波棱瓜子乙酸乙酯提取物对小鼠免疫性肝损伤的影响

目的:观察藏药波棱瓜子乙酸乙酯提取物对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)联合诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用。方法:采用卡介苗联合脂多糖诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型,ig给予波棱瓜子乙酸乙酯提取物(0.25、0.35、0.51g/kg)连续12d,比较各组脏器指数,测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、一氧化氮(NO)的含量及肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,HE染色切片观察肝组织病理学变化。结果:波棱瓜子乙酸乙酯提取物(0.25、0.35、0.51g/kg)可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏指数及脾脏指数;改善肝脏组织病理学变化;降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST水平;升高肝匀浆中SOD活性,降低MDA含量;但对血清中NO含量无显著影响。结论:波棱瓜子乙酸乙酯提取物对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用。     

波棱瓜子多糖对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察波棱瓜子多糖对刀豆球蛋白A(Con A)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用,并探讨其作用机制。方法:治疗组分别ig给予波棱瓜子多糖(0.71、0.99、1.44 g/kg),连续8d,采用一次性尾静脉注射ConA 30mg/kg诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型。比较各组脏器指数,测定小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)、白细胞介素6(IL-6)的含量及肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,用苏木素-伊红染液(HE)染色切片观察肝组织病理学变化。结果:波棱瓜子多糖(0.71、0.99、1.44g/kg)可明显降低免疫性肝损伤小鼠的肝脾脏器指数;降低肝损伤小鼠血清中ALT、AST、LDH的活性以及NO、IL-6的含量;升高肝匀浆中SOD的活性,降低MDA的含量;并在不同程度上改善肝脏组织病理学变化。结论:波棱瓜子多糖1.44g/kg剂量组各指标较模型组均有显著性差异,其保肝机制可能与其抗炎、抗氧化、清除自由基以及免疫调节有关。     

波棱素对免疫性肝损伤的保护作用

目的:本实验分别从体外细胞与体内实验研究波棱素对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)所致的免疫性肝损伤的保护作用。方法:建立卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导小鼠肝损伤模型,大鼠尾静脉注射BCG 12 d,用LPS诱发肝细胞损伤,同时建立原代肝细胞损伤模型,细胞与整体实验同时进行,以论证该单体药物的适用性和可靠性。分别测定血清和上清液中各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、以及整体实验中肝组织匀浆的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等生化指标活力或水平的影响。结果:波棱素体外实验中5、20、80 mg/L和体内实验中10mg/kg和20mg/kg可以降低BCG+LPS所致免疫性肝损伤和肝细胞损伤中的血清和细胞上清液中ALT、AST、LDH的活力,增强整体实验中肝组织匀浆的SOD和GSH-Px活性,减少其中MDA的含量,表现出波棱素对免疫性肝损伤的保护作用及其抗氧化的特性。结论:波棱素对由BCG+LPS致免疫性肝损伤具有一定的保护和抗氧化作用。     

波棱瓜子有效组分配伍对刀豆蛋白A所致小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:探究波棱瓜子中活性成分乙酸乙酯提取物(HE)与脂肪油(HSO)配伍对刀豆蛋白A(Con A)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用及其机制。方法:将小鼠80只随机区组分为8组,即空白组,模型组,联苯双酯组(阳性组),HSO组,HE组,组分配伍1∶1,1∶2,2∶1组,每组10只。治疗组分别灌胃(ig)给予波棱瓜子HE,HSO及二者不同剂量配伍药液连续8 d,采用尾静脉一次性注射Con A 30 mg·kg-1诱导造成小鼠免疫性肝损伤模型。造模8 h后采血,制备肝匀浆。计算小鼠的肝脾系数;酶联免疫法(ELISA)检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST),一氧化氮(NO)及肝脏匀浆中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)等生化指标的活性及含量;同时对肝组织进行病理学检查。结果:波棱瓜子各治疗组均可降低免疫性肝损伤小鼠的肝脾脏器指数;降低小鼠肝损伤血清ALT,AST水平及NO的含量;增强肝匀浆中SOD活性,降低MDA的含量;减轻Con A对肝组织的病理损伤。其中有效组分HSO-HE 2∶1配伍组各指标较模型组均有显著性差异,护肝作用最佳。结论:波棱瓜子HE与HSO配伍护肝作用优于单一组分,提示配伍时具有协同增效的作用,其保肝机制可能与其抗炎、抗氧化以及清除自由基有关。     

