二陈汤加味通过抑制NLRP3通路对慢性阻塞性肺疾病的防治作用

目的:观测二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠外周血单个核细胞(PBMCs)中Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体相关基因表达的影响,探讨二陈汤加味对COPD抗炎的分子机制。方法:采用脂多糖(LPS)联合香烟烟雾方法制备COPD大鼠模型。40只大鼠随机平均分为正常组,模型组,二陈汤加味组,MCC950(NLRP3抑制剂)组。造模期间(从实验第1～30天),MCC950组于实验第1天单次腹腔注射60 mg·kg~(-1);二陈汤加味组以10 g·kg~(-1)剂量灌胃,1次/2 d。造模成功后,从实验第31～45天,MCC950组腹腔注射3 mg·kg~(-1),1次/2 d;二陈汤加味组以10 g·kg~(-1)剂量灌胃,2次/d;正常组、模型组灌胃生理盐水10 g·kg~(-1)。酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定大鼠肺组织匀浆中白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-18(IL-18)和趋化因子8(CXCL8)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠外周血PBMCs中NLRP3,凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1蛋白表达;光镜观察肺组织结构变化,免疫组化检测NLRP3,ASC和Caspase-1在肺组织中的定位表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中IL-1β,IL-18和CXCL8含量均明显升高(P0.05,P0.01);PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均明显增高(P0.01);与模型组比较,二陈汤加味组PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P0.05,P0.01),肺匀浆中IL-1β,IL-18和CXCL8含量均明显下降(P0.05,P0.01),肺组织结构明显改善。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与抑制PBMCs中NLRP3,ASC,Caspase-1 mRNA表达,减少IL-1β,IL-18和CXCL8的释放有关。     

宁肺合剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠血TNF-а和IL-8的影响

目的:探讨宁肺合剂对肺脾气虚型和肺肾两虚型慢性阻塞性肺疾病大鼠血TNF-а和IL-8含量的影响。方法:90只健康大鼠按随机数字表法分成正常对照组,肺脾气虚模型组,肺肾两虚模型组,宁肺合剂低、中、高剂量组,采用"烟熏加气管内滴入脂多糖联合番泻叶灌胃泻下法制备肺脾气虚型"和"烟熏加气管内滴入脂多糖联合背部皮下注射琥珀酸氢化可的松复制肺肾两虚型"慢阻肺大鼠模型,实验结束时,观察各组大鼠肺组织病理学改变和血清TNF-а和IL-8含量。结果:模型组大鼠血TNF-а和IL-8含量明显升高,与正常对照组比较有显著差异(P0.05),宁肺合剂高剂量组、中剂量组和低剂量组与模型组比较血TNF-а和IL-8含量下降(P0.05)。结论:宁肺合剂可以降低血TNF-а和IL-8含量,减轻慢阻肺气道炎症。     

固本防哮饮对哮喘小鼠NLRP3和TLR4的影响

目的观察中药复方固本防哮饮对哮喘小鼠肺组织中炎症小体3(NLRP3)及Toll样受体4(TLR4的影响并探讨其防治哮喘机制。方法采用卵蛋白(OVA)联合人呼吸道合胞病毒(RSV)致敏激发雌性Balb/c小鼠,建立哮喘持续期小鼠模型,随机分为正常组、模型组、中药组(固本防哮饮组)。苏木精-伊红染色法观察小鼠肺组织病理变化,Western blotting法及real-time q PCR法测定小鼠肺组织中NLRP3、TLR4、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白及mRNA表达,ELISA法测定小鼠肺组织、血清中IL-1(IL-1)及IL-18(IL-18)表达水平。结果模型小鼠肺组织内TLR4、IL-1β蛋白及mRNA表达均高于正常组(P 0.05),固本防哮饮组小鼠肺组织中TLR4、IL-1β蛋白、mRNA表达均低于模型组(P 0.05);肺组织中NLRP3蛋白及m RNA表达、肺组织及血清中IL-18蛋白表达3组间差异无统计学意义(P 0.05)。结论 TLR4的激活可能与哮喘持续期气道炎症持续存在有关。固本防哮饮可能通过下调TLR4,减少IL-1的释放,减轻气道炎症,从而缓解哮喘症状。     

