卵圆细胞的生物学特征及其与肝癌发生的关系

目的通过动态的方法观察卵圆细胞的主要生物学特征及其在肝癌发生过程中的演变规律,揭示卵圆细胞与肝癌发生之间的关系。方法构建实验性肝癌的大鼠诱癌模型,运用常规HE染色、免疫组织化学和爱新蓝染色等方法,动态观察卵圆细胞在肝癌发生过程中的演变规律和分子表达特征。结果随着诱癌时间延长,逐渐出现卵圆细胞的增生、癌前病变、胆管细胞癌和(或)肝细胞癌,各阶段卵圆细胞均表达OV-6、AFP和c-kit。结论原发性肝癌可能与卵圆细胞异常分化有关,卵圆细胞特征性表达为OV-6、AFP和c-kit。     

肝癌组织中表皮生长因子含量的研究

用放免法定量检测肝癌组织，癌旁组织和正常肝组织中表皮生长因子（EGF）含量。癌旁组织EGF含量显著高于正常肝组织。癌组织与癌旁组织比较，其EGF含量无显著性差异。作者认为EGF对肝癌的发生发展有重要的促进作用，这种作用始于癌前病变。     

肝癌及癌旁组织中HBsAg表达的研究

应用免疫组织化学技术，检测４０例肝癌（ＨＣＣ）及癌旁组织中ＨＢｓＡｇ表达，阳性率达８２．５％，表明ＨＢＶ感染与ＨＣＣ发生密切相关。ＨＢｓＡｇ在ＨＣＣ中表达较癌旁组织中少而弱，可能系肝细胞癌变后不利于ＨＢｓＡｇ表达及Ｓ基因发生重排或缺失之故。碎点状ＨＢｓＡｇ小包涵体，其可能为ＨＣＣ中ＨＢｓＡｇ的特殊表现形式、小细胞ＬＣＤ中ＨＢｓＡｇ表达显著高于癌旁其他类型病变，支持其更接近癌前病变的观点。ＨＢｓＡｇ染色可作为鉴别ＨＲＶ感染肝病中癌前病变与早期癌及高分化癌的一种辅助手段。     

性激素对鼠实验性肝癌影响的形态计量分析

为探讨性激素对鼠实验性肝癌的影响，复制ＤＥＮ－ＡＡＦ－ＰＨ肝癌动物模型，从形态计量角度，分别观察雌二醇，睾酮和去势手术对鼠实验性肝癌的作用。结果表明，雄性大鼠比雌性形成癌前增生性结节的数目多，体积大（Ｐ＜０００１）；雌二醇可使结节数目减少和体积减小，而睾酮与之相反；睾丸切除可减轻癌前病变，卵巢切除可加重癌前增生性结节的病变程度。本研究表明性激素在鼠实验性肝癌的发生发展过程中起重要作用     

肝癌组织中表皮生长因子含量的研究

用放免法定量检测肝癌组织，癌旁组织和正常肝组织中表皮生长因子（ＥＧＦ）含量。癌旁组织ＥＧＦ含量显著高于正常肝组织。癌组织与癌旁组织比较，其ＥＧＦ含量无显著性差异。作者认为ＥＧＦ对肝癌的发生发展有重要的促进作用，这种作用始于癌前病变     

