胞外体与肿瘤免疫治疗

 【摘要】　胞外体（EXO）是真核细胞晚期内体分泌到细胞外的小囊泡体,负载了来源细胞的膜分子,蛋白分子以及一些参与信号转导的分子。不同来源的EXO其所负载的蛋白成分不同,其生物学特性也有所差异。以树突细胞（DC）为代表的抗原递呈细胞（APC）以及肿瘤细胞释放的EXO在机体免疫调节以及肿瘤免疫治疗中的作用研究近年来取得了较大进展。就EXO 的生物学特性及其在肿瘤免疫治疗中研究进展作一综述。     

异汉防己碱增强多药耐药肿瘤细胞对阿霉素的敏感性及其机制

目的:以K562/DOX和MCF-7/DOX细胞为对象,探讨异汉防己碱对化疗药物阿霉素（DOX）的增敏作用及其作用机制。方法:采用MTT法检测异汉防己碱的内在细胞毒性及其对阿霉素的增敏作用,并以RF值评价其增敏效果。应用流式细胞术（FCM）检测细胞膜上P-gp的表达以及细胞内DOX和罗丹明123（Rh123）的蓄积量。结果:异汉防己碱在10μg/ml的无毒剂量可明显增强DOX的细胞毒性。K562/DOX和MCF-7/DOX细胞膜上P-gp均呈强阳性表达,但异汉防己碱对该P-gp表达水平无明显影响。异汉防己碱可使K562/DOX和MCF-7/DOX细胞内DOX和123的荧光密度（FI）均明显增加,由此证明异汉防己碱可有效抑制P-gp的功能。结论:异汉防己碱可通过抑制P-gp的功能而增强阿霉素的敏感性,从而有效逆转肿瘤细胞的多药耐药性（MDR）,它可能成为有效多药耐药逆转剂的候选药物。     

多柔比星导致急性心肌毒性24小时内血清中缺血修饰白蛋白变化的临床观察

目的：通过临床观察IMA（缺血修饰白蛋白）诊断DOX（多柔比星）心肌毒性的敏感性、准确性以及是否存在早期诊断价值。方法：选取2007年7月至2014年7月住院使用DOX肿瘤化疗患者48例,在化疗前均常规查心电图、心脏彩超、cTnT（肌钙蛋白）,如以上指标有异常则不选用多柔比星化疗。在用DOX化疗期间如出现DOX导致的急性心肌毒性反应则将此患者定为入组条件。入组患者均在出现多柔比星导致的急性心肌毒性反应10分钟及3、6、12、24小时抽血查IMA、cTnT、CK－MB（心肌酶谱）检验指标。结果：在DOX导致的急性心肌毒性患者血清IMA值出现了变化,而这种变化在发生DOX急性心肌毒性早期就开始增高,各种对比P＜0．01,并且IMA的变化与心电图具有相关性（P＝0．000）。结论：IMA成为DOX心肌毒性反应的早期诊断指标具有一定价值。     

miRNA在肿瘤治疗相关心脏毒性中的研究进展

因心脏毒性的发生使抗肿瘤药物的临床使用受限。化疗、放疗、靶向治疗和免疫治疗均表现出不同频度和程度的心脏毒性,严重者可发生心力衰竭,危及患者生命。不同抗肿瘤治疗导致的心脏毒性作用机制复杂,氧化应激、DNA损伤、细胞凋亡等均可能参与。miRNA（microRNA）是细胞增殖、死亡、凋亡和分化的关键调控因子,其失调还与心脏重塑和心脏毒性密切相关。本文将对miRNAs可能参与不同肿瘤治疗所致心脏毒性发生的作用机制,及其在监测和治疗中的作用进行综述。      

