乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义

目的:探讨乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义。方法:检测40对乳腺癌及其癌旁组织组织中miR-34a与VEGF的表达,分析乳腺癌中miR-34a表达与临床病理因素及VEGF表达的关系;用双荧光素酶报告系统检测miR-34a对乳腺癌细胞MCF-7中VEGF转录活性的影响;用miR-34a模拟物转染MCF-7细胞后,检测细胞增殖情况与VEGF及下游Akt蛋白表达的变化。结果:与癌旁组织比较,乳腺癌组织中miR-34a表达明显降低,而VEGF表达明显升高(均P0.05);乳腺癌中miR-34a的表达与TNM分期有关(P0.05),且与VEGF的表达呈负相关(r~2=0.4469,P=0.0033)。miR-34a模拟物转染后,MCF-7细胞中VEGF的转录活性明显抑制;增殖率明显降低,VEGF的表达以及Akt的磷酸化水平明显下调(均P0.05)。结论:miR-34a在乳腺癌组织中表达降低,削弱了对VEGF及其下游Akt磷酸化的抑制,从而促进了乳腺癌的生长。     

miR-146a在原发性肝癌组织中表达及对细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨miR-146a在原发性肝癌组织中表达,以及上调原发性肝癌HepG2细胞中miR-146a表达水平对细胞增殖和侵袭的影响。方法:2015年3月至2018年3月,行肝癌手术治疗的原发性肝癌患者89例,利用实时荧光定量PCR技术检测原发性肝癌和癌旁组织中miR-146a表达,培养HepG2细胞并分为miR-146a模拟物组、阴性对照组和空白组,利用实时荧光定量PCR技术检测细胞中miR-146a表达,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。结果:原发性肝癌组织中miR-146a相对表达量为0.36±0.09,癌旁组织中则为1.04±0.11,差异有统计学意义(t=43.947,P=0.000);miR-146a表达量在中高分化、TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、发生淋巴结转移及有门静脉癌栓的原发性肝癌组织中降低(P 0.05);miR-146a模拟物组细胞中miR-146a相对表达量高于阴性对照组和空白组(P 0.05);miR-146a模拟物组24、48、72和96h时细胞吸光度A值低于阴性对照组和空白组(P 0.05);miR-146a模拟物组迁移细胞数和侵袭细胞数低于阴性对照组和空白组(P 0.05)。结论:miR-146a在原发性肝癌组织中呈低表达,且与肿瘤发生及恶性化进展有关,特异性提高HepG2细胞中miR-146a表达水平可降低细胞增殖能力,抑制细胞迁移和侵袭能力     

miR-301a在结肠直肠癌组织中的表达及其对结肠癌细胞侵袭、迁移能力的影响

目的:分析结肠直肠癌组织miR-301a的表达及其与结肠直肠癌病人临床病理特征的关系。探讨下调miR-301a表达对结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移能力以及PTEN蛋白表达的影响。方法:应用实时定量PCR方法检测48对结肠直肠癌组织和癌旁组织以及5种结肠癌细胞株中miR-301a的表达。应用瞬时转染方法将miR-301a抑制剂转入结肠癌细胞株HCT116后,用细胞增殖实验(CCK-8法)、transwell侵袭实验检测细胞的增殖和侵袭力;采用transwell迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力;并用Western印迹技术检测下调miR-301a后其靶蛋白PTEN表达的变化。结果:PCR结果显示,miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较其对应的癌旁组织和无淋巴结转移的癌组织为高(P<0.05);5种结肠癌细胞中均有不同程度表达;transwell侵袭、迁移实验显示,miR-301a抑制剂转染后HCT116细胞侵袭、迁移能力明显降低(P<0.05);增殖实验显示,下调miR-301a对结肠癌细胞抑制作用明显(P<0.05)。划痕实验表明,miR-301a抑制剂转染组细胞迁移能力明显受到抑制。Western印迹法显示,miR-301a抑制剂转染组细胞PTEN蛋白表达增加。结论:miR-301a在有淋巴结转移的结肠直肠癌组织中表达较高;下调miR-301a的表达抑制HCT116细胞的增殖、侵袭和迁移能力,且PTEN蛋白表达增加。miR-301a对结肠癌细胞生物学功能的影响可能是通过PTEN信号通路实现的。     

