MUC粘蛋白表达与胃癌

MUC粘蛋白是由胃肠、卵巢等多种上皮细胞分泌的一类高分子量 (>2 0 0kD)糖基化蛋白质 ,对正常粘膜起润滑和保护作用。这些上皮细胞一旦癌变其分泌的粘蛋白的质和量将出现异常。随着近年对分子生物学技术研究的进展 ,使粘蛋白在肿瘤中的异常表达的研究成为可能性。粘蛋白在癌的发生发展中所起的作用被注目[1 ] 。本文就MUC粘蛋白的表达状态与胃癌的相关性 ,尤其表达状态对胃癌诊断、治疗及预后等方面的意义作一综述。1　MUC粘蛋白迄今为止 ,已有 14种粘蛋白基因被鉴定[2 ] ,按HUGO基因委员会命名法 ,分别叫做MUC1,MUC2 ,MUC3A ,MU…     

蛋白糖基化与细胞毒性T淋巴细胞应答

糖基化是已知的蛋白最重要的翻译后修饰。已知的蛋白糖基化有多种类型 ,其中最常见的是发生在天冬酰胺 (Ａｓ ｐａｒａｇｉｎｅ ,Ａｓｎ)的Ｎ 糖基化 (Ｎ ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)和发生在丝氨酸 (Ｓｅｒｉｎｅ ,Ｓｅｒ)和苏氨酸 (Ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ,Ｔｈｒ)的Ｏ 糖基化 (Ｏ ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎ)。糖蛋白中糖基的结构大小不一 ,少者仅一个单糖 ,稍复杂的寡糖链可由 12～ 15个单糖残基衍生物组成 ,甚至可多达 2 0～ 30个单糖残基。糖链的结构类型与其在肽链上共价连接的氨基酸种类有关。蛋白 (肽 )糖…     

核转录因子-κB在慢性气道粘液高分泌大鼠肺组织中的表达及意义

目的　探讨核转录因子κB(NF κB)在大鼠慢性气道粘液高分泌信号转导过程中的作用。方法　 2 4只Wistar大鼠随机分组后分别给予生理盐水吸入 (正常组 )、内毒素 (LPS)雾化吸入(实验组 )及内毒素雾化吸入 吡咯烷二硫氨基甲酸盐 (PDTC)注射 (干预组 ) ,以免疫印迹法及原位杂交技术分别检测各组大鼠肺组织中NF κB及粘蛋白 (MUC) 5AC、MUC2mRNA含量。结果　实验组NF κB、MUC2及MUC5ACmRNA含量与正常组相比明显增高 (P <0 0 5 ) ;干预组中NF κB及MUC2mRNA与实验组相比明显受抑制 (P <0 0 5 ) ,MUC5ACmRNA受抑制程度较小 (P >0 0 5 ) ,与MUC2有明显差异。结论　NF κB参与气道粘液高分泌的信号转导过程 ,但对不同粘蛋白表型存在差异 ,其调控重点更侧重于有基础分泌特性的MUC2。     

6A8α-甘露糖甘酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用。糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连。N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化。这些酶的识别与特性研究有助     

不可分型流感嗜血杆菌脂肽P4诱导气道上皮细胞分泌黏蛋白的机制

目的 研究不可分型流感嗜血杆菌脂肽P4诱导气道上皮细胞分泌黏蛋白MUC5AC的作用及机制。方法培养人气道上皮细胞NCI-H292,用不同浓度的P4孵育细胞,检测粘蛋白5AC(MUC5AC)的分泌及mRNA表达、ROS的产生及肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)的活性;分析Duox1 p47^phox和P67^phox亚基亚细胞转位和表皮生长因子受体(EGFR)的磷酸化。结果0、30、50和100 ng/mL P4作用NCI-H292细胞24 h后,可诱导其分泌MUC5AC并表达其mRNA,并促进p47^phox和P67^phox亚基转位至细胞膜、增高细胞内ROS的含量,同时可上调TACE的酶活性及诱导EGFR磷酸化。NADPH氧化酶抑制剂可抑制ROS产生;而ROS抑制剂处理则可降低TACE的酶活性;沉默TACE表达后可抑制EGFR磷酸化,而EGFR抑制剂处理可降低MUC5AC分泌。结论P4经Duox1/ROS/TACE/ EGFR诱导人NCI-H292细胞分泌MUC5AC。     

6A8α-甘露糖苷酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用.糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连.N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化.这些酶的识别与特性研究有助于对蛋白质糖基化机制与糖链功能的了解.     

