健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及肝转移灶的生长转移及相关基因的影响

目的:观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤及转移灶的生长转移及相关基因的影响。方法:建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,并随机分为模型组,阳性组(5-氟尿嘧啶,5-Fu组),健脾养正消癥方低、高剂量组。观察健脾养正消癥方对裸鼠胃癌移植瘤的抑瘤率及肝转移灶的情况。反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中基质金属蛋白酶2(MMP-2),MMP-9,MMP-14,血管内皮生长因子(VEGF),RECK基因表达的影响。Western blot法检测健脾养正消癥方对胃癌原位移植瘤及肝转移灶中P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF,RECK基因表达的影响。结果:健脾养正消癥方高、低剂量组小鼠瘤体平均瘤重明显小于模型组(P0.01)。健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,侵袭转移相关基因中MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK基因表达上升;健脾养正消癥方作用于裸鼠胃癌移植瘤及其肝转移灶后,其相关蛋白P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF表达下降,RECK蛋白表达上升。结论:健脾养正消癥方对裸鼠胃癌原位移植瘤及肝转移灶生长具有抑制作用;健脾养正消癥方能够下调P-STAT3,MMP-2,MMP-9,MMP-14,VEGF等相关基因或蛋白的表达同时上调RECK基因或蛋白的表达。     

附子-白术药对对乳腺癌骨转移裸鼠TGF-β/Smads/Gli2/PTHrP信号通路的影响

目的:研究附子-白术药对对乳腺癌骨转移裸鼠的保护作用及其作用机制。方法:裸鼠随机分为正常组、模型组、唑来膦酸组、附子-白术药对组,采用左心室注射乳腺癌细胞MDA-MB-231BO法建立骨转移模型,并进行相应干预。观察裸鼠骨转移程度,微计算机断层扫描(Micro-CT)检测裸鼠胫骨矿物质密度(BMD),骨体积(BV),选取感兴趣区域(ROI)体积(TV),计算骨体积分数BV/TV,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(TRAP)观察骨转移灶中破骨细胞表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测转化生长因子-β_1(TGF-β1),Smad3,Smad4,胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli2)和甲状旁腺激素相关蛋白(PTHr P)的表达。结果:与模型组比较,附子-白术药对组骨转移程度显著降低(P0.01),裸鼠胫骨BMD,BV/TV显著升高(P0.01),TRAP(+)细胞数量显著减少(P0.01),骨转移灶中TGF-β_1,Smad3,Gli2和PHTr P表达均显著降低(P0.01),Smad4表达均明显升高(P0.05)。结论:附子-白术药对可减轻乳腺癌骨转移裸鼠溶骨性损伤,其机制可能与其上调Smad4蛋白表达,下调TGF-β1,Smad3,Gli2和PTHr P蛋白表达,调控TGF-β1/Smads/Gli2/PTHr P信号通路有关。     

二陈汤加味对COPD大鼠转化生长因子-β1，组蛋白去乙酰化酶2基因表达的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及其受体(TGF-βRII)基因表达,外周血单个核细胞(PBMCs)中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因表达及活性的影响。方法:采用烟熏加脂多糖方法制备COPD大鼠模型。随机分为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量组(20,10,5 g·kg~(-1))。正常组、模型组灌胃生理盐水(10 g·kg~(-1)),二陈汤加味高、中、低剂量组分别灌胃,连续14 d。荧光酶联免疫法测定PBMCs中HDAC2活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆中TGF-β_1及PBMCs中HDAC2含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA及PBMCs中HDAC2 mRNA表达;免疫组化检测TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白在肺组织的原位表达,光镜观察组织结构。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中TGF-β_1含量升高(P0.05);肺组织中TGF-β_1mRNA,TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著增强(P0.01);模型组大鼠PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均明显减低(P0.05,P0.01),差异均有统计学意义。与模型组比较,二陈汤加味高、中剂量组肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA表达(P0.01)和TGF-β_1蛋白含量均显著降低(P0.05,P0.01),免疫组化检测肺组织中TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著弱于模型组(P0.01),PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均升高(P0.05,P0.01),肺组织结构明显改善。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与增强PBMCs中HDAC2基因表达,提高HDAC2活性,抑制TGF-β_1及其受体基因的表达有关。     