波棱瓜子脂肪油抗免疫性肝损伤的谱效关系研究

目的:探讨波棱瓜子脂肪油(HO)抗卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导免疫性肝损伤的药理作用与其化学成分之间的关系,揭示其抗肝损伤的有效物质基础。方法:采用GC-MS建立9批HO的GC指纹图谱,并对各个峰进行标定,获得HO化学成分数据;采用BCG+LPS诱导造成免疫性肝损伤小鼠模型,分为空白组、模型组及9个给药组,给药组ig给予HO(7mL·kg-1)连续12 d,测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,获得HO药理活性数据,将两者进行逐步多元回归分析,揭示HO抗肝损伤的有效物质基础。结果:建立了波棱瓜子脂肪油气相指纹图谱,并标定7个色谱峰;抗免疫性肝损伤药效实验中9个给药组均有不同程度的抗肝损伤作用,逐步回归分析表明HO抗免疫性肝损伤药理活性与其亚油酸、油酸、亚麻酸的含量成正相关。结论:HO对BCG+LPS诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用,可能与其含有不饱和脂肪酸有关,增强小鼠抗氧化活性。     

砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响

为了研究砂炒对波棱瓜子有效成分、致腹泻以及保肝作用的影响,该实验采用HPLC分析波棱瓜子砂炒前后有效成分波棱甲素与波棱素的含量差异;以稀便率和腹泻指数评价砂炒对波棱瓜子总木脂素(total lignans, TL)致泻情况的影响;以CCl₄急性肝损伤模型评价砂炒对波棱瓜子TL保肝作用的影响.HPLC分析结果显示,波棱瓜子砂炒后波棱甲素含量降低40.9%(P<0.01),波棱素含量无显著性变化.药效学结果显示,砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组稀便率与腹泻指数显著低于同剂量生品波棱瓜子TL组(P<0.01或P<0.05);砂炒及生品波棱瓜子TL高、中剂量组均能显著抑制CCl₄致肝损伤小鼠血清中ALT,AST水平的升高(P<0.01或P<0.05),但砂炒波棱瓜子TL高、中剂量组小鼠ALT,AST水平高于同剂量的生品波棱瓜子TL组(P<0.05).结果表明,砂炒可有效缓解波棱瓜子TL致泻作用,但是同时也降低了波棱瓜子TL的保肝作用.     

菘蓝提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:探讨菘蓝提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法:建立卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤模型,用全自动生化仪检测血清中ALT、AST水平,分光光度计测定肝匀浆中MDA、SOD含量,并观察肝脏病理组织学变化。结果:菘蓝提取物可明显降低免疫性肝损伤小鼠血清中ALT和AST活性,同时能减少肝匀浆中MDA含量,升高肝匀浆SOD活性。结论:菘蓝提取物对免疫性肝损伤具有保护作用。     

美味猕猴桃根提取物对四氯化碳致小鼠慢性肝损伤的影响

目的 探讨美味猕猴桃根提取物对CCl4致小鼠慢性肝损伤的影响.方法 采用CCl4建立小鼠慢性肝损伤模型,连续6周分别灌胃给予50,25和13 g/kg 3个剂量美味猕猴桃根提取物,测定各组动物血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性,肝匀浆丙二醛(MDA)含量,测算肝指数(HI).结果 美味猕猴桃根提取物高、中剂量组显著降低肝损伤小鼠血清ALT、AST活性和肝匀浆MDA含量(P<0.01),明显降低HI(P<0.05).结论 美味猕猴桃根提取物对CCl4致小鼠慢性肝损伤有一定的保护作用.     

4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮对小鼠急性肝损伤的保护用

目的研究4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮(AcO-BOA)对四氯化碳小鼠急性肝损伤的保护作用。方法用腹腔注射四氯化碳(Carbon tetrachloride,CCl4)造小鼠急性肝损伤模型后,给予不同剂量的AcO-BOA,检测血清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝组织中的超氧化物歧化酶(SOD),还原型谷胱甘肽(GSH)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果 AcO-BOA能升高肝组织中的SOD,GSH活性,明显降低血清中的ALT、AST的活性和肝匀浆的MDA含量(P<0.05)。结论 4-乙酰氧基苯并恶唑-2-酮能降低肝损伤的程度,对四氯化碳导致小鼠急性肝纤维化有一定的保护作用。     