阿霉素长循环热敏脂质体联合射频热疗的药效学研究

目的 考察阿霉素长循环热敏脂质体（doxorubicin long-circulating thermo-sensitive liposomes, DOX-LCTSLs）与射频（radiofrequency, RF）热疗联合对人宫颈癌HeLa荷瘤裸鼠的抗肿瘤效果及相关药效。方法 构建人宫颈癌HeLa荷瘤裸鼠模型,将小鼠随机分为6组：对照组、RF热疗组、DOX组、DOX-LCTSLs组、DOX+RF组和DOX-LCTSLs+RF组。分别在给药0.5 h、4 h及12 h后检测组织中药物的含量,确定DOX在各时间段主要组织及肿瘤中的分布情况;治疗期间观察裸鼠的生活状态,隔天测量肿瘤体积变化并计算抑瘤率;治疗结束后将主要器官及肿瘤切片进行HE染色,观察各组织器官的细胞形态学变化;使用TUNEL染色法考察肿瘤组织细胞凋亡情况。结果 组织分布结果表明,DOX-LCTSLs组在心脏分布明显比DOX组减少;DOX-LCTSLs+RF组抑瘤率达82.14%,与DOX组及DOX+RF组相比差异有统计学意义（P＜0.05）;HE组织切片表明DOX-LCTSLs对裸鼠主要脏器无明显毒性,而肿瘤组织细胞出现不规则及核溶解现象;TUNEL凋亡检测表明,经过DOX-LCTSLs+RF组尾静脉注射治疗后,肿瘤组织出现明显凋亡现象。结论 DOX-LCTSLs与其他治疗组相比,具有明显的热敏控释性、低毒性,联合RF热疗可显著增强DOX抗肿瘤活性。     

乳糖酸修饰的介孔二氧化硅纳米粒子靶向肝癌研究

目的:合成一种具有肝癌特异性的纳米药物载体,实现对肝癌细胞靶向释放化疗药物阿霉素（doxorubicin,DOX）。方法:本研究将具有肝癌特异性的配体乳糖酸（lactobionic acid,LA）修饰到介孔二氧化硅（mesoporous silica nanoparticles,MSN）表面,合成具有肝癌靶向作用的纳米载体LA-MSN,然后用LA-MSN负载化疗药物阿霉素,形成具有肝癌特异性靶向杀伤作用的纳米药物DOX/LA-MSN。结果:细胞荧光成像以及细胞电子显微镜实验显示乳糖酸具有良好的肝癌细胞靶向作用并能有效转运DOX/LA-MSN纳米药物进入肝癌细胞。 体外杀伤实验显示DOX/LA-MSN纳米药物在体外能够有效杀伤HepG2肝癌细胞,小动物活体成像实验表明LA-MSN纳米药物具有在体内靶向实体肝癌的能力。结论:DOX/LA-MSN纳米药物能够有效避免阿霉素药物非特异性的缺点,实现对肝癌靶向治疗,是一种具有良好应用前景的纳米药物载体。     

增强Exosomes免疫功能方法的研究进展

 Exosomes（EXO）是细胞内多囊泡体（MVB）膜内陷形成,并与细胞膜融合,分泌到胞外的膜性囊泡状小体。其内部和膜表面可携带多种信息传递和免疫激活因子,所以EXO的来源、作用途径和功能成为研究的焦点。在进一步了解EXO的生物学特性和功能的基础上,利用各种方法为EXO人工添加具有各种功能的因子,从而使EXO具有更强大的功能。将近年不同的人工方法和所添加的因子以及合成的EXO增进的功能特性进行了综述。     

心脏磁共振成像在评估癌症治疗引起的心脏毒性中的应用

目前由于癌症治疗引起的心脏毒性极其复杂，如何能够准确的评估心脏结构、功能和心肌组织特征至关重要，从而需要更先进的非侵入性检查方法。心脏核磁（cardiac magnetic resonance,CMR）的特殊应用，包括通过检测心肌应变、检测微循环功能障碍和检测亚临床左室功能障碍，以及对于免疫检查点抑制剂引起的炎症更敏感的检测等可以用来评估癌症治疗引起的心脏毒性。CMR在癌症治疗引起的心脏毒性的非侵入性检测中起着重要的作用，本文就CMR在检测癌症治疗过程中心脏毒性的作用做一综述。     

