OMEGA TPHA与FUJIREBIO TPPA实验比较及注意事项

梅毒螺旋体(TP)的检测是国际旅行卫生体检中必不可少的项目,是国际移民组织(TMO)推荐检查的三种传染病之一,其初筛实验简单,而确认实验(TPHA与TPPA)中有很多注意事项,本文简要介绍了两种确认实验的原理、试剂盒组成、实验步骤、结果观察与报告以及实验注意事项,并对检测中常见的问题进行了探讨,供卫生检疫实验室人员参考.     

2000～2003年北京地区涉水产品卫生检测受理情况分析

目的：通过对2000-2003年涉及生活饮用水卫生安全产品(以下简称涉水产品)北京地区卫生检测受理情况的调查分析，阐明目前北京地区市场主要涉水产品种类以及在4年间的变化趋势，为今后卫生部门完善相关的检测规范提供依据。方法：根据北京市疾病预防控制中心2000-2003年涉水产品受理登记进行统计分析。结果：4年中输配水设备检测数量最多；2002年报检数量最多；由于《生活饮用水卫生规范》(2001)颁布后对与饮用水接触的水处理材料(如水质处理器滤芯、膜组件、活性炭等)的卫生安全性进行了规定，2002-2003年此两类产品检测数量大幅度增高，而颁布前的2000年检测数量为零；机械部件如阀门、水泵、水处理剂加入器等检测数量极少，今后应加强对其卫生管理；电热水壶(瓶)和饮水机每年均报检24种至61种，今后应统一其实验方法、检验项目及评价依据。     

卫生微生物学检验规范注解

卫生微生物检验规范是各种环境卫生规范(标准)配套的微生物检验方法，是贯彻执行卫生规范(标准)进行卫生监督、监测的有力工具。为了使预防医学、疾病预防与控制、卫生监督等公共卫生各级机构的广大预防医学工作者及相关部门的广大基层检验人员掌握方法关键，详细地了解方法原理，实验操作中的注意事项等，故对卫生微生物检验规范作一注解。由于卫生微生物的检验通常是采用指标菌．在不同的卫生微生物规范中往往采用同一个卫生指标菌，为避免重复，不可能对每个检验规范的逐项作注解，只能对规范中的指标菌和特定菌以及特定环境中的微生物检验作注解。     

献血者抗-HIV检测中的假阳性分析

由于艾滋病主要经血液途径传播，故检测HIV是保证输血安全的重要检测项目。目前，大多数血站采用ELISA方法检测献血者抗-HIV，该方法是当前控制经输血途径传播HIV的一种简便、快速、有效的实验方法。笔者对54465人次献血者用两种不同厂家抗一HIV检测试剂进行检测，实验结果为阳性25例，上报确认实验室用确认实验方法确认。1例为阳性，其余24例均为阴性。现报告分析如下。     

食品中致泻性大肠埃希菌PCR确认试验检测的探讨

目的 建议修订GB 4789.6—2016《食品安全国家标准食品微生物学致泻大肠埃希氏菌检验》PCR确认试验中，大肠埃希菌ATCC25922不宜作为检测肠道集聚性大肠埃希菌(EAEC)毒力基因的阴性对照菌株。方法 参照GB 4789.6—2016,采用市面在售的2种不同品牌规格致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂盒进行PCR确认试验。结果 阴性对照菌株大肠埃希菌ATCC25922在2种不同品牌规格致泻性大肠埃希菌核酸检测试剂中均检测出pic基因，存在PCR确认实验过程中阴性对照失控现象。结论 PCR确认试验中大肠埃希菌ATCC25922作为阴性对照菌参与检测EAEC毒力基因，会影响试验结果的判读，建议采用等效标准菌株(如ATCC8739)作为阴性对照菌株参与试验。     

诺如病毒核酸检测及病毒基因序列分析

〔目的〕通过对国境口岸输入性感染性腹泻暴发病例的快速检测、排查和病原基因序列分析,为病人的诊断、治疗和口岸突发疫情的处置提供依据,保障国境口岸的卫生安全。〔方法〕利用分子生物学技术,通过粪便样本的核酸(RNA)提取、聚合酶链反应(RT-PCR)、凝胶电泳分析以及基因序列测定、基因序列分析等过程,对造成群体腹泻的病原种类进行确认。〔结果〕9份送检的腹泻病人粪便样本中均检测到诺如病毒特异性核酸片段。经基因序列分析,确认检测到的诺如病毒基因型属基因组Ⅰ(GⅠ)。确认造成马耳他籍船舶"蓝海探索"号暴发腹泻病例的病原为诺如病毒。〔结论〕通过核酸检测等技术手段,可快速确认传染病病原种类,为疫情控制、保障国境口岸的卫生安全提供技术支持。     

