蜂毒素对大鼠血小板内钙浓度的影响

应用Ｆｕｒａ－２作为荧光试剂，测定大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度变化。蜂毒素１．５ｍｇ／Ｌ使血小板细胞内Ｃａ~（２＋）浓度增加；悬液中加入ＣａＣｌ＿２１ｍｍｏｌ／Ｌ，血小板细胞内Ｃａ~（２＋）继续增加。维拉帕米３．１２５ｍｇ／Ｌ作用５ｍｉｎ后，蜂毒素仍可使血小板内Ｃａ~（２＋）增加．但加入ＣａＣｌ２血小板Ｃａ~（２＋）的浓度不再增加。提示蜂毒素促进大鼠血小板细胞内Ｃａ~（２＋）的释放和细胞外Ｃａ~（２＋）进入细胞内。     

心肌亚细胞Ca^2＋分布电镜细胞化学定位研究

应用Ｃａ￣（２＋）细胞化学探针—焦锑酸钾技术，结合电镜Ｘ线电子探针显微分析技术，研究心肌细胞内Ｃａ￣（２＋）定位、分布。结果：正常心肌细胞Ｃａ￣（２＋）以细小颗粒形态主要位于肌浆网腔、肌膜、细胞核，而胞浆和线粒体Ｃａ￣（２＋）分布少。Ｘ线电子探针证实沉淀颗粒主要为Ｃａ￣（２＋），直接证实心肌亚细胞Ｃａ￣（２＋）的高度隔空化分布，为进一步深入研究心肌缺血再灌注等Ｃａ￣（２＋）异常代谢变化提供新的研究方法。     

大鼠脑挫伤后脑不同部位细胞和线粒体内的钙含量变化

用原子吸收分光光度法（ＡＡＳ）及比色法分别测定了脑挫伤后８ｈ大鼠各脑区细胞内钙（Ｃａｉ）、组织总磷（Ｐｔ）、线粒体钙（Ｃａｍｔ）、线粒体（Ｐｍｔ）的含量变化，结果表明原发损伤可使多数脑区的细胞受体影响并发生Ｃａ＾２＋内流，局部伤情影响着Ｃａ＾２＋内流程度；内流Ｃａ＾２＋多是以结合形式沉积于胞浆等部位以维持胞内Ｃａ＾２＋浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）稳定，蛋白质是可能的主要结合剂；但严重的Ｃａ＾２＋内流将     

黄腐酸和超氧阴离子对软骨细胞内钙离子浓度的影响

目的：为探讨病区黄腐酸（ＦＡ）和活性氧自由基可能引起大骨节病，我们测定了在ＦＡ和超氧自由基（）作用下，软骨细胞内钙离子浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）随时间的变化。方法：应用萤光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定细胞内钙离子浓度并用下式计算：［Ｃａ￣（２＋）］ｉ＝Ｋｄ（Ｆ－Ｆ＿（ｍｉｎ））／（Ｆ＿（ｍａｘ）－Ｆ）。结果：作用４５ｍｉｎ后，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ从１．６２×１Ｏ￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ升达１．１８×１０￣（－６）ｍｏｌ／Ｌ；ＦＡ作用４ｈ后，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ从３．７８×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ升达５．５１×１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ。结论：说明ＦＡ与·有相似的促进［Ｃａ￣（２＋）］ｉ升高的作用，［Ｃａ￣（２＋）］ｉ的升高将造成软骨细胞损伤，而软骨坏死是大骨节病的重要病理特症之一。     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ２＋浓度进行了测定。结果表明：ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％。胞浆内游离Ｃａ２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

神经元缺血坏死与细胞外液中不同Ca^＋浓度的关系

目的 探讨缺血时细胞外不同Ｃａ＾２＋浓度对神经细胞坏死程度的影响。方法 使用体外培养１２－１４天大鼠大脑皮神经细胞,随机分为正常对照组（８例）;单纯缺血组（８例）;较高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）高Ｃａ＾２＋浓度组（８例）。检测各组神经细胞内总钙（ＴＣＡ＾２＋）,游离钙（Ｃａ＾２＋ｉ）及细胞外液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）浓度变化。结果 单纯缺血组,较高Ｃａ＾２＋浓度组,高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液中ＬＤＨ均高于正常对照组（Ｐ〈０．０５）,同时高Ｃａ＾２＋浓度组,较高Ｃａ＾２＋浓度组细胞内ＴＣａ＾２＋、Ｃａ＾２＋ｉ及外液ＬＤＨ浓度均高于缺血组。结论 脑缺血时,随着细胞外液中Ｃａ＾２＋浓度增设,神经细胞内钙沉积增加,从而加速神经细胞死亡。     

