榄香烯对人肺癌细胞表面所表达与侵袭转移相关黏附蛋白的影响

目的：观察榄香烯对肺癌细胞系表面所表达与侵袭、转移相关的黏附蛋白的影响。方法：利用激光共聚焦显微镜观察高转移人巨细胞肺癌细胞PG和低转移人肺腺癌细胞PAa表达的血小板免疫相关抗原CD42a、TSP、CD9的表达情况；利用流式细胞仪检测的高转移人巨细胞肺癌细胞PG和低转移人肺腺癌细胞PAa表达的血小板免疫相关抗原CD42a、TSP、CD9的表达情况及二种癌细胞与高、中、低浓度的榄香烯注射液共同孵育后CD42a、TSP、CD9的表达改变。结果：利用激光扫描可见CD9、CD42a、TSP均匀的表达于细胞表面。流式细胞术结果显示，PG细胞表达的CD9阳性细胞数目和平均荧光强度低于PAa细胞，而PG细胞表达的CD42a、TSP阳性细胞数目和平均荧光强度均高于PAa细胞，从总的趋势来看，榄香烯注射液增高PG和PAa细胞CD9的表达，降低其CD42a、TSP的表达。结论：PG细胞系的转移能力高于PAa细胞系；对肺癌细胞表面所表达与侵袭、转移相关的粘附蛋白的影响，可能是榄香烯注射液抗肺癌转移的分子机理。     

威麦宁体外杭肿瘤作用的实验研究浅探

目的:探讨威麦宁对人肺癌等6种不同肿瘤细胞株的体外抑制增殖作用及与化疗药物(顺铂)合用后的增效作用,并探讨其抗肺癌作用机制.方法:MTT法检测威麦宁单独及与顺铂(DDP)合用对不同肿瘤细胞体外增殖的影响;流式细胞术检测威麦宁对肺癌细胞株(PG、PAa)细胞周期的影响.结果:威麦宁对肺癌细胞株PG、PAa、A549、肝癌细胞株BEL-7402、胃癌细胞株MGC-803及黑色素瘤细胞株B16-BL6等均有不同程度的抑制作用(P＜0.01,0.001);并可明显加强化疗药物顺铂(DDP)抑制肿瘤细胞体外增殖作用(P＜0.001);可将PG、PAa细胞周期阻滞在S期.     

丹参酮ⅡA对乏氧环境下人高转移性巨细胞肺癌细胞表面β1-整合素及E-cadherin表达的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA对低氧培养的人高转移性巨细胞肺癌(PG)细胞表面黏附分子E-cadherin、β1-整合素表达的影响.方法 PG细胞复苏,按干预药物不同分为丹参酮ⅡA高、中、低剂量组及顺铂组、阴性对照组,分别置于常氧和低氧环境下培养,48 h后应用流式细胞术测定黏附分子E-cadherin、β1-整合素在各组PG细胞表面表达情况.结果 低氧环境下,PG细胞所表达β1-整合素荧光强度随丹参酮ⅡA浓度的增高而逐渐减弱,但表达β1-整合素的阳性细胞率接近100％,无统计学意义;PG细胞表达E-cadherin,随着丹参酮Ⅱ A浓度的增加,其阳性细胞数增加,但表达E-cadherin的荧光强度很弱,无统计学意义.常氧环境下,PG细胞所表达β1-整合素的荧光强度随着丹参酮ⅡA浓度的增高逐渐减弱,表达β1-整合素的阳性细胞率接近100％,无统计学意义;PG细胞表达E-cadherin,随着丹参酮Ⅱ A浓度的增加,其阳性细胞数减少,但表达E-cadherin荧光强度很弱,没有统计学意义.结论在常氧环境下,丹参酮ⅡA通过下调E-cadherin和β1-整合素表达来抑制PG细胞的浸润转移;在低氧环境下,通过下调β1-整合素来抑制PG细胞的转移而上调E-cadherin表达来增加PG细胞的浸润转移能力.     