microRNA-497 在肝细胞癌中的表达及意义

目的:探讨microRNA-497(miR-497)在肝细胞癌组织中的表达及其意义.方法:收集40例肝细胞癌及对应癌旁组织标本,用qRT-PCR方法检测标本中miR-497的表达;人肝癌SMMC-7721细胞经miR-497模拟物转染后,用MTT和流式细胞术检测其增殖能力与凋亡水平的变化,并用qRT-PCR和Western blot检测miR-497潜在靶点Bcl-w的mRNA与蛋白的表达.结果:miR-497在肝癌组织中的表达水平明显低于其癌旁组织[(1.181±0.779)vs.(14.599±5.266),P＜0.05];转染miR-497模拟物的SMMC-7721细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡增加,Bcl-w的mRNA与蛋白表达均明显降低(与未转染的SMMC-7721细胞比较,均P＜0.05).结论:肝癌组织中miR-497表达下调,该下调可能导致靶基因Bcl-w表达升高,从而促进肿瘤的发生与发展.     

CircDONSON靶向miR-4458对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨CircDONSON对肝癌Huh-7细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:qRT-PCR法检测肝癌组织中CircDONSON、miR-4458表达量;肝癌细胞Huh-7分为si-NC组、si-CircDONSON组、miR-NC组、miR-4458组、si-CircDONSON+anti-miR-NC组、si-CircDONSON+anti-miR-4458组;CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭情况;双荧光素酶报告实验检测miR-4458与CircDONSON靶向的关系;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果:肝癌组织中CircDONSON表达量较癌旁组织升高(4.82±0.38比1.00±0.12,P<0.05),miR-4458表达量较癌旁组织降低(0.34±0.04比1.00±0.07,P<0.05);抑制si-CircDONSON或过表达miR-4458降低肝癌细胞活力、划痕愈合率和MMP-2、MMP-9蛋白水平(P<0.05)减少,细胞克隆...     

下调MicroRNA-21对胃癌细胞生物学行为及PTEN表达的影响

目的:探讨抑制MicroRNA 21(miR-21)的表达对胃癌细胞的生物学行为及PTEN表达的影响,并分析miR-21参与肿瘤发生、发展的可能机制。方法:应用细胞瞬转的方法将miR-21 inhibitor转染课题组前期试验证实的miR-21高表达胃癌细胞株,应用细胞增殖试验(CCK8方法)、流式细胞技术(Annexin-Ⅴ标记)、Transwell试验检测抑制胃癌细胞株中miR-21表达后,对其细胞增殖、凋亡、周期、迁移的影响;并用Western印迹技术和双荧光素酶报告载体技术检测下调miR-21后,胃癌细胞株PTEN表达的变化。结果:体外增殖试验显示,下调miR-21后对胃癌细胞株的增殖抑制作用明显(P<0.05);体外凋亡试验显示,下调miR-21能增加胃癌细胞株的凋亡(P<0.05);Western印迹试验显示,抑制miR-21表达后胃癌细胞株PTEN蛋白表达明显增加,荧光素酶相对活性明显增加(P<0.05)。结论:下调miR-21的表达对胃癌细胞株的增殖有明显的抑制作用,且促进其凋亡,能降低其体外迁移能力;下调miR-21后,PTEN活性明显增加;PTEN可能是miR-21参与胃癌发生、发展的靶标之一。     

miR-96干扰NKD2表达对骨肉瘤MG63细胞株的增殖、凋亡的影响

目的探究miR-96通过干扰裸露角质蛋白同源物2(naked cuticle homolog 2,NKD2)的表达对骨肉瘤MG63细胞株的增殖、凋亡的影响。方法回顾性分析我院2013年9月至2018年2月收集的骨肉瘤标本57例临床资料作为研究组,同时收集距肿瘤边界5 cm的癌旁组织作为对照组,其中男39例,女18例;年龄21～49岁,平均(28.16±6.73)岁。将骨肉瘤MG63细胞株分为miR-96抑制组与空白对照组,其中miR-96抑制组细胞给予miR-96抑制剂转染,空白对照组细胞不作任何处理。培养48h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法与Western blot法检测各组人骨肉瘤MG63细胞中miR-96与NKD2蛋白表达水平;采用四甲基偶氮唑盐(methyl thiazolyltetrazolium assay, MTT)法检测各组细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况与细胞周期分布情况。结果骨肉瘤组织中miR-96表达水平明显高于正常骨组织(P0.05);骨肉瘤组织中NKD2蛋白表达水平明显低于正常骨组织(P0.05);miR-96抑制组骨肉瘤细胞中miR-96表达水平明显低于空白对照组(P0.05);miR-96抑制组骨肉瘤细胞中NKD2表达水平明显高于空白对照组(P0.05);miR-96抑制组骨肉瘤MG63细胞株经miR-96抑制剂转染48h后细胞相对吸光度明显低于空白对照组细胞(P0.05);miR-96抑制组骨肉瘤MG63细胞株细胞凋亡率明显大于空白对照组(P0.05);miR-96抑制组与空白对照组骨肉瘤MG63细胞株细胞周期情况差异明显(P0.05)。结论 miR-96在骨肉瘤组织中呈高表达,NKD2在骨肉瘤组织中呈低表达;miR-96通过抑制NKD2表达而促进骨肉瘤MG63细胞株生长,并抑制骨肉瘤MG63细胞株早期凋亡。     