一测多评法在肝能滴丸质量控制中的应用研究

目的建立一测多评法同时测定肝能滴丸及其原料药中8种成分(去氢双松柏醇、波棱醇I、波棱内酯A、波棱甲素、波棱素、herpetetrone、波棱酮、波棱乙素)的含量。方法采用HPLC法,以波棱甲素为内参物,建立波棱甲素与其他7种指标成分的相对校正因子(f_(k/m)),并计算各待测成分的量。同时采用外标法测定5批肝能滴丸及原料药中这8种成分的含量,比较一测多评法所得的计算值与实测值之间的差异,以验证建立的一测多评法的准确性与可行性。结果在一定线性范围内,波棱甲素与去氢双松柏醇、波棱醇I、波棱内酯A、波棱素、herpetetrone、波棱酮、波棱乙素的f_(k/m)分别为0.908、0.728、0.516、0.720、0.461、0.623、0.410,在不同情况下重现性良好;5批肝能滴丸及原料药的计算值与实测值无显著性差异。结论以波棱甲素为内参物,同时测定肝能滴丸及原料药中8种成分含量的一测多评方法可靠,结果准确,可用于肝能滴丸的质量控制。     

RP-HPLC同时测定藏药波棱瓜子中7个活性木脂素成分的含量

 目的建立一种RP-HPLC同时测定藏药波棱瓜子中7个活性木脂素成分(ent-isolariciresinol,dehydrodiconiferyl alcohol,herpet-rione,herpetin,herpetetrone,herpetotriol,herpetal)的含量。方法采用Pinnacle DB C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm,RESTEK)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸为流动相梯度洗脱,检测波长为240 nm,流速为1.0 mL·min^-1。结果Ent-isolariciresinol,dehydrodiconiferyl alcohol,herpetrione,herpetin,herpetetrone,herpetotriol和herpetal的线性范围分别为:1.29～24.80 mg·L^-1(r=0.978 9),6.77～130.20 mg·L^-1(r=0.100 26),10.41～200.20 mg·L^-1(r=0.980 2),4.45～85.50(r=0.986 1),2.91～56.10 mg·L^-1(r=0.982 8),5.80～111.60mg·L^-1(r=0.100 78)和6.99～134.40 mg·L^-1(r=0.986 6)。平均回收率均在95.19%～102.64%内(RSDs<1.52%)。结论本法准确可靠,灵敏度高,重现性好,结果表明,该分析方法适用于波棱瓜子药材的质量控制。     

基于聚类分析和典型相关分析的北柴胡保肝作用谱效关系研究

目的 探讨北柴胡正丁醇萃取部位的保肝作用及与其HPLC指纹图谱间的谱效关系,以阐明其药效物质基础。方法 采用HPLC-ELSD法获取北柴胡正丁醇萃取部位的指纹图谱;检测CCl₄所致急性肝损伤小鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平、肝组织中丙二醛（MDA）的量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性;利用聚类分析与典型相关分析法对色谱-药效数据进行相关分析。结果 从HPLC指纹图谱中共提取出12个能够标示药材特征的皂苷类成分的共有峰。不同产地北柴胡药材的保肝作用存在显著差异（P＜0.05）。聚类分析和典型相关分析明确了给予北柴胡正丁醇萃取部位的小鼠血清中ALT水平和肝组织中SOD活性与皂苷类化合物柴胡皂苷a和柴胡皂苷d之间存在线性关系。结论 北柴胡保肝作用的部分药效物质基础为柴胡皂苷a和柴胡皂苷d。     

熊胆粉不同极性部位HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的 建立熊胆Fel Ursi粉不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价熊胆粉的质量评价提供参考。方法 将熊胆粉分别用醋酸乙酯、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇、乙腈依次提取,浓缩干燥,用甲醇溶解,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果 10批熊胆粉醋酸乙酯部位共有模式共标记6个共有峰,三氯甲烷部位共有模式共标记8个共有峰,丙酮部位共有模式共标记8个共有峰,乙腈部位共有模式共标记10个共有峰,乙醇部位共有模式共标记16个共有峰,5种溶剂提取物均指认了4个共有指纹峰（牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸）。综合聚类分析和主成分分析（principal component analysis,PCA）结果,发现相同产地的熊胆粉,受不同厂家加工方法不同的影响,也存在一定的质量差异。通过正交偏最小二乘-判别分析（orthogonal partial least squares- discriminant analysis,OPLS-DA）,发现牛磺熊去氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、鹅去氧胆酸、乙醇部位10号峰、乙腈部位1、2号峰可能是熊胆粉质量差异的主要标志性成分。结论 所建立的HPLC指纹图谱可以反映熊胆粉的化学成分分布,为熊胆粉的整体质量评价提供参考,并为熊胆粉谱效关系研究提供一定依据。     