姜黄素对高脂血症大鼠肾皮质TGF-β1 mRNA与MMP-2mRNA表达的影响

目的:探讨姜黄素防治高脂血症致肾脏损害的作用机理。方法:喂食高脂饲料造成大鼠高脂血症致肾脏损害模型,姜黄素(高、中、低剂量)同时干预给药12周,实验结束后,分别检测大鼠肾皮质TGF-β1mRNA和MMP-2mRNA的表达。结果:姜黄素高、中剂量组肾皮质TGF-β1mRNA表达较模型对照组显著减少,且姜黄素高剂量组显著少于低剂量组(P<0.01);姜黄素高剂量组肾皮质MMP-2mRNA表达较模型对照组明显增多,且明显多于低剂量组(P<0.01)。结论:姜黄素能减少肾皮质TGF-β1mRNA表达,提高肾皮质MMP-2mRNA表达,呈量效依赖关系,从而有效地防治高脂血症致肾脏损害。     

杜仲多糖对肝纤维化模型大鼠Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白，MMP-1，TIMP-1及TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:探讨杜仲多糖治疗肝纤维化(HF)作用,并探讨其相关的作用机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分成2组,正常组(10只)和肝纤维化造模组(50只)。造模组采用40%四氯化碳(CCl4)腹腔注射制备HF动物模型,造模成功后将其随机分为5个组,分别为模型组,杜仲多糖高、中、低剂量组及秋水仙碱组每组10只。秋水仙碱组(1.0×10-4g·kg~(-1)),杜仲多糖高、中、低剂量组(0.14,0.07,0.035 g·kg~(-1))分别连续灌胃给药8周后收集样本,测定法大鼠体质量及计算肝脏系数;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6),高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box 1,HMGB1),脂多糖(LPS),肝组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)水平;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分析各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,MMP-1,TIMP-1及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)mRNA表达情况。结果:与正常组比较,CCl_4能显著降低实验大鼠体质量(P0.01),提高肝脏系数(P0.01);杜仲多糖能显著增加HF模型的体质量(P0.01),显著降低HF模型肝脏系数(P0.01);ELISA检测表明,杜仲多糖能显著降低肝纤维化大鼠血清IL-6,HMGB1及LPS含量(P0.01);RT-PCR检测结果显示,杜仲多糖及秋水仙碱能显著降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β_1mRNA含量(P0.05),明显提高MMP-1含量(P0.05,P0.01),且呈量效关系。结论:杜仲多糖具有显著的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与抑制降低HF肝脏中Ⅰ,Ⅲ型胶原蛋白,TIMP-1及TGF-β_1mRNA表达有关。     

黄芪多糖对人胃癌细胞移植瘤的抑制效应及对Bcl2、Bax表达的影响

目的:观察黄芪多糖对人胃癌细胞SGC-7901移植瘤的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:采用体外培养的SGC-7901人胃癌细胞制作荷瘤裸鼠模型,随机分为模型组、氟尿嘧啶组(10 mg/kg)、黄芪多糖高剂量组(1.5 g/kg)和黄芪多糖低剂量组(0.75 g/kg),每组6只,于治疗开始第0、7、14、21、28 d分别测量肿瘤体积;停药后第2 d处死裸鼠,剥离瘤组织,称取瘤重,计算其抑瘤率;取部分肿瘤组织做病理学检查;采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中Bcl2和Bax的表达情况。结果:模型组裸鼠肿瘤体积明显增大,重量明显增加,给予相应药物干预之后,黄芪多糖高、低剂量组与氟尿嘧啶组裸鼠肿瘤增长缓慢,体积减少与重量明显减轻,与模型组相比,具有显著性差异(P<0.05,P<0.01);病理学检查结果显示,给予黄芪多糖干预后,瘤结节体积缩小,中央及边缘区域出现较大面积的坏死。免疫组化结果显示各给药组Bcl2蛋白表达明显低于模型组,而Bax蛋白表达明显高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:黄芪多糖对SGC-7901细胞移植瘤具有明显的抑制作用,其机制可能与降低Bcl2的表达,增高Bax的表达,下调Bcl2/Bax比值,诱导胃癌细胞凋亡有关。     

解毒活血复方对人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤血管生成及VEGF、MMP-2表达的影响

