疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H_1N_1感染的A549细胞凋亡的影响

目的:探讨疏风宣肺方与解表清里方对流感病毒H1N1感染的A549细胞凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌上皮细胞A549,甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后,以达菲为药物对照组,利用基因芯片技术通过KEGG pat hway分析涉及细胞凋亡信号传导途径。研究疏风宣肺方与解表清里方凋亡信号通路中基因转录的变化;同时采用荧光定量PCR检测各组细胞中的肿瘤坏死因子受体超家族成员6(Fas)、Fas配体(Fas L)及天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白-3、-8、-9(Caspase-3、-8、-9)m RNA表达的变化;West er n bl ot t i ng法检测各组细胞中蛋白的变化。结果:与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Casp3、Casp8、Casp9、Fas、Fasl明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Casp8、Casp7、Fas、Fasl明显下调;q RT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均显著升高(P0.01);与H1N1感染组比较,疏风宣肺组Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05),解表清里组Caspas e-3、-9、Fas、Fas L的m RNA表达均明显降低(P0.05)。同时疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Wes t er n bl ot t i ng结果显示,H1N1感染组Fas、Fas L蛋白细胞较对照组显著升高(P0.05)。与H1N1感染组比较,2种方药的Fas、Fas L表达均显著降低(P0.05);q RT-PCR结果与基因芯片结果基本一致。结论:疏风宣肺方与解表清里方均可调控甲型流感病毒感染后的Caspase-3、-8、-9、Fas、Fas L表达,可对抗流感病毒感染后的细胞凋亡。     

疏风宣肺方和解表清里方对流感病毒H1N1感染人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路作用的研究

目的:研究疏风宣肺方和解表清里方体外对人肺腺癌上皮细胞A549中TLR3/7信号通路的影响。方法:利用基因芯片技术研究甲型流感病毒H1N1感染A549细胞后TLR3/7信号通路中基因转录的变化。采用荧光定量PCR和Western blotting法检测各组细胞中的Toll样受体3(Toll-like receptor3,TLR3)、Toll样受体7(Toll-like receptor 7,TLR7)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,My D88)、激活核因子Kappa B(nuclear factor-Kappa B,NF-κB)的mRNA及蛋白表达的变化。结果:在TLR3/7相关信号传导通路中,与细胞对照组相比,H1N1感染组差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显上调,奥司他韦组、疏风宣肺组和解表清里组对差异表达基因Tlr3、Tlr7、Myd88、Nfbk1、Mapk8、Mapk13、Ifna1、Ifnβ1明显下调。qRT-PCR结果显示,与细胞对照组比较,H1N1感染组TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均显著升高(P0.01)。与H1N1感染组比较,疏风宣肺组的TLR3/7、My D88、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P0.05或P0.01),解表清里方对TLR3/7、NF-κB的mRNA表达均明显降低(P0.05或P0.01)。同时,疏风宣肺组治疗效果优于解表清里组。Western blotting结果显示,H1N1感染组TLR3/7、NF-κB蛋白较正常组显著升高(P0.05)。与H1N1感染组比较,两种方药的TLR3/7、NF-κB表达均显著降低(P0.05或P0.01)。结论:疏风宣肺方和解表清里方可以抑制流感病毒H1N1所诱导的TLR3/7信号通路活化,下调活性NF-κB的转录活性,发挥抗流感病毒的作用。     

猪苓汤对Thy-1大鼠肾炎模型相关细胞因子及基因表达作用研究

为探讨猪苓汤作用机制,选用Thy-1大鼠肾炎模型,以肝素作为对照进行研究。结果,病理造模组与正常对照组相比,IL－1β、TNFα、IL-6、IL-6mRNA均高于正常（P＜0．01）;猪苓汤组与肝素组的TNFα、IL-6、IL-1β、IL-6mPNA均低于造型组（P＜0．05）。     

丹参单体对TNF-α诱导大鼠动脉平滑肌细胞MCP-1和IL-1β的影响

目的观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA对肿瘤坏死因子（TNF—α）诱导的血管平滑肌细胞（SMC）白细胞介素-1β（IL—1β）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的影响，探讨丹参单体抗动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法体外培养大鼠主动脉SMC；RT—PCR法检测SMCMCP-1mRNA的表达；放免法检测SMC培养上清IL-1β的水平。结果TNF—α促进SMCMCP—1mRNA的表达，提高IL-1β水平（P值均＜0．01）。两种丹参单体均抑制上述因子的表达，其中，对于抑制MCP—1mRNA的表达以丹参酮ⅡA效果更佳。结论丹参单体抗AS作用的机制之一是抑制炎症相关因子的表达，丹参酮ⅡA抗炎效果优于丹酚酸B。     

