阿托伐他汀对高胆固醇血症患者清道夫受体BⅠ表达的影响

目的探讨清道夫受体BⅠ(SR-BⅠ)在动脉粥样硬化发生中的作用及阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的作用机制。方法随机选择健康体检中心男性高TC血症患者60例为高脂组,另选男性TC正常者60例为对照组。采用紫外分光法检测血管紧张素转换酶(ACE)的活性,放射免疫法检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平,硝酸还原酶法检测NO水平,RT-PCR和Western blot法分别检测SR-BⅠ mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,高脂组TC、TG、LDL-C、AngⅡ、ACE明显升高(P0.05,P0.01),HDL-C、NO、SR-BⅠ mRNA和蛋白表达明显降低(P0.05,P0.01);与同组治疗前比较,高脂组治疗后TC、TG、LDL-C、Ang Ⅱ、ACE明显降低(P0.05),HDL-C、NO、SR-BⅠ mRNA和蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01)。HDL-C与SR-BⅠ呈显著正相关,AngⅡ与SR-BⅠ呈显著负相关。结论高TC血症患者SR-BⅠ表达降低,阿托伐他汀能上调SR-BⅠ表达。     

烟酸对实验性动脉粥样硬化兔脂肪组织和细胞Caveolin-1表达的影响

目的 探讨烟酸对实验性动脉粥样硬化兔脂肪组织和细胞小凹蛋白1(Caveolin-1)表达的影响.方法 16只健康雄性新西兰大白兔给予高脂饮食8周,随机分为高脂组(继续饲以高脂饲料6周,n=8)和烟酸组[在高脂饮食基础上给予烟酸200 mg/(kg·d),共6周,n=8],另选8只兔给予普通饮食14周作为正常对照组.实验前后测定血脂和体重,14周末处死动物,取腹股沟皮下脂肪组织采用实时荧光定量PCR检测Caveolin-1 mRNA表达.体外观察不同浓度烟酸(0、0.2、1.0和5.0 mmol/L)对兔脂肪细胞Caveolin-1 mRNA表达的影响.结果 与正常对照组相比,高脂组总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显升高,主动脉内膜厚度和斑块面积均显著增加,而脂肪组织Caveolin-1 mRNA表达明显降低;与高脂组相比,烟酸组总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显降低,高密度脂蛋白胆固醇水平升高,且主动脉内膜厚度和斑块面积均显著缩小,脂肪组织Caveolin-1 mRNA表达升高.体外实验显示,烟酸可呈浓度依赖性地刺激脂肪细胞Caveolin-1 mRNA表达.结论 烟酸可明显改善血脂谱及稳定动脉粥样斑块,可能与上调脂肪组织或细胞Caveolin-1 mRNA表达水平有关.     

皮下免疫热休克蛋白65对小鼠巨噬细胞胆固醇流出率的影响及机制

目的观察皮下免疫不同剂量热休克蛋白65(HSP65)对载脂蛋白E缺失小鼠动脉粥样硬化及巨噬细胞TC流出率的影响。方法选择apoE-/-小鼠24只,随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、5μg HSP65组及25μg HSP65组,每组8只,第3、6周进行皮下免疫。实验第16周末取标本,分离小鼠主动脉测定血管斑块面积;用自动生化仪测定小鼠血脂水平,酶联免疫吸附法分别检测血清HSP65抗体滴度及炎性因子白细胞介素10(IL-10)和干扰素γ水平,液闪计数仪检测巨噬细胞TC流出率;提取肝脏mRNA及膜蛋白,分别检测ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和G1(ABCG1)、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的表达。结果与PBS对照组比较,5μg HSP65组和25μg HSP65组TC流出率明显降低,HSP65抗体滴度和干扰素γ水平明显升高,主动脉粥样硬化斑块面积明显增加(P<0.05,P<0.01);其中25μg HSP65组血清HDL-C和IL-10表达较PBS对照组明显降低(P<0.01);5μg HSP65组和25μg HSP65组ABCA1、ABCG1及SR-BⅠmRNA表达明显低于PBS对照组(P<0.05)。结论皮下免疫HSP65可抑制小鼠巨噬细胞TC流出,可能是通过下调ABCA1、ABCG1和SR-BⅠ的表达。     