白术挥发油对人肺癌细胞株PG细胞增殖和细胞周期的影响

目的：观察白术挥发油对人肺癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用和对其细胞周期的影响。方法：倒置相差显微镜下观察白术挥发油对PG细胞形态和生长状态的影响，MTT法测定白术挥发油对PG细胞的生长抑制率，流式细胞术检测白术挥发油对PG细胞细胞周期的作用。结果：镜下观察，250μg／ml和125μg/ml白术挥发油处理PG细胞48小时及72小时后，PG细胞形态变差，分裂相减少；250μg／ml和125μg/ml白术挥发油处理48小时对PG细胞的生长抑制率分别为58．58％、16．84％，与对照组比较有显著性著异；250μg／ml、125μg／ml白术挥发油组G0／G1期细胞数与阴性对照组比较有显著性差异，S期细胞数亦显著低于阴性对照组。结论：白术挥发油可以抑制PG细胞增殖，其作用可能是通过阻止PG细胞通过G1／S期转换点来实现，的并呈剂量依赖性。     

人肺癌细胞系PA、PG对重组基底膜侵袭的作用以及消瘤保肺丸的影响

目的:探讨人肺癌细胞系PA(人低转移性肺腺癌细胞株)、PG(人高转移性巨细胞肺癌细胞株)时重组基地膜侵袭作用及消瘤保肺丸对其侵袭能力的影响.方法:取8只健康日本大耳白兔,随机分为消瘤保肺丸高剂量组、低荆量组、清肺化痰丸对照组,生理盐水空白组4组,每组2只.每组每天早晚各给药1次,每次10 ml/kg.其中高、低荆量组分别相当于人等效剂量的10、5倍,对照组相当于人等效剂量的5倍,空白组给以等量生理盐水,连续给药3日,末次给药后2 h内分别从耳中央动脉无茵采血,制备舍药血清,采用Transwell细胞培养小室建立了人肿瘤细胞体外侵袭模型,光学显微镜观察侵袭细胞的相对数目来表示肿瘤细胞的侵袭能力.结果:消瘤保肺丸高剂量组、低剂量组对人肺癌PA、PG有明显的抑制作用,与对照组、空白组比较,组间差异有显著性(P<0.05).结论-消瘤保肺丸能明显抑制人肺癌细胞系PG、PA对重组基底膜侵袭能力.     

肺金生方通过调控MMP-2/TIMP-2平衡抗肺癌侵袭转移研究

目的:探讨肺金生方对多种肺癌细胞株的体外抗肿瘤转移作用。方法:以肺金生方含药血清作用于肺癌A549、PG和PAa细胞,普通倒置显微镜观察各组细胞的生长特点及形态,MTT法检测细胞增殖情况,Boyden小室法观察细胞迁移,ELISA法检测25%肺金生方含药血清对MMP-2、TIMP-2表达的影响。结果:肺金生方含药血清作用于各细胞后,与正常细胞相比形态发生明显改变,明显梭形化,细胞数量减少;各浓度肺金生方组抑制率与空白组相比有差异,其中25%含药血清与空白组相比有显著性差异(P0.01),25%肺金生方含药血清组能减弱A549、PG和PAa细胞迁移,同时,各细胞肺金生方组MMP-2、TIMP-2的表达与空白血清组相比有差异(P0.05)。结论:肺金生方可以通过调控MMP-2/TIMP-2平衡达到抗肺癌转移作用。     

白花蛇舌草诱导人肺巨细胞癌细胞株PG细胞凋亡的初步研究

目的研究白花蛇舌草诱导人肺巨细胞癌细胞株PG细胞凋亡的作用，以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理PG细胞，采用流式细胞仪分析白花蛇舌草对PG细胞在细胞周期各个时相不同DNA含量和细胞凋亡峰的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞在非凋亡细胞二倍体峰（G1）之前出现典型的凋亡细胞峰，不同浓度的含药血清对PG细胞的作用存在明显的量效关系，凋亡率分别为6．86％、9．77％、11．69％。结论诱导肿瘤细胞凋亡可能是白花蛇舌草抗肿瘤作用机理之一。     

大豆胰蛋白酶抑制剂抑制肺癌PG细胞生长及诱导细胞调亡的研究

目的 研究大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI) 在体外对人肺癌PG细胞生长抑制作用和对细胞周期的影响.方法 采用MTT法检测SBTI对人肺癌PG细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SBTI对人肺癌PG细胞周期的影响;电子显微镜观察SBTI对细胞调亡的作用.结果 SBTI对人肺癌PG细胞的生长有明显抑制作用;SBTI可以将人肺癌PG细胞阻滞于S期;SBTI可以促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,诱导人肺癌PG细胞的凋亡.结论 大豆胰蛋白酶抑制剂能抑制人肺癌PG细胞生长、诱导人肺癌PG细胞调亡的作用,其作用的机制为阻滞人肺癌PG细胞于S期,促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,实验为大豆胰蛋白酶抑制剂抗肿瘤效应提供了实验依据.     

