微生态制剂对TNBS诱导的大鼠结肠炎的疗效

目的:评价双歧三联活菌对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠结肠炎的疗效,并探讨其作用机制.方法:成年♀SD大鼠(n=50),随机分为健康对照组A、未治疗组B、双歧三联活菌治疗组C、奥沙拉秦治疗组D、双歧三联活菌和奥沙拉秦联合治疗组E(n=10).观察大鼠的一般情况,检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、结肠组织TNF-α细胞阳性率,比较结肠组织炎症程度.结果:A组大鼠DAI(P<0.001)、血清TNF-α(P<0.001)水平、肠组织TNF-α细胞阳性率(P<0.05)、肠组织学评分(P<0.05)显著低于未治疗组B;B组大鼠DAI、血清TNF-α水平、肠组织学评分、肠组织TNF-α细胞阳性率最高(P<0.05);3个治疗组C、D、E的大鼠DAI、血清TNF-α、肠组织TNF-α细胞阳性率明显下降,肠组织炎症明显消散,以E组最显著(P<0.05),肠组织TNF-α的表达与结肠炎病情轻重呈正相关.结论:双歧三联活菌能有效治疗TNBS诱导的大鼠结肠炎,其作用机制可能与抑制肠黏膜免疫系统效应细胞TNF-α的表达有关.     

肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin保护作用的研究

目的研究肠道微生态对三硝基苯磺酸(trinitro-benzen-sulfonic acid,TNBS)诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用。方法建立TNBS诱导大鼠结肠炎模型。实验分为正常组、模型组和双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌(金双歧)组。进行疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分,用ELISA法测定结肠组织TNF-α、IL-10和血清内毒素水平,采用免疫组织化学染色检测紧密连接(tight junction,TJ)相关蛋白occludin的分布。结果TNBS诱导大鼠结肠炎后,DAI和组织学损伤评分增高,结肠组织TNF-α水平升高,IL-10水平降低和血清内毒水平升高,而经双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌处理后,DAI和组织学损伤评分有明显下降,结肠组织TNF-α水平降低,IL-10水平升高和血清内毒素水平降低,组间比较差异有显著性(P0.05)。TNBS诱导大鼠结肠炎后,TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达亦减少,而双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌(金双歧)处理后可使TNBS引起的TJ结构受损减轻,相关蛋白的表达增多(P0.05)。结论肠道微生态对TNBS诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞TJ蛋白具有明显的保护作用,其可能的机制是通过纠正肠道微生态,上调肠上皮细胞TJ蛋白occludin的表达,降低结肠组织TNF-α水平,提高IL-10水平,从而抑制内毒素通过紧密连接进入体循环。     

肠道微生态对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白occludin保护作用的研究

目的研究肠道微生态对三硝基苯磺酸(trinitro-benze-sulfonic acid,TNBS)诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用。方法建立TNBS诱导大鼠结肠炎模型。实验分为正常组、模型组和双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、肠球菌三联活菌(金双歧)组。进行疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分。用ELISA法测定结肠组织TNF-α、IL-10和血清内毒素,采用免疫组织学染色检测紧密连接(tight junction,TJ)相关蛋白occludin的分布。结果 TNBS诱导大鼠结肠炎后,DAI和组织学损伤评分增高,结肠组织TNF-α水平升高,IL-10水平降低和血清内毒素水平升高,而经金双歧处理后,DAI和组织学损伤评分明显下降,结肠组织TNF-α水平降低,IL-10水平升高和血清内毒素水平降低,组间比较差异有显著性(P0.05)。TNBS诱导大鼠结肠炎后,TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达亦减少,而金双歧处理后,可使TNBS引起的TJ结构受损减轻,相关蛋白的表达增多(P0.05)。结论肠道微生态对TNBS诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白具有明显的保护作用。     

