瑞—姬氏染液复合染色法诊断卡氏肺孢子虫肺炎的研究

目的 制作颜色鲜明，结构清晰，易于观察的卡氏肺孢子虫包囊和滋养体染色标本。方法 采用瑞-姬氏染液复合染色法，结果 染色后肺孢子虫包囊中的囊内小体有呈紫红色的细胞核和呈蓝色的细胞质，囊壁薄，淡蓝色，包囊各部分结构清晰可辨，滋养体有紫红色的细胞核和蓝色的细胞质。结论 瑞-姬氏染液复合染色法可在临床诊断和教学中推广应用。     

人型耶氏肺孢子虫姬姆萨氏染色形态表达

目的研究人型耶氏肺孢子虫姬姆萨氏染色形态。方法采用姬姆萨氏染色法涂片染色痰液和肺泡灌洗液孢子虫,在油镜下观查形态。结果痰液人型孢子虫大小约1.0～7.5μm,包囊圆形或椭圆形,包囊囊壁染成淡蓝色,囊内小体染成紫红或紫蓝色;滋养体胞浆染成淡蓝色,内容细胞质染成紫红或紫蓝色;包囊可单个、几个、散在、成群或串状存在,成群排列常伴不同发育阶段孢囊和滋养体,虫体大小差异较大,形态多样,成熟典型的包囊很少,大多是不成熟包囊或滋养体。结论人型肺孢子虫姬姆萨氏染色形态较动物孢子虫形态更显大小不均、形态多样,常以不成熟包囊和滋养体在片中表达。     

卡氏肺孢子虫包囊抗原纯化方法的研究

目的　研究卡氏肺孢子虫包囊抗原的纯化方法。　方法　肌肉注射地塞米松诱发大鼠卡氏肺孢子虫肺炎 ,瑞 -姬氏染液复合染色法检获肺组织中的肺孢子虫包囊 ,用改进的胶原酶消化法、Percoll不连续密度梯度离心分离、超声粉碎纯化卡氏肺孢子虫包囊抗原。　结果　采用浓度为 0 .0 5 %胶原酶消化 2次 ,30 min/次 ,在 1.0 30 g/ ml密度层可获得相对纯净而完整的卡氏肺孢子虫包囊抗原。　结论　本研究可提供高纯度卡氏肺孢子虫抗原 ,为进一步建立对卡氏肺孢子虫肺炎的有效诊断方法具有十分重要的意义。     

甲苯胺蓝染色的卡氏肺孢子虫包囊中发现特征性括号状结构

本研究以可的松诱发卡氏肺孢子虫感染的大鼠与小鼠,制备肺涂片进行甲苯胺蓝染色。所有的卡氏肺孢子虫包囊均染成深紫红色,与蓝色背景易于区别。在两种肺涂片中均可见到含括号状结构的包囊,与Grocott果氏四胺银染色结果相似。一般认为该结构可以是与真菌鉴别的标志。实验结果表明甲苯胺蓝染色有可能取代银染色法,成为卡氏肺孢子虫性肺炎诊断的一种实用技术。     

卡氏肺孢子虫低死亡率SD大鼠动物模型的建立

目的建立低死亡率卡氏肺孢子虫肺炎(PCP) SD 大鼠动物模型. 方法将雌性SD大鼠随机分为实验组和对照组,实验组采用按体重定量皮下注射地塞米松免疫抑制的方法诱导建立PCP动物模型,对照组注射与地塞米松等体积的生理盐水.分别制作肺印片,经瑞-姬氏复合染色后,检查卡氏肺孢子虫包囊.制作肺组织病理切片,经HE染色后观察肺组织病理变化.制作感染大鼠肺组织超薄切片,透射电镜观察Pc包囊和滋养体. 结果用地塞米松诱导后,实验组SD大鼠死亡率为0,肺印片阳性率为76.7%(23/30).肺组织出现典型的病理变化,并可观察到Pc包囊.实验组SD大鼠体重下降明显,与对照组体重比较具有极显著性差异(P<0.01).电镜下可观察到Pc包囊和滋养体的形态结构. 结论采用按体重定量皮下注射地塞米松的方法可建立低死亡率PCP动物模型.     