泰脂安对高胆固醇血症兔血脂和主动脉内膜中巨噬细胞的影响

目的 观察泰脂安对高胆固醇血症兔血脂和主动脉内膜中巨噬细胞的影响,以探讨泰脂安在调脂和抗动脉粥样硬化中的作用.方法 给16只新西兰健康雄兔高胆固醇饮食,8周后随机给予泰脂安1.0 g·kg-1·d-1,8只为泰脂安组;淀粉干预25.0 mg·kg-1,8只为对照组;另8只兔每天分别进食普通饲料120 g(正常饮食组).6周后测定血清血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDI-C),采用免疫组织化学法测定主动脉内膜中巨噬细胞阳性数.结果 与正常饮食组比较,对照组和泰脂安组TC[分别为(1.8±0.7)mmol/L与(27.8±1.0)mmol/L和(26.5±2.5)mmol/L]、LDL-C[(0.6±0.2)mmol/L与(14.5±3.3)mmol/L和(13.7±4.1)mmol/L]升高,均为P<0.05.经泰脂安干预后,主动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞表达下降[(71.8±15.5)%与(53.8±12.7)%,P<0.05];TC[(19.0±4.3)mmol/L]和LDL-C[(11.6±2.2)mmol/L]水平下降(P<0.05).结论 泰脂安能有效地调节血脂和降低动脉粥样硬化程度.     

烟酸对实验性动脉粥样硬化兔主动脉骨桥蛋白表达的影响

目的 探讨烟酸对动脉粥样硬化兔主动脉壁骨桥蛋白表达的影响.方法 16只雄性新西兰大白兔给予高脂饮食8周后,随机分为高脂血症组与烟酸组:高脂血症组(n=8)继续饲以高脂饲料6周;烟酸组(n=8)在高脂饮食基础上给予烟酸[200 mg/(kg·d)]6周.另选8只兔给予普通饮食14周作为正常对照组.14周末处死动物进行主动脉病理学检测,采用免疫组织化学染色检测兔主动脉壁骨桥蛋白的表达水平,采用实时定量PCR检测各组兔主动脉壁骨桥蛋白mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,高脂血症组主动脉内膜厚度和斑块面积显著增加,骨桥蛋白和mRNA表达显著增加(P＜0.01).烟酸组主动脉内膜和斑块面积显著缩小,骨桥蛋白和mRNA表达显著减少(均P＜0.01).相关性分析显示:骨桥蛋白表达量与动脉粥样硬化斑块面积(r=0.821,P＜0.01)及内膜厚度(r =0.818,P＜0.01)均呈正相关;骨桥蛋白mRNA表达量与动脉粥样硬化斑块面积(r=0.888,P＜0.01)及内膜厚度(r =0.874,P＜0.01)也均呈正相关.结论 烟酸抗动脉粥样硬化作用除与其降脂作用有关外,还可能与其降低骨桥蛋白和mRNA水平有关.     

烟酸对实验性动脉粥样硬化兔主动脉斑块形成和MK2表达的影响

目的探讨烟酸对动脉粥样硬化斑块形成及动脉壁MK2 mRNA表达的影响。方法 16只雄性新西兰大白兔给予高脂饮食8周后,随机分为高脂血症组(n=8)和烟酸组(n=8),高脂血症组继续饲以高脂饲料6周,烟酸组在高脂饮食基础上给予烟酸[200 mg/(kg.d)]6周。另选8只兔给予普通饮食14周作为正常对照组。14周末处死动物进行主动脉病理学检测,采用实时定量PCR检测各组兔主动脉壁MK2 mRNA的表达。结果与正常对照组相比,高脂血症组总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高,主动脉内膜厚度和斑块面积显著增加,MK2 mRNA表达显著增加(P0.01)。与高脂血症组相比,烟酸组总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低,高密度脂蛋白胆固醇水平升高,主动脉内膜厚度和斑块面积显著减少,MK2 mRNA表达也显著减少(P均0.01)。MK2 mRNA表达量与动脉粥样硬化斑块面积(r=0.919,P0.01)和内膜厚度(r=0.863,P0.01)呈正相关。结论烟酸抗动脉粥样硬化作用除与其降脂作用有关外,还可能与其降低MK2 mRNA水平有关。     

山楂叶总黄酮对AS模型大鼠PPARα、LXR、ABCA1mRNA表达的影响

目的 探讨PPARα活化后对肝脏X受体(LXR)、三磷酸腺苷结合盒转运子A1 (ABCA1) mRNA表达的影响,及其在AS发生、发展和治疗中的作用及机制.方法 以高脂饲料饮食配合维生素D3注射建立Wistar大鼠AS模型,并设立对照组、模型组、给药组.采用半定量RT-PCR方法检测各组动脉壁中PPARα、LXR和ABCA1基因的表达,采用血清生物化学检测法检测大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C及TC/HDL的含量.结果 AS模型组大鼠血清TG高于对照组(P<0.05)、TC、LDL-C、TC/HDL-C的水平均明显高于对照组(P<0.01),但HDL-C水平与对照组比较略有降低(P>0.05).给药组大鼠血清TG、TC、LDL-C均较AS模型大鼠降低(P<0.05),TC/HDL-C较AS模型大鼠明显降低(P<0.01),但HDL-C较模型组升高(P<0.05).与对照组比较,AS模型组PPARα、LXR、ABCA1基因表达含量降低(P<0.05).与AS模型组比较,给药组PPARα表达水平明显升高(P<0.01)、LXR、ABCA1表达水平升高(P<0.05).结论 山楂叶总黄酮可通过激活PPARα提高LXR和ABCA1的表达促进TC的逆向转运,降低TC的负荷,从而达到防止AS发生的危险.     