白头翁醇提物对大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白的保护作用

目的:探讨白头翁醇提物对三硝基苯磺酸诱导大鼠结肠炎肠黏膜上皮细胞紧密连接蛋白的调控,进一步阐明白头翁醇提物对大鼠实验性结肠炎的肠黏膜屏障的保护作用.方法:建立TNBS诱导大鼠结肠炎模型.实验分为正常组、模型组、白头翁醇提物治疗组和双歧杆菌嗜酸乳杆茵肠球菌三联活菌(金双歧)组.进行疾病活动指数(DAI)和组织学损伤评分,用ELISA法测定结肠组织TNF-α、IL-10和血清内毒素,采用免疫组织学染色检测紧密连接(tight iunction,TJ)相关蛋白occludin的分布.结果:TNBS诱导大鼠结肠炎后,DAI和组织学损伤评分增高,结肠组织TNF-α水平升高、IL-10水平降低和血清内毒素水平升高,而经白头翁醇提物和双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活菌处理后,DAI和组织学损伤评分有明显下降(6.50±1.27,5.90±1.67 vs 9.20±1.75:5.00±1.05,4.80±1.25 vs 7.10±0.99,均P<0.05),结肠组织TNF-α水平降低(521.24±109.37 ng/L,503.98±126.63 ng/L vs 657.54±149.60 ng/L,均P＜0.05)、血清内毒素水平降低(0.148±0.093EU/mL,0.153±0.106 EU/mL vs 0.213±0.023EU/mL,均P＜0.05)和IL-10水平升高(92.19±30.09 ng/L,95.57±27.71 ng/L vs 42.92±23.74ng/L,均P＜0.05);TNBS诱导大鼠结肠炎后,TJ结构遭到破坏,TJ相关蛋白的表达减少,而白头翁醇提物和双歧杆菌嗜酸乳杆菌肠球菌三联活茵(金双歧)处理后可使TNBS引起的TJ结构受损减轻,相关蛋白的表达增多.结论:白头翁醇提物可以对TNBS诱导大鼠结肠炎肠黏膜屏障具有明显的保护作用,其机制可能是通过调节肠道微生态、上调肠上皮细胞紧密连接蛋白ocluudin的表达、降低结肠组织TNF-α含量、提高IL-10水平,从而抑制内毒素通过紧密连接进入体循环.     

双歧杆菌三联活菌散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎临床疗效观察

目的探讨双歧杆菌三联活菌散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎患者的临床效果。方法将2017年6月至2019年2月本院收治的溃疡性结肠炎患者92例采用随机数表法分成两组,每组46例。观察组患者给予双歧杆菌三联活菌散联合美沙拉嗪治疗,对照组单用美沙拉嗪治疗,疗程2个月。比较两组患者的症状消失时间,治疗前后血清炎症细胞因子的表达水平和不良反应发生情况。结果观察组患者的腹泻消失时间、脓血便消失时间、腹痛消失时间均显著短于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗2个月后,两组患者的血清C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素细胞1β(IL-1β)表达水平均显著下降,观察组患者的水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗过程中,两组患者的不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论双歧杆菌三联活菌散联合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎患者临床疗效确切,能快速消除临床症状,减轻炎症反应,值得推广应用。     

