大鼠心室肌α1-肾上腺素能受体介导的c-fos、c-myc表达

目的　探讨去甲肾上腺素 (NE)诱导心肌细胞原癌基因的超常表达与适应性心肌肥大的关系及其受体介导和跨膜信号转导的作用。方法　以 10 - 6 mol LNE灌流大鼠离体心脏 1h ,采用逆转录—多聚酶链反应 (RT PCR)方法 ,测定不同实验条件下左心室c fos和c myc表达水平。结果　 10 - 6 mol LNE灌流心脏后c fos和c myc表达均显著增强 ;用 5×10 - 6 mol L的哌唑嗪预先灌流可完全阻断NE诱导的c fos和c myc表达增强的效应 ;分别用 5 0mmol L的新霉素和 10 μmol L的钌红预先灌流心脏 ,可显著抑制NE诱导的c fos和c myc表达。结论　NE经α1 受体介导 ,可诱导心肌c fos和c myc表达增强 ;磷酸肌醇—钙信号系统和二酰基甘油—蛋白激酶C信号系统可能与NE诱导心肌c fos和c myc表达增强有关。     

氯沙坦对高血压大鼠左室原癌基因C-myb mRNA表达的影响

目的　研究氯沙坦 (Losartan)对肾性高血压心肌肥厚大鼠血浆血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )及左室肌原癌基因C -mybmRNA表达的影响 ,探讨AngⅡ受体 (AT1 )拮抗剂逆转左室重构的可能机制。方法　 3 0只 10周龄的Wistar大鼠 ,体重 190～ 2 0 0g ,采用两肾一夹 ( 2KIC)制造肾性高血压模型 ,造模成功后随机分为 3组 ,假手术组 ( 10只 ) ,氯沙坦组 ( 10只 ) ,非治疗组 ( 10只 )。治疗 8周后 ,处死动物 ,采用原位杂交方法检测左心室原癌基因C -mybmRNA的表达 ,并用图像分析仪做半定量分析 ,用放免方法测定血浆AngⅡ的含量。结果　经过 8周治疗后 ,氯沙坦组血压、心肌肥厚大鼠左心室肌原癌基因C -mybmRNA的表达及左室重量指数均明显低于非治疗组 (P <0 0 0 1,P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,但血浆AngⅡ含量明显高于非治疗组及假手术组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论　AT1 受体拮抗剂氯沙坦能有效地降低肾性高血压大鼠肥厚左室肌原癌基因c -mybmRNA的表达 ,这可能是其预防和逆转左室重构的机制之一。     

活血潜阳方对自发性高血压大鼠心肌肥厚组织原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

目的：通过分析左心室心肌原癌基因c—fos和c-myc mRNA及蛋白的表达．探讨活血潜阳方改善自发性高血压大鼠（spontaneous hypertensive rat．SHR）左心室肥厚的作用机制。 方法：以10周龄的SHR为高血压左心室肥厚模型，随机分为SHR模型组．中药大、中、小剂量治疗组，西拉普利治疗组，年龄和性别相匹配的京都（Wistar-Kyoto，WKY）大鼠作为正常对照组，每组5只。灌胃14周后，取大鼠心脏组织，用原位杂交组织化学法和免疫组化法分别检测心肌c—fos和c-myc mRNA及蛋白的表达。 结果：24周龄模型组SHR左心室肥厚心肌的原癌基因c—fos和c—myc mRNA及蛋白的表达与WKY大鼠比较明显增强（P〈0．01）。与SHR模型组比较．大、中和小剂量活血潜阳方组大鼠左心室心肌组织中c—fos和c—myc mRNA的表达下降（P〈0．05）；大、中剂量活血潜阳方可降低c—myc蛋白的表达，但对c-fos蛋白表达的影响与模型组比较，差异未见统计学意义。 结论：活血潜阳方可以下调SHR心肌组织中原癌基因c—myc的表达，可能是改善高血压左心室肥厚的重要机制之一，是否通过对c-fos表达的影响治疗左心室肥厚尚不能确定。     

莲心碱与莲心季铵碱对肾性高血压大鼠左室肥厚逆转作用的比较

目的 探讨中药莲子心中2种异喹啉生物碱--莲心碱(Liensinine,Lien)和莲心季铵碱(Lomsine,Lot)的降压效果以及对肾性高血压大鼠(RHR)左室肥厚(LVH)的逆转作用.方法 二肾一夹造成RHR模型,口服给予Lien和Lot治疗10周,观察治疗前后血压变化情况,并以左室质量与体质量比(LVW/BW)和左室结构参数为指标测定药物对RHR的LVH的逆转情况.结果 Lien和Lot均能对肾性高血压大鼠有效地进行降压,且使RHR增高之LVW/BW值、左室壁(LVW)厚度和室中隔(SI)厚度均得到显著回降.结论 Lien和Lot对RHR大鼠左室肥厚具有一定的逆转作用.     