电针治疗对颞下颌关节紊乱综合征大鼠颞下颌关节内炎症因子TNF-α、IL-1β的影响

目的:观察电针治疗对颞下颌关节紊乱综合征大鼠颞下颌关节内炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响。方法:通过拔除大鼠右上颌磨牙,人为造成大鼠偏侧咀嚼,建立大鼠颞下颌关节紊乱综合征(TMD)模型。实验分电针组、空白组、模型组3组,按组进行相应的干预然后收集血清和组织匀浆采用酶联免疫吸附反应(ELISA)法检测TNF-α、IL-1β水平。结果:与空白组血清炎症因子含量进行比较,模型组血清内IL-1β、TNF-α含量大幅升高(P0.05);与模型组比较,电针组血清内IL-1β、TNF-α含量降低(P0.05)。与空白组颞下颌关节组织匀浆中炎症因子的含量进行比较,模型组中IL-1β、TNF-α的含量升高(P0.05);与模型组比较,电针组颞下颌关节组织匀浆中IL-1β、TNF-α含量降低(P0.05)。结论:电针能够有效降低大鼠血清中IL-1β、TNF-α等促炎因子的表达水平,抑制模型大鼠颞下颌关节炎的指数,具有一定抗炎消肿镇痛作用。     

慢支咳喘宁胶囊对实验性慢性支气管炎大鼠肺组织中IL-2 IL-8含量的影响

目的探讨慢支咳喘宁胶囊治疗慢性支气管炎的作用机制.方法采用改良烟熏法复制慢性支气管炎大鼠模型,实验动物随机分为模型对照组、慢支咳喘宁胶囊低剂量组、慢支咳喘宁胶囊高剂量组、气管炎丸组、及不加处理的空白对照组.造模各组以高、低剂量慢支咳喘宁胶囊,气管炎丸和生理盐水进行干预,测定各组大鼠肺组织中IL-2、IL-8的含量.结果模型组大鼠肺组织中IL-2含量较空白组明显降低(P＜0.01),而IL-8含量则较空白组明显升高(P＜0.01);与模型组比较,治疗各组肺组织中IL-2含量明显升高(P＜0.05或P＜0.01),IL-8含量则明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论慢支咳喘宁胶囊可提高IL-2含量,降低IL-8含量,控制慢性炎症反应.     

鱼金葶颗粒对AECOPD模型大鼠肺组织IL-8、TNF-α的影响

目的观察鱼金葶颗粒对慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)模型大鼠肺组织匀浆中细胞白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及病理组织分析。方法将Wistar大鼠72只,随机分为空白组、模型组和鱼金葶颗粒低、中、高剂量组及地塞米松对照组。采用烟雾吸入加脂多糖灌肺复合因素建立AECOPD大鼠模型。应用鱼金葶颗粒干预。采用ELISA法测定肺组织匀浆IL-8、TNF-α的含量。结果鱼金葶高剂量、中剂量组与模型组比较肺组织匀浆IL-8、TNF-α水平差异均有统计学意义(P0.05)。结论鱼金葶颗粒对AECOPD模型大鼠肺组织匀浆中IL-8、TNF-α有明显的干预作用,能够有效降低IL-8、TNF-α的水平。     