苗族腌汤对急性肝衰竭大鼠肠黏膜Occludin及肝组织IL-22的影响

目的通过检测肠黏膜紧密连接蛋白Occludin的表达及肝组织中白介素-22(interleukin-22,I L-22)的含量,初步探讨腌汤对急性肝衰竭(acute liverfailure,ALF)的食疗作用.方法 40只♂S D大鼠随机分成正常组、模型组、双歧杆菌三联活菌组、腌汤腌组,每组10只.双歧杆菌三联活菌组、腌汤组分别予双歧杆菌三联活菌、腌汤灌胃,1次/d,连续9 d,正常对照组、模型组则用等容积的生理盐水灌胃.于实验第8天,除正常组外,其余3组予硫代乙酰胺(生理盐水配制)按300 mg/kg皮下注射,1次/d,连续2 d,建立大鼠ALF模型.于实验的第10天,股动脉放血处死大鼠,留取血清测血清谷丙转氨酶,谷草转氨酶含量;留取距回盲部3 cm回肠组织及肝组织行肠黏膜紧密连接蛋白Occludin及肝组织IL-22的检测.结果与正常组比,各组大鼠血清转氨酶水平及肝组织IL-22含量明显增加(P0.01).与模型组比,双歧杆菌三联活菌组、腌汤组血清转氨酶的水平有所下降(P0.01),双歧杆菌三联活菌组与腌汤组相比,差别无统计学意义(P0.05);与模型组相比,双歧杆菌三联活菌组、腌汤组大鼠肝组织IL-22含量增加(P0.05),与双歧杆菌三联活菌组比较,腌汤组无明显差异(P0.05);除正常组外,各组大鼠肠黏膜Occludin表达水平下降(P0.01),与模型组相比,双歧杆菌三联活菌组、腌汤组肠黏膜Occludin的表达水平明显上升(P0.05),与双歧杆菌三联活菌组相比,腌汤组Occludin的表达水平差异无统计学意义(P0.05).结论苗族腌汤可能通过保护大鼠肠黏膜屏障,上调IL-22的表达对ALF发挥食疗作用.     

益生菌对实验性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子及核因子-κB表达的影响

目的寻找双歧三联活菌治疗大鼠实验性结肠炎的最佳剂量,同时观察双歧三联活菌、柳氮磺胺吡啶(SASP)及两者联用的治疗效果。方法将42只SD大鼠均分为正常对照组、模型组、双歧三联活菌高剂量组(0.210×108CFU/d)、双歧三联活菌中剂量组(0.105×108 CFU/d)、双歧三联活菌低剂量组(0.053×108 CFU/d)、SASP组以及双歧三联活菌中剂量 SASP组。各实验性结肠炎组大鼠采用8%乙酸灌肠造模,各治疗组给予药物干预,并应用免疫组化技术检测大鼠结肠黏膜肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-10、IL-1β的表达。结果①模型组大鼠结肠黏膜TNF-α、NF-κB、IL-1β表达增多、IL-10表达减少;②中剂量双歧三联活菌即为治疗大鼠实验性结肠炎的最佳剂量,但仅在一定程度上起到治疗大鼠实验性结肠炎的目的,其疗效与SASP相当;③双歧三联活菌联合SASP治疗效果最佳,与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论双歧三联活菌可用于治疗大鼠实验性结肠炎,与SASP联用其治疗效果优于两者单独用药。     

培菲康对实验性溃疡性结肠炎大鼠TNF-α、IL-10水平的影响

目的阐明培菲康对三硝基苯磺酸钠(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)TNF-α、IL-10水平的影响,寻求UC治疗的有效新途径。方法成年雌性SD大鼠50只,随机分成5组(n=10):正常对照组(G1)、模型对照组(G2)、培菲康治疗组(G3)、奥沙拉嗪治疗组(G4)、培菲康和奥沙拉嗪联合治疗组(G5),经不同处理和治疗后,通过免疫组化染色观测各组大鼠结肠组织中TNF-α(两步法)、IL-10(S-P法)表达情况,通过实时荧光定量PCR分析结肠组织中TNF-α、IL-10mRNA的表达水平。结果G1组各指标显著低于G2组(P0.001),肠组织结构正常;与G2组相比,G3、G4、G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平显著降低(P0.001);与G3或G4组相比,G5组TNF-α、IL-10细胞阳性率和TNF-α、IL-10mRNA的表达水平也显著降低(P0.001);G3或G4组之间,TNF-α、IL-10细胞阳性率及TNF-αmRNA水平无差别(P0.05),而G4组IL-10mRNA水平明显低于G3组(P0.001)。结论TNF-α、IL-10在溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展过程中起重要作用,培菲康能明显降低该过程中肠组织TNF-α、IL-10的表达水平,可能通过调控这两个细胞因子的表达而发挥疗效。     