MUC1粘蛋白在进展期胃癌中的表达及临床意义

目的检测MUC1粘蛋白在进展期胃癌中的表达,探讨其对胃癌预后的意义.方法采用免疫组化SP法,应用抗MUC1粘蛋白核心蛋白抗体(DF3抗体)检测60例胃癌根治标本及对照组20例胃正常黏膜组织标本MUC1粘蛋白表达.采用χ2检验及Kaplan-Meier生存曲线进行统计分析.结果 MUC1粘蛋白阳性表达率55%(33/60).有淋巴结转移胃癌组MUC1粘蛋白阳性表达率为71.0%(22/31),无淋巴结转移组MUC1粘蛋白阳性表达率为37.9%(11/29),组间差别显著(P<0.05).按PTNM分期,Ⅰ期胃癌的MUC1粘蛋白阳性表达率为20%,Ⅱ期表达率68.8%,Ⅲ期表达率53.3%,Ⅳ期表达率78.6%,Ⅰ期与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期间存在显著统计学差异(P<0.05).经Kaplan-Meier法生存曲线统计表明,MUC1阳性表达组5年生存状况较MUC1阴性组差(Log-Rank检验,P=0.037).结论在进展期胃癌中MUC1粘蛋白表达与淋巴结转移相关,随着胃癌的进展MUC1表达呈上升趋势;MUC1粘蛋白表达提示预后不良.     

糖蛋白糖链结构的研究及临床应用

糖蛋白糖链结构的研究及临床应用兰医一院李晓玲，李定国糖蛋白是机体重要的组成成份，具有复杂的生理功能。凡糖蛋白中糖链的Ｎ一乙酰氨基半乳糖（ＧａｌＮＡｃ）与肽链中丝氨酸或苏氨酸残基的羟基形成α一糖苷键而连接者称为０—连接型糖链。而糖链的Ｎ一乙酰氨基葡萄糖...     

人呼吸道粘液分泌体外实验方法的建立

目的建立研究人类呼吸道粘液分泌的体外实验方法。方法直径小于3mm的小支气管组织(HSBT)剪碎后被均匀地放入24孔培养板中。分别记录基础粘蛋白分泌量(BM)和激发粘蛋白分泌量(SM)，SM用超过BM的百分率表示。在含50nmol／L视黄酸的BEGM与DMEM(1：1)混合液中进行支气管粘膜上皮的原位培养，在带半透膜的插入培养板中培养正常人支气管上皮细胞(NHBE)。MUC5AC粘蛋白ELISA以其多克隆抗体为一抗，绵羊抗兔IgG为二抗，邻苯二甲酰胺显色。酶连二花葙豆凝集素(DBA)试验(ELDBAA)以DBA铺盘以便与粘蛋白结合，用过氧化物酶标记的DBA识别被捕捉的粘蛋白。结果MUC5AC ELISA的敏感性为10ng／ml，而ELDBAA为30ng/ml。经过3h培养，HSBT的基础MUC5AC和DBA粘蛋白分泌量分别为11和19ng／mg组织。原位培养的支气管粘膜上皮细胞3h积聚的粘蛋白分泌量分别为MUC5AC粘蛋白793-1868ng／孔和DBA粘蛋白290-2675ng／孔。NHBE细胞在气液界面形成后的第6d，3h积聚的基础DBA粘蛋白分泌量为22ng／孔。结论:上述组织和细胞培养以及粘蛋白测量方法的建立为呼吸道粘液分泌的研究奠定了良好基础。     

粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中的表达及意义

目的　研究 4种粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中的表达规律并探讨其意义。方法　采用粘蛋白 1(Mucin1,MUC1)、粘蛋白 2(MUC2 )、粘蛋白 3 (MUC3 )及粘蛋白 5AC(MUC5AC)的单克隆抗体 ,应用免疫组化和Westernblot检测对照组胆囊 2 4例 ,胆囊腺瘤样息肉19例。结果　MUC1、MUC2及MUC5AC免疫组化及Westernblot表达在胆囊腺瘤样息肉组较对照组显著增高 (P <0 .0 1) ,而MUC3在腺瘤样息肉组较对照组显著降低 (P <0 .0 1)。结论　粘蛋白在胆囊腺瘤样息肉中呈现非同步表达 ,可能与其属癌前病变有关。     