注射用复合辅酶对肺癌放疗保护作用的研究

目的研究注射用复合辅酶（贝科能）在肺癌放疗支持治疗中的作用。方法42例肺癌接受原发灶和纵隔淋巴结放疗的患者随机分为治疗组和对照组,各21例,治疗组在放疗后连续给予注射用复合辅酶2支（每支含辅酶A100单位,辅酶I 0.1单位）,对照组为空白对照。观察患者肿瘤的局部控制率、血液学毒性、肺功能损伤、心脏毒性。结果在治疗组和对照组中肺癌局部控制率无明显差异（P〉0.05）,两组患者Ⅲ、Ⅳ度白细胞减少的发生率差异有统计学意义（P〈0.05）,治疗组放射性肺炎的发生率下降,对心脏有保护作用。结论在本实验组中,注射用复合辅酶在肺癌的放疗中作为支持治疗有明显的疗效,可降低骨髓抑制,对心肺有保护作用。     

超声心动图对化疗药所致心脏毒性的评估

摘 要：癌症治疗方法的改进延长了患者的生存期,但很多化疗药物会引起心脏并发症。尤为显著的是,化疗导致的心脏功能受损明显降低了癌症患者的生存质量,提高了死亡率。早期发现亚临床心脏毒性和左心室功能异常是非常重要的。目前,对于亚临床心脏毒性的检测缺乏准确的手段和方法。超声心动图是现有的一种有效评估心脏功能的方法,在心脏毒性诊断中起到重要作用。全文探讨超声心动图在检测心脏毒性中的作用,包括传统及超声心动图新技术对亚临床心脏毒性的评估。     

低频率超声对MCF-7/DOX细胞多药耐药逆转的体外研究*

目的:观察低频率超声空化效应对人乳腺癌细胞株MCF-7/DOX 多药耐药的逆转作用,并探讨其逆转肿瘤多药耐药的机制。方法:以不同的超声辐射时间照射MCF-7/S 、MCF-7/DOX 细胞,采用MTT 法筛选出非细胞毒剂量的超声照射时间。以无毒剂量的超声照射联合不同浓度的DOX,比较单独DOX组与联合组MCF-7/DOX 细胞对DOX的IC 50值有无明显差异,从而判断低频率超声的增敏作用,并计算增敏倍数和相对逆转效率。用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞内阿霉素的浓度。结果:低频率超声辐射对MCF-7/DOX 细胞具有一定的细胞毒作用,其非细胞毒辐射时间是10s。非细胞毒性的超声辐射可显著增加阿霉素对MCF-7/DOX 细胞的抑制率（从21.65%±0.05% 升至43.13%±0.19%）,可显著降低阿霉素对MCF-7/DOX 细胞的IC 50 （从61.08± 0.27μg/mL降至 28.12± 5.94μ g/mL）;对MCF-7 细胞的抑制率（从66.47% ± 0.02%升至 67.25% ± 0.20%）及IC 50 （从0.84± 0.07μ g/mL 降至 0.802 ±0.03μ g/mL）无明显的影响。低频率超声对MCF-7/DOX 细胞的逆转倍数为2.17倍,相对逆转效率为:54.71% 。流式细胞仪检测结果显示:单独应用DOX,MCF-7 细胞的凋亡率为33.99% ,MCF-7/DOX 细胞的凋亡率为4.4% ,低频率超声与DOX合用后,MCF-7/DOX凋亡率为13.70% 。低频率超声处理后,MCF-7/DOX 细胞内DOX浓度显著增加,峰值明显右移,但尚不能达到敏感细胞的水平。结论:低频率超声可部分逆转人乳腺癌MCF-7/DOX 细胞对阿霉素的耐药性,其逆转机制考虑为低频率超声空化效应增加细胞膜的通透性,增加肿瘤细胞内抗肿瘤药物的浓度,从而杀灭耐药的肿瘤细胞,逆转肿瘤耐药性。      