目的:观察解毒活血复方(肠复康,CFK)对人结肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用,并探讨其对STAT3、p STAT3及VEGF、MMP-2表达的影响。方法:采用裸鼠结肠癌原位种植转移模型,将荷瘤鼠50只随机分为5组,每组10只,种植后第1周开始,分别给予生理盐水(模型组)、5-FU(5-FU组)、CFK低剂量(CFK低剂量组)、CFK高剂量(CFK高剂量组)、5-FU与CFK联合应用(CFK+5-FU组),1次/d,共用4周。种植后第5周末处死动物,测量原位肿瘤瘤质、抑瘤率,免疫组化检测各组结肠癌组织中肿瘤微血管密度(MVD),Western blot法检测STAT3、p STAT3、VEGF和MMP-2蛋白表达。结果:高剂量组及CFK+5-FU组平均瘤质均显著低于模型组(P0.05);CFK高剂量组、CFK+5-FU组平均瘤质均低于5-FU组(P0.05);CFK高、低剂量组、CFK+5-FU组MVD均明显低于模型组和5-FU组,差异均有统计学意义(P0.01);CFK高剂量组、5-FU组肿瘤组织中STAT3、p STAT3、VEGF及MMP-2蛋白的表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:解毒活血复方(CFK)可通过干预STAT3磷酸化,下调VEGF、MMP-2蛋白表达,从而抑制人结肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤血管生成。     

蜈蚣提取物对裸鼠肝癌原位移植瘤EphA7表达的影响

目的:观察蜈蚣提取物(Scolopendra Centipede Extract,SCE)作用于裸鼠肝癌原位移植瘤模型后对肝癌原位移植瘤生长的抑制作用及EphA7蛋白的影响,探讨SCE抗肝癌的作用机制。方法:以肝内植入裸鼠肝癌组织法构建肝癌原位移植瘤模型。将成瘤裸鼠随机分为SCE高剂量组(蜈蚣提取物高剂量,50 mg/kg/d,腹腔注射)、SCE低剂量组(蜈蚣提取物低剂量,10mg/kg/d,腹腔注射)、5-FU组(50mg/kg/次,腹腔注射),模型组(0.9%氯化钠注射液,10g/kg/d,腹腔注射),另设正常组(同模型组),用药14d。观察裸鼠的瘤体体积与瘤重,计算抑瘤率,测血清AFP含量,检测移植瘤EphA7蛋白的表达情况。结果:(1)与模型组比较,SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组瘤重均低于模型组(P0.01);与5-FU组及SCE低剂量组比较,SCE高剂量组平均瘤重最低,差异具有统计学意义(P0.01);SCE高剂量组、SCE低剂量组、5-FU组抑瘤率分别是62.5%、37.5%、30.8%。(2)SCE高剂量组、SCE低剂量组血清AFP平均含量明显降低,与模型组比较,差异具有统计学意义(P0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组血清中AFP含量明显降低(P0.01),SCE低剂量组血清中AFP含量无明显差异(P0.05)。(3)SCE高剂量组、SCE低剂组与模型组比较,肝癌原位移植瘤中Eph A7蛋白表达均表现为下调,差异具有统计学意义(P0.01);与5-FU组比较,SCE高剂量组肝癌原位移植瘤中Eph A7蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P0.01),与SCE低剂量组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:SCE对肝癌原位移植瘤裸鼠肿瘤的生长有明显抑制作用,并有剂量依赖性;SCE通过下调Eph A7蛋白的表达,调控酪氨酸磷酸化及肿瘤血管的形成,可能是SCE抗肝癌的机制之一。     

基于MMP-2、MMP-9探讨胃肠安方及其拆方抑制人胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移的部分配伍机制

