一种新型肝炎相关性病毒的分子生物学研究

目的 了解南京地区ＴＴＶ病毒感染情况，重叠ＴＴＶ感染对慢性乙型肝炎病变和蔼和ＨＢＶ复制的影响。方法 采用巢式ＰＣＲ方法检测血清标本中ＴＴＶ－ＤＮＡ。结果 ４６９ 血清标本中，ＴＴＶＤＮＡ总检出率为２１．１％。其中健康人群、献血员、血透患者、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎、非甲－非庚型肝炎检出率分别是９．４％、３３．３％、３０．８％、１１．６％、１９．９％、１５．４％、８．７％、９     

TTV在非甲-庚型肝炎患者中的检测、克隆及测序

目的分析ＴＴＶ（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｔｅｄｖｉｒｕｓ）深圳分离株ＯＲＦ１部分基因序列。方法在ＴＴＶＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），检测４０例广东地区非甲－庚型肝炎患者血清中ＴＴＶＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果４０例非甲－庚型肝炎中２１例ＴＴＶＤＮＡ阳性（５２．５％）。对其中一株ＴＴＶ（ＳＺ１）ＯＲＦ１部分基因克隆、测序，并与Ｏｋａｍｏｔｏ等报道的２株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）相比较，其核苷酸序列的同源性分别为９６．７％与９７．４％。结论本研究证实我国华南地区存在ＴＴＶ感染。ＴＴＶ的分子克隆与测序及ＰＣＲ诊断技术的建立对国内进一步开展ＴＴＶ感染的诊断与流行病学调查均具有重要意义     

上海地区血液透析患者与供血者中输血传播病毒DNA检测及部分核苷酸序列分？

目的 了解上海地区暴露于血及血制品的血透患者中输血传播病毒（ＴＴＶ）感染。方法 采用套式ＰＣＲ技术，检测了６例血透患者和４９例供血员血清中ＴＴＶ ＤＮＡ，并对其中各１例ＰＣＲ产物（２７２ｂｐ）测序。结果 血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ的检出率为３２．８％（２０／６１），供务员的检出主继２４．５％（１２／４９）。２０例ＴＴＶＤＮＡ阳性血透患者中，６例为单纯ＴＴＶ感染，６例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染，４     

非甲～庚型肝炎患者血清中TTV的检测及序列分析

我们采用套式ＰＣＲ技术对 5 0例非甲～庚型肝炎患者进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测 ,并对ＴＴＶ ＤＮＡ序列进行比较。　　对象与方法1.对象 :5 0例血清样本采自传染科诊断为急慢性非甲～庚型肝炎患者 ,血清病毒标志经ＥＬＩＳＡ和 (或 )ＰＣＲ法检测排除甲～庚型肝炎病毒、ＥＢ病毒及ＣＭＶ感染 ,并排除药物性、酒精性、自身免疫性肝炎及脂肪肝 ,无输血及血制品史。男性 41例 ,女性 9例 ,年龄 ( 30± 13)岁。2 .方法 :ＴＴＶ ＤＮＡ检测 :ＴＴＶ引物位于ＯＲＦ1区 ,外引物按ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ报道序列合成 ,引物序列为 :正义链 (Ｐ1)ＡＣ ＣＧ…     

斑点杂交法检测肝病患者TTV感染状况初探

目的 探讨斑点杂交法在检测肝病患者ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染状况中的应用价值。方法 提抽患者血清中ＤＮＡ,分别采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）及斑点杂交技术检测其中的ＴＴＶ病毒ＤＮＡ。结果 在３０份非甲～非戊型肝炎患者血清中,ＰＣＲ方法检出１１份为ＴＴＶ阳性,检出率为３６．７％。采用斑点杂交法检出３份阳性血清,阳性率为１０％。制备的探针具有ＴＴＶ特异性,可检出相当于１０＾６拷贝的病毒ＤＮＡ。结论 以地高辛标     

TTV单独及重叠HBV感染的临床研究

目的：了解输血传播病毒（Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ Ｔｉａｎｓｍｉｔｔｅｄ Ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）单独及重叠乙肝病毒（ＨＢＶ）感染的临床特征，探讨其致病性。方法：用套式聚合酶链反应检测血清中ＴＴＶ ＤＮＡ，用ＥＬＩＳＡ法和／或ＰＣＲ法对其他肝炎病毒标志物进行血清学检测。结果：肝病患者ＴＴＶ ＤＮＡ总的阳性率为２１．９％（１０７／４８９）。从临床分型来看，ＴＴＶ单独感染者以急性肝炎（ＡＨ）为多见，占７５％     