miR-181b及其关键靶基因PTEN和TIMP-3在肝细胞肝癌中的表达和意义

目的:研究miR-181b对PTEN和TIMP3基因表达的影响,探讨其在肝细胞肝癌(HCC)发生、发展中的作用及意义。方法:应用免疫组化和实时荧光定量PCR检测30例HCC及相应癌旁组织,10例正常肝脏组织中miR-181b、PTEN、TIMP-3表达情况,分析miR-181b、PTEN和TIMP-3的表达水平与HCC临床病理特征之间的关系。探讨miR-181b水平与PTEN、TIMP3表达的相关性。结果:在HCC组织中PTEN和TIMP-3的m RNA和蛋白的表达水平均明显低于癌旁组织及正常肝组织(P0.01),调控二者表达的miR-181b在HCC组织中的的表达明显增高。miR-181b、PTEN和TIMP-3的表达水平与HCC细胞的分化程度、血清中AFP表达水平、HBV感染明显有关,与患者年龄、性别、肿瘤大小等因素无关。结论:miR-181b在HCC中的表达量显著高于癌旁和正常肝组织,其表达水平与肿瘤组织细胞的分化程度、血清AFP水平及是否合并HBV感染明显相关;在HCC组织中,miR-181b的表达水平与PTEN、TIMP3的水平呈负相关。miR-181b可能通过靶向调控PTEN和TIMP3的表达来发挥其促进HCC侵袭转移的生物学作用。     

miR-21调控PTEN/PI3K/Akt通路抑制增生性瘢痕形成的机制研究

目的:探讨miR-21对增生性瘢痕中PTEN表达和成纤维细胞增殖的影响,以期为增生性瘢痕的临床诊断和治疗提供新靶点。方法:分别用qPCR和Westernblot检测增生性瘢痕(HTS)组织和细胞中miR-21及PTEN的表达;双荧光素酶报告基因检测验证miR-21与PTEN的调控关系;Westernblot检测miR-21对增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)中PTEN蛋白表达影响;MTT检测细胞增殖能力变化。结果:HTS组织中miR-21高表达,PTEN低表达;双荧光素酶报告实验和Westernblot证实了miR-21对PTEN的靶向调控作用;下调miR-21可增加PTEN的表达,从而可抑制PI3K/Akt通路活性,抑制HSF细胞增殖。结论:本研究证实了miR-21具有诊断和治疗HTS的潜能,并为临床提供可能的新靶点。     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ和PTEN在肝癌组织中的表达及意义

目的检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和PTEN蛋白在肝癌组织与癌旁组织的表达情况,探讨两种蛋白表达㈦临床病理各参数的关系及意义。方法收集100例中山大学附属第一医院手术切除的肝癌㈦癌旁组织标本,构建组织微阵列芯片,应⒚免疫组化染色检测PPARγ和PTEN蛋白的表达。在体外实验中,应用Western blotting法检测人肝癌Huh7细胞中PPARγ活化对PTEN蛋白的影响。结果PPARγ、PTEN蛋白在肝癌组织中阳性表达率分别为82%和62%,明显低于癌旁组织的表达率(分别为95%和92%),差异有统计学意义(P0.05)。肝癌组织中PPARγ蛋白的表达与癌组织的分化程度密切相关,PTEN蛋白表达与癌组织的分化程度和肿瘤门静脉浸润关系密切。体外实验证实Huh7细胞中PPARγ活化后上调PTEN蛋白表达。结论PPARγ和PTEN蛋白在肝癌组织中阳性表达率均低于癌旁组织,PPARγ活化后上调PTEN蛋白表达,两种蛋白在肝癌发生发展中起着重要作用。     