双歧杆菌三联活菌胶囊、复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎的疗效观察

[目的]观察双歧杆菌三联活菌胶囊、复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合美沙拉嗪对溃疡性结肠炎的疗效,为溃疡性结肠炎临床治疗提供帮助。[方法]入选100例溃疡性结肠炎患者,按随机数字表法分为对照组和治疗组,各50例,对照组患者采用美沙拉嗪治疗,治疗组患者采用双歧杆菌三联活菌胶囊、复方谷氨酰胺肠溶胶囊联合美沙拉嗪治疗,检测2组患者治疗前后总体症状评分、氧化应激指标(GSH-Px、CAT、SOD)、细胞因子(IL-2、TNF-α、IL-6、hs-CRP)及血流动力学指标(WHV、PV、PCV、PAdT)情况。[结果]治疗前2组患者总体症状评分、氧化应激指标、细胞因子及血流动力学指标比较差异无统计学差异(P0.05)。与治疗前比较,2组患者治疗后IL-2和氧化应激指标均显著升高,总体症状评分、血流动力学指标、MDA以及细胞因子显著降低,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组患者IL-2和氧化应激指标显著高于对照组,总体症状评分、血流动力学指标、MDA以及细胞因子显著低于对照组,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。[结论]双歧杆菌三联活菌胶囊、复方谷氨酰胺肠溶胶囊与美沙拉嗪的联合治疗能够改善溃疡性结肠炎患者临床症状及血液情况、降低炎症反应以及防止氧化应激反应的加剧,对溃疡性结肠炎患者的临床治疗具有重要的意义。     

双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对肝硬化自发性腹膜炎患者血清CRP、IL-2的影响

目的探讨双歧杆菌乳杆菌三联活菌片对肝硬化自发性腹膜炎患者的临床疗效及对患者血清CRP、IL-2水平的影响。方法选取我院2015年1月至2017年12月收治的肝硬化自发性腹膜炎患者89例,按随机数字表法分为对照组(44例)和观察组(45例)。对照组患者进行常规治疗,观察组患者在常规治疗基础上联合双歧杆菌乳杆菌三联活菌片进行治疗。比较两组治疗后的临床效果、治疗前后肝功能相关指标、血清CRP、IL-2水平的变化,比较两组治疗期间不良反应的发生情况。结果观察组临床疗效的总有效率为91.11%,显著高于对照组的75.00%(P 0.05)。治疗前,两组ALT、TBil、ALB水平无明显差异(P 0.05);治疗后,两组ALT、TBil均显著降低(P 0.05),ALB均显著升高(P 0.05),且观察组显著优于对照组(P 0.05)。治疗前,两组血清CRP、IL-2水平无显著差异(P 0.05);治疗后,两组血清CRP均显著降低(P 0.05)、血清IL-2均显著升高(P 0.05),且观察组明显优于对照组(P 0.05)。观察组治疗期间不良反应发生率为6.67%,与对照组(9.09%)比较差异无统计学意义(P 0.05)。结论双歧杆菌乳杆菌三联活菌片治疗肝硬化自发性腹膜炎的疗效确切,可改善患者肝功能,降低血清CRP水平并升高IL-2水平,值得应用和推广。     

Probiotics increase T regulatory cells and reduce severity of experimental colitis in mice

AIM:To investigate the effect of probiotics on regulating T regulatory cells and reducing the severity of experimental colitis in mice. METHODS:Forty C57/BL mice were randomly divided into four groups.Colitis was induced in the mice using 2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid(TNBS).After 10-d treatment with Bifico capsules(combined bifidobacterium,lactobacillus and enterococcus),body weight,colonic weight,colonic weight index,length of colon,and histological scores were evaluated.CD4+CD25+Foxp3+T cell in mesenteric lymph nodes were measured by flow cytometry,and cytokines in colonic tissue homogenateswere analyzed by a cytometric bead array. RESULTS:The colonic weight index and the colonic weight of colitis mice treated with Bifico were lower than that of TNBS-induced mice without treatment. However,colonic length and percent of body weight amplification were higher than in TNBS-induced mice without treatment.Compared with TNBS-induced mice without treatment,the level of CD4+CD25+Foxp3+T cells in mesenteric lymph nodes,the expression of interleukin(IL)-2,IL-4 and IL-10 in colonic tissues from colitis mice treated with Bifico were upregulated,and tumor necrosis factor-αand interferon-γwere downregulated. CONCLUSION:Probiotics effectively treat experimental colitis by increasing CD4+CD25+Foxp3+T cell and regulating the balance of Th1 and Th2 cytokines in the colonic mucosa.     