川芎嗪对乏氧人肺癌细胞β1-整合素及钙依赖黏附素表达的影响

目的:探讨川芎嗪对乏氧人巨细胞肺癌(PG)细胞表达β1-整合素和钙依赖黏附素的影响。方法:PG细胞复苏,分为川芎嗪高、中、低剂量组及顺铂组、阴性对照组,置常氧和低氧环境培养,检测E-cadherin(CD324)、β1-整合素(CD29)的表达。结果:PG细胞CD324常氧组表达大于低氧组;在常氧和低氧环境中,各实验组CD324表达均大于对照组;常氧组CD29表达低于低氧组。结论:在乏氧环境下PG细胞有更高的转移能力,川芎嗪能够抑制PG细胞的转移能力。     

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响。方法:用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降。结论:下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是半枝莲抗肿瘤的重要机制之一。     

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的：研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响，以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：用不同浓度的半枝莲含药大鼠血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞，采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果：经半枝莲含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论：半枝莲抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。     

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的 研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制.方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响.结果 经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低.结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关.     

大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的影响

目的:实验通过大黄虫丸含药血清干预体外人肺腺癌PAa细胞株研究其抗肿瘤机制,进而探讨活血化瘀法在肿瘤治疗中的疗效和价值。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的大黄虫丸含药血清与人肺腺癌PAa细胞株共同孵育,于不同时间观察,并与空白血清作对照。研究大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的细胞毒作用、生长抑制作用及对细胞周期的影响。结果:5%～20%各组含药血清OD值与相同作用时间10%牛血清、相同浓度的正常鼠血清OD值比较有明显差异(P<0.05～0.01),并随着血药浓度的提高OD值逐渐减低;药血清对人肺腺癌PAa细胞株增殖有明显抑制作用,并随药血清浓度提高、作用时间延长抑制作用增强;其诱导凋亡作用随药血清浓度的增加及作用时间的延长而增强。结论:大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株有明显抑制作用,为大黄虫丸抗肿瘤提供了科学依据。     

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响

目的：研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法：用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞nm23基因表达的影响。结果：经半枝莲含药血清作用的PG细胞nm23基因表达水平明显上调。结论：半枝莲抗肿瘤作用机制可能与nm23基因表达水平上调有关。     

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的 研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制.方法 用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响.结果 经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降.结论 下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是白花蛇舌草抗肿瘤的重要机制之一.     

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞P^53基因表达的影响

目的 研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制.方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响.结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调.结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关.     

苏木含药血清联合顺铂对肺癌PG细胞的增殖抑制及Cyclin D1、CDK4蛋白表达的影响

目的:探讨苏木含药血清对人肺癌PG细胞株的增殖抑制作用及对Cyclin D1、CDK4蛋白表达的影响。方法:将肺癌PG细胞分为空白组、苏木组、苏木+顺铂组、顺铂组4组,四唑盐比色法(MTT)中各组根据血清浓度的不同分为20%、10%、5%、2.5%四组,观察各组PG细胞的增殖抑制作用;免疫荧光法中各组血清浓度为20%,采用激光共聚焦显微镜观察各组Cyclin D1、CDK4蛋白表达。结果:MTT法中10%、20%苏木组细胞的增殖抑制率明显,具有作用时间和剂量依赖性,但低于顺铂组和苏木+顺铂组,苏木+顺铂组PG细胞的增殖抑制率与顺铂组比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫荧光结果显示:与空白组比较,苏木组CDK4、Cyclin D1蛋白减少(P0.05),顺铂组和苏木+顺铂组CDK4、Cyclin D1蛋白的表达亦减少(P0.01);且顺铂组和苏木+顺铂组CDK4、Cyclin D1蛋白的表达低于苏木组(P0.05)。与顺铂组比较,苏木+顺铂组CDK4、Cyclin D1蛋白的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论:苏木含药血清通过下调Cyclin D1、CDK4蛋白表达抑制PG细胞增殖。     

