF结合的竞争抑制实验。结果：HG能够将^[3H]PAF置换下来,且置换呈剂量依赖性和饱和性的特点。结论：HG是通过PAF受体而发挥特异性的PAF拮抗剂作用。     

人参皂苷Re对ADP、PAF、AA诱导家兔血小板聚集功能的影响

[目的]研究人参皂苷Re对血小板聚集功能的影响。[方法]采用体外实验通过Born法观察人参皂苷Re对二磷酸腺苷钠盐(ADP)、血小板活化因子(PAF)、花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集率的影响。[结果]人参皂苷Re体外抑制ADP、PAF、AA诱导的家兔血小板聚集差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。半数抑制浓度(IC50)分别为0.197、0.242、0.443 g/L。[结论]人参皂苷Re呈剂量依赖性抑制体外ADP、PAF、AA诱导的血小板聚集,且抗ADP诱导的血小板聚集作用强于PAF、AA。     

葶苈子黄酮对血小板激活因子的拮抗作用

目的研究葶苈子黄酮对血小板激活因子(PAF)诱导的家兔中性粒细胞(PMN)和洗涤家兔血小板(WRP)的聚集及黏附作用的影响。方法比浊法观察PAF诱导的PMN(或WRP)聚集;PAF诱导已着色PMN(或WRP)黏附,比色法测定此PMN(或WRP)破膜后溶液吸光度,表示其黏附活性。结果葶苈子黄酮可明显抑制PAF诱导的PMN和WRP聚集及黏附活性的升高(P<0.05)。结论葶苈子黄酮具有拮抗PAF的作用。     

Corilagin抗PAF诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究Corilagin抗血小板活化因子（PAF）损伤人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制．方法用PAF损伤HUVEC,采用MTT法测定Corilagin对HUVEC活性的影响;以Fura-2／AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中t-PA、PAI-1含量的变化．结果1μmol／L的PAF刺激内皮细胞2h后,可明显降低HUVEC的吸光度值,细胞内钙离子浓度升高,PAI-1含量明显升高,t-PA含量无明显变化;50～200μmol／L的Corilagin可升高PAF引起HUVEC吸光度值的降低,呈浓度依赖性显著降低HUVEC内游离钙浓度;Corilagin明显抑制PAF诱导的PAI-1分泌增高,对t-PA水平无明显影响．结论Corilagin对PAF诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生、调节t-PA／PAI-1平衡密切相关．     

20（R）-人参皂苷Rg_3抗血小板活化因子诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨20（R）-人参皂苷Rg3抗血小板活化因子（PAF）损伤人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的保护作用及其机制.方法采用MTT法测定PAF诱导HUVEC活性;用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中t-PA、PAI-1含量.结果 1μmol/LPAF刺激HUVEC 2 h后,可明显降低HUVEC的吸光度值,细胞内钙离子浓度升高,上清液中PAI-1含量明显升高,而t-PA含量无明显变化;20～80μmo/L 20（R）-人参皂苷Rg3可升高HUVEC吸光度值,并呈浓度依赖性显著降低HUVEC内游离钙浓度;20（R）-人参皂苷Rg3降低上清液中PAI-1含量,对t-PA含量无明显影响.结论 20（R）-人参皂苷Rg3对PAF诱导损伤的HUVEC具有抗损伤保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度,抑制PAI-1产生和调节t-PA/PAI-1平衡作用有关.     

GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和胞浆游离钙的影响

[目的]探讨血小板GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS对血小板聚集和血小板[Ca2+]i的影响.[方法]比浊法测定PAG;采用Fura-3/AM荧光探针标记血小板胞浆钙离子,使用共聚焦显微镜观察单个血小板荧光强度的变化,计算机图像系统分析血小板[Ca2+]i的变化.[结果]凝血酶(0.03 U/mL)为激动剂时,血小板PAG(M)为(78.2±12.4)%.在所取的62.5～1 000μmol/L RGDS内的5种浓度下,RGDS可呈浓度依赖性地抑制凝血酶诱导的PAG(M).正常人静息血小板[Ca2+]i荧光强度值为376.1±70.5;凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca2+]i荧光强度值升高为977.9±108.8;GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250 μmol/L)对静息血小板的[Ca2+]i荧光强度值无抑制作用;GPⅡ b/Ⅲa受体拮抗剂RGDS(250μmol/L)作用于血小板后,凝血酶(0.03 U/mL)激动的血小板[Ca2+]i荧光强度值升高受到抑制,抑制率为(9.37±7.5)%.[结论]凝血酶(0.03 U/mL)可以引起血小板的聚集和血小板[Ca2+]i的升高.GP Ⅱb/Ⅲa受体拮抗剂RGDS可以抑制凝血酶(0.03 U/mL)引起的血小板聚集和[Ca2+]i的升高.     