3''''-Me-DAB诱导大鼠肝癌发生过程中p53及相关基因mRNA的定量分析

背景与目的:有关肝癌中p53基因突变及p53蛋白表达异常已有报道,但其在mRNA水平上的变化尚不清楚。为了解在肝癌发生、发展和预后过程中p53、谷胱甘肽转硫酶P(glutathioneS-transferaseP,GST-P)、甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)和白蛋白mRNA水平的变化,本研究定量分析癌前病变和癌灶中GST-P、AFP和白蛋白mRNA的量。方法:在3'-甲基-4-二甲胺偶氮苯(3'-methyl-4-dimethylaminoazobenzene,3'-Me-DAB)诱发F344大鼠肝癌过程中,用激光捕获显微取样仪(LCM)准确获得大鼠肝脏中微小癌灶或癌前病变组织后,采用LightCyclerTMV3System实时(real-time)RT-PCR定量分析这些病灶组织中mRNA水平。结果:在实验的第6、12和24周,癌前病变组织中p53mRNA量均显著高于正常组织(P≤0.001)。从第6周到第24周,癌前病变组织中p53mRNA逐渐降低(P<0.01)。癌组织中p53mRNA含量高于正常组织,低于同期癌前病变组织(P=0.028和0.0136)。第24周的癌前病变组织或癌组织中细胞核呈p53强染色。各实验期,癌前病变中GST-PmRNA量明显高于正常组织和癌组织(P<0.001)。癌组织中AFPmRNA的表达量显著高于癌前病变组织和正常组织(P<0.001),白蛋白mRNA的表达量显著低于这两种组织(P<0.01)。GST-P和AFP分别在癌前病变组织和癌组织中呈灶状强表达。结论:GST-     

肿瘤相关巨噬细胞的极化方式及其对乳腺癌进展的影响

乳腺癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一，在全球范围内，其发病率呈逐年升高以及年轻化的趋势。肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages,TAMs）是乳腺癌肿瘤微环境中重要的免疫细胞，功能多样，具有高度的可塑性。当前的研究认为，TAMs在乳腺癌形成早期常表现为M1样表型，而在乳腺癌进展的过程中则极化为M2样表型，M2型TAMs能够促进乳腺癌的细胞增殖、血管生成、免疫抑制以及耐药性，与乳腺癌的预后呈负相关。因此，对TAMs极化方向的干预可作为乳腺癌抗癌治疗的一个新的研究方向。本文主要对乳腺癌中TAMs极化的分子机制以及对乳腺癌进展的影响进行综述。     

3′-Me-DAB诱导大鼠肝癌发生过程中p53及相关基因mRNA的定量分析

背景与目的:有关肝癌中 p53基因突变及 p53蛋白表达异常已有报道 , 但其在 mRNA水平上的变化尚不清楚 . 为了解在肝癌发生、发展和预后过程中 p53、谷胱甘肽转硫酶 P( glutathione S-transferase P,GST-P) 、甲胎蛋白 ( α -fetoprotein,AFP) 和白蛋白 mRNA水平的变化 , 本研究定量分析癌前病变和癌灶中 GST-P、 AFP和白蛋白 mRNA的量 . 方法:在 3′ -甲基 -4-二甲胺偶氮苯 (3′ -methyl-4-dimethylaminoazobenzene,3′ -Me-DAB)诱发 F344大鼠肝癌过程中 , 用激光捕获显微取样仪 (LCM)准确获得大鼠肝脏中微小癌灶或癌前病变组织后 , 采用 LightCyclerTM V3 System 实时 (real-time)RT-PCR定量分析这些病灶组织中 mRNA水平 . 结果:在实验的第 6、 12和24周,癌前病变组织中p53mRNA量均显著高于正常组织(P≤0.001)。从第6周到第24周,癌前病变组织中p53mRNA逐渐降低(P<0.01)。癌组织中p53mRNA含量高于正常组织,低于同期癌前病变组织(P=0.028和0.0136)。第24周的癌前病变组织或癌组织中细胞核呈p53强染色。各实验期,癌前病变中GST-PmRNA量明显高于正常组织和癌组织(P<0.001)。癌组织中AFPmRNA的表达量显著高于癌前病变组织和正常组织(P<0.001),白蛋白mRNA的表达量显著低于这两种组织(P<0.01)。GST-P和AFP分别在癌前病变组织和癌组织中呈灶状强表达。结论：GST-P和AFPmRNA分别在癌前病灶组织和癌组织中强表达,是这些病变组织的重要标志物。p53mRNA在早期肝癌前病变和癌灶中显示高水平的表达,而较晚期p53蛋白升高。     