咳喘宁胶囊对慢性支气管炎大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液TNF和IL-1β含量的影响

目的：探讨咳喘宁胶囊对实验性慢性支气管炎治疗作用的内在机制。方法：采用改良烟熏法复制大鼠慢性支气管炎模型，实验分组为模型组、咳高组、咳低组、桂龙组，并设不加处理的正常组。以高、低剂量咳喘宁和桂龙咳喘宁进行干预，测定各组大鼠血清、肺组织及支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素－1（IL－1β）的含量。结果：模型组大鼠血清、肺组织及BALF中TNF和IL－1β含量均较正常组明显升高（P＜0．01）。与模型组相比较，治疗各组血清、肺组织及BALF中TNF和IL－1β含量均明显降低（P＜0．05或P＜0．01）；咳高组血清、肺组织中TNF含量均明显低于桂龙组与咳低组（P＜0．01），而3个治疗组对BALF中TNF含量的影响差异无统计学意义（P＞0．05）；咳高组血清、肺组织及BALF中IL－1β含量均低于桂龙组与咳低组（P＜0．05或P＜0．01）。结论：TNF和IL－1β在慢性支气管炎的病理生理过程中起着重要作用，咳喘宁胶囊通过降低TNF和IL－1β含量，控制炎症反应。     

补髓生血冲剂对慢性再生障碍性贫血患者血清可溶性Fas、肿瘤坏死因子、白细胞介素2表达作用的影响

为探讨补肾中药补髓生血冲剂抑制慢性再生障碍性贫血（CAA）细胞凋亡的疗效机理,分析了30例CAA患者血清可溶性Fas(sFas)、肿瘤坏死因子（TNF－α）、白细胞介素2（IL－2）水平在用药前后的变化规律,并用再障生血片进行对照研究。结果,患者疗前血清sFas、TNF－α、IL－2表达均明显高于正常组（P＜0．05或P＜0．01）,疗后sFas、TNF－α水平接近正常组（P＞0．05）,而IL-2水平仍高于正常组（P＜0．05）。表明：（1）CAA患者血清存在着细胞凋亡相关因子的表达异常;（2)补髓生血冲剂是通过调节TNF－α水平来调控CAA患者细胞表面Fas分子的表达,并影响血清sFas的表达,而并非通过调节IL－2表达水平来影响CAA细胞凋亡。     

疏风宣肺方、解表清里方药对流感病毒小鼠TLR7、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达的影响

目的 观察疏风宣肺和解表清里方药对流感病毒亚甲型肺适应株（FM1）感染小鼠肺组织细胞Toll样受体7（Toll-like receptor 7, TLR7）、髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88, MyD88）、激活核因子Kappa B（nuclear factor-kappaB,NF-κB） mRNA及蛋白表达的影响。方法 选择108只小鼠,随机分为9组：正常组,模型组,磷酸奥司他韦胶囊组［西药组,2.5 g/（mL?d）］,疏风宣肺方（中药1）高、中、低剂量组［3.762、1.881、0.941 g/（kg?d）］,解表清里方（中药2）高、中、低剂量组［4.368、2.184、1.092 g/（kg?d）］,每组12只。将各组小鼠用乙醚轻度麻醉,正常组以0.05 mL生理盐水滴鼻,其余各组以0.05 mL 4LD50流感病毒FM1稀释液滴鼻感染小鼠。造模成功率100%。感染后2 h灌胃给药。正常组、模型组灌胃蒸馏水, 0.2 mL/次,1次/d,连续干预4天。采用RT-PCR反应测定肺组织TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达,采用Western blot法测定肺组织TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达水平。结果 与正常组比较,模型组TLR7、MyD88、NF-κB mRNA表达升高（P<0.01）;与模型组比较,西药组,中药1高、中、低剂量组TLR7、MyD88、NF-κB mRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,中药2高、中剂量组TLR7、NF-κB mRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,中药2高、中剂量组MyD88 mRNA表达降低（P<0.05）,中药2中剂量组MyD88蛋白表达降低（P<0.05）,中药2低剂量组TLR7、NF-κB蛋白表达降低（P<0.05）。与西药组比较,中药1低剂量组MyD88蛋白表达降低（P<0.05）,中药1中、低剂量组NF-κB蛋白表达降低（P<0.01）;中药2高、中、低剂量组TLR7 mRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）,MyD88蛋白表达降低（P<0.01）,中药2低剂量组NF-κB mRNA及蛋白表达降低（P<0.05,P<0.01）。结论 疏风宣肺方各剂量和解表清里中剂量能通过调节MyD88依赖的TLR信号传导通路下调NF-κB活性,发挥抗流感病毒的作用。疏风宣肺方效果优于解表清里方。     