白芍总苷对TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎的影响

背景：白芍总苷（TGP）具有抗炎、免疫调节等作用,其对炎症性肠病是否具有治疗作用尚不清楚。目的：探讨TGP对大鼠实验性结肠炎的影响及其可能机制。方法：50只大鼠以三硝基苯磺酸（TNBS）／乙醇溶液灌肠诱导结肠炎模型,分为结肠炎模型组、低、中、高剂量TGP组（25、50、100mg／kgTGP）和阳性药物对照组（100mg／kg奥沙拉秦）。10只大鼠作为正常对照组（0．9％NaCl溶液灌肠）。实验期间评估各组疾病活动指数（DAI）;干预2周后行结肠大体损伤指数（CMDI）和组织学损伤指数（TDI）评分,以酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-1O）水平,以免疫组化方法检测结肠组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶（p—p38MAPK）表达。结果：与结肠炎模型组相比,高剂量TGP组实验期间DAI均值显著降低（P＜0．01）;中、高剂量TGP组CMDI和TDI显著降低,血清TNF-α水平降低,IL-10水平升高,结肠组织p-p38MAPK表达降低（P＜0．05）。高剂量TGP的疗效与奥沙拉秦无明显差异。结论：TGP可能通过抑制p38MAPK激活,抑制TNF-α分泌,促进IL—10分泌,改善免疫调节紊乱,从而减轻TNBS诱导的大鼠实验性结肠炎的症状和结肠炎性损伤。     

开口箭提取物对大鼠实验性结肠炎的治疗机制研究

目的研究中药开口箭有效成分对大鼠实验性结肠炎的治疗作用及其机制。方法建立三硝基苯磺酸大鼠结肠炎模型，用开口箭醇提物（主要成分为甾体皂苷）灌肠治疗2周，计算治疗前后结肠黏膜损伤指数（CMDI）和组织学评分（HS），测定其结肠组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、中性粒细胞髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、血小板表面P-选择素（P-选择素）以及血小板最大聚集率（PagT）改变。结果治疗后大鼠CMDI及HS降低，MDA降低，MPO活性下降，PagT和P-选择素计数下降，SOD活性增加。结论开口箭醇提物对大鼠实验性结肠炎有治疗作用，其机制可能为清除氧自由基、减轻脂质过氧化物对组织的损伤以及抑制血小板的聚集与活化，减少炎性因子的释放。     

Protective effect of angelica sinensis polysaccharide on experimental immunological colon injury in rats