肝细胞癌中miR-942-5p的表达及其与患者恶性特征及不良预后的关系

目的:探讨微小RNA-942-5p(miR-942-5p)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其功能。方法:用实时定量PCR检测西安交通大学第一附属医院样本库保存的73例HCC组织和对应癌旁组织中miR-942-5p的表达。分析miR-942-5p表达与HCC患者临床病理资料的关系,同时分析TCGA数据库中miR-942-5p表达与HCC患者总生存率的关系。Transwell小室检测干扰miR-942-5p表达后HCC细胞迁移和侵袭能力的变化,StarBase V3.0网站和荧光素酶报告基因质粒预测分析miR-942-5p的下游靶点,并用Western blot验证。结果:miR-942-5p表达量在HCC组织中明显高于对应癌旁组织(2.390 vs. 1.764,P0.05)。miR-942-5p表达量与HCC患者肿瘤数目、血管浸润和临床分期明显有关(均P0.05)。miR-942-5p高表达HCC患者总生存率明显低于miR-942-5p低表达HCC患者(19.535%vs. 53.873%,P0.05)。沉默miR-942-5p表达后,肝癌HCCLM3和MHCC97H细胞迁移和侵袭能力明显减弱(均P0.05)。预测与分析结果显示,扣针蛋白5(FBLN5)是miR-942-5p的直接下游靶点(P0.05),沉默miR-942-5p表达导致HCCLM3和MHCC97H细胞中FBLN5表达增加。结论:miR-942-5p在HCC组织中表达异常升高并与恶性临床特征和不良预后密切相关,机制可能与miR-942-5p抑制FBLN5表达促进HCC细胞迁移和侵袭有关。     

微小RNA-181b及其靶基因肝癌缺失基因-1在肝癌发生中的作用

目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-181b对肝癌缺失基因-1(DLC-1)的调控及其在肝癌发病中的作用.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和Western blot检测4份正常肝脏组织,17份癌旁组织、肝癌组织及肝癌SMMC7721细胞、胚肝LO2细胞中miR-181b和DLC-1的mRNA和蛋白质表达水平.应用miR-181b抑制剂下调肝癌细胞SMMC7721中miR-181b表达后,实时定量聚合酶链反应和Westem blot检测SMMC7721细胞中DLC-1表达水平的变化.结果 miR-181b在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.162 ±0.004、0.175±0.021和0.656±0.034,肝癌组织高于正常肝组织(P＜0.05).miR-181b在SMMC7721细胞中的表达较LO2细胞上调(0.723±0.042和0.262±0.037,P＜0.01).DLC-1 mRNA在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.392±0.094、0.187 ±0.043和0.081 ±0.012,肝癌组织低于正常肝组织(P＜0.05);DLC-1蛋白在正常肝组织、癌旁组织和肝癌组织中的相对表达量分别为0.423±0.026、0.214±0.029和0.112±0.021,差异有统计学意义(P＜0.01).miR-181b抑制剂转染SMMC7721细胞后,DLC-1蛋白在空白组、转染组和阴性对照组的相对表达量分别为0.132±0.027、0.379±0.019和0.125±0.015,转染组较其他两组明显升高(P＜0.05).结论 miR-181b在肝癌组织中表达上调,其抑制DLC-1的表达可能是肝癌发生的重要机制.     

长链非编码RNA MALAT1在肝癌组织中的表达及其在肝癌细胞增殖与侵袭转移中的作用

目的:探讨长链非编码RNA MALAT1在肝癌组织中的表达及意义。方法:用qRT-PCR检测85例肝癌组织及其配对癌旁组织中MALAT1的表达,分析MALAT1的表达与肝癌患者临床病理因素的关系;在肝癌SMMC-7721细胞中分别过表达与敲除基因MALAT1后,通过CCK-8与Transwell实验检测肝癌细胞增殖与侵袭转移能力的改变。结果:MALAT1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织(P0.01);MALAT1在肝癌组织中的表达与肿瘤大小、肝癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移明显有关(均P0.05)。肝癌SMMC-7721细胞过表达MALAT1后增殖、侵袭与转移能力明显增强,而敲低MALAT1后增殖、侵袭与转移能力明显减弱(均P0.05)。结论:MALAT1在肝癌组织中表达上调,MALAT1可促进肝癌细胞增殖、侵袭与转移,故可能与肝癌的发生发展密切相关。     