肝癌患者可以进行肝移植吗？

月干癌是指发生于肝的恶性肿瘤,包括原发性肝癌和转移性肝癌两种,人们日常说的肝癌指的多是原发性肝癌。原发性肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,根据最新统计,全世界每年新发肝癌患者约60万,居恶性肿瘤的第五位。原发性肝癌按细胞分型可分为肝细胞肝癌、胆管细胞肝癌及混合型肝癌。按肿瘤的形态可分为结节型、巨块型和弥漫型。在我国,肝癌的死亡率仅次于肺癌,居恶性肿瘤的第二位。肝癌的初期症状并不明显,晚期主要表现为肝痛、乏力、消瘦、黄疸、腹水等症状。     

CPGL的基因结构及其与肝癌相关性的研究

目的 克隆carboxypeptidase of glutamate like(CPGL)全长cDNA，初步探讨它在肝癌发生发展中的作用。方法 通过5’-RACE方法和RT-PCR验证，确定(CPGL)全长序列，根据其全长与人类基因组的比较进而确定基因的染色体定位和其外显子、内含子；应用Western Blot方法检测CPGL在肝癌组织和癌旁组织中的表达；细胞克隆形成及生长曲线检测CPGL对肝癌细胞生长的影响。结果 CPGL全长2616bp，编码475个氨基酸的蛋白，染色体定位于18q22.3，蛋白产物定位于细胞质中，Western Blot结果发现CPGL在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织。将CPGL转染肝癌细胞系SMMC7721发现其具有抑制生长的作用。同源比较发现CPGL含有M20蛋白酶家族的保守功能域。结论 上述发现表明CPGL是具有潜在抑癌作用的基因。     

肝癌高危人群的彩色多普勒超声定期筛查对诊断小肝细胞癌的应用价值

目的：探讨肝癌高危人群彩色多普勒超声定期筛查对诊断小肝细胞癌的的应用价值。方法运用常规超声法和彩色多普勒超声检查同时对81例属于肝癌高危人群的患者进行间隔为3个月的定期筛查,比较常规超声法和彩色多普勒超声检查对小肝细胞癌检出的灵敏性和特异性。另外,比较了已经确诊的56例小肝细胞癌患者和11例肝结节患者的回声模式和血流指数。比较不同体积肝癌的检出率和血流指数。结果彩色多普勒超声定期筛查是在检测敏感性、阴性检测率和符合率上都显著优于常规超声法（P＜0．05）,显示出更好的诊断性能。肝癌患者的病灶回声模式与肝结节患者差异显著,P＜0．05。肝癌组病灶内或周围的最大血流速度和血流指数大于肝结节组,差异有统计学意义, P＜0．05;肝癌组肝动脉的最大血流速度和血流指数大于肝结节组,差异有统计学意义,P＜0．05。≤2．0 cm的肝癌病灶,彩色多普勒超声的检出率高于普通超声,差异有统计学意义,P＜0．05。结论运用彩色多普勒超声检查对肝癌高危人群进行定期筛查,对及早诊断小肝细胞癌具有重要的意义。     

抑制NEK7促进肝癌细胞凋亡的实验

目的 采用体外实验验证抑制NEK7表达后肝癌细胞增殖、衰老及凋亡的变化,并探索其机制。方法 Western blot及RT-PCR检测不同肝癌细胞系及人肝永生化THLE-2细胞系中的NEK7表达,针对NEK7基因序列设计抑制其表达的shRNA,转染肝癌细胞后,观察细胞体外增殖活性、衰老、凋亡及细胞周期的变化,Western blot检测抑制NEK7表达后细胞周期相关因子的变化。结果 肝癌细胞中NEK7呈高表达,shRNA慢病毒转染肝癌细胞抑制NEK7表达后,肝癌细胞增殖能力受到抑制,细胞衰老及凋亡比例显著升高,S及G2/M期细胞数明显减少,细胞周期受到阻滞,C-myc、c-Fos、cyclin D1、cyclin E等细胞周期因子表达水平受到抑制,P16及P27表达水平升高,CDK2、CDK4及CDK6的表达无明显变化。结论 靶向抑制NEK7表达,降低了肝癌细胞的增殖能力,并促进细胞衰老、诱导其凋亡,同时肝癌细胞周期进程受阻。     