血小板激活因子及其受体拮抗剂与缺血再灌注损伤

<正>血小板激活因子(platelet-activating factor,PAF),由于其能引起血小板聚集而得名,1979年PAF的结构被定为1-o-烷基-2-乙酰基-sn-甘油-3-磷酰胆碱。80年代以后,对PAF的基础研究和临床研究迅速增多,发现血小板激活因子主要通过结合于特异性受体起作用。血小板激活因子受体拮抗剂的种类和品种很多,如CV-3928、CV-6209、WEB-2086、WEB-2170、RP-59227、L-691880、E-5880、BN52021等,可选择性地阻止PAF与其特异性受体结合,阻断由PAF引起的一系列炎症反应。     

血小板激活因子拮抗剂的研究Ⅰ.2,5-二取代四氢呋喃衍生物的合成

根据血小板激活因子(PAF)拮抗剂的结构特点和受体的模拟构象,设计并合成了8个以四氢呋喃为母核,在2、5位有不同取代基的化合物。初步药理实验显示,这些化合物对PAF诱导的兔血小板聚集(体外)均有不同程度的拮抗作用。其中化合物V_3、V_7在浓度为3×10~(-5)mol/L的抗擬作用(PAF:10~(-8)mol/L)分别为100.0%和90.9%。     

单采血小板与手工分离血小板的质量比较

目的:对单采血小板和手工血小板的含量进行检测,评价两种血小板的质量。方法:对197袋手工血小板、77个治疗量的单采血小板进行血小板、RBC和WBC含量检测,了解其达标情况;对76例输注患者根据临床症状进行疗效评估。结果:单采血小板的血小板平均含量为(2.23±0.54)×1011,合格率为74.03%;手工血小板平均含量为(0.62±0.13)×1011,合格率为84.26%;两种血小板的RBC平均含量超过质量标准,WBC平均含量低于质量标准。输注单采血小板和手工血小板的患者分别有87%和80%能够明显改善症状。结论:手工血小板计数含量高于单采血小板,临床疗效与之接近,在临床上可合理充分使用。     

体外循环对血小板代谢的影响

本文检测了10例体外循环患者血浆内TxB_2、6—酮—PGF_(1a)、PF_4及vWF 的浓度变化,结果为:TxB_2于肝素化后及转流开始出现第一次高峰,转流结束及鱼精蛋白中和后出现第二次高峰,术后2h 恢复正常,6—酮—PGF_(1a)无显著性改变;PF_4于转流后开始升高,转流结束达高峰,术后24h 恢复正常;vWF 于转流结束开始升高,术毕与术后2h 为高峰,24h 恢复正常.这—研究有利于判断体外循环中血小板的功能变化。     

硫代硫酸钠抑制血小板聚集的实验研究

以硫代硫酸钠为实验样品，观察其对血小板聚集功能和膜糖蛋白Ⅲ的影响。结果：ＳＴＳ明显抑制以ＡＤＰ为诱导剂的ＰａｇＴ（Ｐ＜０．０５），而且与药物浓度呈量效关系。ＳＴＳ又使ＧＰⅢ，测得量下降（Ｐ＜０．０５），，其下降程度与血小板聚集抑制率呈正相关（ｒ＝０．５７，Ｐ＜０．０５）。     

慢性肾功能不全患者3项血小板指标的观察

目的 :观察和分析慢性肾功能不全时 3项血小板指标的改变。方法 :用 MICRO- OT- 1 8型全自动血细胞分析仪对 72例慢性肾功能不全患者的平均血小板体积 ( MPV)、血小板计数( BPC)和血小板压积 ( PCT)进行了测定 ,并与 50例正常人的检测值作对照。结果 :发现尿毒症患者的 MPV比对照组明显缩小 ,且血肌酐 ( Scr)越高 ,MPV越小。氮质血症患者的 MPV与对照组无显著性差异 ;BPC和 PCT只在 Scr≥ 1 0 0 0 μmol/ L的尿毒症组比对照组显著减少。结论 :尿毒症患者所具有的出血倾向 ,可能与 MPV的变小有一定关系     

血液病患者血小板输注无效原因探讨及预防

目的：探讨输注血小板无效的原因。方法：观察131例血液病患者和造血干细胞移植患者的662例次单采血小板输注情况及效果，并分析其影响因素。结果：急性白血病（AL）组、再生障碍性贫血（AA）组、特发性血小板减少性紫癜（ITP）组血小板输注有效率分别为66．49％、71．19％、50．67％（P〈0．05）；AL、AA组中发热患者输注有效率低于未发热患者（P〈0．05）；AL患者脾脏肿大与否及是否发生DIC，血小板输注有效率有显著性差异（P〈0．05）；外周造血干细胞移植（HSCT）组和骨髓移植组血小板榆注有效率分别为52．54％、38．22％（P〈0．05），而HSCT组中的死亡者与未死亡者输注有效率分别为23、21％和52．91％（P〈0．05）。结论：引起血小板输注无效的病因复杂。应视患者一般状况、出血情况、治疗方案及血小板计数综合判断并选择适宜时机输注血小板，避免或减少血小板输注无效的各种原因，提高血小板输注有效率。     