缬沙坦对两肾一夹高血压大鼠ACE2/ACE表达的影响

目的观察两肾-夹（2K1C）高血压大鼠肾脏、心脏血管紧张素转换酶2（ACE2）／ACE的表达变化。了解缬沙坦对大鼠肾脏、心脏ACE2／ACE表达的影响。方法30只雄性Wistar大鼠随机分为3组：正常对照组（n=10）;2K1C高血压组（n=10）;2K1C＋缬沙坦组（n=10）。免疫组化法检测ACE2／ACE蛋白表达,放射免疫法检测肾脏局部Ang11水平,尾袖法测量大鼠血压。结果①免疫组化ACE2与ACE均显著表达于肾皮质小管管腔与心肌细胞胞质,ACE在2K1C高血压组表达明显增强而ACE2表达降低,2K1C＋缬沙坦组ACE表达显著降低而ACE2表达增强,差异有统计学意义（P=0．000）;②与对照组相比,2K1C高血压组与2K1C＋缬沙坦组肾脏AngⅡ水平均显著升高（P=0．000）;③2K1C高血压大鼠血压较各组均升高（P：0．000）,缬沙坦治疗组血压明显低于高血压组（P=0．000）。结论2K1C高血压大鼠组织中ACE2表达降低而ACE表达增强,缬沙坦可增加组织ACE2表达,降低ACE表达并有效降压。     

佐芬普利对肾血管性高血压大鼠肾脏血管肾张素转换酶2及Mas受体的影响

目的:探讨佐芬普利对大鼠肾血管性高血压?心肌肥厚及肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)及血管紧张素1-7(Ang1-7)受体Mas的影响?方法:清洁型雄性SD大鼠70只,随机分为假手术组(S)20只?2K1C手术组50只?采用两肾一夹法(two-kidney one clip,2K1C)制作肾血管性高血压模型,高血压造模成功大鼠46只,随机分为2K1C + 蒸馏水组(K)23只?2K1C + 佐芬普利组(Z)23只?分别于术后第4?8?12周,无创血压仪套尾法监测血压,二维超声心动图监测心脏结构和功能;术后第8?12周分别处死大鼠取其代偿肾脏,荧光定量PCR检测其ACE2及Ang1-7受体Mas mRNA表达,Western blot技术检测ACE2及Mas蛋白表达?结果:①术后K组各时间段血压均明显升高,Z组较K组血压显著降低(P均< 0.01);②术后第8?12周,K组收缩及舒张末期左室后壁厚度?室间隔厚度均显著增加,Z组上述指标明显改善(P均< 0.01),第12周时K组射血分数显著降低,Z组显著增加(P均< 0.01);③K组中,Mas基因及蛋白水平第8周时上调,第12周时下调,与K组相比,Z组第8周时明显下调,第12周时明显上调(P均< 0.01);K组中ACE2基因及蛋白水平第8周时上调,第12周时无显著变化,与K组相比,Z组第8周时上调,第12周时显著下降(P < 0.01);结论:2K1C法成功复制肾血管性高血压大鼠模型,并致高血压性心脏改变;佐芬普利不仅能显著降低肾性高血压大鼠血压,还能改善心肌重构,上调肾脏组织中Mas基因与蛋白水平,下调ACE2基因及蛋白水平?     

Expression characteristics of c-fos, c-myc and bFGF in early burn tissue

目的　探讨烧伤后创面组织原癌基因c fos、c myc和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达顺序及分布规律。方法　采用深Ⅱ 0烫伤模型 ,将 4 2只大鼠分为 7组 ,即正常对照组、烫伤后 3h、6h、1d、3d、7d和 14d组。用SP免疫组化方法研究烫伤后不同时间点内源性c fos、c myc和bFGF蛋白的表达规律及分布特征。结果　烧伤可以诱导c fos、c myc和bFGF表达 ,但三者的表达模式不尽相同。正常皮肤即有c fos表达 ,伤后 3h达峰值 ,以后逐渐下降 ,1d以后降至最低水平。其阳性颗粒主要分布于表皮基底细胞胞浆及真皮成纤维细胞的胞核内。c myc的表达在伤后 3d达最高值 ,阳性信号分布于真皮层的成纤维细胞的胞浆中 ;而bFGF则在伤后 6h开始出现 ,伤后第一天达最高值 ,主要分布于真皮层的成纤维细胞的胞浆中。结论　烧伤可以诱导皮肤创面组织原癌基因c fos、c myc及bFGF的表达 ,其表达具有时相与部位分布特征。三者表达的时相性提示在烧伤后早期原癌基因与生长因子基因之间具有相互调控作用 ,而这种调控作用对后期组织修复将产生一定的影响。     