补肺汤对COPD肺气虚证模型大鼠肺组织形态学及IL-10、TNF-α含量的影响

目的:观察补肺汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺气虚证模型大鼠肺组织形态学及肺组织中白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、模型组、补肺汤高剂量组、补肺汤中剂量组、补肺汤低剂量组、桂龙咳喘宁(阳性对照)组。采用烟熏加脂多糖气管滴入方法建立COPD肺气虚证实验动物模型。采用HE染色光镜观察肺组织的病理形态学改变;ELISA法检测肺组织中IL-10、TNF-α的含量。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠出现COPD肺气虚证症状和体征,支气管和肺组织出现慢性支气管炎和肺气肿病理改变;用药各组大鼠症状和体征以及支气管和肺组织病理学变化较模型组均有不同程度的改善和减轻;模型组大鼠肺组织中IL-10的含量降低,TNF-α的含量升高,与正常对照组比较,差异均有非常显著性意义(P0.01);补肺汤高、中剂量组大鼠肺组织中IL-10的含量升高,TNF-α的含量降低,与模型组比较,差异均有非常显著性意义(P0.01);补肺汤低剂量组、桂龙咳喘宁组大鼠肺组织中IL-10的含量升高,TNF-α的含量降低,与模型组比较,差异均无显著性意义(P0.05);补肺汤高剂量组2项指标与桂龙咳喘宁组比较,差异均有显著性意义(P0.05)。结论:补肺汤可减轻COPD肺气虚证大鼠支气管、肺组织病理学变化,对COPD肺气虚证大鼠免疫功能有增强作用。     

金银花提取物对重症急性胰腺炎肺损伤大鼠ROS-NLRP3炎症小体信号通路的影响

目的观察金银花提取物(HFE)对重症急性胰腺炎大鼠肺组织的保护作用,并初步探究可能的作用机制。方法将大鼠分为假手术组、模型组及银花提取物低、中、高剂量组、地塞米松组,每组16只。评估大鼠生存状态;测定大鼠肺组织湿/干重比率(W/D)、动脉血氧分压;HE染色观察大鼠胰腺、肺组织病理形态学变化;酶联免疫法检测BALF中白细胞介素-1β(IL-1β)\白细胞介素-18(IL-18)水平,血细胞计数仪分析总细胞数量和多形核白细胞数量;氮蓝四唑光还原法检测肺组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)水平,比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平,二氢乙啶(DHE)法检测活性氧(ROS);免疫印迹法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱天冬酶(Caspase-1)、IL-1β蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组生存状况评分降低,胰腺、肺组织病理评分降低,动脉血二氧化碳分压、胰腺、肺组织W/D升高,血氧分压降低;BALF中IL-1β、IL-18、总细胞数量、多形核白细胞数量升高;肺组织SOD水平降低,MDA、ROS水平升高,肺组织中NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1蛋白表达升高(P 0.05)。与模型组相比,金银花提取物各组以及地塞米松组生存状况评分升高,胰腺、肺组织病理评分升高,动脉血二氧化碳分压、胰腺、肺组织W/D降低,血氧分压升高,BALF中IL-1β、IL-18、总细胞数量、多形核白细胞数量降低,肺组织SOD水平升高,MDA,ROS水平降低,肺组织中NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1蛋白表达降低(P 0.05)。结论金银花提取物对重症急性胰腺炎大鼠的肺损伤具有保护作用,且这种作用可能通过抑制ROS产生,进而抑制NLRP3炎症小体通路介导的促炎因子IL-1β和IL-18的释放,缓解肺组织炎症损伤。     

外感清热解毒方对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的影响

目的：探讨外感清热解毒方对脂多糖（LPS）诱导急性肺损伤（ALI）大鼠的影响及作用机制。方法：20只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、外感清热解毒方组、miR-495抑制剂组。气管滴注LSP（5 mg/kg）成功复制ALI大鼠模型，给予相应干预。定量PCR检测大鼠肺组织miR-495水平；苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织病理改变；酶联免疫吸附试验检测肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1β、IL-18、IL-10炎症介质和髓过氧化物酶（MPO）活性；蛋白质免疫印迹法检测肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、凋亡相关微粒蛋白（ASC）、胱天蛋白酶-1（Caspase-1）、GSDMD蛋白表达。结果：与对照组比较，模型组大鼠肺组织miR-495表达下调（P<0.05），出现病理损伤，BALF中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18含量升高，IL-10含量下降，MPO活性增强；肺组织NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达增加（均P<0.05）。与模型组和miR-495抑制剂组比较，外感清热解毒方组大鼠肺组织miR-495表达上调（P<0.05），病理损伤减轻，BALF中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-18含量下降，IL-10含量升高，MPO活性减弱；NLRP3、ASC表达下调（均P<0.05），Caspase-1表达差异无统计学意义（P>0.05）。除对照组外，均可见GSDMD蛋白切割，外感清热解毒方组蛋白切割表达水平明显低于模型组和miR-495抑制剂组。结论：外感清热解毒方对ALI大鼠具有保护作用，其机制可能与调控miR-495/NLRP3/GSDMD信号通路，减轻炎症反应，抑制细胞焦亡有关。     