血管平滑肌α肾上腺素受体触发Ca~2 运动的研究

血管平滑肌α肾上腺素受体触发Ｃａ￣２＋运动的研究课题负责关永源（中山医科大学药理学教研室；广州，５１００８９）该项研究采用离体血管条收缩，Ｃａ￣２＋内流子外溢及Ｆｕｒａ－２荧光测定胞浆Ｃａ￣２＋瞬即变化等技术，研究血管平滑肌α肾上腺受体触发Ｃａ￣２＋...     

降钙素基因相关肽对人主动脉平滑肌增殖的影响

以人主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）为模型，用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量测定法观察了降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）对细胞增殖的影响，并对细胞内Ｃａ＾２＋浓度进行了测定，结果表明，ＣＧＲＰ对人主动脉ＳＭＣ有明显抑制作用，呈浓度依赖性，最佳浓度为１０ｎｍｏｌ／Ｌ，抑制率达４７．４４％，胞浆内游离Ｃａ＾２＋浓度明显降低，提示ＣＧＲＰ降低细胞内Ｃａ＾２＋浓度可能是其抑制ＳＭＣ增殖的作用机制之一。     

缺氧对小鼠心肾Ca~（2＋）─Mg~（2＋）─ATPase及CAT的影响

对４０只小鼠进行常氧及三种低氧的实验．用酶组织化学法观察小鼠心、肾Ｃａ￣（２＋）－Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｃ和ＣＡＴ活性的变化。发现在１２％氧的环境中心肌两种酶活性明显降低．而肾组织Ｃａ￣（２＋）－Ｍｇ￣（２＋）－ＡＴＰａｓｅ在氧浓度为８％时活性下降。结果提示；不同器官酶活性对缺氧的耐受性不同。     

1－烯丙基氯－3诱导神经细胞内游离钙和游离钠离子改变

用鸡胚脑神经细胞对１－烯丙基氯－３引起的细胞内游离Ｃａ~（２＋）、游离Ｎａ~＋的变化进行了研究。结果显示，在１－烯丙基氯－３的作用下，神经细胞内游离Ｃａ~（２＋）、游离Ｎａ~＋浓度随毒物浓度的增加而明显增高，呈显著的剂量－效应关系。细胞内游离Ｎａ~＋的改变在低剂量组无Ｃａ~（２＋）变化明显，细胞外高钾能使细胞内游离钙增加，但对细胞内游离Ｎａ~＋作用不明显。提示１－烯丙基氯－３引起的中毒性周围神经病可能与神经细胞内Ｎａ~＋、Ｃａ~（２＋）增加有关。     

内皮素-1对成纤维细胞内游离钙的影响

目的研究内皮素（ＥｎｄｏｔｈｅｌｉｎＥＴ）对成纤维细胞（ＨＬＦ）内钙离子浓度（［Ｃａ＋２］ｉ）的影响及维拉帕米（Ｖｅｒ）对ＥＴ促［Ｃａ＋２］ｉ效应的阻断作用。方法采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ钙荧光指示剂测定ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度。结果ＥＴ在很短时间内即可明显提高ＨＬＦ细胞内Ｃａ＋２浓度（Ｐ＜０．０１～０．００１）。并且在细胞外液无Ｃａ＋２存在情况下，亦可提高［Ｃａ＋２］ｉ，且有明显的量效关系（Ｐ＜０．０５～０．０１）。同时，Ｖｅｒ对ＥＴ的上述作用具有显著的作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＥＴ对Ｖｅｒ的调控作用是通过［Ｃａ＋２］ｉ转运而产生的。     