重庆航空口岸两起群体性输入诺如病毒分子溯源研究

目的通过对口岸聚集性输入性腹泻病例的快速检测、排查和病原基因序列分析,为病人的诊断、治疗和口岸突发疫情的处置提供依据,保障国境口岸的卫生安全。方法利用分子生物学技术,通过肛拭子样本的核酸(RNA)提取、RT-PCR、凝胶电泳分析以及核酸序列测定,对造成群体腹泻的病原种类进行确认。结果样本中均检测到诺如病毒特异性核酸片段。经序列分析为诺如病毒基因型属基因组Ⅰ(GⅠ)和II(GII)。结论通过核酸检测等技术手段,可快速确认传染病病原种类,为疫情控制、保障国境口岸的卫生安全提供技术支持。     

艾滋病病毒(HIV)抗体检测实验结果分析与评价

[目的]探讨4组不同的试剂作HIV抗体检测，取代确认实验(WB)的可行性。[方法]选用目前国内产品中批批检合格的第三代国产试剂和国家指定用的进口试剂，由三组人员分别进行初检和复检。用ELISA法检测抗-HIV。[结果]重点人群HIV抗体测定20483例，第一组试剂检测HIV阳性47例；第二、第三组试剂榆测阳性39例，排除8例，39例初筛阳性中有35例做了WB均为阳性，结果符合率为100%。[结论]运用3种国产试剂和2种进口试剂进行HIV抗体初筛实验(初检和复检)结果基本可以取代WB，特别是目前HIV/AIDS进入了快速增长期，HIV抗体的检测操作应简单、易行、廉价。     

社区HIV快速检测在扩大MSM检测中的效果评价

目的评价下城区社区卫生服务机构艾滋病病毒(HIV)快速检测模式在扩大男男性行为者(MSM)检测范围的应用效果。方法在MSM志愿者工作组办公室就近的社区卫生服务机构建立HIV快速检测点,通过动员转介和外展干预的方式为MSM人群提供HIV抗体快速检测,初筛阳性者送疾病预防控制中心复核和确认。比较实施前后MSM人群的检测量以及新确认HIV感染者数的变化情况。结果 2012年-2013年共快速检测MSM 3 962人,新确认HIV感染者159例。2012年、2013年与前一年比较,社区快速检测使MSM检测量的增长率分别提高了244.07%、67.67%,MSM人群新确认HIV感染者数的增长率分别提高了227.27%、81.18%,全区新确认HIV感染者总数的增长率分别提高了39.69%、35.23%。结论社区HIV快速检测能有效扩大MSM检测范围,发现更多的HIV感染者。     

送给准妈妈的产检课

对于第一次怀孕的女性来说,产检是一个陌生、但又必须要经历的过程,由于不了解产检流程与注意事项,所以很容易紧张。确认怀孕,早孕试纸不一定一锤定音怀孕意味着一个新生命的开始,首先确认自己是否怀孕,最简单的方法便是用早孕试纸自行检测,其原理是通过检测尿液中的人绒毛膜促性腺激素(HCG)值来判断是否怀孕。若尿检阳性,即出现两条杠,则提示已孕;弱阳性,即第二条杠隐约可见,也有提示作用,需去医院进一步验血确认。     

免疫印迹法(WB)对隐性梅毒抗体确证检测的价值探讨

目的拟通过使用WB对隐性梅毒TPPA/TP-ELISA检测结果不一致标本的检测比较,探讨WB对于隐性梅毒抗体检测结果的确证价值。方法 1.先用TPPA或TP-ELISA检测血清或血浆标本,对阳性标本分别交叉使用另一种方法复核。对两种方法检测结果不一致的60份标本,再用WB进行检测。2.对NCCL提供的梅毒标准血清盘,使用TP-ELISA和TPPA同时检测,WB结果采用NCCL提供。结果 1.用TP-WB对60例TPPA/TP-ELISA检测不一致的标本进行检测,51份TP-ELISA阳性,TPPA阴性的标本,WB检测结果是32份阳性,9份不确定,10份阴性;9份TP-ELISA阴性,TPPA阳性的标本,WB检测结果是8例阳性,1例可疑。2.血清盘40份标本,WB阳性26例,阴性14例,26例阳性标本分别用TPPA和ELISA检测,TPPA阳性24例,阴性2例;TP-ELISA检测26例全部阳性。而14例WB检测阴性标本分别用两种方法检测时,TPPA与之完全相符,TPELISA出现两例阳性。结论 WB可作为潜伏期梅毒检测TPPA、TP-ELISA二者结果不致时的确认方法。     