肺孢子虫肺炎的诊治

肺孢子虫肺炎是由卡氏肺孢子虫引起的急性肺炎,在机体免疫功能低下时经呼吸道侵入而发病。卡氏肺孢子虫的生物学分类是原虫类弓形体属,也有真菌特征。其以厚壁包囊和薄壁滋养体两种形态存在于肺内,厚壁包囊含8个以上子孢子,包囊破裂释放出子孢子,并发育成滋养体,某些情况下滋养体也可转变成包囊,肺孢子虫在自然界分布很广,     

大鼠肺孢子虫性肺炎病原和病理学观察

用地塞米松1mg/次,肌肉注射大鼠,每周2次,连续14周,诱发重度肺孢子虫性肺炎.肺印片查见成熟包囊、未成熟包囊及破溃包囊,形态典型,为病原诊断主要依据。相差显微镜观察虫体形态清晰。透射电镜初步观察见滋养体及包囊,滋养体粘附于I型肺泡上皮细胞。组织学形态为典型肺孢子虫性肺炎特征。     

卡氏肺孢子虫包囊抗原纯化方法的研究

目的 研究卡氏肺孢子虫包囊抗原的纯化方法。方法 肌肉注射地塞米松诱发大鼠卡氏肺孢子虫肺炎，瑞姬氏染液复合染色法获肺组织中的肺孢子虫包囊，用改进的胶原酶消化法，Percoll不连续密度梯度离心分离，超声粉碎纯化卡氏肺孢子虫包囊抗原。结果 采用浓度为0．05％胶原酶消化2次，30min/次，在1.030g/ml密度层可获得相对纯净与而而完整的卡氏肺孢子虫包囊抗原。结论 本研究可提价蒿纯度卡氏肺孢子虫抗原，为进一步建立对卡氏肺孢子虫肺炎的有效诊断方法具有十分重要的意义。     

计算机三维辅助作图在寄生虫学研究中的应用

三维作图有时对描述寄生虫的亚细胞组织的精细形态来说是有用的。本文作者介绍了怎样从一系列卡氏肺孢子虫的切片借助计算机三维辅助作图再现其形态结构。卡氏肺孢子虫是一种机会性感染的病原体,在几种哺乳动物的肺部发现。它的生活史中的三种形式是:单核的滋养体,包囊前期和包含了8个能发育成滋养体的核内小体的成熟包囊,在电子显微镜下已能区分,并可看到细胞核内小体从1个发展到8个。滋养体     

卡氏肺孢子虫超微结构观察

目的 观察Wistar大鼠肺组织中卡氏肺孢子虫生长发育的超微结构。 方法 45只雌性Wistar大鼠随机分为2组，实验组（35只）每周2次经皮下注射地塞米松（1mg/次），对照组（10只）不作处理同步饲养。分别于首次注射地塞米松后第1～10周内，每周取两组鼠肺组织，电镜下观察卡氏肺孢子虫的感染情况及其生长发育的超微结构。 结果 电镜下观察，卡氏肺孢子虫虫体主要寄生于Wistar大鼠肺泡腔内，也见于肺泡膈、肺巨噬细胞和中性粒细胞，虫体表面有管状突起，内含细胞核、线粒体、空泡、粗面内质网和丰富的核糖体。许多卡氏肺孢子虫滋养体附着于肺Ⅰ型上皮细胞，偶见附着于肺Ⅱ型上皮细胞，有的伸出1或多个较宽大的伪足，部分细胞质内发现核相关细胞器和纺锤微管。囊前期有早、中、晚3种类型，在其内发现代表减数分裂的联会复合体。包囊壁上有一增厚处，内有一孔隙。 结论 卡氏肺孢子虫生活史由滋养体、囊前期和包囊等构成，包囊壁增厚处孔隙的存在提示为囊内小体逸出的一种模式。     

卡氏肺孢子虫的超微结构观察

采用皮下注射醋酸可的松和低蛋白饲养方法诱发SD大鼠自然感染卡氏肺孢子虫后,取其肺组织,按常规方法进行透射电镜的系统观察。结果除为Yoshida提出的卡氏肺孢子虫生活史的有性增殖和无性增殖循环的最新设想提供了某些形态学依据外,还继Vossen等之后再次发现该病原在1型肺泡上皮细胞内寄生的情况。本文最后就卡氏肺孢子虫对宿主的致病机理进行了讨论。     

Morphological characteristics of developmental stages of Acanthamoeba and Naegleria species before and after staining by various techniques

Seven stains were studied to determine the best color and contrast for staining the developmental stages of free living pathogenic Acanthamoeba and Naegleria species. The acid-fast bacilli stain (AFB) produced a blue color without contrast; trichrome-eosin and modified Field's showed various color contrasts; Giemsa, iron-hematoxylin, modified AFB and Gram produced only one color which distinguished the nucleus, nucleolus, cytoplasm, food- and water-vacuoles. The motile organs (acanthopodia, pseudopodia, lobopodia and flagella) were also clearly differentiated but produced a similar color as the cytoplasm. These motile organelles were first induced by incubating at 37 degrees C for at least 15 minutes and then fixing with methanol in order to preserve the protruding morphology prior to staining. The trichrome-eosin and iron-hematoxylin stains showed good color contrast for detecting all three stages, the trophozoite, cyst and flagellate; Giemsa and Gram stained the trophozoite and flagellate stages; the modified Field's and modified AFB stains stained only the trophozoite stage. Depending on the purpose, all these stains (except the AFB stain) can be used to identify the developmental stages of Acanthamoeba and Naegleria for clinical, epidemiological or public health use.     