抑癌基因FN及PTEN在肝细胞肝癌中的表达及临床意义探讨

目的探讨纤黏连蛋白(fibronectin,FN)和张力蛋白同源基因蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinomas,HCC)组织中的表达及与其临床病理特征间的关系。方法采用Western blot及免疫组化方法检测83例HCC组织及其癌旁组织、47例肝硬变组织和11例正常肝组织中FN及PTEN的表达情况,并分析FN及PTEN的表达与HCC临床病理特征间的关系。结果 HCC癌组织中FN蛋白表达阳性率明显高于癌旁组织、正常肝组织及肝硬变组织(P0.05),而PTEN蛋白的表达结果与之相反(P0.05);癌旁组织中FN蛋白表达阳性率亦高于肝硬变组织及正常肝组织(P0.05),PTEN蛋白的表达结果与之相反(P0.05)。在合并癌栓、伴淋巴结转移、AFP阳性及肿瘤病灶多发的HCC癌组织中FN蛋白表达阳性率较高(P0.05),而FN蛋白在HCC癌组织中的表达与患者性别、年龄、HBs Ag状态、肿瘤分化程度及大小均无关(P0.05)。在高-中分化HCC、合并癌栓、AFP阳性、伴淋巴结转移和肿瘤直径≥2 cm的HCC癌组织中PTEN蛋白表达阳性率较低(P0.05),而PTEN蛋白在HCC癌组织中的表达与患者性别、年龄、Hbs Ag状态及肿瘤数目无关(P0.05)。结论 FN和PTEN在HCC癌组织中异常表达,其在HCC的发生、发展和侵袭转移中可能起一定的促进或抑制作用。两者异常表达可作为HCC恶性程度和侵袭转移的分子生物学标志物。     

7种microRNAs在原发性肝癌组织和癌旁组织间的差异表达及与血清肿瘤标志物水平的相关性研究

目的 分析小RNA(microRNAs)在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异及与血清肿瘤标志物水平的相关性,探索肝癌诊断和预后可能的新标志.方法 使用实时定量PCR技术检测7种MicroRNAs在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异.结果 7种microRNAs在原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中的表达差异均有统计学意义(P<0.05).与癌旁组织相比,miR-34c、miR-21、miR-16及miR-10b在肝癌组织中表达上调,miR-200a、miR-148b及miR-Let-7i在肝癌组织中表达下调,其中miR-200a 和 miR-148b下调明显.miR-200a在肝癌和癌旁组织中的表达差异与患者血清AFP水平呈正相关(r=0.848 9,P<0.01),而其余microRNAs的表达差异与患者血清各肿瘤标志物水平均无相关关系(P>0.05).结论 原发性肝细胞癌和癌旁组织中存在microRNAs的表达差异,miR-200a可能成为新的肝癌早期诊断标志.     

miR-221在甲状腺乳头状癌中的表达及其生物学功能

背景与目的:microRNA(miRNA)异常表达与恶性肿瘤的发生发展密切相关,部分miRNA表达与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性临床病理特征具有明确的相关性。本研究探讨miR-221在PTC中的表达情况及其对PTC细胞生物学行为的影响。方法:通过qPCR技术检测51对PTC癌组织及癌旁组织手术标本中miR-221的表达情况,并通过实时荧光定量RT-PCR检测甲状腺乳头状癌K1细胞miR-221的表达,将PTC K1细胞分别转染miRNA随机序列(阴性对照组)和miR-221抑制物(miR-221抑制物组)后,以无处理的K1细胞为空白对照,分别用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期、细胞凋亡率,Transwell小室检测细胞侵袭力。结果:miR-221在PTC癌组织中的相对表达量均明显高于癌旁组织的相对表达量(P0.05)。与空白对照组比较,miR-221抑制物组K1细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡率明显增加,G_0/G_1期细胞比例明显升高,而G_2/M期细胞的比例明显降低,细胞侵袭能力明显降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。阴性对照组与空白对照组间以上指标差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:miR-221在PTC中的表达升高,且可能通过调节细胞周期与凋亡而影响PTC细胞的增殖与侵袭能力。miR-221有作为PTC早期诊断与治疗的生物标志物的潜在价值。     