ITP患者骨髓及血液检测指标与疗效关系的探讨

目的：为观察血小板表面相关抗体Ｇ（ＰａＩｇＧ）、外周血血小板计数（ＢＰＣ）、平均血小板容积（ＭＰＶ）、骨髓巨核细胞计数（ＭＫ）与产板型巨核细胞比例（ＰＰＭＫ）对特发性血小板减少性紫癜（ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｏｐｅｎｉｃｐｕｒｐｕｒａ,ＩＴＰ）患者疗效的预计价值。方法：采用Ｃｏｕｌｔｅｒ全自动血球分析仪及双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法等,对７３例ＩＴＰ患者治疗前和治疗后的ＢＰＣ、ＭＰＶ、     

瞬时受体电位M7通道与血小板源性生长因子和5-HT促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖相关性的研究

目的：探讨瞬时受体电位M7通道（transient receptor potential melastatin 7, TRPM7）在血小板源性生长因子（platelet derived growth factor, PDGF）和5-羟色胺（5-hydroxytryptamine, 5-HT）诱导的肺动脉平滑肌细胞（pulmonary artery smooth muscle cells, PASMCs）异常增殖中的作用。方法：利用贴块法和酶解法分离大鼠PASMCs。采用RT-PCR、Western blot和全细胞膜片钳技术观察TRPM7在PASMCs中的功能性表达。利用TRPM7阻断剂2-APB,采用MTT的方法检测TRPM7对PDGF和5-HT诱导的PASMCs异常增殖的作用。结果：RT-PCR、Western blot结果显示,TRPM7在大鼠PASMCs中有mRNA和蛋白表达。利用膜片钳技术检测到TRPM7电流,且PDGF可上调TRPM7内、外向电流。100 μmol•L^-1 2-APB可抑制PDGF和5-HT引起的大鼠PASMCs异常增殖。结论：TRPM7可能参与PDGF和5-HT诱导的大鼠PASMCs的增殖,有可能成为肺动脉高压临床治疗新的靶点。     

脂蛋白（a）对血小板蛋白激酶C作用的实验研究

目的：研究脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］对血小板血栓形成的作用及其机理。方法：制备健康成人血小板，观察施加不同浓度Ｌｐ（ａ）、作用不同时间后，血小板（ＰＬＴ）膜、浆蛋白激酶Ｃ（Ｍ－ＰＫＣ、Ｐ－ＰＫＣ）的变化，同时设凝血酶阳性对照组和不加Ｌｐ（ａ）及凝血酶的阴性对照组，并对检测结果做统计学分析。结果：血小板Ｐ－ＰＫＣ活性随着Ｌｐ（ａ）浓度的增高而逐渐降低，当Ｌｐ（ａ）浓度为０．５５ｍｇ／ｍｌ时，Ｐ－ＰＫＣ下降最为明显，与阴性对照组相比下降约为４３％，有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）；Ｍ－ＰＫＣ活性随着Ｌｐ（ａ）浓度的增高而逐渐增高，在Ｌｐ（ａ）浓度为０．０８３ｍｇ／ｍｌ时，Ｍ－ＰＫＣ开始明显增高，与阴性对照组相比增高近２倍，随着Ｌｐ（ａ）浓度的进一步升高，Ｍ－ＰＫＣ增高更为明显，差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。另外，随着Ｌｐ（ａ）与ＰＬＴ作用时间的延长，Ｐ－ＰＫＣ逐渐下降，Ｍ—ＰＫＣ逐渐上升，与空白对照组相比其时相差异均非常显著（Ｐ＜０．０１）。结论：Ｌｐ（ａ）能激活ＰＬＴ，使其Ｍ—ＰＫＣ增高，Ｐ－ＰＫＣ下降，且随着浓度增高和作用时间的延长该作用增强，故Ｌｐ（ａ）在血栓形成早期起重要作用，对血栓性疾病的发生有重要意     

大蒜素和海波联合作用对血小板粘附功能的影响

用玻球法测定大蒜素、海波和联合给药对人血小板粘附功能的作用。实验结果指出,大蒜素、海波和联合给药组均能降低血小板粘附率(AdhR)(P<0.01),联合给药组效果更显著。提示大蒜素和海波联合使用其作用可优越于单独给药。     

川芎嗪抑制体外循环中血小板活化的实验研究

本文采用犬实验研究围术期体外循环１０个时段血小板数量、聚集功能、代谢产物、活化标志蛋白和超微结构。结果显示：（１）体外循环造成血小板活化，从而使血小板数量下降，聚集功能降低，花生四烯酸代谢旺盛，ＴＸＢ２／６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１２比值升高，血小板表面ＧＭＰ—１４０升高，电镜下血小板伪足增多、破碎、脱粒和微管扩张；（２）川芎嗪能降低这些变化的程度，使血小板得到保护，而不影响血液动力学；并能减少鱼精蛋白的量．并从血小板内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ含量变化探讨了川芎嗪的作用机制。