以MUC1为靶点的肿瘤疫苗的研究进展

Mucin1粘蛋白（以下简称MUC1）是一种Ⅰ型跨膜蛋白,正常情况下主要表达于腺上皮细胞分泌极,呈极性分布,顶端表达。在肿瘤组织中,MUC1异常表达,暴露出正常情况下隐蔽的表位,成为一种理想的抗肿瘤靶分子。目前,已有多家实验室研制出不同种以MUC1为靶点的肿瘤疫苗。     

胃癌及癌前病变组织中MUC6核粘蛋白的表达及其意义

目的　探讨正常胃粘膜、癌前病变组织以及胃癌组织中MUC6核粘蛋白的表达规律 ,及其与患者临床病理因素之间的联系。方法　应用兔抗人MUC6核粘蛋白的抗体和免疫组织化学SP法检测人正常胃粘膜 (n =10 )、癌前病变肠上皮化生粘膜 (n =2 9)和胃癌组织 (n =47)中MUC6核粘蛋白的表达。结果　人正常胃粘膜中胃腺的基底部广泛分布MUC6核粘蛋白 (10 0 % ) ,而肠上皮化生、不典型增生和胃癌组织中的表达阳性率分别为 13 .8%、70 %、44.7%。胃癌组织中MUC6核粘蛋白的表达与胃癌患者的性别、肿瘤的部位和大小、淋巴结转移、肿瘤的分化与浸润、临床分期和Lauren氏分型之间差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　MUC6基因是组成胃粘膜的粘蛋白基因之一 ,在胃癌前病变和胃癌组织中的表达呈下调趋势 ,但与患者的一些临床病理指标之间不存在关联。     

U0126对中性粒细胞弹性蛋白酶介导气道黏液高分泌的影响

目的探讨U0126对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)介导气道黏膜高分泌的影响。方法利用原代培养的大鼠气道上皮细胞，分3组行条件孵育，分别为对照组、加精制猪胰中性粒细胞弹力酶(NE)孵育的处理组；同时加酶和分裂原激活的蛋白酶的激酶(MEK)特异性阻断剂U0126孵育的干预组。孵育24h后行酶联免疫吸附法及膜杂交技术，分别检测培养液的粘蛋白(MUC)含量及细胞MUC5AC转录水平的表达。结果U0126明显降低培养细胞分泌的MUC含量，并从转录水平降低MRU的合成。结论U0126可通过阻断培养的气道上皮细胞信号通路来抑制NE介导气道黏液高分泌。     

复发性翼状胬肉中MUC5AC的表达与泪膜稳定性的相关研究

目的：检测粘蛋白MUC5AC在复发性翼状胬肉组织中的表达水平,初步探讨粘蛋白MUC5AC与翼状胬肉术后泪膜稳定性的相关性。方法：应用SP免疫组织化学染色法检测5例正常结膜组织、6例原发性翼状胬肉组织及22例复发性翼状胬肉组织中粘蛋白MUC5AC的免疫学定位及表达,所有病例术前均检查泪膜破裂时间（BUT）、泪液分泌（Schirmer）试验,分析MUC5AC在复发性翼状胬肉中的表达与BUT、Schirmer实验的相关性。结果：正常结膜组织、原发性翼状胬肉组织及复发性翼状胬肉组织的Schirmer试验、BUT组间差异有统计学意义,P〈0.05;MUC5AC在正常结膜组织、原发性翼状胬肉组织及复发性翼状胬肉组织的表达组间差异有统计学意义,P〈0.05;复发性翼状胬肉组MUC5AC阳性细胞计数与正常结膜组比较差异有统计学意义,P〈0.05;Spearman相关分析,MUC5AC的表达与BUT呈负相关;r=0.616。结论：粘蛋白MUC5AC在复发性翼状胬肉中高表达与翼状胬肉术后泪膜稳定性下降有关。     

粘蛋白在结石性胆囊炎中的变化及意义

目的 探讨不同类型粘蛋白在结石性胆囊炎胆囊粘膜的表达规律及与结石形成的可能关系。方法 采用粘蛋白1（Mucin1,MUC1）、粘蛋白2（MUC2）及粘蛋白3（MUC3）的单克隆抗体，应用免疫组化方法检测对照组胆囊24例，胆固醇结石和胆红素结石胆囊粘膜54例及38例。结果 MUC1在对照组、胆固醇结石组、胆红素结石组阳性率分别为47.1%(10/24），50％（27／54），60.5%(22/38）；MUC2分别为21％（5／24），40.7%(22/54),50%(19/38);MUC3分别为75％（18／24），29.6％（16／54），21.1％（8／38）。结论 粘蛋白与胆囊结石发生有一定关系。     