目的通过体内研究探讨胃肠安方及其不同功效组成药物拆方对胃癌裸鼠原位移植瘤生长及转移作用效果及其配伍规律。方法将胃肠安方按其功效拆分为健脾理气、清热解毒、软坚散结三大组成部分,采用2×2×2析因实验设计方案,建立裸小鼠人胃癌原位移植模型。观察胃肠安方不同功效组成药物抑制胃癌生长及转移作用效果及其之间是否存在交互作用。结果①胃肠安方全方组及健脾理气组、软坚散结组、健脾清热组的抑瘤率分别为28.5%、24.6%、28.8%及30.2%,与模型组瘤重比较明显下降,差异有统计学意义(P0.05);软坚散结因素在抑制瘤重方面具有主效应,健脾理气及软坚散结因素存在交互作用。②胃肠安全方组、清热解毒组、健脾清热组的转移率分别为22.22%、10.00%、18.18%,与模型组75.00%比较,能明显降低裸鼠胃肿瘤的转移率(P0.05)。③胃肠安全方组及其不同治则拆方配伍各组中除软坚散结组外,均能抑制MMP-2蛋白表达,尤其以健脾理气组及全方组作用最为明显(P0.05);健脾组、健脾清热组及全方组对MMP-9蛋白表达抑制作用最为明显(P0.05)。析因分析结果显示,在软坚散结因素存在时,健脾理气因素与清热解毒因素在下调MMP-2蛋白表达方面具有协同作用。胃肠安方及其拆方对裸鼠胃肿瘤组织MMP-2基因表达具有不同程度的抑制作用,以全方组、健脾软坚组、清热软坚组作用最为明显(P0.01)。析因分析结果显示,健脾理气与清热解毒及清热解毒与软坚散结组之间对MMP-2的基因表达抑制具有相互交互作用。全方组、健脾软坚组对裸鼠胃肿瘤组织MMP-9 mRNA表达抑制作用明显(P0.01),健脾理气与清热解毒及健脾理气与软坚散结组对MMP-9 mRNA表达抑制具有相互交互作用。胃肠安方全方组及健脾理气组明显抑制裸鼠胃肿瘤组织MMP-2及MMP-9的活性(P0.01),析因分析结果显示,在清热解毒因素存在时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面具有协同作用,而在缺乏清热解毒因素时,健脾理气与软坚散结因素在抑制MMP-2及MMP-9活性方面存在拮抗作用。结论胃肠安方全方组、清热解毒组、健脾清热组能明显抑制胃癌的生长和转移,清热解毒组抑制胃癌转移效果最为明显,健脾理气因素抑制瘤重主效应具有显著性,健脾理气及软坚散结因素在抑制瘤重方面存在交互作用;析因分析结果显示,在软坚散结因素存在的情况下,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有协同作用,在软坚散结因素缺乏时,健脾理气和清热解毒因素对下调MMP-2蛋白表达具有拮抗作用。在清热解毒因素存在的情况下,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性具有协同作用,在清热解毒因素缺乏时,健脾理气和软坚因素对抑制MMP-2和MMP-9活性存在拮抗作用。     

黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2表达的影响

目的:观察黄芪、莪术配伍对人卵巢癌HO-8910原位移植瘤的抑瘤效果及瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因表达的影响。方法:选取已建立荧光蛋白转染的HO-8910卵巢癌原位癌动物模型,分为模型组,阳性对照组(顺铂),黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍(按照2∶1)高、中、低剂量组,监测抑瘤效果。用免疫组化和Real time-PCR检测移植瘤组织中MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白和基因的表达情况。结果:阳性对照组,黄芪组,黄芪、莪术配伍高剂量组,黄芪、莪术配伍低剂量组平均肿瘤质量明显小于模型组(P0.05);各组MMP-2、FGF-2、BCL-2蛋白表达与模型组相比无统计学差异(P0.05);黄芪组,莪术组,黄芪、莪术配伍组高、中、低剂量组肿瘤组织中的MMP-2、FGF-2、BCL-2 mRNA表达明显低于模型组(P0.05)。结论:黄芪、莪术配伍使用在实验周期内对人卵巢癌HO-8910具有抑制作用(P0.05),其作用机制可能与下调移植瘤中MMP-2、FGF-2、BCL-2基因表达相关。     

MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达以及意义

目的探讨MMP-2、MMP-9在葡萄胎组织中的表达情况,以确定二者预测葡萄胎恶变的可能。方法收集41例清宫术后病理诊断为葡萄胎患者的首次清宫组织,并收集17例正常早孕（〈12周）无其他疾病、要求终止妊娠的绒毛组织作为对照组。将组织分为正常绒毛组（17例）、葡萄胎组（29例）、侵葡组（12例）,观察MMP-2、MMP-9在侵蚀性葡萄胎、葡萄胎以及正常绒毛表达强度。蛄果MMP-2、MMP-9在侵葡组、葡萄胎组以及正常绒毛组的灰密度值依次为70．93±8．87／86．91±8．81,102．40±7．13／109．38±5．60．105．64±5．30／111．27±4．33,侵葡组MMP-2,MMP-9的阳性表达明显高于其他2纽（P均〈0．01）,但葡萄胎组与正常绒毛组相比无显著性差异（P〉0．05）;在侵葡组的表达中MMP-2和MMP-9呈正相关。结论MMP-2、MMP-9高表达可能在葡萄胎、侵蚀性葡萄胎发生发展过程中有促进作用,能促进葡萄胎组织的恶变。在含有高危因素的葡萄胎恶变患者中,MMP-2、MMP-9的表达明显升高,联合检测MMP-2、MMP-9对预测葡萄胎的恶变具有-定的临床意义,有可能成为临床预测葡萄胎恶变的重要指标。     

