超声微泡联合Ad-EGFP/HIF-1α介导EPCs移植治疗大鼠心肌梗死

目的探讨超声微泡联合Ad-EGFP/HIF-1α介导内皮祖细胞（EPCs）移植治疗大鼠心肌梗死的可行性。方法将Ad-EGFP/HIF-1α转染EPCs。将30只SD大鼠建立心肌梗死模型后随机分为5组：空白对照组（C组）、超声＋微泡组（US＋MB组）、单纯EPCs组、超声＋EPCs组（US＋EPCs组）及超声＋微泡＋EPCs组（US＋MB＋EPCs组）。EPCs移植后4周,用超声心动图检测大鼠左心室收缩功能,免疫组织化学（I HC）染色法检测CD34的表达及微血管密度（MVD）,Western blot检测VEGF蛋白的表达。结果 US＋MB＋EPCs组射血分数、短轴缩短率高于其他各组（P〈0.05）,MVD计数高于其他各组（P〈0.05）且VEGF蛋白表达水平最高（P〈0.05）。结论超声微泡联合Ad-EGFP/HIF-1α介导EPCs移植可通过促进VEGF的高效表达、刺激心肌梗死周边区血管生成等途径改善心肌梗死大鼠的心功能。     

超声定位辐照载血卟啉微泡治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

目的探讨超声定位辐照载血卟啉微泡介导药物靶向释放技术治疗兔VX2肝移植瘤的效果。方法利用35只新西兰大白兔建立肝VX2移植瘤模型,并随机均分为超声定位辐照载血卟啉微泡组（US＋LMLH组）、超声定位辐照血卟啉组（US＋HP组）、超声定位辐照空白脂质微泡组（US＋MB组）、单纯载血卟啉微泡组（LMLH组）、单纯血卟啉组（HP组）、单纯超声辐照组（US组）和生理盐水对照组（C组）。治疗前后用二维超声、CDFI及CEUS观察肿瘤大小、回声及血流灌注情况,计算肿瘤体积大小及生长抑制率;同时观察不同处理组肝内转移及远处转移情况;并用透射电镜观察肿瘤细胞的超微结构。结果US＋LMLH组肿瘤内部呈混合回声,CDFI及超声造影显示肿瘤的滋养血管明显减少,生长抑制率高于其他各组;在肝内及远处转移方面,US＋LMLH组较少转移,明显优于其他各组;超微结构显示US＋LMLH组细胞膜破坏,线粒体明显肿胀。结论超声定位辐照载血卟啉微泡能有效激活血卟啉,具有较强的体内抑瘤效果。     

靶向性双自杀基因混合碘油对兔肝癌的介入治疗研究

目的评价携带血管内皮生长因子（VEGF）启动子调控的TK及CD融合双自杀基因重组腺病毒系统（AdVEGF-CDglyTK）与超液化碘油混合栓塞兔肝癌的治疗效果.方法 36只荷VX2瘤兔随机分4组,LP组（单纯超液化碘油栓塞组）;LP＋AdVEGF-CDglyTK组（超液化碘油＋AdVEGF-CDglyTK混合栓塞,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;AdVEGF-CDglyTK组（单纯灌注AdVEGF-CDglyTK,介入术后腹腔注射GCV ＋5-FC治疗组）;NS组（生理盐水治疗组）.于术前及术后第10、15天行CT检查观察肿瘤的体积,免疫组织化学法检测肿瘤组织VEGF的表达及微血管密度（MVD）.结果 4组兔术前肿瘤体积在统计学无显著性差异（P〉0.05）;介入治疗后10天、15天的各组之间肿瘤增长率均有显著性差异（P〈0.05）,LP＋AdVEGF-CDglyTK肿瘤增长率最小,而LP组肿瘤增长率小于AdVEGF-CDglyTK组,三个治疗组疗效均优于生理盐水对照组.VEGF表达方面：LP组表达最高,与其它三组相比有显著性差异（P〈0.05）,其它三组之间未见显著性差异.MVD表达：LP组最高,LP＋AdVEGF-CDglyTK组最低,与其它各组相比有显著性差异（P〈0.05）,而AdVEGF-CDglyTK组MVD表达也低于NS组,有显著性差异（P〈0.05）.结论在对兔肝癌的治疗中,与单纯碘油栓塞以及单纯灌注AdVEGF-CDglyTK相比,AdVEGF-CDglyTK与碘油混合肝动脉栓塞可以明显降低肿瘤的生长率,减少肿瘤组织VEGF的表达及减少肿瘤新生血管生成.     