卡氏肺孢子虫个体发育与种群动力学的研究

首先建立Wistar大鼠及NCS系裸小鼠(nu/nu)卡氏肺孢子虫(Pneumocy stis carinii,P.c)实验动物感染模型,经梯度离心得到纯净的活体P.c包囊,证明了包囊能发育为滋养体阶段。用激光微束系统对含8个子孢子的包囊施行激光显微外科手术,切除包囊内4个或2个子孢子,再把术后包囊接种裸小鼠,表明术后包囊仍具有感染力,仍能发育为滋养体及含8个子孢子的包囊,认为8个子孢子的包囊为成熟包囊。用激光流式细胞仪对虫体种群的DNA、RNA、蛋白质含量动力学进行了分析。     

肺孢子虫包囊的分离及纯化

20只纯系Wistar大鼠经皮下注射醋酸可的松25m/次,每wk2次,用药7wk后即可诱发大鼠肺孢子虫肺炎。经相差显微镜直接检查、姬姆萨染色、亚甲胺蓝染色及六亚甲基四胺银染色在肺组织内检出肺孢子虫包囊。分离纯化过程包括三个步骤:1 肺组织匀浆的制备及过滤;2 采用0.2％胶原酶消化;3 不连续Percoll密度梯度离心。包囊及滋养体密度为1.033g/ml,肺组织碎片密度达1.040g/ml,从而分离。经上述过程处理后可获得较为纯净的肺孢子虫包囊,可用于ELISA。     

间日疟原虫红细胞内期电镜观察

间日疟原虫裂殖子钻入红细胞后,早期环状体呈哑铃形,其纳虫空泡内膜状物质通过红细胞中狭窄通道排出。滋养体形状不规则,或呈卵圆形,由单层表膜包绕,细胞质内具有无嵴线粒体,纳虫空泡中有电子致密颗粒。配子体形状规则,几乎充满被寄生的红细胞,由两层表膜包绕,细胞质内具有有嵴线粒体。雌配子体细胞质内核糖体、嗜锇小体和线粒体都比雄配子体丰富。被寄生的红细胞的3个主要变化为出现小泡、细胞质裂隙和凹窝小泡复合物。后者沿红细胞表膜分布,可能是薛氏小点。     

Emerging importance of Pneumocystis carinii among indian immunosuppressed patients

Pneumocystis carinii is known to cause both significant morbidity and mortality in immunosuppressed individuals. In a six and a half year period starting with 1992, a total of 204 samples including bronchial aspirates, induced sputum and suction catheter tips were examined for P. carinii by direct microscopic examination of Giemsa's and toluidine 'O' stained smears. At a later stage of the investigation, immunofluorescent staining using monoclonal reagent (Meriflour, USA) was also used for examination of the specimens. In all 24 (11.8%) of 204 samples were positive for P. carinii. In addition, Pneumocystis carinii pneumonia (PCP) was diagnosed in five (33%) of 15 patients of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) with opportunistic infections. All these 15 patients had CD4 T cell counts of less than 500 T lymphocyte equivalent (TLE) /ml as measured by a Trax ELISA assay. Laboratories in India have to be better equipped for an early and correct diagnosis of PCP that is bound to rise with the increase in the number and variety of immunosuppressed patients.     

鼠疟原虫裂殖子进入红细胞后的早期超微结构演化

为了探讨疟原虫红内早期超微结构的演化，用透射电镜观察了伯氏和约氏疟原虫。裂殖子入侵后补围于内陷红细胞膜所构成的纳虫泡中，起初停留于浅层红细胞浆内，造成该处表面隆起。虫体浑圆，顶端结构很快消失，球形体与核和线粒体分离并萎缩。分离了的线粒体略显舒展，内质网扩大。核变长弯形，核周隙有部分地扩大。双层内膜渐与外膜分离，断裂、卷曲、以至消失。最后变成单层质膜的滋养体。早期滋养体的组织结构仍较精细，以后密度逐渐减低。胞浆内有个别多角形的大内质网池，质膜下出现小食物泡。然后虫体变扁平，边缘卷起，包围红细胞浆，终至封口融合，形成一个食物泡；接着在其旁出现消化泡和色素粒。长成更大的中期滋养体。