冠心病不稳定型心绞痛与MMP-1、MMP-2、MMP-3相关性研究

目的:研究冠心病不稳定型心绞痛(UA)患者血清MMP-1、MMP-2、MMP-3的表达,并探讨其与冠状动脉狭窄程度和斑块不稳定性之间的关系。方法:分离出30例UA和30例CPS患者血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测其中的MMP-1、MMP-2、MMP-3表达水平,并进行相关性研究。结果:UA和CPS组患者血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3有统计学意义(P<0.005)。结论:冠心病不稳定型心绞痛患者血清中MMP-1、MMP-2、MMP-3表达水平增高,提示其可能是动脉粥样硬化不稳定斑块的发病机制之一。     

MMP3、MMP7在腰椎间盘突出组织中的表达及其临床意义

目的：检测腰椎间盘突出症患者突出椎间盘组织中基质金属蛋白酶3（MMP-3）、基质金属蛋白酶7（MMP-7）的表达,为研究椎间盘突出重吸收提供生化依据,以便进一步了解腰椎间盘突出组织重吸收的发生机制。方法：运用免疫组织化学法,通过兔抗人MMP-3、MMP-7的单克隆抗体,对30例突出腰症椎间盘标本进行染色。结果：在突出椎间盘组织中,破裂型比非破裂型MMP-3、MMP-7的阳性表达率更高,其差异有统计学意义。结论：MMP-3、MMP-7与椎间盘突出重吸收可能有关,破裂型比非破裂型更易于重吸收。     

桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平影响的实验研究

目的:研究桃红四物汤对光老化小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平的影响。方法:将30只小鼠随机分到6个组中,分别为中药高、中、低剂量组、阳性对照组(VE组)、模型对照组、和空白对照组。模型对照组、VE组和中药低、中、高剂量组小鼠造皮肤光老化模型,空白对照组小鼠正常饲养。在造模前30 min,给各组小鼠灌胃,空白对照组和模型对照组给生理盐水,高、中、低剂量组给相应剂量药液,VE组给予维生素E滴剂。造模完成后,采用Western blot方法检测小鼠组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12、Smad-2蛋白表达水平含量。结果:与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著下降(P<0.01);与模型对照组相比,中药低、中、高剂量组小鼠皮肤组织中MMP-1、MMP-3、MMP-12蛋白含量的表达水平显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01),Smad-2蛋白表达水平显著上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物汤对皮肤光老化具有一定的保护作用。     

桂枝茯苓胶囊对子宫腺肌病小鼠病灶组织MMP-2、MMP-7的影响

目的:探讨桂枝茯苓胶囊治疗子宫腺肌病(Adenomyosis,以下简称Ad)的实验依据。方法:将7周龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,除正常组以外,对其他3组小鼠行经腹同种异体垂体宫腔移植手术,术后正常组和模型组小鼠灌胃蒸馏水,中药组灌胃桂枝茯苓胶囊,西药组灌胃孕三烯酮,用药3个月,停药后继续饲养3个月,并行病理切片HE染色和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-7免疫组化测定。结果:小鼠Ad发病率模型组(90.0%)>中药组(75.0%)>西药组(69.2%)>正常组(0.0%),且MMP-2和MMP-7在动情间期子宫内膜的表达强于动情期,在模型组Ad病灶中的表达最强,和正常组相比差异显著(P<0.05),在中药组中的表达有所下降,在西药组中的表达更低,与模型组差异显著(P<0.05)。结论:采用BALB/c系小鼠行经腹同种异体垂体移植术可以作为建立Ad动物模型的理想方法,桂枝茯苓胶囊能降低小鼠Ad的发生率,其作用机理与调节MMP-2、MMP-7蛋白表达水平有关。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