L—精氨酸对肾性高血压心肌肥厚大鼠左心室肌原癌基因c—fos mRNA表达的影响

目的：探讨L－精氨酸对肾性高血压心肌肥厚大鼠左室肌原癌基因c-fos mRNA表达的影响。方法：采用原位杂交方法检测原癌基因c-fos mRNA的表达。结果：经过8周后,L－Arg使高血压心肌肥厚大鼠左室肌原癌基因c-fos mRNA表达显著减少（P＜0．05）。结论：L－Arg能使高血压心肌肥厚大鼠左室肌原癌基因c-fos mRNA的表达量减少。     

两肾一夹高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2的表达

目的:观察两肾一夹(2K1C)高血压大鼠肾脏血管紧张素转换酶2(ACE2)蛋白和mRNA的表达。方法:30只雄性Wister大鼠随机分为2组,对照组和2K1C高血压组各15只。鼠尾容积法测定术前、术后1周、4周、8周的血压变化。8周后,免疫组化法检测肾脏ACE2蛋白表达,放射免疫分析法测定心肌组织AngⅡ水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测肾脏ACE2 mRNA表达。结果:①2K1C组术后血压明显高于术前和对照组(P<0.01);②与对照组相比,高血压模型组心肌局部AngⅡ浓度显著升高(P<0.01);③高血压模型组ACE2蛋白和mRNA表达较对照组明显降低(均P<0.05)。结论:2K1C高血压大鼠心肌局部AngⅡ浓度升高,肾脏组织ACE2蛋白和mRNA表达降低,这可能是两肾一夹高血压大鼠血压发生的机理之一     

卡托普利对肾性高血压心肌肥厚大鼠左心室肌原癌基因c-fos mRNA表达的影响

探讨卡托普利对肾性高血压心肌肥厚大鼠左室肥原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。方法：采用原位杂交方法检测原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达。结果经过８周治疗后,卡托普利使高血压心肌肥厚大鼠左室肌原部癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达量显著减少。结论卡托普利减少高血压心肌肥厚大鼠左室肥原癌基因ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达。     

β1受体基因治疗对肾性高血压大鼠心室重构的影响

目的:观察阳离子脂质体混合物(DOTAP/DOPE)介导的β1受体反义寡核苷酸单次注射对两肾一夹肾性高血压大鼠血压及心肌胶原含量的影响。方法:用雄性SD大鼠制造两肾一夹肾性高血压模型。β1寡核苷酸(β1ODN)末端用FITC标记,阳离子脂质体混合物与β1反义寡核苷酸(β1ASODN)的摩尔比率分别为0,1.5,2.0,2.5,3.0,经鼠尾静脉注射,β1ASODN注射剂量为0.5mg·kg-1。反向寡核苷酸(β1INODN)注射剂量也为0.5mg·kg-1,比率为2.0。共聚焦检测荧光分布。监测血压,8周后测定左、右心室重量和心肌羟脯氨酸含量。结果:FITC标记的β1ASODN主要分布在心肌细胞的细胞浆中,且呈时间依赖性的减弱。当比率为2.0时,可使血压下降维持27d,可以使血压最大下降39mmHg,其降压效果及维持时间最好。β1INODN组左心室重量/体重、左心室肌羟脯氨酸/心肌干重与假手术组相比显著性升高(P<0.01,P<0.01);比率2.0组的左心室重量/体重、左心室肌羟脯氨酸/心肌干重比β1INODN组显著性降低(P<0.05,P<0.01)。结论:单次注射β1受体反义寡核苷酸对2K1C肾性高血压治疗有效,阳离子脂质体混合物与β1ASODN以不同的比率混合后注射,其降压效果及维持时间以及对左室重构的影响有差异,当比率为2.0时最好;且β1ASODN预防与逆转左室肥厚的同时,也降低左室胶原含?     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部RAS的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及组织局部肾素-血管紧张素系统(RA S)的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组,高血压对照组和牛磺酸治疗组,于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,处死大鼠,分离左室心肌,检测左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量(放射免疫法检测)和血管紧张素转换酶活性(分光光度计法检测)。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室重/体重比增大,心肌的血管紧张素Ⅱ含量增加和血管紧张素转换酶活性均增高。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室重/体重比、心肌的血管紧张素Ⅱ含量和血管紧张素转换酶活性。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与抑制心肌组织局部血管紧张素Ⅱ生成有关。     