AIM: To study the effect of angelica sinensis polysaccharide (ASP) on immunological colon injury and its mechanisms in rats.METHODS: Immunological colitis model of rats was induced by intracolon enema with 2, 4, 6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) and ethanol. The experimental animals were randomly divided into normal control, model control, 5-aminosalicylic acid therapy groups and three doses of ASP therapy groups. The 6 groups were treated intracolonically with normal saline, normal saline, 5-aminosalicylic acid (100 mg.kg-1), and ASP daily (8:00 am) at the doses of 200, 400 and 800 mg.kg-1 respectively for 21 days 7 d following induction of colitis. The rat colon mucosa damage index (CMDI), the histopathological score (HS), the score of occult blood test (OBT), and the colonic MPO activity were evaluated. The levels of SOD, MDA, NO, TNF-α, IL-2 and IL-10 in colonic tissues were detected biochemically and immunoradiometrically. The expressions of TGF-β and EGF in colonic tissues were also determined immunochemically.RESULTS: Enhanced colonic mucosal injury, inflammatory response and oxidative stress were observed in colitis rats,which manifested as significant increases of CMDI, HS, OBT,MPO activity, MDA and NO contents, as well as the levels of TNF-α and IL-2 in colonic tissues, although colonic TGF-β protein expression, SOD activity and TL-10 content were significantly decreased compared with the normal control (P＜0.01). However, these parameters were found to be significantly ameliorated in colitis rats treated intracolicly with ASP at the doses of 400 and 800 mg@kg-1 (P＜0.05-0.01).Meantime, colonic EGF protein expression in colitis rats was remarkably up-regulated.CONCLUSION: ASP has a protective effect on immunological colon injury induced by TNBS and ethanol enema in rats,which was propably due to the mechanism of antioxidation,immunomodulation and promotion of wound repair.     

白细胞介素-23/-17轴在小鼠急性实验性结肠炎中的表达及作用

目的 研究白细胞介素(IL)-23/IL-17轴在小鼠实验性结肠炎结肠组织中的表达和作用.方法 将64只小鼠分为对照组24只、模型组24只、抗体组8只、正常血清组8只.除对照组外,其余各组建立小鼠急性实验性结肠炎模型.对照组和模型组小鼠分别于造模后24 h、48 h、7 d处死.抗体组和正常血清组小鼠分别于造模前2 h腹腔内注射多克隆大鼠抗小鼠IL-17中和抗体和正常大鼠血清,于造模48 h后处死.检测各组小鼠组织学损伤评分、肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性;酶联免疫吸附试验检测结肠组织IL-23p19、IL-17含量;免疫组化染色检测核因子(NF)-κB p65在结肠组织中的表达;实时荧光定量(RT)PCR检测IL-23p19、IL-17、IL-12p35的mRNA表达水平.结果 模型组24 h、48 h、7 d时IL-23p19蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(15.53±3.32)、(31.16±4.98)、(14.03±3.56)ng/mg蛋白和4.09±0.34、3.39±0.46、6.54±1.82]、IL-17的蛋白表达水平和mRNA表达水平[分别为(0.35±0.06)、(0.38±0.08)、(0.26±0.05)ng/mg蛋白和4.21±2.61、2.65±0.91、5.63±1.43]均显著高于正常对照组(P值均＜0.05),48 h时达高峰.IL-23与IL-17蛋白表达水平和mRNA表达水平呈正相关(r值分别为0.745和0.793,P＜0.05).抗体组IL-23p19和IL-12p35高水平表达,但NF-κB p65阳性细胞率、组织学评分及MPO活性[分别为1.86%±0.36%、0.63±0.52、(0.40±0.03)U/g]明显低于48 h模型组[分别为4.35%±0.37%、5.13±0.64、(2.29±0.40)U/g],说明中和IL-17后能明显减轻结肠炎症,抑制NF-κB活性.结论 IL-23/IL-17轴在急性实验性结肠炎早期阶段起关键作用.IL-17有望成为炎症性肠病治疗的新靶标.     