miR-205和张力蛋白同源缺失基因在食管癌组织中的表达及与根治术后预后的关系

目的 探讨miR-205与10号染色体磷酸酶和张力蛋白同源缺失基因(PTEN)在食管癌组织中的表达及与根治术后预后的关系。方法 2018年9月～2019年9月收治的食管癌病人78例均行根治术,收集癌旁组织和癌组织标本,采用荧光定量PCR法检测癌旁组织和癌组织miR-205、PTEN表达,分析食管癌病人癌组织miR-205、PTEN表达水平与病理特征的关系,所有病人随访至2022年9月30日,采用Kaplan-Meier分析食管癌病人癌组织miR-205、PTEN表达与预后的关系。结果 食管癌病人癌组织miR-205表达水平高于癌旁组织,PTEN表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);食管癌病人癌组织miR-205表达水平与PTEN表达水平呈负相关(r=-0.397,P<0.001);淋巴结转移、低分化、Ⅲ～Ⅳ期食管癌病人癌组织miR-205表达水平分别高于无淋巴结转移、高中分化、Ⅰ～Ⅱ期病人,差异有统计学意义(P<0.05),PTEN表达水平分别低于无淋巴结转移、高中分化、Ⅰ～Ⅱ期病人,差异有统计学意义(P<0.05);所有病人随访3年,失访2例...     

miR-1246在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察微小RNA-1246（miR-1246）在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量PCR（qRT-PCR）方法检测miR-1246在肝癌以及癌旁组织的表达;对人肝癌细胞株（BEL7402、SMMC7721）转染miR-1246 抑制剂后,采用MTT法观察肝癌细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 miR-1246 在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织[（65.39±8.77）vs（10.23±2.58）,P=0.002]。MTT和凋亡实验结果显示,与阴性对照组相比,转染miR-1246抑制剂后,BEL7402细胞增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）;SMMC7721细胞也出现增殖能力下降,凋亡增加（P均＜0.05）。结论 miR-1246 在肝癌组织中高表达,并且与肝癌细胞的增殖及凋亡有关,其表达的上调可能与肝癌的发生发展有关。     

微小RNA-150在肝细胞癌中的表达及其临床意义

【摘要】〓目的〓探讨微小RNA(miR)-150在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法〓实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝癌及配对癌旁组织中miR-150表达。原位杂交技术(ISH)进一步验证肝癌和配对癌旁组织miR-150表达差异。将肝癌组织中miR-150表达与临床病理特征进行关联分析。Kaplan-Meier法检测miR-150阴性组和阳性组生存曲线。Cox单因素回归模型分析miR-150表达与患者术后总生存的相关性。结果〓qRT-PCR结果显示:与癌旁组织相比,12例中有8例肝癌组织低表达miR-150,肝癌组织中miR-150表达明显降低(P=0.034)。ISH结果与qRT-PCR结果相一致,即肝癌组织大部分为阴性或弱阳性表达,62%癌旁组织ISH染色强度高于配对的肝癌组织(P<0.001)。关联分析提示miR-150表达与AFP、肿瘤大小、TNM分期、组织学分级、脉管癌栓存在明显负相关(P<0.05)。miR-150阳性组患者术后总生存明显高于miR-150阴性组(P=0.004,Kaplan-Meier法)。Cox单因素回归分析提示肝癌组织低表达miR-150是患者不良预后指标(P=0.005)。结论〓肝癌组织低表达miR-150与肿瘤侵袭表型相关,提示不良预后。     

反义 miR-224在结肠癌组织中的表达及其对癌细胞增殖的影响

目的探讨微小 RNA(miRNA)miR-224在结肠癌组织中的表达,以及对体外癌细胞增殖和凋亡的影响。方法收集2011年2月至2014年3月行手术治疗的134例结肠癌和癌旁组织标本,利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测标本中 miR-224表达情况;对人结肠癌细胞 SW480进行 miR-224反义寡核苷酸转染并培养,利用克隆形成实验和流式细胞仪检测 miR-224反义寡核苷酸对 SW480细胞增殖和凋亡的影响,利用 Real-time PCR 和 Western blot 法对不同转染组细胞中 Bcl-2表达情况进行检测。结果miR-224在结肠癌组织中相对表达水平显著高于癌旁组织(P <0.05);反义 miR-224组人结肠癌 SW480细胞克隆形成率显著低于对照组,而细胞凋亡指数则高于对照组,差异均具有统计学意义(P <0.05);反义 miR-224组细胞 Bcl-2相对表达量和蛋白相对表达量均低于对照组(P <0.05)。结论miR-224在结肠癌组织中呈高表达,减少 miR-224表达可抑制结肠癌细胞增殖,并加速细胞凋亡,有可能成为结肠癌早期发现及基因治疗的新靶位。