高血压病人红细胞变形能力与红细胞ATP酶活性及细胞内离子水平关系的研究

通过观察６６例高血压病（ＥＨ）病人红细胞变形能力（ＥＤ）和红细胞ＡＴＰ酶活性，细胞内离子浓度变化及其相互关系。结果显示，ＥＨ病人红细胞滤过指数（ＩＦ）较对照组明显增高（Ｐ＜０．００１），红细胞膜Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性、细胞内Ｋ＋，Ｍｇ２＋－浓度明显降低（Ｐ＜０．００１），而细胞内Ｎａ＋，Ｃａ２＋浓度明显增高（Ｐ＜０．００１），且随着ＥＨ病程进展而逐渐明显（Ｐ＜０．００１）。ＥＨ病人红细胞ＩＦ与红细胞Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性及Ｋ＋，Ｍｇ２＋浓度呈明显负相关（Ｐ＜０．００１），与Ｃａ２＋，Ｎａ＋浓度呈正相关（Ｐ＜０．００１）。结果提示ＥＨ病ＨＥＤ降低与红细胞膜ＡＴＰ酶活性降低及离子浓度异常有关。     

白介素1对鼠甲状腺细胞钙离子的作用

目的：利用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）观察ＩＬ－１β及ＴＳＨ对鼠甲状腺ＦＲＴＬ－５细胞内Ｃａ２＋的影响，以进一步了解ＩＬ－１β对甲状腺细胞的作用及机制。方法：将待测ＦＲＴＬ－５细胞以Ｆｌｕｏ－３负载，以ＬＳＣＭ扫描测定细胞内Ｃａ２＋，分别加入不同浓度的ＴＳＨ或ＩＬ－１，观察细胞内Ｃａ２＋变化。结果：（１）ＴＳＨ可使细胞内Ｃａ２＋的水平上升，与ＴＳＨ浓度有关。（２）ＩＬ－１β可降低ＦＲＴＬ－５细胞内基础Ｃａ２＋和ＴＳＨ刺激的细胞内Ｃａ２＋的水平。结论：ＴＳＨ对甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统有刺激作用，Ｃａ２＋作为第二信使可介导ＴＳＨ的效应。Ｉ－１β可以通过抑制甲状腺细胞磷酸肌醇／钙离子系统而发挥其抑制效应     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca~（2＋）－Mg~（2＋））－ATP酶的影响

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－Ａｒｐ酶的影响，采用改良的Ｈａｎａｈａｎ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ２＋浓度呈正相关。说明（Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋）－ＡＴＰ酶活性下降时，红细胞变形能力降低，可能与患者红细胞膜蛋白的过度糖化及细胞内Ｃａ２＋浓度的增高有关。     

糖尿病患者血小板游离钙变化与血栓素B2生成的关系

为了探讨糖尿病患者血小板胞浆内游离Ｃａ￣（２＋）浓度（［Ｃａ￣（２＋）］ｉ）与血栓素Ｂ＿２（ＴＸＢ＿２）生成的关系，及其在糖尿病微血管病变发病中的作用，作者用Ｃａ￣（２＋）荧光指示剂ｆｕｒａ－２直接测定２７例糖尿病患者（合并微血管病变苔１３例，无微血管病变者１４例）血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ，并且同步测定ＴＸＢ＿２。结果：以钙载体Ａ＿（２３１８７）诱导，糖尿病组血小板［（Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为１１４７±５２ｎｍｏｌ／Ｌ，高于对照组（８９７±４９ｎｍｏｌ／ＬＰ＜０．０１），且与ＴＸＢ，生成呈正相关：而用花生四烯酸诱导，糖尿病组血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ峰值为３５３±１４ｎｍｏｌ／Ｌ，虽高于对照组（３１２±１６ｎｍｏｌ／Ｌ，Ｐ＜０．０５），但与ＴＸＢ＿２生成未呈显著相关。上述改变在糖尿病有或无微血管病变两组之间比较无显著性差异，提示糖尿病患者血小板［Ｃａ￣（２＋）］ｉ变化可能通过膜磷脂酶环节致使ＴＸＢ＿２生成增多，参与微血管病变的发病。     