上海地区血液透析患者与供血者中输血传播病毒DNA检测及部分核苷酸序列分析

目的　了解上海地区暴露于血及血制品的血透患者中输血传播病毒（ＴＴＶ）感染率。方法　采用套式ＰＣＲ技术,检测了 ６例血透患者和 ４９例供血员血清中 ＴＴＶ ＤＮＡ,并对其中各 １例 ＰＣＲ产物（２７２ｂｐ）测］３。结果血透患者ＴＴＶ ＤＮＡ的检出率为 ３２．８％（２０／６１）,供血员的检出率为 ２４． ５％（１２／４９）。 ２０例 ＴＴＶＤＮＡ阳性血透患者中,６例为单纯ＴＴＶ感染,６例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染,４例为ＴＴＶ、ＨＣＶ和４例为ＴＴＶ、ＨＧＶ重叠感染。在所有ＴＴＶ感染者中,仅发现１例血清ＡＬＴ升高,该病例为ＴＴＶ、ＨＣＶ及ＨＧＶ重叠感染。对ＰＣＲ阳性扩增产物２７２ｂｐ测序结果显示,上海株（ＳＨＰ、ＳＨＤ）核苷酸的同源性为９９．６％,与深圳株、２株日本株核着酸的同源性分别为９７．４％、９８．７％和９８．７％,表明ＴＴＶ上海株与深圳株及日本株（Ｎ２２、Ｇ１ａ）属同一亚型,首次证实了上海地区的ＴＴＶ感染。结论ＴＴＶ感染可经血传播。其致病性较弱,对ＴＴＶ的研究尚属开始,ＴＴＶ的病原学、流行病学及临床意义等问题还有待进一步探索和阐明。     

各型病毒性肝炎TTV DNA检测结果

各型肝炎中及献血者中ＴＴＶ合并感染情况。设计特异性引物,采用半套式ＰＣＲ法,对辽沈地区２０例散发性非甲－非庚型肝炎,２０例慢性乙型肝炎,２０例慢性丙型肝炎及４０例重型肝炎与５０例献血者血清进行ＴＴＶ ＤＮＡ检测。非甲－非庚型肝炎血清阳性１例（５％）;重型肝炎阳性９例（２２．５％）;慢性乙肝阳性５例（２５％）;慢性丙肝阳性３例（１５％）;献血者未查出ＴＴＶ ＤＮＡ阳性者。二株ＴＴＶ ＤＮＡ扩增产物的     

病原不明肝炎患者肝组织中TTV正链的检测及其与病变的关系

目的探讨 ＴＴＶ与病原不明肝炎的关系及 ＴＴＶ能否在肝组织中复制。方法用巢式 ＰＣＲ法对３１例某职校流行的病原不明肝炎患者的血清进行３．２ｋｂＴＴＶ ＤＮＡ扩增, ３０例同地区志愿献血员为对照组,结合肝炎患者的病理改变进行分析;同时用核酸酶保护法对其中７例肝炎患者的肝组织做ＴＴＶ正链的检测。结果在病原不明肝炎患者中,ＴＴＶ的检出率为９６．９％,在志愿献血员中检出率为６０％,两组间ＴＴＶ的检出率差异有显著性。在ＴＴＶ ＤＮＡ阳性的３０例肝炎患者中,尽管大多数肝脏损害轻微,但仍有６．６％有慢性肝炎改变。在７例病原不明肝炎患者的肝组织中用核酸酶保护法均检出ＴＴＶ ＤＮＡ的正链。结论 ＴＴＶ感染可能与该病原不明肝炎的流行有关,ＴＴＶ可以在人肝组织中复制,ＴＴＶ可能导致的肝脏损害轻微,但仍有少数有慢性肝炎发生。     

一种新的可经输血传播病毒(TTV)的分子流行病学研究

目的 分析深圳地区不同人群中ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ，ＴＴＶ）感染情况及其基因型。方法 在ＴＴＶ ＯＲＦ１设计引物，建立巢式聚合酶链反应，检测深圳地区不同人群血清中ＴＴＶ ＤＮＡ。对ＰＣＲ产物进行分子克隆，以荧光法（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，３７３Ａ）测序。结果 ９０例一般人群、８８例有偿献血员、７９例静脉毒瘾者、５２例非甲￣非庚型肝炎、６７例     