黄芪注射液对病毒性心肌炎TNF-α、IL-1和IL-6的影响

目的：探讨病毒性心肌炎（VMC）患者血清肿瘤坏死因（TNF—α）、白细胞介素1（IL—1）、白细胞介素6（IL—6）的变化及黄芪注射液防治作用。方法：治疗组24例用黄芪注射液治疗，对照组24例用辅酶A、ATP甲等治疗。结果：治疗后治疗组血清TNF—α、IL—1和IL—6水平显著下降（P〈0．01），与健康组无显著差异；对照组治疗前后TNF—α、IL—1和IL—6水平无差异，并显著高于健康组（P〈0．01）。结论：黄芪注射液可降低TNF—α、IL—1和IL—6，对病毒性心肌炎有良好的防治作用。     

针刺治疗急性脑梗死对TNF-α,IL-6及肌力的影响

方法：将80例急性脑梗死患者随机分为为针药组、药物组各40例,采用RIA法测定其治疗前后肿瘤坏死因子（TNF－α)、白细胞介素6（IL－6）水平,记录其肌力变化情况。结果：急性脑梗死患者的TNF－α、IL－6水平明显高于正常健康体检者（P＜0．01）,针药组治疗后TNF－α、IL－6明显低于药物组（P＜0．05）,肌力恢复优于药物组（P＜0．01）。     

神经系统疾病患者外周血中IL—2、sIL—2R TNF—α的表达以及红细胞免疫的变化观察

目的 研究IL－2、sIL-2R、TNF－α在神经系统疾病患者血清中的表达以及神经系统疾病红细胞免疫及其调节功能的变化规律。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）定量测定患者血清中IL－2、sIL-2R、TNF－α的含量,采用红细胞与酵母菌免疫粘附法测定红细胞免疫功能及其调节功能。结果 神经系统疾病患者IL－2、IL－2R和TNF－α含量低于健康对照组（P＜0．001、P＜0．05、P＜0．05）,RBC－C3bRR和CR1FER低于健康对照组（P＜0．01）,RBC－ICR和CR1FIR高于健康对照组（P＜0．01）。结论 提示该病的发生和发展过程与IL－2、sIL-2R、TNF－α的含量和红细胞免疫功能及其调节功能的变化有着密切的关系。     

有机阴离子转运多肽1B1的研究进展

 目的介绍有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)的研究进展。方法查阅国外有关文献,并对其进行分析、归纳和总结。结果OATP1B1存在遗传多态性,且不同等位基因所表达的OATP1B1的转运能力具有显著性差异,进而会对多种药物的药动学及药效学产生影响;OATP1B1还与药物不良反应及药物相互作用有关。结论基于OATP1B1对药物体内过程的重要作用,关注OATP1B1遗传多态性对药动学、药效学的影响,及其与不良反应及药物相互作用的关系具有一定临床意义。     

八棱丝瓜蛋白1的体外抗HIV-1活性

目的：研究八棱丝瓜蛋白1的抗HIV-1活性。方法：通过实验株HIV-1ⅢB诱导合胞体形成抑制实验、HIV-1ⅢB和临床分离株HIV-1KM018急性感染细胞以及HIV-1ⅢB慢性感染细胞的p24抗原表达抑制实验检测八棱丝瓜蛋白1的抗HIV-1活性。结果：八棱丝瓜蛋白1抑制HIV-1ⅢB诱导C8166细胞形成合胞体的EC50为0．025μmol·L^-1，治疗指数为76。八棱丝瓜蛋白1抑制HIV-1ⅢB感染C8166和HIV-1KM018感染PBMC的p24抗原表达的EC50分别为0．033和0．207μmol·L^-1。八棱丝瓜蛋白1不抑制HIV-1ⅢB在慢性感染H9细胞中的复制。结论：首次发现八棱丝瓜蛋白1是一种具有抗HIV-1活性的核糖体失活蛋白。     