组蛋白去乙酰化酶抑制剂治疗T细胞淋巴瘤的作用机制及临床研究进展

组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors，HDACI）可以调节组蛋白氮端的乙酰化状态，从而发挥其在疾病治疗方面的作用，组蛋白的氮端尾部修饰属于表观遗传学的范畴。表观遗传学主要研究在不改变DNA序列的情况下发生的可遗传性的变异，HDACI作为一类非细胞毒性新型抗肿瘤的靶向治疗药物备受关注，临床应用日益广泛。美国食品药品监督管理局（FDA）先后批准两种HDACI用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤（cutaneous T cell lymphoma，CTCL）后，HDACI在其他T细胞淋巴瘤亚型中的临床应用越来越受到重视，人们对其作用机制的深入研究为HDACI在T细胞淋巴瘤各亚型中的广泛应用提供了分子生物学的理论基础，本文就HDACI在T细胞淋巴瘤治疗中的作用机制及临床研究进展进行综述。      

维甲酸治疗乳腺癌生物靶点的研究进展

生物靶向治疗和化学预防是乳腺癌防治研究的热点之一。抗肿瘤策略正从传统的非选择性细胞毒性药物应用向针对机制的多环节作用的生物靶向治疗发展。维甲酸（retinoids）是天然或人工合成的维生素A衍生物。维甲酸作为促进恶性肿瘤细胞向成熟分化的分化诱导剂，对乳腺癌发挥多靶向治疗和化学预防作用。     

载药磁性复合微球用于HT-1080细胞的磁感应热化疗

目的:研究功能型载药磁性复合微球介导的磁感应热化疗对人纤维肉瘤细胞HT-1080的细胞毒性作用,为软组织肉瘤的治疗探索新方法。方法:双乳化法制备负载盐酸阿霉素(doxorubicin hydrochloride,DOX)和磁性颗粒（magnetic nanoparticles,MNPs）的磁性复合微球,仪器分析法对制备的复合微球进行理化性质表征测定,CCK8法检测细胞经不同处理后的相对增殖率,研究不同浓度的DOX及不同温度的水浴加热对HT-1080细胞的毒性作用,并以Veleriote法评价复合微球介导的磁感应热化疗是否存在协同增敏效应。结果:复合微球为粒径约3μm的光滑核壳结构的中空球体,MNPs及DOX分别位于微球的壳层和核层,该介质置于交变磁场下暴露可迅速升温,升温性能与微球中磁颗粒含量呈正相关性。单独DOX药物处理和加热处理对细胞均有毒性作用。DOX联合43℃热疗的细胞毒性效果优于单一药物或加热处理,复合微球介导的化疗和磁感应热化疗对肿瘤细胞的杀伤效果均优于单一DOX处理效果,热化疗之间存在协同增敏效应,该效应为非剂型依赖且复合微球介导的热化疗协同效应更为显著。结论:载药磁性复合微球可介导肿瘤磁感应热化疗,对HT-1080的细胞毒性呈热化疗协同效应。     

PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂致心脏毒性的研究进展

心脏毒性是抗肿瘤药物的严重不良反应,随着抗肿瘤药物的不断发展,免疫检查点抑制剂已被应用于多种癌症的治疗,特别是程序性死亡受体1（PD-1）或程序性死亡配体1（PD-L1）免疫检查点抑制剂近年来受到广泛关注,本文将从PD-1及PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂概述、PD-1/PD-L1免疫检查点抑制剂致心脏毒性的表现及可能机制的探索、心脏毒性的检测方法和PD-1/PD-L1所致心脏毒性的治疗等方面进行综述。     

蒽环类抗肿瘤药物的心脏毒性及保护剂的研究进展

由于蒽环类药物显著的抗肿瘤作用和广泛的临床应用,其临床应用的安全性越来越受到重视.该类药物的心脏毒性表现为剂量限制性的特点.目前唯一获批的蒽环类药物心脏毒性保护剂只有右丙亚胺,其心脏保护作用已经得到了广泛认可,并被美国临床肿瘤实践指南及其他多种国内外指南推荐应用于蒽环类药物心脏毒性的预防和治疗.有关右丙亚胺的临床应用策略,目前仍存在一定争议.本文探讨了右丙亚胺对蒽环类药物抗肿瘤效价的影响、右丙亚胺用药时机的选择、右丙亚胺临床应用的安全性以及正在研究中的可能具有心脏保护功能的药物.     