益肺方药对慢性支气管炎肺气虚证大鼠TNF-α、IL-1β的影响

目的：观察益肺方药对慢性支气管炎肺气虚证大鼠血清及肺组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL-1β）的影响,探讨其作用机制。方法：大鼠随机分为正常组、模型组、益肺高剂量组、益肺低剂量组、桂龙咳喘宁胶囊对照组,除正常组外其余各组大鼠采用改良烟熏法复制慢性支气管炎肺气虚证SD大鼠模型,各组分别处理,检测干预前后各组大鼠血清及肺组织中TNF-α、IL-1β的含量。结果：模型组大鼠血清及肺组织中TNF-α、IL-1β含量均较正常组明显升高。经用药干预,各用药组大鼠血清、肺组织中TNF-α、IL-1β含量均较模型组明显降低;益肺高剂量组与桂龙咳喘宁胶囊对照组大鼠血清、肺组织中TNF-α、IL-1β的含量均明显低于益肺低剂量组。结论：炎症因子TNF-α、IL-1β介导了慢性支气管炎的病理过程,益肺方药可通过调节其含量变化,对慢性支气管炎肺气虚证产生治疗作用。     

蔡氏内异方调控TRIM24/NLRP3炎症小体介导大鼠异位子宫内膜细胞焦亡的机制研究

目的探讨蔡氏内异方是否通过作用于TRIM24/NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡而干预子宫内膜异位症。方法采用子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型。SD雌性大鼠随机取6只为正常对照组,6只为假手术组,其余大鼠造模成功后,再随机分为模型组、孕三烯酮组(0.25 mg/kg)、蔡氏内异方低剂量组(11.4 g/kg)、蔡氏内异方高剂量组(22.8 g/kg),每组6只。灌胃3周后,将各组大鼠的子宫内膜组织进行HE染色以观察组织形态,并采用IHC染色检测TRIM24的表达,Western blot法检测TRIM24及NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达,ELISA法检测组织上清液中IL-1β、IL-18的浓度。结果与正常对照组比较,假手术组的子宫内膜组织形态、TRIM24的表达、NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达及IL-1β、IL-18的浓度均无明显差异。与假手术组比较,模型组的组织上皮层增厚且不规则,TRIM24的表达显著降低(P0.001),NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达明显升高,IL-1β、IL-18的浓度显著升高(P0.001)。与模型组比较,孕三烯酮组和蔡氏内异方高剂量组的组织上皮层变薄且规则,TRIM24的表达显著升高(P0.001,P0.01),NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡相关蛋白的表达明显降低,IL-1β、IL-18的浓度显著降低(P0.001)。与孕三烯酮组比较,蔡氏内异方低剂量组的上皮细胞增多,蔡氏内异方高剂量组的间质细胞增多。与蔡氏内异方低剂量组比较,蔡氏内异方高剂量组的组织上皮层变薄,间质中TRIM24的表达明显增加,Pro-IL-1β蛋白的表达明显降低(P0.01)。结论高剂量蔡氏内异方可显著上调异位子宫内膜组织中TRIM24的表达,并明显抑制NLRP3炎症小体介导的细胞焦亡。     