新型甲型H1N1流感的分期辨证模式研究

目的观察新型甲型H1N1流感患者的证候学特点,阐述其病因病机,总结出符合临床实际的分期辨证模式。方法以卫生部甲型H1N1流感的诊断标准,采用横断面调查方法回顾性分析甲型H1N1流感确诊病例308例,分别按照表证期、里证期和恢复期三个阶段的各自临床症状、体征,以及各期相关证素等进行统计学分析。结果 (1)表证期相对高频的症状、体征有:发热90.25%,疲乏69.16%,咳嗽49.35%,恶寒43.83%,咽痒咽痛43.83%,头晕头痛33.12%,白痰32.14%,流涕29.87%等,咽充血72.08%,扁桃体肿大83.77%。(2)里证期的相对高频的症状、体征有:发热、咳嗽、小便黄、口渴等为100%,心烦、咽痛等为85.71%,纳差、脘痞、疲乏、扁桃体肿大等为71.43%。(3)恢复期相对高频的症状、体征有:疲乏30.52%,纳差、脘痞17.82%,小便黄17.53%,咳嗽10.39%,咽充血15.26%。(4)主要证素特点是,表证期以风热(100%)、气虚(69.16%)和痰湿(46.75%)为主,里证期以郁火(100%)、气虚(71.43%)和痰湿(71.43%)为主,恢复期以正气受损(气虚、阴虚、阳虚)、余邪未净为病机特点。结论新型甲型H1N1流感患者表证期以风热袭表、阳气郁滞为特点,里证期类似于"风温病"的"热郁胸膈证"和"邪热壅肺证"的组合,恢复期以正气受损(气虚、阴虚、阳虚)、余邪未净为病机特点。     

ZTC 1+1用于养阴清肺糖浆水提液的絮凝工艺研究

目的优化养阴清肺糖浆的生产工艺,更好地保留有效成分,提高药液的澄清度。方法采用天然高分子絮凝剂ZTC 1+1对养阴清肺糖浆原药水提液进行絮凝处理,以有效成分甘草酸保留率和药液浊度为衡量指标,考察絮凝剂用量、絮凝温度、搅拌速度、搅拌时间对絮凝效果的影响,并将絮凝后的药液离心处理,以确定最佳工艺条件。结果最佳絮凝提纯工艺条件为药液温度30℃,ZTC 1+1用量0.6 g/L,快搅速度450 r/min,快搅时间2 min,慢搅速度50 r/min,慢搅时间10 min,絮凝后的药液再在转速3 000 r/min下离心20 min,此时甘草酸保留率为84%,药液浊度只有1.3 NTU。结论 ZTC 1+1用于养阴清肺糖浆原药水提液的絮凝提纯效果明显优于醇沉法,絮凝法可以替代醇沉法用于养阴清肺糖浆水提液的提纯。     

甲型H1N1流感的应对措施

目的：探讨甲型H1N1流感的应对措施。方法：对符合诊断标准的57例甲型H1N1流感患者分别从医院、病区、患者3个角度给予制定岗位责任制、成立发热门诊、成立隔离病区、合理公布病区、医务人员自身防护、病区消毒处理、健康宣教、饮食指导等应对措施。结果：57例患者经治疗全部痊愈,痊愈率达100.00%。住院天数最短为5天,最长为11天,平均6.8天;病毒转阴天数最短为3天,最长7天,平均5.3天。结论：从医院、病区、患者3个角度给予甲型H1N1流感有针对性的应对措施有助于患者康复。     

三七凝胶对硬膜外黏连TIMP-1、MMP-1的影响

目的 探讨三七凝胶对椎板切除术后硬膜外黏连基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响.方法 建立椎板切除术模型,将72只大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、黏连平组、凝胶组和三七凝胶组,各18只,分别在术后第7、14、21天采用免疫组化进行动态观察,分析愈合过程中TIMP-1和M...     