没食子酸丙酯对H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的影响及其作用机制

目的 探讨没食子酸丙酯（propyl gallate,PG,赤芍801）对H2O2诱导人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）氧化损伤的影响及其作用机制。方法 将SH-SY5Y细胞均分为对照组、H2O2模型组、PG1组、PG2组和PG3组,对照组常规加入DMEM/F12培养液培养;H2O2模型组加入H2O2 200 μmol·L-1;PG1组加入PG 20 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG2组加入PG 40 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1;PG3组加入PG 80 μmol·L-1+H2O2 200 μmol·L-1。比较5组SH-SY5Y细胞的增殖活性,细胞培养物上清中8-OHdG,细胞内ROS、LDH释放量,Hoechst 33258染色结果、细胞周期变化情况及Caspase-3酶活性。结果 H2O2模型组细胞存活率显著低于对照组,细胞培养物上清中8-OHdG水平显著高于对照组,ROS水平显著高于对照组,LDH释放量显著高于对照组,具有非常显著性差异（P＜0.01）;PG1组、PG2组和PG3组细胞存活率均显著高于H2O2模型组,细胞培养物上清中8-OHdG水平均显著低于H2O2模型组,ROS水平均显著低于H2O2模型组,LDH释放量均显著低于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG可显著改善SH-SY5Y细胞凋亡情况,且具有剂量依赖关系;H2O2模型组G0/G1期百分率显著高于对照组,S期、G2/M期和PI均显著低于对照组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PG2组、PG3组G0/G1期百分率显著低于H2O2模型组,S期、G2/M期和PI均显著高于H2O2模型组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;H2O2模型组Caspase-3酶活性显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;PG2组和PG3组Caspase-3酶活性显著低于H2O2模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 PG在一定剂量范围内对H2O2诱导的SH-SYSY神经细胞损伤具有明显的保护作用,其保护效应可能与清除ROS,减轻DNA氧化损伤,抑制线粒体通路介导的细胞凋亡有关。     

苏木含药血清对人肺癌PG细胞增殖周期影响的对比研究

目的探讨苏木含药血清对人肺癌PG细胞株的周期阻滞作用及其分子机制。方法将肺癌PG细胞分为空白组、苏木组、苏木加顺铂组、顺铂组4组,分别用20%空白血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液、20%苏木含药血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂、20%空白血清的1640培养液加1 μg/mL顺铂培养PG细胞,采用光镜和激光共聚焦显微镜观察各组PG细胞学形态,流式细胞仪检测细胞周期,PCR法检测Rb1、P16 mRNA的表达。结果光镜和激光共聚焦显微镜下苏木组PG细胞的凋亡程度明显,但低于顺铂组和苏木加顺铂组。与空白组比较,苏木组PG细胞的G0/G1和S期比例增加（P〈0.05）,G2/M期降低（P〈0.01）;顺铂组和苏木加顺铂组的S和G2/M期比例增加（P〈0.05, P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。与苏木组比较,顺铂组和苏木加顺铂组的S期和G2/M期比例增加（P〈0.05,P〈0.01）,G0/G1期降低（P〈0.01）。苏木加顺铂组PG细胞的各期与顺铂组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。与空白组比较,苏木组P16、Rb1 mRNA表达增加,顺铂组和苏木加顺铂组亦增加且优于苏木组（P〈0.05）;与顺铂组比较,苏木加顺铂组P16、Rb1 mRNA表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论苏木含药血清通过上调P16、Rb1 mRNA转录水平引起PG细胞 G0/G1、S期阻滞,从而诱导细胞凋亡,这与顺铂通过cyclinB1使细胞停滞在G2/M、S期不同。     

川芎嗪、丹参酮ⅡA对PG干细胞样细胞凋亡的影响

目的:观察不同剂量川芎嗪、丹参酮ⅡA对干细胞样细胞凋亡的影响。方法:将无血清培养获得的球细胞随机分为7组,依次为对照组、低剂量川芎嗪组、中剂量川芎嗪组、高剂量川芎嗪组、低剂量丹参酮ⅡA组、中剂量丹参酮ⅡA组、高剂量丹参酮ⅡA组,应用流式细胞术分别检测PG-BE1、PG-LH7细胞凋亡。结果:PG-BE1细胞系中剂量川芎嗪及不同浓度丹参酮ⅡA均可促进PG-BE1干细胞样细胞凋亡,其中高剂量丹参酮ⅡA促凋亡作用最强,其余三组之间促凋亡能力无统计学差异;PG-LH71细胞系低、高浓度川芎嗪、丹参酮ⅡA对PG干细胞样细胞均有促凋亡作用,其中高剂量丹参酮ⅡA促凋亡能力最强,低剂量川芎嗪促凋亡能力最弱。结论:无论是PG-BE1细胞系还是PG-LH7细胞系,高剂量丹参酮ⅡA均可明显促进PG干细胞样细胞的凋亡,其促凋亡能力等于或大于顺铂促凋亡能力。