芦丁对溃疡性结肠炎小鼠的干预作用及NLRP3炎症小体的影响

目的观察芦丁对葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎小鼠的干预作用。探讨其对NLRP3炎症小体信号分子活化的影响。方法将60只SPF级C57BL/6J小鼠随机分为6组,每组10只。除空白组外,其余组均采用葡聚糖硫酸钠诱导建立溃疡性结肠炎模型,美沙拉嗪组同时给予美沙拉嗪缓释颗粒灌胃,芦丁高、中、低剂量组分别给予100 mg/(kg·d)、50 mg/(kg·d)、25 mg/(kg·d)芦丁溶液灌胃,空白组、模型组以等体积l%羧甲基纤维素钠溶液灌胃,均连续5 d。灌胃结束后,比较各组疾病活动度(DAI)评分、组织学评分,采用酶联免疫吸附法测定小鼠血清和结肠组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平,采用qRT-PCR法检测结肠组织中NLRP3、IL-1βmRNA表达量,采用Western blot法检测结肠组织中NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分、组织学评分,血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显升高(P均<0.05);与模型组比较,芦丁高、中剂量组和美沙拉嗪组上述指标均明显降低(P均<0.05),且芦丁高剂量组血清及结肠组织中IL-1β和IL-18水平,结肠组织中NLRP3 mRNA表达量、IL-1βmRNA表达量和NLRP3、Cleaved caspase-1、Cleaved IL-1β蛋白表达水平均明显低于美沙拉嗪组(P均<0.05)。结论芦丁可明显改善溃疡性结肠炎小鼠临床症状,抑制黏膜炎症损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体的活化有关。     

单叶细辛对寒饮射肺证模型大鼠IL-8及CRP表达水平的实验研究

目的:利用单叶细辛水提取液对寒饮射肺模型大鼠进行干预,检测白介素-8(IL-8)、C-反应蛋白(CRP)、炎症细胞变化,初步探讨其炎症发生机制。方法:40只健康Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、辽细辛组、单叶细辛组4组,每组10只,后3组用中医理论复制寒饮射肺动物模型,造模成功后第2天分别灌胃给予生理盐水及相应药物,对照组、模型组给予生理盐水灌服,给药组给予中药水提取液治疗,1次/天,28天。检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液白细胞总数和中性粒细胞比率,血清、肺组织匀浆IL-8、CRP的水平。结果:模型组大鼠肺部出现明显的炎症改变,两给药组也出现炎性细胞浸润,但程度较模型组轻;模型组炎症细胞总数增加,肺组织匀浆、血清IL-8、CRP显著升高,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05);两给药组大鼠炎症细胞总数,肺组织匀浆、血清IL-8、CRP均明显较模型组降低,差异有显著性(P0.05)。结论:单叶细辛水提取液可降低寒饮射肺模型大鼠肺组织、血清IL-8、CRP,对肺组织炎症有抑制作用,对寒饮射肺证有一定的治疗作用。     

穴位埋线调控NLRP3炎症小体及IL-27表达对溃疡性结肠炎大鼠的黏膜保护作用

目的：观察穴位埋线对溃疡性结肠炎(UC)大鼠NLRP3炎症小体及IL-27表达的调控作用,探讨其治疗UC的作用机制。方法：SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、药物组和穴位埋线组,每组各10只。除空白组外,其余各组采用葡聚糖硫酸钠 (DSS) 法制备UC大鼠模型。药物组给予柳氮磺胺吡啶(SASP)连续灌胃14 d,穴位埋线组给予穴位简易埋线,每7 d 干预1次,共3次。观察各组大鼠一般状况,记录疾病活动度指数(DAI)、黏膜损伤指数(CMDI)和结肠长度变化;HE 染色观察大鼠结肠组织病理形态改变;ELISA测定大鼠血清IL-18、IL-1β、IFN-γ、IL-27炎性因子水平;Western-blot及RT-PCR检测大鼠结肠组织中NLRP3、caspase-1及IL-27的蛋白和mRNA表达。 结果：与模型组比较,穴位埋线治疗可有效改善 UC大鼠一般状况,降低DAI和CMDI评分,增加大鼠结肠长度,并减轻结肠组织病理损伤;同时降低了大鼠血清中IL-18、IL-1β、IFN-γ水平,升高IL-27的水平(P＜0.05);下调结肠组织中NLRP3、 caspase-1的蛋白和mRNA表达,上调了IL-27的表达(P＜0.05)。 结论：穴位埋线疗法对DSS所诱导的UC大鼠模型具有明显的治疗作用,其机制可能是通过上调IL-27的表达,抑制NLRP3炎症小体通路激活及炎性细胞因子的表达,从而减轻UC肠黏膜炎性损伤。     