超声破坏微泡促进下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的时间-效应关系研究

目的探讨超声破坏微泡促进下肢缺血大鼠骨骼肌血管新生的时间一效应关系。方法将76只切断双侧股动脉一周后的SD大鼠随机分为4组：超声破坏微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组。超声破坏微泡组经尾静脉输人脂质全氟丙烷微泡造影剂0．5ml，同时用1．0MHz、2．0W／cm^2的超声在其双侧大腿骨骼肌局部作用3min；单纯超声组仅在骨骼肌局部用同等的超声能量作用；单纯微泡组仅由尾静脉输入脂质全氟丙烷微泡造影剂0．5ml；对照组不作任何处理。处理结束后的第3、7、10、14、21、28天，用免疫组化、酶联免疫吸附试验（ELISA）、彩色多普勒血流显像（CDFI）和国产DFY-Ⅱ型超声图像定量分析诊断仪等方法检测和观察微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达和血管新生的情况。结果超声破微泡组有较多的新生血管，其他三组较少；随着时间的变化，超声破坏微泡组的MVD值和VEGF表达在第10天达到高峰，单纯超声组的高峰出现在第14天；CDFI检查和DFY-Ⅱ型诊断仪分析表明，超声破坏微泡组可探及较多的血流信号（P＜0．05）。结论超声破坏微泡可刺激缺血骨骼肌中内源性VEGF较快、较多的分泌，从而促进新生血管生成。     

诺帝-褐藻酸钠微球血管内介入治疗兔VX2肝癌

目的探讨诺帝-褐藻酸钠微球(KMG)血管内介入治疗兔VX2肝癌的效果。方法将50只VX2肝癌模型兔随机分为5组(n=10),于DSA引导下行靶血管灌注:A组灌注生理盐水,B组诺帝,C组KMG,D组5-氟尿嘧啶+KMG,E组诺帝-KMG。术前1天及术后2周行增强CT扫描,比较各组肿瘤体积及体积增长率。采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)表达,计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果术前1天各组肿瘤体积差异无统计学意义(P均0.05);术后2周,A、B组肿瘤体积及体积增长率均大于C、D、E组(P均0.05)。5组间VEGF阳性率及MVD差异均有统计学意义(P均0.01),E组VEGF阳性率及MVD均低于其他各组(P均0.05)。结论诺帝-KMG血管内介入治疗兔VX2肝癌效果较好。     

血管内皮抑素微泡联合聚焦超声抗结肠癌肿瘤血管生成的实验研究

目的评估靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照抑制结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤血管生成的治疗效果。方法将65只结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤的Balb／c裸鼠模型随机分为5组,每组13只：A组为空白对照组,裸鼠肿瘤未行任何治疗组;B组为单纯超声辐照组,仅行超声辐照,未使用任何造影剂;C组为超声辐照联合SonoVue裸微泡治疗组;D组为超声辐照联合Targestar．SA裸微泡治疗组;E组为超声辐照联合包载血管内皮抑素的微泡治疗组。分别于辐照前、辐照后1、14和28d测量肿瘤体积,绘制肿瘤体积生长曲线。实时超声造影检查,脱机分析峰值强度（PI）、局部血容量（RBV）和局部血流量（RBF）等造影参数。实验结束后切除肿瘤组织行光镜及电镜病理学检查,并通过CD34免疫组织化学检测评估肿瘤坏死面积（NA）和微血管密度（MVD）。结果辐照前各组肿瘤体积的差异无统计学意义（P〉O．05）;辐照后28d,C组、D组和E组肿瘤体积明显小于A组和B组,且E组明显小于c组和D组（均P〈0．01）。辐照前各组PI、RBV和RBF的差异均无统计学意义（均P〉0．05）;辐照后28d,C组、D组和E组PI、RBF和RBV较辐照前明显降低且明显低于A组和B组（均P〈0．05）,E组明显低于C组和D组（均P〈0．05）。电镜观察显示,C、D、E组肿瘤细胞核膜消失,核染色质溶聚,呈簇状不规则排列,线粒体空泡化和微血管内皮损伤出血,以E组最为明显,而A和B组鲜见。免疫组织化学染色显示,治疗后28d,E组肿瘤组织NA明显高于其他各组,而MVD则明显低于其他各组（均P〈0．01）。结论靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照可以破坏结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤微血管,并抑制肿瘤新生血管生成,增强结肠癌的治疗效果．将来可能是具有临床应用前景的结肠癌治疗新方法。     

ECT评价超声微泡治疗小鼠肝癌 腹水转移皮下瘤的实验研究

目的研究67Ga ECT肿瘤显像评价低功率超声辐射微泡治疗小鼠肝癌腹水转移皮下瘤的生物学效应.方法 KM昆明种小鼠6只建立小鼠H22腹水转移皮下瘤模型,随机分为A、B、C三组.A组：单纯低功率超声治疗肿瘤;B组：微泡剂＋低功率超声治疗肿瘤.C组：正常对照组,观察三组动物抗瘤效应、组织学、免疫组化检测PCNA、CD34蛋白表达、67Ga ECT肿瘤显像.结果三组小鼠肿瘤处理前后体积变化及生长率比较,B组肿瘤治疗后体积明显被抑制及生长率下降.A、C二组比较：t=0.91,P＞0.05;B、C二组比较：t=2.95,P＜0.05.形态学改变：B组可见明显的肿瘤血管栓塞及肿瘤坏死.免疫组化检测：PCNA、CD34在C组、A组呈强阳性表达,而B组表达明显下降.A、B、C三组PCNA阳性指数（PI）分别为89.9%、37.4%、91.7%;CD34 MVD计数分别为78.4%、31.2%、77.1%.67Ga ECT肿瘤显像：B组：微泡剂＋低功率超声治疗前后,除肝脏部位放射性明显浓聚外,肝癌皮下瘤小鼠右侧前肢见明显放射性浓聚,用ROI技术计算比较,治疗后肿瘤部位放射性明显降低,下降46.2%.结论低功率超声辐射微泡治疗小鼠肝癌腹水转移皮下瘤,可以致肿瘤血管栓塞及抑制肿瘤细胞的增殖;67Ga ECT肿瘤显像评价低功率超声辐射微泡致肿瘤血管栓塞有一定作用.     