丹参片治疗口腔黏膜白斑及对局部组织金属基质蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:探讨丹参片治疗口腔黏膜白斑(OLK)的临床疗效及对局部组织细胞金属基质蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)表达的影响。方法:选取2014年5月至2016年3月南京中医药大学附属南京市中西医结合医院OLK患者136例,随机分为对照组与观察组,每组68例,同期进行口腔检查的20例健康人群作为健康对照组。对照组患者给予维甲酸和西瓜霜喷雾剂治疗,观察组则在对照组的基础上联合丹参片治疗。2个月为1个疗程,2组均连续治疗1个疗程,治疗后随访12个月。比较2组治疗后临床疗效,采用免疫组化法检测OLK患者及健康对照组局部黏膜组织中MMP-2、MMP-9表达情况。结果:治疗2个月后观察组总有效率为80.88%,显著高于对照组的63.24%(P0.05);治疗4个月后观察组总有效率较治疗2个月后明显升高,且高于对照组(P0.05)。与健康对照组比较,观察组局部黏膜组织中MMP-2和MMP-9阳性表达率明显升高(P0.05);与治疗前比较,治疗2个月及4个月后观察组局部黏膜组织中MMP-2和MMP-9阳性表达率明显降低(P0.05),且治疗4个月后观察组局部黏膜组织中MMP-2阳性表达率低于对照组(P0.05);对照组仅治疗4个月后局部黏膜组织中MMP-2阳性表达率较治疗前降低(P0.05)。2组随访期间观察组复发率明显低于对照组(P0.05),2组癌变率差异无统计学意义(P0.05)。结论:丹参片联合常规药物治疗OLK效果显著,可显著抑制局部组织MMP-2和MMP-9表达,并在短期内对抑制组织癌变具有一定的积极作用。     

犀黄丸对大肠癌LoVo细胞基质金属蛋白酶2,9蛋白表达的影响

[目的]研究犀黄丸含药血清对大肠癌LoVo细胞中基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,MMP-9)表达的影响及意义。[方法]应用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,检测犀黄丸含药血清作用下LoVo细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。[结果]在犀黄丸含药血清的干预下,LoVo细胞中MMP-2、MMP-9的蛋白分泌水平与空白对照组比较明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。[结论]犀黄丸可能通过抑制MMP-2和MMP-9的蛋白表达,达到抑制大肠癌转移的作用。     

针刀疗法对膝骨关节炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13浓度的影响

目的:研究针刀对膝骨关节炎兔模型血清中基质金属蛋白酶MMP-3和MMP-13远期含量变化的影响,探讨针刀治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:将48只健康清洁6月龄新西兰兔按随机数字表法随机分为4组,每组各12只,4组分别为空白组、模型组、电针组和针刀组。空白组不参加造模,其余3组用左后肢伸直位固定制动法造成实验性膝骨关节炎的家兔模型。模型组不进行干预,电针组每周干预3次,针刀组每周干预治疗1次,两组均干预3周。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测模型兔血清中MMP-3和MMP-13的浓度。结果:模型组MMP-3、MMP-13含量明显增加,与其它组相比差异有统计学意义(P<0.05);针刀组中MMP-3、MMP-13含量降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刀疗法能够降低膝骨关节炎模型兔血清中MMP-3和MMP-13的浓度,因此可能抑制关节软骨的破坏,控制软骨的退行性改变,达到改善膝骨关节炎的症状、治疗KOA的作用。     

电针干预佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡的MMP-3、MMP-9分子调节机制

目的观察电针干预对佐剂性关节炎大鼠踝关节滑膜细胞凋亡和相关蛋白基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法32只雄性SD大鼠被随机分为生理盐水组、模型组、电针干预组和假电针干预组,每组8只。生理盐水组大鼠在双侧足垫部注射模拟造模,其余大鼠用弗氏完全佐剂在双侧足垫部注射造模。电针干预组大鼠予以电针干预。假电针干预组予以假电针刺激处理。HE染色观察模型大鼠踝关节炎症进展情况,Tunnel法检测模型大鼠踝关节滑膜细胞凋亡情况,RT-PCR检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的mRNA表达,Western blot检测踝关节滑膜的MMP-3、MMP-9的蛋白表达。结果HE染色显示,电针干预组大鼠的关节炎症显著轻于模型组。Tunnel法检测,电针干预可以促进关节炎大鼠的滑膜细胞凋亡。RT-PCR和Western blot检测结果显示,电针干预可以显著降低关节炎大鼠踝关节滑膜组织中的MMP-3、MMP-9 mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。结论电针干预可以显著减轻佐剂性关节炎大鼠的关节炎症和增殖的滑膜细胞数量,其分子机制可能和电针降低局部的MMP-3、MMP-9蛋白的表达有关。