清热养阴除湿丸对痛风大鼠炎症因子及关节功能的影响

目的:探讨清热养阴除湿丸对痛风大鼠的治疗机制。方法:将50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组、清热养阴除湿低剂量组、清热养阴除湿高剂量组。采用改良Coderre法构建痛风大鼠模型，按组别给予大鼠0.9%氯化钠溶液、秋水仙碱、清热养阴除湿丸灌胃治疗。通过HE染色观察大鼠滑膜组织病理改变；采用ELISA法检测大鼠外周血IL-1β、IL-18、IL-33、TNF-α水平；采用RT-qPCR、Western blotting检测大鼠滑膜组织中NLRP3炎症小体相关基因及线粒体自噬相关基因表达。结果:模型组大鼠外周血IL-1β、IL-18、IL-33、TNF-α高于空白组(均P<0.05)。干预后，秋水仙碱组、清热养阴除湿低剂量组、清热养阴除湿高剂量组大鼠外周血IL-1β、IL-18、IL-33、TNF-α下降，且清热养阴除湿高剂量组各项指标最低(P<0.05)。清热养阴除湿低剂量组、清热养阴除湿高剂量组大鼠滑膜组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、LC3B、p62、PHB2蛋白相对表达低于模型组(均P<0.05)。结论:清热养阴除湿丸通过抑制NLRP3炎...     

西黄丸对炎症微环境下肺癌A549荷瘤小鼠NLRP3炎症小体及其产物和肿瘤增殖的影响

目的:研究并探讨西黄丸对炎症微环境下的肺癌A549荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨西黄丸对肺癌A549荷瘤小鼠的血清及肿瘤组织中的核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体及其产物表达的影响作用。方法:采用肺癌A549荷瘤小鼠模型,肺癌A549细胞采用培养基中加入脂多糖(LPS)+三磷酸腺苷(ATP)的办法造炎症微环境下的肺癌A549细胞模型。造模成功后随机分为空白组(等体积生理盐水),MCC950组(MCC950溶液,0.79 g·kg~(-1)),西黄丸低、中、高剂量组(0.39,0.78,1.95 g·kg~(-1)),采用口服给药的方式进行,每天给药1次,连续给药21 d,处死小鼠并剥离肿瘤组织测量肿瘤体积及质量,免疫组织化学法检测肿瘤组织NLRP3表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测丙二醛(MDA),白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-18(IL-18),NLRP3炎性小体蛋白表达,眼底静脉取血以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IL-1β,IL-18,MDA表达水平。结果:与空白组比较,MCC950组,西黄丸低、中、高剂量组的抑瘤率分别为39.21%,31.72%,42.24%,55.68%;ELISA检测发现,西黄丸高剂量组能明显下调小鼠血清中的MDA,IL-1β,IL-18表达水平(P0.05);Western blot结果显示,与空白组比较,西黄丸高剂量组能够有效降低小鼠肿瘤组织中的MDA,IL-1β,IL-18,NLRP3的蛋白表达水平(P0.05);免疫组织化学法结果显示,与空白组比较,MCC950组与西黄丸各剂量组均能降低小鼠肿瘤组织中的NLRP3炎症小体表达阳性率(P0.05),且MCC950组和高剂量西黄丸组抑制效果最好(P0.05)。结论:西黄丸可以抑制荷肺癌A549细胞小鼠的肿瘤组织生长,其机制可能是通过抑NLRP3炎症小体及IL-1β,IL-18,MDA的表达水平,进而抑制肿瘤细胞的炎症微环境达到抑制肿瘤细胞生长的结果。     