Morphologic studies of the liver cell dysplasia

Light and electron microscopic changes in human liver cells which were considered to be precancerous lesions, were studied. In our micrometrical examination, dysplastic liver cells were classified into two types: large and small dysplastic cell. Each type had nuclear pleomorphism and multinucleation; however, the nucleocytoplasmic ratio of the large dysplastic cell remained normal. Electron microscopically, the large dysplastic cell had some features of regenerative cells. The nucleocytoplasmic ratio of the small dysplastic cell was between that of normal hepatocytes and liver cancer cells. The difference in the incidence of the small and large dysplastic cells in normal livers and cirrhotic livers having hepatocellular carcinoma was statistically significant. In addition, the small dysplastic cell had more of a tendency to produce a small round focus. It was morphologically suggested that the more important candidate for the precancerous cell in the liver was the small dysplastic cell.     

Stabilization of LKB1 and Akt by neddylation regulates energy metabolism in liver cancer

The current view of cancer progression highlights that cancer cells must undergo through a post-translational regulation and metabolic reprogramming to progress in an unfriendly environment. In here, the importance of neddylation modification in liver cancer was investigated. We found that hepatic neddylation was specifically enriched in liver cancer patients with bad prognosis. In addition, the treatment with the neddylation inhibitor MLN4924 in Phb1-KO mice, an animal model of hepatocellular carcinoma showing elevated neddylation, reverted the malignant phenotype. Tumor cell death in vivo translating into liver tumor regression was associated with augmented phosphatidylcholine synthesis by the PEMT pathway, known as a liver-specific tumor suppressor, and restored mitochondrial function and TCA cycle flux. Otherwise, in protumoral hepatocytes, neddylation inhibition resulted in metabolic reprogramming rendering a decrease in oxidative phosphorylation and concomitant tumor cell apoptosis. Moreover, Akt and LKB1, hallmarks of proliferative metabolism, were altered in liver cancer being new targets of neddylation. Importantly, we show that neddylation-induced metabolic reprogramming and apoptosis were dependent on LKB1 and Akt stabilization. Overall, our results implicate neddylation/signaling/metabolism, partly mediated by LKB1 and Akt, in the development of liver cancer, paving the way for novel therapeutic approaches targeting neddylation in hepatocellular carcinoma.     

Carcinohistogenesis and expression of alpha fetoprotein in experimental hepatocarcinoma

In1973,WhenAnthony,etal.inUganda[']werestudyinghumanhepatocirrhosisandhepatocarcinomatheyfirstreportedthatatypicalhyperplasia(AH)ofhepatocyteswasprecancerosisofhepatocellularcarcinoma(HCC).Roncalli,etal.[2]dividedAHintolargehepatocyticandsmallhepatocyticAH,andtheyconsideredthelatterwascloselyrelatedtoformingHCC.In1988,Xu,etal.[3]pointedoutthatHCCoccursfromproliferativenodulesofbasophilicandacidophilichepatocytes.Indeed,carcinohistogenesis,inparticularthechangeofalpha-fetoprotein(AFP)i…     

超声造影在肝脏局灶性病灶良恶性肿瘤鉴别诊断中的应用价值

目的：探讨在肝脏局灶性良恶性肿瘤鉴别诊断中超声造影技术的应用价值。方法回顾性分析91例接受超声造影检查的肝脏肿瘤患者93个病灶的临床诊断资料,对肝脏不同病变的超声造影表现情况进行比较。结果在本次研究中,共有89个超声造影结果准确,诊断率为95．7％。在93个肝脏肿瘤病灶中,有78个恶性肿瘤病灶,有15个良性肿瘤病灶。超声造影回声增强程度、增强均匀度、消退快慢和增强快慢在肝脏良恶性肿瘤中存在统计学差异（P＜0．05）。在本次研究中,有肝转移癌（ metastatic liver carcinoma ,MLC）病灶26个,有肝细胞癌（ hepato cellular carcinoma , HCC）病灶52个,HCC和MLC在超声造影增强程度和增强均匀度上差异明显（P＜0．05）,在增强快慢和消退快慢上无明显差异（P＞0．05）。结论在肝脏良恶性肿瘤的鉴别中超声造影有很重要的应用价值。     