4种不同方法检测梅毒螺旋体抗体的比较

目的 对4种不同的梅毒螺旋体抗体检测方法进行比较，筛选高敏感性和特异性诊断方法和试剂。方法 采用快速血浆反应素试验(RPR)；梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)；梅毒螺旋体特异性抗体酶联免疫吸附试验(TP—ELISA)；梅毒螺旋体特异性抗体乳胶凝集试验(TPLA)4种方法对76份可疑梅毒抗体阳性标本进行检测。结果 RPR有一定假阳性和假阴性；TPPA敏感性稍差；TP—ELISA敏感性最高。结论 TP—ELISA敏感性高，适合大批献血员筛查；TPLA与其他方法的检测结果符合率最高，且操作简便，适合作确认试验。     

不同检测方法在特殊人群梅毒检测中的应用分析

目的比较TP-ELISA、TP-PA、RPR 3种梅毒检测方法,为选择梅毒感染状况筛查方法提供依据。方法采用梅毒特异性抗体的双抗原夹心法（ELISA）进行抗体（包括IgM、IgG）检测,并与RPR法检测结果进行比较。3种方法检测结果有反应性的标本,再用TPPA法进行确证。结果ELISA-IgM法有反应性率2.28%（9/394）,RPR法有反应性率3.30%（13/394）,ELISA-IgG法有反应性率13.20%（52/394）;ELISA法与TPPA法符合率97.9%（47/48）,RPR法与TPPA符合率25%（12/48）,IgM法与TPPA符合率14.58%（7/48）。ELISA法与RPR及IgM法差异有高度显著性。ELISA法与TPHA法差异无显著性。结论ELISA法能满足疾控机构监测的需要,可以在特殊人群梅毒感染状况检测中应用。     

梅毒螺旋体抗体的CMIA法与TPPA检测比较

目的以TPPA为参照法,判定CMIA法在检测梅毒螺旋体抗体中的应用价值。方法对本院收集的983份血清样本同时进行TPPA法与CMIA法检测,对比两种方法检测结果的差异性。结果 CMIA法总阳性率为10.58%,TPPA法总阳性率为10.27%。结论 CMIA的准确性、灵敏度及特异度与TPPA无统计学差异,且具有重复检测准确率高的优势。     

健康体检人员937例梅毒螺旋体抗体的检测

目的调查了解盐城市盐都区健康体检人员梅毒螺旋体(TP)的感染情况。方法采用酶联免疫法(TP-ELISA)检测937名健康体检人员血清TP抗体,对阳性标本作颗粒凝集法梅毒螺旋体抗体试验(TPPA),确认阳性者再分别作梅毒快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST),并对结果进行分析。结果937例健康体检人员中共检出TP-ELISA阳性者13例(经TPPA试验确证均为TP抗体阳性),占总检测人数的1.39%。男女性别间差异无统计学意义(χ2=0.03,P>0.05),不同职业人群中以药品从业人员阳性率最高,达16.67%(2/12),其次为宾馆酒店人员,阳性率为3.16%(5/158)。此13例标本中有10例RPR和TRUST结果为阴性,另3例RPR和TRUST为阳性,滴度分别为1∶64、1∶16和1∶1。结论该地区健康体检人员的TP感染率较高,有必要将梅毒检测纳入健康体检的内容。同时,在人群作TP感染的筛查时,可采用TP-ELISA试验,RPR和TRUST则不适宜。     

梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用

目的评价3种梅毒血清学试验在梅毒诊断中的应用价值。方法对65份梅毒阳性血清和96份健康体检阴性的血清用苍白密螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和苍白密螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)3种方法进行检测。结果 3种方法检测65份梅毒血清中,TRUST阳性61份,阳性率为93.8%;TP-ELISA阳性63份,阳性率为96.9%;TPPT阳性65份,阳性率100.0%;3种方法检测96份健康者血清,TRSUT和TP-ELISA均检出生物假阳性。结论 TRUST敏感性、特异性均最低,TP-ELISA敏感性和特异性高于TRUST,TPPA敏感性和特异性最高;TRSUT对于非特异性的梅毒血清学试验,仅可作为疗效观察和随访有无复发或再感染的指标。     

老年患者抗梅毒螺旋体抗体阳性与免疫印迹法结果的对比分析

目的 对老年患者梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)检测阳性的标本,用免疫印迹法进行确认,分析其在老年患者梅毒诊断中的临床价值.方法 用梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)作为梅毒筛查,对老年患者TPPA阳性标本用免疫印迹法(WB)进行确认.结果 TPPA阳性的64例老年患者送检标本,用WB检测确证阳性63例,阳性符合率为98.4％,阴性符合率为100.0％.结论 TPPA测定抗梅毒抗体有较高的阳性符合率,几乎全部存在既往感染或隐性感染,对TRUST结果则应综合分析.     