激动β_3肾上腺素受体对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的探讨激动β3肾上腺素受体(β3-AR)对载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠血脂、动脉粥样硬化(AS)斑块、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)的影响。方法选择10周龄C57BL/6小鼠10只作为正常对照组(A组,等量生理盐水腹腔注射),10周龄apoE-/-小鼠50只,高脂饮食至36周龄时随机分为高脂模型组(B组,等量生理盐水腹腔注射)、阿托伐他汀阳性药物对照组(C组,10mg/kg灌胃)、β3-AR激动剂小剂量组(D组,1.65μg/kg腹腔注射)、β3-AR激动剂大剂量组(E组,3.0μg/kg腹腔注射)与β3-AR拮抗剂组(F组,5.0μg/kg腹腔注射),分别给予β3-AR激动剂或β3-AR拮抗剂腹腔注射2次/周,共12周。48周龄时全自动生化仪检测小鼠血脂,取胸主动脉行病理观察,Western blot测定SR-BⅠ蛋白表达水平的变化。结果与B组比较,C组、D组、E组TC、VLDL/LDL-C显著下降(P<0.01);胸主动脉粥样斑块面积减小(P<0.01);SR-BⅠ蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。D组、E组TG水平显著下降(P<0.01)。结论激动β3-AR通过改善apoE-/-高脂小鼠血脂代谢,上调SR-BⅠ,促进胆固醇逆转运,进而起到了减小胸主动脉斑块面积、抗AS的作用。     

白藜芦醇对兔动脉粥样硬化血脂及反映斑块稳定性的MMP-9/TIMP-1比值的影响

目的:观察白藜芦醇对动脉粥样硬化兔血脂代谢、主动脉过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响。方法:将70只雄性新西兰白兔随机分为5组:A组喂普通饲料,B组喂高脂饲料,C、D、E组喂高脂饲料的同时分别给予白藜芦醇4mg/kg.d、8mg/kg.d、16mg/kg.d进行干预。于12周末取血测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清MMP-9、TIMP-1水平。取完整胸主动脉,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察主动脉PPARγ、MMP-9、TIMP-1mRNA的表达。结果:病理对照组(B组)TG[(2.46±0.32)mmol/L∶(0.42±0.23)mmol/L]、TC[(30.19±3.98)mmol/L∶(1.07±0.22)mmol/L]、HDL-C[(1.74±0.50)mmol/L∶(0.63±0.30)mmol/L]、LDL-C[(16.82±1.95)mmol/L∶(0.53±0.15)mmol/L]、PPARγ[(0.78±0.07)∶(0.59±0.05)]、TIMP-1[(91.80±9.23)ng/ml∶(68.49±9.04)ng/ml]、MMP-9[(341.96±9.94)ng/ml∶(164.04±7.08)ng/ml]水平均明显高于正常对照组(A组)(P均0.01);随着白藜芦醇剂量的增大,血清TG、TC、LDL-C水平,MMP-9及其mRNA表达,和MMP-9/TIMP-1比值显著降低,HDL-C、TIMP-1及其mRNA表达显著升高,在中、高剂量组(D、E组)更为明显(P0.05～0.01),呈一定的剂量依赖性。结论:白藜芦醇可改善兔动脉粥样硬化血脂代谢紊乱,通过降低MMP-9/TIMP-1比值稳定粥样硬化斑块。     

小檗碱对高脂兔模型脂代谢及脂肪PPARγ、INSIG-2基因表达的影响

目的 研究小檗碱对高脂兔模型脂代谢的影响,及其与脂肪代谢相关基因表达变化的相关性.方法 采用高脂饲料喂养建立家兔高脂模型,测定各处理组血清TC、TG、LDL-C和HDL-C水平.实时荧光定量PCR技术检测脂肪组织PPARγ和INSIG-2基因表达. 结果 高脂组TC、TG和LDL-C水平较普食组明显升高(P<0.05),而小檗碱处理后血清TC、TG和LDL-C的水平较高脂组明显降低(P<0.05);实时荧光定量PCR检测结果显示,高脂组PPARγ和INSIG-2 mRNA表达明显高于普食组(P<0.05),小檗碱处理后PPARγ mRNA表达明显较高脂组显著降低(P<0.05),而INSIG-2 mRNA表达则较高脂组明显上调(P<0.05),且低剂量作用更明显. 结论 小檗碱具有明显的降血脂作用,其机制与PPARγ表达下调而INSIG-2基因表达上调有关.