大鼠肾缺血再灌注损伤时c-fos基因的表达

为探讨原癌基因c－fos在急性缺血性肾脏损伤修复中的分子调控作用，用免疫组织化学法及原位分子杂交技术，对急性肾缺血再灌注后大鼠肾组织内Fos蛋白及c－fosmRNA表达的分布、强度、时程和动力学等特征进行了研究。缺血再灌注早期即可诱导肾组织中c－fos的高效表达，肾缺血45min，Fos蛋白表达在再灌注1h、2h～4h达高峰、8h锐减、24h消失。c-fosmRNA0.5h出现、1h达高峰、2h锐减，到4h时极少。原癌基因c－fos的高效表达可能参与缺血再灌注所致肾脏损伤修复的分子调控，从而影响其病变过程。     

牛磺酸对高血压大鼠心肌肥厚、心肌细胞凋亡、NO及血管紧张素Ⅱ含量的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚、心肌细胞凋亡、一氧化氮（NO）及血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）含量的影响。方法采用两肾一夹（2K1C）型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组（每组20只）：假手术对照组、高血压对照组、牛磺酸治疗组。于术后第5周开始给予牛磺酸50mg·kg^-1·d^-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,大鼠处死,分离其左室心肌以用于检测左室质量/体质量比、心肌细胞凋亡指数（AI）、NO和Ang Ⅱ含量。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室质量体质量比、心肌AI和Ang Ⅱ含量均升高,心肌NO含量降低。应用牛磺酸治疗则明显降低了肾动脉狭窄术后大鼠的血压、左室质量/体质量比、心肌Ai和Ang Ⅱ含量;同时也升高了2K1C高血压大鼠心肌NO含量。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制高血压大鼠心肌肥厚和心肌细胞凋亡发生,其作用机制与药物调控心源性活性物质分泌水平有关。     

双肾双夹肾性高血压大鼠左心室原癌基因c-fos表达的变化

目的：测定双肾双夹（2K2C）肾性高血压大鼠早期，左心室原癌基因c-fos mRNA水平的变化，方法：实验分二组：对照组，2K2C组，术后24h,36h,48h,72h测动脉血压，提取左心室总RNA，与α－32P标记的c-fos cDNA探针作斑点杂交。结果：在各观察时间点，双肾双夹肾性设备夸大 鼠左心室c-fos mRNA均呈低水平表达，与对照组差异无显性，结论：在2K2C肾性高血压早期，丰血压升高，左心室c-fos基因无明显改变。     

肾血管性高血压大鼠肠系膜血管内皮型一氧化氮合酶磷酸化改变及意义

目的:观察大鼠肾血管性高血压发病过程中肠系膜血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)总蛋白表达及其Ser1179位点磷酸化水平的变化,探讨高血压时内皮功能紊乱的分子机制。方法:将72只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组和高血压组,每组36只,用双肾双夹(2K2C)法狭窄双肾动脉复制肾血管性高血压(RHR)模型,用无创血压仪测量大鼠尾动脉收缩压,术后2、4、8周处死大鼠,留取肠系膜血管组织;Western blot法检测组织eNOS总蛋白、eNOS Ser1179磷酸化水平,及蛋白磷酸酶PP1、PP2A的表达;化学比色法检测组织一氧化氮(NO)的含量。结果:与假手术组相比,2K2C术后2周收缩压明显增高(P<0.05),8周时可高达(170.1±11.5)mmHg;与同时间点假手术组相比,2K2C术后2周和4周时肠系膜血管组织eNOS Ser1179水平无明显变化,8周时明显降低(P<0.05),各时间点假手术组和2K2C组之间eNOS总蛋白及PP1、PP2A的表达水平均无统计学差异(P>0.05);与同时间点相比,2K2C组的组织NO含量2周、4周无明显变化,8周发生降低(P<0.05)。结论:血管组织eNOS Ser1179磷酸化降低、NO生成减少可能是肾血管性高血压发病中内皮细胞功能紊乱的原因之一,eNOS Ser1179磷酸化水平下调与PP1、PP2A蛋白表达无关。     