维持性血透患者六种肝炎病毒感染的调查研究

目的：了解维持性血液透析患者六种肝炎病毒感染情况,探讨其与输血、透析时间、肝功能的关系。方法：对１６７例维持性血液透析患者进行调查,采用第二代酶联免疫法（ＥＬＩＳＡ）检测ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＥＶ、ＨＧ,用套式ＰＣＲ法检测经输血传播的肝炎病毒（ＴＴＶ）ＤＮＡ,并按血透时间、输血次数等分组进行对比分析。结果：ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＨＥＶ、ＨＧＶ、ＴＴＶ感染率分别为０％、２０．４％、５５．７％、０％、     

TTV基因组的克隆与进化分析

利用ＰＣＲ方法从输血传播病毒 (ＴＴＶ)阳性标本中获得不同长度且重叠覆盖ＴＴＶ基因组的ＤＮＡ片段。将ＰＣＲ扩增片段克隆到ｐＴ Ａｄｖ载体中 ,筛选获得阳性克隆。ＤＮＡ序列测定结果表明所克隆的片段为ＴＴＶ基因组序列。利用ＤＮＡ片段中特有的限制性内切酶位点将ＴＴＶ的ＤＮＡ片段首尾相连 ,得到近全长的基因组克隆 ,命名为ＴＴＶ0 2 1。对ＴＴＶ0 2 1的核酸序列进行分析 ,ＴＴＶ0 2 1长 34 72ｎｔ,存在 2个阅读框架ＯＲＦ1和ＯＲＦ2 ,分别编码 785和 146个氨基酸。将ＴＴＶ0 2 1与其它已知的ＴＴＶ基因组全序列进行了同源性比较 ,…     

新疆地区输血传播病毒的检测

随着检测技术的发展，对肝炎病毒的认识更加深刻。除甲～戊型肝炎和已知的其它致病因素外，仍有１０％～２０％的因输血或散发性肝炎不能用现有的检测方法检出其病毒标志。１９９７年Ｎｉｓｈｉｚａｗａ等报告了一种新发现的，与人类肝炎相关的ＤＮＡ病毒ＴＴＶ。为了解新疆地区ＴＴＶ感染情况，我们用日本学者报道的ＴＴＶ核苷酸序列设计了两对引物，检测了新疆地区的１２８例各种肝炎患者和４１例血液透析患者血清，证实新疆地区存在ＴＴＶ感染的流行，现将检测结果和部分ＴＴＶ阳性核苷酸测序结果总结报道如下。材料与方法一、病例来源本…     

TTV感染血清学,原位杂交及干扰素治疗研究

目的了解ＴＴＶ感染状况,探讨ＴＴＶ致病性及对干扰素治疗的应答。方法采用ＰＣＲ和原位杂交方法检测血清和肝组织中ＴＴＶ ＤＮＡ,回顾分析８例ＴＴＶ／ＨＣＶ感染者干扰素治疗后病毒及ＡＬＴ应答状况。结果各型肝病患者（３６．７％～４２．８％）和职业供血员（４３．２％）ＴＴＶ感染率均显著高于义务供血员（健康对照人群,５．６％）。部分感染者采用斑点杂交方法可自血清中检出ＴＴＶ ＤＮＡ（３／３０,１０．０％）,提示存在较高的血清病毒负荷, １６例慢性非甲～戊型肝炎患者及１６例肝炎后肝硬化患者肝组织以原位杂交检测,各６例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性（３７．５％）。 ８例ＴＴＶ／ＨＣＶ混合感染者经２４周疗程干扰素治疗后,６例维持持久ＡＬＴ应答（停药后２４周ＡＬＴ正常）,治疗１２周时, ８例血清ＴＴＶ ＤＮＡ均阴转,但 ２例停药后复阳, ＡＬＴ无应答的２例患者, ＨＣＶ ＲＮＡ呈阳性但ＴＴＶ ＤＮＡ阴怀;而ＴＴＶ ＤＮＡ阳转的２例患者ＡＬＴ均维持应答。结论 ＴＴＶ感染在肝病患者和职业供血员中较普遍, ＴＴＶ可在肝组织中活跃复制,其对干扰素治疗反应较敏感,ＴＴＶ／ＨＣＶ重叠感染时ＴＴＶ无明显致肝损伤作用。     