金刚藤颗粒对急性盆腔炎模型大鼠NLRP3炎症小体通路及免疫功能的影响

目的观察金刚藤颗粒对急性盆腔炎(APID)模型大鼠NLRP3炎症小体通路及免疫功能的影响。方法将雌性SD大鼠105只随机分为假手术组、模型组及金刚藤颗粒低、中、高剂量组,每组均15只,灌胃治疗15 d后,ELISA检测大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察子宫组织的病理形态;实时定量PCR及Western blotting分别检测NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平。结果 HE染色显示,模型组大鼠子宫内膜上皮细胞脱落坏死,腔壁结构紊乱,全层炎性细胞浸润,有充血水肿;与模型组比较,金刚藤颗粒治疗组症状较模型组有显著改善;与对照组、假手术组比较,模型组血清IL-1β、IL-18水平显著升高(P 0.05),与模型组比较,金刚藤颗粒治疗组IL-1β、IL-18水平显著降低(P 0.05);与对照组比较,模型组NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1 mRNA水平显著升高(P 0.05),与模型组比较,金刚藤颗粒治疗组NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1 mRNA水平显著降低(P 0.05);模型组NLRP3、ASC、IL-1β、Caspase-1蛋白表达水平显著高于假手术组(P 0.05),金刚藤颗粒治疗组NLRP3、ASC、IL-1β、Cas-pase-1蛋白表达水平较模型组显著降低(P 0.05)。结论金刚藤颗粒对急性盆腔炎模型大鼠具有显著治疗作用,其可能通过抑制NLRP3炎症小体通路发挥免疫作用。     

河车虫草胶囊对COPD模型大鼠肺组织匀浆TNF-α、IL-8的影响

目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠TNF-α、IL-8的变化及河车虫草胶囊干预的效果及机制。方法:48只SD大鼠随机分为正常对照组,COPD模型组,西药对照组,中西药低、中、高剂量组。采用熏烟加气道内注入脂多糖(LPS)的方法制造COPD大鼠模型,中西药组予河车虫草胶囊(高、中、低3个剂量)联合茶碱缓释片,西药对照组予茶碱缓释片,模型组予等量生理盐水,共4周。放射免疫法检测各组大鼠肺组织匀浆中TNF-α、IL-8的变化。结果:模型组肺组织匀浆中TNF-α含量较正常组明显升高(P0.01),中西药中剂量组较模型组降低明显(P0.01),其次为中西药低剂量组(P0.05);模型组IL-8含量较正常组明显升高(P0.05),中西药中剂量组较模型组显著降低(P0.05)。结论:河车虫草胶囊能在一定程度上调节COPD大鼠TNF-α、IL-8水平,抑制炎症反应。     

款冬花散对COPD大鼠巨噬细胞极化的影响及其作用机制研究

目的 观察款冬花散对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠肺巨噬细胞极化的影响及TLR4/NF-κB/NLRP3通路在介导巨噬细胞极化过程中的作用。方法 48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、罗红霉素组及款冬花散低、中、高剂量组,每组8只。建立COPD（痰热壅肺证）大鼠模型,采用款冬花散干预,HE染色评估肺组织病理改变,ELISA法对肺泡灌洗液中白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)水平和肺组织iNOS、CD10水平进行定量检测,通过免疫组化和RT-PCR检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)的蛋白和mRNA表达水平。结果 与空白组相比,模型组大鼠BALF中IL-1β、IL-18含量升高,肺组织中一氧化氮合酶（iNOS）含量升高、CD10含量降低,肺组织中TLR4、NF-κB、NLRP3蛋白表达上调（P <0.01）,而款冬花散组对COPD（痰热壅肺证）模型大鼠的生物学特征有一定改善作用,在一定程度上改善肺组织炎性改变,降低大鼠BALF中IL-1β、IL-18含量,降低肺组织i...     

慢支咳喘宁胶囊对实验性慢性支气管炎大鼠肺组织中EGF和IL-1β含量的影响

目的:探讨慢支咳喘宁胶囊治疗慢性支气管炎(Chronic Bronchitis,CB)的作用机制。方法:大鼠气管内注入脂多糖制造动物模型,放射免疫法测定各组大鼠肺组织中EGF和IL-1β的含量。结果:模型组大鼠肺组织中EGF和IL-1β的含量均较空白组明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,治疗各组肺组织中EGF和IL-1β含量明显降低(P<0.05)。结论:慢支咳喘宁胶囊可降低EGF和IL-1β的含量,减轻炎症反应。