Roles of Combined Glypican-3 and Glutamine Synthetase in Differential Diagnosis of Hepatocellular Lesions

Background: Hepatocellular carcinoma (HCC) is the fifth most prevalent cancer and thirdly leading causeof cancer-related death worldwide. The estimated risk of hepatocellular carcinoma is 15 to 20 times as highamong persons infected with HCV as it is among those who are not infected, with most of the excess risk limitedto those with advanced hepatic fibrosis or cirrhosis. Glypican3 (GPC3) plays a key role in relation to signalingwith growth factors, regulating the proliferative activity of cancer cells. Glutamine synthetase (GS) catalyzesthe synthesis of glutamine from glutamate and ammonia in the mammalian liver. GS was suggested as a specificmarker for tracing cell lineage relationships during hepatocarcinogenesis. In normal liver, GS expression isseen in pericentral hepatocytes, but not by midzonal or periportal hepatocytes. In HCC, strong and diffuseGS expression in seen in tumor cells. Results: Glypican3 immunopositvity was highly specific and sensitiveindicator for hepatocellular carcinoma as well as glutamine synthetase which was found to be a sensitive andspecific indicator for development of hepatocellular carcinoma when compared to cirrhosis, liver cell dyspalsiaand metastatic carcinomas. Statistical analysis revealed a significant association between GPC3 and GS withtumor size (P=0.003, p=0.006, respectively). Diffuse staining significantly associated with large tumor size while,focal and mixed staining was detected more with small tumor size. Studying the relation with tumor grade alsorevealed significant association between diffuse GPC3 and GS staining with high tumor grade. Diffuse stainingwas detected in 91.7% and 100% respectively of poorly differentiated specimens and only in 33.3% and 22.2%of well differentiated specimens. Conclusions: While using GPC3 and GS to screen for premalignant hepaticlesions remains controversial, our data suggest that GPC3 and GS may be a reliable diagnostic immunomarkersto distinguish HCC from benign hepatocellular lesions. However, negative immunostaining should not excludethe diagnosis of HCC.     

FOXK1对肝癌高转移细胞系Huh7侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨叉头框转录因子1(FOXK1)对肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力的影响。方法 采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及其癌旁正常组织FOXK1 mRNA的表达,qRT-PCR和Western blot检测正常肝细胞HL7702、肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白的表达。小RNA干扰技术下调FOXK1表达后,qRT-PCR和Western blot检测肝癌高转移细胞Huh7 FOXK1 mRNA和蛋白的表达,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力。 结果 qRT-PCR检测结果显示,肝癌组织中FOXK1 mRNA的表达高于癌旁正常组织(2.87±0.21 vs 1.35±0.11,P=0.004);qRT-PCR和Western blot检测结果显示,相比正常肝细胞HL7702,肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001)。下调FOXK1表达后,肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),侵袭和迁移细胞数目明显减少(P<0.01)。结论 下调FOXK1表达能抑制肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力。     

p21和IGF-II在肝癌、肝硬化组织中表达的研究

 目的　探讨 p2 1、IGF II在肝硬化、肝细胞癌 (HCC)中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法　用免疫组化S P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌 (HCC) p2 1、IGF II表达情况。结果　p2 1、IGF II在癌旁肝硬化和单纯肝硬化组织中的阳性表达率 (92 .86 %和 75 % ;6 8%和 74 % )与HCC(5 4 .5 5 %和 36 .36 % )相比差别有显著性意义 (P <0 .0 5 )。IGF II与p2 1阳性表达存在相关关系。HBsAg阳性或伴LCD改变的肝硬化 ,p2 1、IGF II阳性率均高于HBsAg阴性或不伴有LCD改变的肝硬化 (P <0 .0 5 )。结论　 (1)在肝细胞癌变演化过程中 p2 1、IGF II可能发挥协同作用。 (2 )LCD可能是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群 ,尤其有 p2 1、IGF II共同过度表达者 ,有发生HCC的高度危险。