实验性结肠炎大鼠内毒素-Toll样受体4-核因子κB信号通路的变化及益生菌的作用

目的探讨和分析实验性结肠炎大鼠血浆内毒素水平的变化及结肠Toll样受体4（TLR4）和核因子κB（NF-κB）表达及意义,并分析益生菌的作用。方法30只雄性W istar大鼠均分为正常对照组（NC组）、模型对照组（UC组）和益生菌治疗组（PC组）;UC和PC组建立2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）实验性结肠炎大鼠模型,PC组大鼠给予双歧三联活菌悬液（2.2×10^9CFU/只）治疗,1次/d,共4周。光镜下观察肠黏膜炎性反应并评分;鲎试验检测各组大鼠血浆内毒素水平;W estern印迹法和实时荧光定量PCR法检测大鼠结肠TLR4和NF-κB p65蛋白及mRNA的表达,分析其变化及益生菌的作用。结果PC组炎性反应评分较UC组明显降低（P〈0.05）,但高于NC组（P〈0.01）;PC组血浆内毒素明显低于UC组（P〈0.05）,但高于NC组（P〈0.01）;UC组TLR4和NF-κB p65的蛋白及mRNA表达明显高于PC组和NC组（P〈0.05、0.01）,PC组高于NC组（P〈0.01）。结论内毒素-TLR4-NF-κB信号通路参与了大鼠实验性结肠炎的发生和发展,减少内毒素的产生、降低大鼠结肠TLR4和NF-κB表达可能是益生菌减轻大鼠结肠炎症的机制之一。     

烟碱型乙酰胆碱受体α7激动剂减轻实验性结肠炎炎性反应

目的 探讨烟碱型乙酰胆碱受体α7(nAChRα7)激动剂对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎的治疗作用.方法 将BALB/C小鼠随机分为对照组(C)、TNBS结肠炎组(T)和nAChRα7激动剂八角枫碱(AN)或拮抗剂二碘四氯吲哚胺(CHD)治疗组.实验第1天诱导(TNBS)结肠炎,实验开始后即对每只小鼠予AN 10μg或CHD 1.5 μg腹腔注射,隔日重复直到实验结束.实验第8天处死小鼠,分别检测肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性,酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子(TNF)-α浓度,分离结肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),提取核蛋白,Western印迹法检测核因子(NF)-κB P65的表达.结果 AN治疗组结肠组织损伤程度、MPO活性、组织TNF浓度等均明显低于TNBS组[MPO活性为(7.6±2.1)U/mg比(12.2±2.6)U/mg,组织TNF浓度为(396±98)pg/g比(627±112)Pg/g],LPMC NF-κB的活化明显受抑制;CHD治疗组结肠组织损伤程度、MPO活性[(14.1±1.8)U/mg]、组织TNF浓度[(692±79)Pg/g]均明显高于其他结肠炎组,LPMC NF-κB明显活化.结论 nAChR α7激动剂AN能明显抑制实验性结肠炎肠道炎性反应.     

青蒿琥酯对 TNBS 诱导的小鼠结肠炎免疫调节机制的研究

背景: 青蒿素及其衍生物具有免疫调节作用,能显著减轻类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮的症状和体征。目的: 探讨青蒿琥酯对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠结肠炎的免疫调节机制。方法: 18只C57BL/6小鼠随机分为乙醇对照组、TNBS模型组和青蒿琥酯治疗组,以TNBS灌肠建立小鼠结肠炎模型,青蒿琥酯治疗组腹腔注射青蒿琥酯150 mg·kg~(-1)·d~(-1)。实验第8d,处死小鼠。行结肠组织病理学评分,检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)活性,以ELISA法检测结肠组织干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-17、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量。结果: 与TNBS模型组相比,青蒿琥酯治疗组结肠组织病理学评分、MPO活性、IFN-γ、IL-17和TNF-α含量显著降低[1.00±0.63对2.83±0.41,(5.62±2.36)U/g对(15.10±3.92)U/g,(132.56±37.09)pg/mg对(221.44±41.99)pg/mg,(89.73±29.86)pg/mg对(229.72±78.58)pg/mg,(408.02±83.13)pg/mg对(692.79±217.51)pg/mg](P0.05),IL-10含量显著升高[(188.66±49.87)pg/mg对(121.02±21.57)pg/mg](P0.05)。除组织病理学评分和IL-10含量外,青蒿琥酯治疗组上述各指标与乙醇对照组无明显差异。各组IL-4含量无明显差异。结论: 青蒿琥酯可减轻TNBS引起的小鼠结肠炎,其机制可能通过抑制Th1/Th17免疫应答、上调保护性细胞因子IL-10含量而发挥免疫调节作用。