Alteration of Endothelial Nitric Oxide Synthase Phosphorylation in Mesenteric Vessel of Renovascular Hypertensive Rats and Its Significance

目的:观察大鼠肾血管性高血压发病过程中肠系膜血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)总蛋白表达及其Ser1179位点磷酸化水平的变化,探讨高血压时内皮功能紊乱的分子机制.方法:将72只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组和高血压组,每组36只,用双肾双夹(2K2C)法狭窄双肾动脉复制肾血管性高血压(RHR)模型,用无创血压仪测量大鼠尾动脉收缩压,术后2、4、8周处死大鼠,留取肠系膜血管组织；Western blot法检测组织eNOS总蛋白、eNOS Ser1179磷酸化水平,及蛋白磷酸酶PP1、PP2A的表达；化学比色法检测组织一氧化氮(NO)的含量.结果:与假手术组相比,2K2C术后2周收缩压明显增高(P＜0.05),8周时可高达(170.1±11.5)mmHg；与同时间点假手术组相比,2K2C术后2周和4周时肠系膜血管组织eNOS Ser1179水平无明显变化,8周时明显降低(P＜0.05),各时间点假手术组和2K2C组之间eNOS总蛋白及PP1、PP2A的表达水平均无统计学差异(P＞0.05)；与同时间点相比,2K2C组的组织NO含量2周、4周无明显变化,8周发生降低(P＜0.05).结论:血管组织eNOS Serl179磷酸化降低、NO生成减少可能是肾血管性高血压发病中内皮细胞功能紊乱的原因之一,eNOS Serl179磷酸化水平下调与PP1、PP2A蛋白表达无关.     

脑缺血后c-fos原癌基因表达

近年研究表明 ,缺血性脑组织损伤有缺血性坏死 (necrosis)和凋亡 (apoptosis) 2种形式。脑缺血时伴有多种凋亡相关基因和蛋白的表达 ,提示细胞凋亡机制参与了缺血性脑损伤的形成。凋亡相关基因通常分为 2类 :一类是促凋亡基因 ,如c fos、c jun、c myc、p5 3、bax、fas等 ;另一类是抗凋亡基因 ,如bcl 2、bcl xl等。而原癌基因 ( proto oncogene)是近10余年来生命科学的一项重大发现 ,当今对原癌基因的研究已远远超出了肿瘤学这一领域。在脑缺血研究中 ,已发现多种原癌基因的异常表达 ,如c fos基因族 ,包括c fos、fos B、fra 1和fra 2 ;jun基…     

牛磺酸抑制肾性高血压大鼠心肌细胞凋亡的研究

目的:探讨牛磺酸对肾性高血压大鼠左室心肌细胞凋亡的影响。方法:75只大鼠随机分为3组,模型组、假手术组和给药组。其中模型组:采用二肾一夹(2KIC)法建立肾血管性高血压大鼠模型;给药组:高血压模型成功后,于术后4周末开始灌饲牛磺酸50mg/(kg·d)8周。采用末端脱氧核昔酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)进行心肌细胞凋亡原位检测;放射免疫法检测心肌AngⅡ含量;分光光度计法检测心肌细胞DNA含量。结果:进入结果分析的模型组、假手术组及用药组分别为17、30和8只。与假手术组相比,模型组术后第4、12周末心肌细胞凋亡均明显增多(P<0.01);心肌细胞DNA含量和AngⅡ含量亦明显增多(P<0.01)。与4周末模型组相比,12周末模型组血压心肌细胞凋亡增多(P<0.05),心肌DNA含量明显增多(P<0.01),AngⅡ含量增多(P<0.01)。与12周末模型组相比,给药组心肌细胞凋亡减少(P<0.01),心肌DNA和AngⅡ含量明显减少(P<0.01)。结论:肾性高血压大鼠心肌细胞凋亡增多,牛磺酸治疗可抑制心肌细胞凋亡。     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组;高血压对照组;牛磺酸治疗组。于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,大鼠处死,分离其左室心肌以用于检测左室质量/体质量比、心肌组织的血管紧张素Ⅱ和一氧化氮含量。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室质量/体质量比增大,心肌组织血管紧张素Ⅱ含量增加,一氧化氮含量降低。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室质量/体质量比和心肌血管紧张素Ⅱ含量,并使心肌一氧化氮含量升高。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与调节心肌组织局部血管紧张素Ⅱ与一氧化氮间平衡有关。