黏蛋白MUC5AC在慢性阻塞性肺疾病患者气道中的表达及其临床意义

目的 探讨黏蛋白MUC5AC在慢性阻塞性肺疾病(COPD)缓解期气道中的表达及其临床意义.方法 病例分3组,即COPD组,吸烟对照组及正常对照组.取胸外科手术切除的肺叶并分离出气道,分离和培养上皮细胞,采用ELISA定量检测培养上清中的MUC5AC,同时采用RT-PCR检测培养气道上皮细胞中的MUC5AC mRNA水平.结果 正常对照组气道上皮细胞MUC5AC蛋白水平较低,吸烟对照组和COPD组比正常对照组明显升高(P<0.05),同时COPD组也高于吸烟对照组(P<0.05);正常对照组气道上皮MUC5AC mRNA水平较低,吸烟对照组和COPD组比正常对照组明显升高,同时COPD组也高于吸烟对照组(均P<0.05).结论 吸烟和COPD可导致气道上皮MUC5AC的蛋白及mRNA水平明显升高,并且COPD患者稳定期也存在MUC5AC的高分泌状态,MUC5AC黏蛋白的过度分泌是COPD慢性进行性发展的一个重要因素.     

金黄色葡萄球菌肠毒素B激活TACE诱导人鼻黏膜上皮细胞分泌黏蛋白

目的观察金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对人鼻黏膜上皮细胞活性氧(ROS)和肿瘤坏死因子转化酶(TACE)活性的影响,并探讨其在介导黏蛋白MUC5AC分泌中的作用。方法体外培养人鼻黏膜上皮细胞,用不同浓度的SEB孵育细胞0~24 h,采用荧光共振能量转移法检测TACE的酶活性,荧光探针H2DCFDA检测鼻黏膜上皮细胞中活性氧(ROS)的含量,ELISA检测培养上清中MUC5AC的分泌水平。同时采用TACE siRNA干扰或ROS抑制剂NAC处理细胞,观察其在介导MUC5AC分泌中的作用。结果 100 ng/m L SEB作用鼻黏膜上皮细胞15 min后即可上调TACE的酶活性,30~60 min后达到峰值,并持续至2 h;SEB也能增加鼻黏膜上皮细胞内ROS的含量;采用NAPDH氧化酶抑制剂DPI处理后,ROS水平明显减少;ROS抑制剂NAC处理鼻黏膜上皮细胞后,可明显降低TACE的酶活性;30~100 ng/m L SEB能显著诱导鼻黏膜上皮细胞分泌MUC5AC,采用TACE siRNA干扰其表达或抑制剂处理后,可抑制MUC5AC分泌。结论 SEB激活TACE诱导人鼻黏膜上皮细胞分泌MUC5AC。     

NF-κB信号转导通路与胰岛素抵抗

核因子-κB(NF-κB)信号转导通路包括NF-κB、NF-κB抑制蛋白(IκB)和IκB激酶(IKK).其中,NF-κB是一种重要的核转录因子,参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡及物质代谢等多种生物进程.IKK具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,能使多种蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基磷酸化.NF-κB信号转导通路的活化与胰岛素抵抗的发生密切相关.文章就NF-κB在胰岛素抵抗发生中作用作一综述.     

粘蛋白MUC1及同种型MUC1/Y在膀胱癌与膀胱良性病变中的表达及其意义

目的:检测粘蛋白MUC1及其同种型MUC1/Y在膀胱癌和膀胱良性病变表达,探讨其在膀胱癌诊断和免疫治疗中的意义。方法:采用免疫组化SP法和高清晰度彩色医学图文分析系统,对48例膀胱癌组织、45例腺性膀胱炎组织和10例正常膀胱组织(对照组)粘蛋白MUC1及其同种型MUC1/Y的表达,进行检测分析。结果:MUC1在膀胱癌组织、腺性膀胱炎组织中的平均灰度均显著低于正常膀胱组织(P<0.001);MUC1/Y仅在膀胱癌中有表达。结论:MUC1、MUC1/Y作为一种新型的肿瘤标志物,它们在膀胱癌组织的高表达及分布特点,可为膀胱癌诊断和免疫治疗提供实验基础。