HPLC同时测定心脑治胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量

目的:建立测定心脑治胶囊(三七,水蛭,土鳖虫)中3种皂苷类成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量测定方法。方法:采用HPLC法,使用C18柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,0~3 m in,20%~25%乙腈,3~15 m in,25%~45%乙腈;检测波长为203 nm;室温。结果:此方法能使样品中的3种皂苷类成分得到良好分离,且线性关系良好,平均加样回收率:三七皂苷R1为102.93%,RSD为1.26%;人参皂苷Rg1为105.68%,RSD为1.52%;人参皂苷Rb1为104.34%,RSD为0.70%。结论:本法简便、快速,结果令人满意,可用于作为心脑治胶囊质量控制方法之一。     

补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1活性的影响

目的:研究补肾化瘀方对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1/TIMP-1活性的影响,探讨其防治肝纤维化的作用机制。方法:建立Wistar大鼠CCL4损伤性肝纤维化模型,通过免疫组化及图像分析等方法,观察补肾化瘀方对肝组织Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及MMP-1/TIMP-1表达的影响。结果:经补肾化瘀方治疗后,用药组肝细胞变性程度和纤维化程度明显减轻;Ⅰ型、Ⅲ型胶原表达明显降低(P<0.05);MMP-1含量明显增加,TIMP-1含量降低,MMP-1/TIMP-1比值显著增加,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:补肾化瘀方可能通过增加MMP-1的产生、减少TIMP-1的分泌而使其对MMP-1的抑制作用减弱,促进了Ⅰ型及Ⅲ型胶原的降解,起到抗纤维化的作用。     

补阳还五汤对中风后遗症患者血清sICAM1及sVCAM1的影响

目的：观察补阳还五汤对中风后遗症患者血清可溶性细胞间粘附分子1（sICAM1）、可溶性血管细胞粘附分子1（sVCAM1）含量的影响。方法：将65例患者随机分为2组。对照组30倒，采用复方丹参注射液、依美思治疗；治疗组35例，在对照组治疗基础上加服补阳还五汤（处方：生黄芪、当归尾、桃仁、红花、赤芍、川芎、地龙）治疗。疗程均为30天。观察临床疗效及治疗前后血清sICAM1、sVCAM1变化情况。结果：总有效率治疗组为91．4％，对照组为70．0％，2组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。治疗组治疗后血清sICAM1、sVCAM1含量均较治疗前下降，差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05，P〈0．01）；对照组治疗前后血清sICAM1、sVCAM1含量变化差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：补阳还五汤治疗中风后遗症疗效显著，并能降低血清sICAM1、sVCAM1含量，抑制细胞粘附。     

低氧诱导因子介导胰岛素样生长因子促骨髓瘤增殖作用

目的:探讨胰岛素样生长因子(IGF-1)对多发性骨髓瘤细胞的作用是否与低氧诱导因子(HIF-1)有关,及其可能的机理.方法:检测IGF-1对多发性骨髓瘤细胞株KMM-1及U266增殖的影响,用免疫印迹法检测IGF-1对骨髓瘤细胞缺氧诱导因子HIF-1α表达的作用、并观察HIF-1拮抗剂Echinomycin对IGF-1作用下骨髓瘤细胞增殖的影响.此外,我们还用免疫印迹法检测IGF-1对HIF-1信号通路上游AKT的作用,并观察PI3-K/AKT的拮抗剂LY294002对IGF-1刺激下骨髓瘤细胞HIF-1α表达及骨髓瘤细胞增殖的影响,及LY294002和HIF-1拮抗剂Echinomycin对骨髓瘤细胞增殖的影响.结果:IGF-1上调骨髓瘤细胞HIF-1α的表达,从而促进骨髓瘤细胞增殖,用Echinomycin阻断HIF-1明显减弱IGF-1的促增殖作用;PI3-K/AKT通路是介导IGF-1上调HIF-1α表达的重要环节,阻断Pi3-K/AKT通路可逆转IGF-1对HIF-1α表达的作用.无论是阻断Pi3-K/AKT通路还是HIF-1都使IGF-1刺激骨髓瘤细胞增殖的作用显著减小.结论:IGF-1通过PI3-K/AKT通路上调骨髓瘤细胞HIF-1α的表达,从而促进骨髓瘤细胞的增殖.我们的研究提示,HIF-1在骨髓瘤的病理中起重要的作用,可能成为治疗骨髓瘤的新靶点之一.