延边地区45例乙型与丙型肝炎患者合并TTV感染的研究

观察延边地区慢性乙肝和慢性丙肝患者ＴＴＶ感染状况，并研究其基因型。对４５例慢性病毒性肝炎患者，通过ＰＣＲ检测其ＴＴＶ，并对ＴＴＶ进行核苷酸序列分析。慢性肝炎病人确实有ＴＴＶ感染，ＴＴＶ亚型可分为Ⅰ型和Ⅱ型，Ⅱ型与日本东京的亚型一致。     

血液透析病人和供血员感染TTV的研究

通过对尿毒症血液透析病人和供血员感染ＴＴＶ的研究 ,证实血液透析是传播ＴＴＶ的重要途径 ,为血液透析病人做好ＴＴＶ感染的预防工作提供科学依据。采用套式ＰＣＲ法检测 10 5例尿毒症血液透析病人和 4 8例供血员血清ＴＴＶＤＮＡ感染情况 ,并对透析频率与感染ＴＴＶ的关系进行分析。结果表明 ,10 5例尿毒症血液透析病人血清ＴＴＶＤＮＡ阳性 4 8例 ,感染率为 4 5.7% ,其中透析 3～ 2 5次感染率为 16.0 % ,2 6～ 4 5次感染率为 4 4 .2 % ,4 6次以上感染率为 67.6%。 4 8例供血员血清ＴＴＶＤＮＡ阳性 7例 ,感染率为 16.4 %。尿毒症血液透…     

非甲～庚型肝炎患者中TTV感染的研究

检测了ＴＴＶ－ＤＮＡ在非甲－庚型肝炎病人中的感染状况。方法采用巢式聚合酶反应检测３８例非甲－庚型肝炎病人血清中ＴＴＶ－ＤＮＡ并观察与肝功能的关系。结果３８例非甲－庚型肝炎病人中１６例ＴＴＶ－ＤＮＡ阳性,占４２．１％,     

病毒性肝炎血清HBV DNA和HCV RNA同时检测的探索

本文对ＨＢＶ ＤＮＡ和ＨＣＶ ＲＮＡ用ＰＣＲ方法一次性同时检测技术进行了探索，经过９２例患者血清的检测的结果显示，与同份血清单一ＰＣＲ方法所检测的ＨＢＶ和ＨＣＶ感染阳性总鹰率为９８．１６％，说明此种多重套式ＰＣＲ方法对临床诊断ＨＢＶ和ＨＣＶ感染具有实用价值。     

佛山地区存在经输血传播病毒(TTV)感染

我们应用Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ法检测了４５例甲到戊型标志物均阴性的肝炎患者和４４例献血员血清中的ＴＴＶＤＮＡ。资料与方法：４５例肝炎患者均为我院传染科或门诊病人,血清经ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ均阴性,ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ,ＨＣＶＲＮＡ均阴性。４４例某院献血员检测抗－ＨＡＶ,ＨＢｓＡｇ,ＨＢｃＡｇ,ＨＢｃＡｂ,抗－ＨＣＶ,抗－ＨＥＶ为阴性,肝功能正常。抽提标本血清ＤＮＡ进行Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ：以ＲＤ０３７和ＲＤ０３８为引物进行第一次ＰＣＲ,再以Ｒ…     

血液透析患者血清和外周血单个核细胞中TTV DNA检测的意义

一、资料与方法 采集广州中山医科大学第二附属医院等３所综合性大医院血液净化中心７４例血液透析患者血清，并提取外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），抽检部分末次洗涤液ＴＴＶＤＮＡ均阴性。所有患者均诊断为慢性肾功能衰竭，男４４例，女３０例，平均年龄（５３±１２）岁，平均透析次数（２２６±３４４）次。 血清肝炎病毒标志物的检测ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＣＶ采用第二代酶免疫分析（ＥＩＡ）技术检测；ＴＴＶ　ＤＮＡ的检测采用ＰＣＲ方法。 统计学分析：计数资料的分析采用ｘ２检验。 二、结果 １．血清及ＰＢＭＣ中 ＴＴＶ ＤＮＡ检测…