河南连翘不同极性部位的HPLC指纹图谱

目的:建立河南连翘饮片不同极性部位的HPLC指纹图谱,比较不同提取部位化学成分之间的差异,为全面评价河南连翘饮片的质量提供参考。方法:将河南连翘饮片用75%乙醇制备总提取物后,分别用石油醚、乙酸乙酯、三氯甲烷、正丁醇、水依次萃取,浓缩至浸膏,减压干燥制得粉末样品,建立HPLC指纹图谱,并采用相似度评价系统软件进行数据分析。结果:连翘饮片石油醚部位HPLC指纹图谱确定了18个共有峰,指认了3个指纹峰;三氯甲烷部位HPLC指纹图谱共确定了25个共有峰,指认了4个指纹峰;乙酸乙酯部位HPLC指纹图谱共确定了20个共有峰,指认了3个指纹峰;正丁醇部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了3个指纹峰;水部位HPLC指纹图谱共确定了17个共有峰,指认了2个指纹峰。连翘饮片同一极性部位指纹图谱相似度较高,不同极性部位之间化学成分有明显差异。结论:该实验方法准确、可靠、重复性高,所建指纹图谱可以全面反映连翘饮片的化学成分分布,为连翘饮片的整体质量评价提供参考。     

丹参水溶性成分促斑马鱼血管生成及心脏保护活性的谱-效关系研究

目的研究丹参水溶性成分促血管生成及心脏保护作用的谱-效关系,揭示其药效物质基础。方法采用HPLC法建立丹参水溶性成分指纹图谱,以斑马鱼建立不同药效学模型,对丹参水溶性成分促血管生成及心脏保护作用进行评价,利用灰色关联度分析方法,建立丹参水溶性成分促血管生成及心脏保护作用的谱-效关系。结果在丹参水溶性成分HPLC指纹图谱中,9种水溶性成分与各药效作用均呈正相关,且各共有峰与药效关联度趋势基本一致,其中5号峰(紫草酸)对各药效作用贡献最大。结论通过谱-效关系研究,阐明了丹参水溶性成分促血管生成及心脏保护作用的物质基础,可为其深入研究奠定基础。     

Protection of Citrullus colocynthis Fruit Extracts on Carbon Tetrachloride-induced and Bacillus Calmette-Guerin plus Lipopolysaccharide-induced Hepatotoxicity in Mice

Objective To investigate the hepatoprotective activities of the extracts from Citrullus colocynthis(ECC),a native plant used as traditional Uigur Medicine on acute liver injury in mice.Methods The activities of ECC of petroleum ether(ECCPE),chloroform(ECCC),ethyl acetate(ECCEA),n-butyl alcohol(ECCBA),and water(ECCW)were evaluated in vivo using two experimental models,carbon tetrachloride(CCl4)-and bacillus calmette-guerin(BCG)plus lipopolysaccharide(LPS)-induced acute hepatotoxicity in mice.The contents of aspartate aminotransferase(AST)and alanine aminotransferase(ALT)in serum were determined and the liver histological examination was carried out,respectively.Results The pretreatment with ECC for 7 d obviously reduced the impact of CCl4toxicity on the serum markers of liver damage,ECCEA and ECCC with a significant difference of AST(P<0.01,0.05,respectively)and ALT(P<0.05,0.01,respectively).The protective activity was reconfirmed against BCG+LPS-induced injury and the serum enzymatic levels were obviously elevated,for ECCEA and ECCC with a significant difference of AST(P<0.05,0.01,respectively)and ALT(P<0.01,0.05,respectively).Conclusion That ECCEA and ECCC are the potent hepatoprotective extracts that could protect liver against the acute injury,and this ability might be attributed to their hepatoprotective potentials.     

短柄小连翘中乙酸乙酯部位化学成分的研究

采用乙醇提取和液液萃取的方法对短柄小连翘茎枝进行了提取.通过硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、反相中压柱色谱和高效液相等多种色谱方法相结合,从短柄小连翘乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离得到了7个双环氧木脂素化合物.经MS和NMR等波谱技术分别鉴定为松脂醇(pinoresinol,1),5'-甲氧基-松脂素(medioresinol,2),8-乙酰基松脂醇(8-acetoxypinoresinol,3),表松脂醇(epipinoresinol,4),(+)-丁香树脂醇[(+)-syringaresinol(5)]、(+)-1-羟基丁香树脂醇[(+)-1-hydroxysyringaresinol(6)]和erythro-buddlenolE(7).化合物 1~7 均为首次从该植物中分离得到.抗氧化活性筛选结果显示,化合物7在1×10^-6 mol·L^-1浓度下,对Fe^2+_Cys诱导大鼠肝微粒体丙二醛(MDA)生成的抑制率为38%,而相同浓度下,阳性对照药Vit E的抑制率为35%,表明化合物7具有显著的抗氧化作用.