Syphilis serology among transvestite prostitutes attending an HIV unit in Rome,Italy

Sixty-seven transvestite prostitutes from Latin America (49 from Brazil and 18 from Colombia) who attended an HIV unit located in the inner city of Rome between January 1991 and June 1992 were studied for syphilis markers by means of both theTreponema pallidum haemoagglutination test (TPHA) and a solid phase haemadsorption test for detection of specific IgM (SPHA-IgM) which are typically present in recent infections. All participants reported more than 500 sexual partners in the past year, and 67.1% of them more than 1500 partners (between 5 and 10 partners per working day). The overall prevalence of anti-HIV antibodies in this population was 65.7%. The prevalence of positive TPHA tests in the population studied was 73.1%, while that of positive SPHA-IgM tests was 10.4%. The prevalence of positive TPHA and SPHA-IgM tests was higher among Colombians than among Brazilians (83.3% vs 69.4% and 22.2% vs 6.1%, respectively) and also showed a positive correlation with the duration of their permanence in Italy. The TPHA and SPHA-IgM positivities were significantly higher among subjects older than 29 years. Positive TPHA was also significantly higher in subjects who reported a history of heroin and/or cocaine abuse while positive SPHA-IgM was higher in subjects who did not use condoms or reported irregular use of them than in subjects who regularly used condoms. No overall correlation was evident between TPHA positivity and anti-HIV positivity, while SPHA-IgM positivity was found to be higher among anti-HIV-negative subjects. The population studied, therefore, apparently represents a relevant source for syphilis (in addition to HIV) transmission, due to the high number of sexual partners and to the overall irregular use of condoms, and it is likely that similar populations can largely contribute the maintenance of syphilis in industrialized countries. Fluorescent anti-treponemal antibody-absorption (FTA-ABS) and rapid plasma reagin (RPR) tests were also performed on all serum samples. Results of FTA-ABS were fully consistent with those of TPHA, while a lower degree of concordance was observed between RPR and TPHA.Revised paper presented in part as a poster at the 10th International Meeting of the International Society for STD Research, Helsinki, Finland, 29 August–1 September 1993.     

出入境人员梅毒诊断方法的应用与患者个案情况分析

目的提高出入境人员中梅毒患者的检出率,并且给予患者指导和教育,提高人们健康观念和自我防护意识。方法采用ELISA法检测1581名出入境人员标本中的梅毒指标、阳性结果,同时采用TRUST法复检和TPPA法确认,对患者进行流行病学调查,了解其感染情况。结果目前口岸梅毒监测工作主要存在三方面问题:按现行检验规程若单一采用非特异性梅毒螺旋体抗原试验作为初筛方法,容易造成梅毒患者漏检;由于漏检使患者忽视疾病的潜在危害,延误治疗;患者对性病知识认识不深,自我防范意识差,增大传染病传播的风险。结论口岸梅毒监测的血清学试验应以ELISA法作筛查,阳性结果以TPPA法确认和TRUST法判断传染性,对于患者应给予治疗建议,加强性病知识宣传教育,以提高检验检疫部门的传染病监测工作质量。     

快速血浆反应素试验及酶联免疫吸附试验同步检测献血者梅毒血清效果评价

目的探讨非特异和特异性梅毒抗体血清学方法筛查效果,为采供血机构选择梅毒筛查方法提供科学依据。方法同时采用快速血浆反应素试验（RPR）和梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP—ELISA）对48235份献血者血液标本做筛查试验,对检出阳性标本用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）进行确认。结果RPR法阳性率0．21％（103／48235）;TP-ELISA法阳性率0．42％（202／48235）,2方法差异有统计学意义（X^2=79．68,P〈0．01）。经TPPA法确认187份梅毒阳性血标本中RPR法检出阳性率为52．41％（98／187）,TP-ELISA法检出阳性率为96．26％（180／187）,2法检出阳性率差异有统计学意义（X^2=94．23,P〈0．01）。111份RPR法阴性、TP—ELISA法阳性血标本,经TPPA法确认为阳性89份;12份TP—ELISA法阴性、RPR法阳性血标本,经TPPA法确认为阳性7份。结论TP-ELISA法梅毒抗体检出率明显高于RPR法,但两法均存在漏检、假阴性或假阳性现象,若同时采用特异和非特异性2种血清学方法进行献血者血液梅毒筛查,可有效减少梅毒经输血传播,确保输血安全。