慢性缺氧大鼠肺组织钙调素活性研究

为探讨钙调素（ＣａＭ）在慢性缺氧性肺动脉高压发病中的作用，将４０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为四组，Ⅰ组为正常对照组，不接受任何处理。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为实验组，分别间断缺氧１、２、３周，而后采用火焰原子吸收分光光度法及磷酸二酯酶法测定四组大鼠肺组织Ｃａ２＋含量及ＣａＭ活性。结果显示：缺氧１、２、３周均能引起大鼠平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）及肺血管阻力（ＰＶＲ）增高，心输出量（ＣＯ）降低；缺氧大鼠肺组织Ｃａ２＋含量及ＣａＭ活性较正常对照组增高，其中缺氧２周及３周组大鼠肺组织ＣａＭ活性与正常对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），但缺氧１周组大鼠ＣａＭ活性与正常对照组比较差异无统计学意义；肺组织Ｃａ２＋含量与ＣａＭ活性呈明显正相关（Ｐ＜０．０５），提示Ｃａ２＋－ＣａＭ系统在大鼠缺氧性肺动脉高压的发生中起一定作用。细胞内Ｃａ２＋浓度增高，可促使ＣａＭ由细胞骨架移行到细胞浆内，可能是慢性缺氧大鼠肺组织ＣａＭ活性增高的原因之一。     

血管紧张素Ⅱ对培养心肌细胞自发性收缩及［Ca~（2＋）］_i瞬间变化的影响

应用倒置显微镜闭路电视系统及Ｃａ（２＋）敏感的荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的方法，记录培养心肌细胞的自发性收缩及［Ｃａ（２＋）］ｉ，瞬间变化，结果发现：应用血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ，１０－１０００ｎｍ０１／Ｌ）５ｍｉｎ后，心肌细胞收缩频率增加，分别增加了５５％，８３％及１０７％，但同样浓度的ＡｎｇⅡ引起细胞边缘运动的速度减少。ＡｎｇⅡ１０，１００ｎｍｌ／Ｌ引起［Ｃａ（２＋）］ｉ瞬间变化最大值的明显增加，分别增加了１６％和３７％。但对［Ｃａ］ｉ（２＋）瞬间变化的基线水平没有明显的影响。结果提示：１．ＡｎｇⅡ增加心肌细胞搏动频率与增加细胞内游离Ｃａ（２＋）有关；２．ＡｎｇⅡ对心肌细胞收缩及［Ｃａ（２＋）］ｉ瞬间变化的作用可能关系到其影响Ｃａ（２＋）内流或细胞内Ｃａ（２＋）释放的机制，３．ＡｎｇⅡ减少心肌细胞收缩速度的机制值得进一步研究。     

层粘连蛋白对人胃癌细胞内游离钙及钙调蛋白和核DNA含量的影响

本文研究外源性层粘连蛋白与人胃癌细胞膜上其受体介导细胞内Ｃａ２＋浓度及钙调蛋白（ＣａＭ）和ＤＮＡ发生的变化。结果表明，层粘连蛋白可引起细胞内Ｃａ２＋浓度升高和钙调蛋白含量显著升高。同时伴有核ＤＮＡ含量增加。提示外源性层粘连蛋白与质膜上的层粘连蛋白受体结合后可能通过细胞内Ｃａ２＋影响核内ＣａＭ，进而促进ＤＮＡ的合成。该信息通路在层粘连蛋白促进肿瘤细胞粘着，铺展，增殖等生物学效应中可能起重要调节作用。     

金属离子及氨基糖对大鼠肾脏N－乙酰氨基葡萄糖转移酶Ⅲ活性测定的影响

采用反相ＨＰＬＣ荧光测定法对大鼠肾脏Ｎ－乙酰氨基葡萄糖转移酶（ＧｎＴ）Ⅲ活性测定时二价金属离子及氨基糖的影响进行了研究。结果表明：ＧｎＴⅢ必须有二价金属离子激活，最佳激活离子为Ｍｎ￣（２＋）离子，其次为Ｍｇ￣（２＋）离子；二协金属离子对ＧｎＴⅢ的激活作用依次为Ｍｎ￣（２＋）＞Ｍｇ（２＋）＞Ｃｏ（２＋）＞Ｃａ￣（２＋）＞Ｎｉ￣（２＋）＞Ｂａ￣（２＋）＞Ｚｎ￣（２＋）。四种氨基糖（Ｎ－乙酰氨基葡萄糖ＧｌｃＮＡｃ，Ｎ－乙酰氨基半轧糖ＧａＩＮＡｃ，氨基葡萄糖ＧｌｃＮ，氨基半乳糖ＧａｌＮ），除ＧｌｃＮ使ＧｎＴ活性增加外，其余三种对ＧｎＴⅢ均有不同程度的抑制作用。