外泌体介导的Let-7a 通过下调MYC表达抑制三阴性乳腺癌细胞的恶性生物学行为

[摘要] 目的：探讨外泌体(EXO)传输Let-7a 调控MYC基因在三阴性乳腺癌（TNBC）细胞恶性生物学行为中的作用及其机制。方法：TNBC细胞MDA-MB-231 培养完成后,qPCR实验检测TNBC组织和细胞中MYC与Let-7a mRNA的表达水平,WB实验检测MYC与Let-7a 蛋白的表达水平。携Let-7a 重组慢病毒和敲除MYC的Crisper/Cas-9 系统分别转染MDA-MB-231 细胞,MTT、Transwell、划痕愈合实验检测MDA-MB-231 细胞增殖、侵袭和迁移能力。荧光素酶活性实验验证MYC和Let-7a 的作用靶点。分别在野生型和过表达Let-7a 的MDA-MB-231 细胞中分离EXO,并以透射电镜和WB实验鉴定。qPCR、WB、MTT、Transwell等实验检测两种EXO分别和MDA-MB-231 细胞共孵育后Let-7a 通过EXO影响MDA-MB-231 细胞的生物学功能。结果：Let-7a 与MYC在TNBC组织和细胞系中表达呈负相关（P<0.05）;MYC促进MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭,Let-7a 可以抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭（均P<0.01）。Let-7a 通过作用于MYC基因的3''UTR 使其沉默,从而减少MYC蛋白的表达（P＜0.05）。Let-7a 由EXO包裹运输至肿瘤细胞,进而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭能力（P<0.05）。结论：EXO介导的Let-7a通过作用于MYC基因3’UTR区使得MYC基因沉默,从而抑制MDA-MB-231 细胞的增殖、迁移与侵袭。     

新抗癌药Mitoxantrone与阿霉素比较,对狗的安全性评价 1,临证性观察

Mitoxantrone 为一蒽醌衍生物,其作用机制与阿霉素相似,即可嵌入ENA 中。1979年Wallace 等和MuraocK 等发现本药在对抗小鼠几种实验性肿瘤系统上是一种有效的化疗药。由某些蒽环类抗癌抗生素特别是阿霉素所致的蓄积性心脏毒性早有记述,一些学者发现,对于评价阿霉素和其他抗癌药的潜在性心脏毒性时,狗是一种有效的实验模型。本报告的目的是将Mitoxantrone 与阿霉素比较时,对其毒性和     

辅酶Q10治疗蒽环类药物致心脏毒性的疗效

目的：研究辅酶Q10（CoQ10）对使用蒽环类化疗药物致心脏毒性的保护作用,并探讨可能的机理。方法：60例肿瘤患者随机分为治疗组（30例）和对照组（30例）,化疗同时分别予CoQ10及大剂量维生素E治疗,治疗前后行心电图、心肌酶检查。结果：化疗后CoQ10组心电图和血清心肌酶学指标均优于对照组（P〈0.05）。结论：CoQ10对蒽环类化疗药物所致心脏毒性有保护作用。     

化疗相关心脏毒性问题研究进展

化疗作为肿瘤治疗手段的基石之一,可引起心力衰竭、冠脉病变、瓣膜病、心律失常等心脏毒性事件,其相关近期、远期心脏毒性问题均需受到临床医生重视。近年随着肿瘤心脏病学交叉学科的发展,化疗药物相关心肌损伤问题在病理生理机制、诊断、治疗等方面均取得了一定进展,但仍然存在诸多问题。该综述从不同化疗药物引起心血管事件的流行病学、临床特点、机制、诊断及治疗策略方面简要介绍其心脏毒性的诊治问题,为临床实践提供参考。