超声辐照微泡介导双自杀基因转染对裸鼠乳腺癌杀伤作用的在体研究

目的：探讨超声辐照微泡介导CD/TK双自杀基因质粒转染对在体乳腺癌的杀伤效应。 方法：用人乳腺癌MCF-7细胞建立裸鼠移植瘤模型后,将荷瘤裸鼠随机分为对照组、质粒组、超声辐照组、超声辐照微泡组,每组5只。对照组仅给予CD与TK相应的前药（5-氟胞嘧啶与更昔洛韦）;质粒组注射质粒（含CD/TK基因）与前药;超声辐照组注射质粒与前药,并予超声辐照;超声辐照微泡组注射靶向超声造影剂（质粒与微泡混合物）与前药,并予超声辐照。实验期间记录裸鼠肿瘤生长情况;处理结束后5 d,剥除肿瘤,计算各组的抑瘤率;用倒置荧光显微镜观察目的基因瘤内转染情况,计算基因转染效率;RT-PCR法检测目的基因的表达;免疫组化法计数肿瘤的微血管密度（MVD）。 结果：与对照组比较,质粒组肿瘤的生长无统计学差异（P>0.05）,而超声辐照组与超声辐照微泡组肿瘤生长被明显抑制（均P<0.05）,质粒组、超声辐照组、超声辐照微泡组的抑瘤率分别为3.72%、21.40%、47.13%。质粒组、超声辐照组、超声辐照微泡组基因转染效率分别为0.78%、2.81%、23.87%,后者转染效率明显高于前两组（均P<0.05）。超声辐照组与超声辐照微泡组肿瘤组织中均出现CD/TK基因阳性片段,而对照组与质粒组的肿瘤组织中未见。超声辐照组与超声辐照微泡组肿瘤组织MVD计数均明显低于对照组,且超声辐照微泡组低于超声辐照组（均P<0.05）,质粒组MVD计数与对照组无统计学差异（P>0.05）。 结论：超声辐照微泡介导的双自杀基因系统能有效提高基因转染效率与表达,从而增强对肿瘤生长和肿瘤微血管的生成的抑制作用。     

超声微泡介导雷帕霉素抗兔腹主动脉球囊损伤术后再狭窄

目的探讨利用超声靶向破坏微泡(UTMD)介导雷帕霉素(RPM)对兔腹主动脉球囊损伤术后新生内膜的作用及对p27、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法选取48只兔建立腹主动脉球囊损伤模型,术后3天分为6组(每组8只):A组,空白对照组;B组,超声+微泡组;C组,RPM组;D组:超声+RPM组;E组,UTMD+高剂量RPM组;F组,UTMD+低剂量RPM组。术前及术后28天分别进行超声检查,检测内-中膜厚度(IMT)。术后第28天病理检测内/中膜厚度比值(I/M)及p27、VEGF表达情况。结果术后第28天超声显示A、B、C、D组IMT较E、F组明显增加(P均<0.01),CD-FI可见充盈缺损。病理检测显示E、F组I/M减低,p27表达增高、VEGF表达降低,与其余组比较差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 UTMD介导RPM可抑制兔腹主动脉球囊损伤术后新生内膜增生及增高p27、降低VEGF表达。     

超声介导载药微泡靶向治疗肿瘤的研究进展

超声介导载药微泡靶向药物释放（UTMD）是一种新兴的靶向给药方法,以声学微泡包裹药物后,经局部超声辐照,可实现缓释及靶向给药的双重作用。同时,超声辐照可促进组织细胞内吞作用并产生声孔作用,在不破坏细胞的情况下增加靶组织对药物的摄取。UTMD为治疗肿瘤等疾病提供了一种安全且可有效减少全身不良反应的给药方法。本文对UTMD应用于肿瘤治疗的作用机制、研究及应用进展进行综述。     

超声靶向微泡破裂增强恩度凝胶抑制裸鼠乳腺癌移植瘤血管生成

目的探讨超声靶向微泡破裂对瘤体内注射恩度凝胶抑制裸鼠乳腺癌移植瘤血管生成作用的影响。方法制备载恩度的PLGA-PEG-PLGA温度敏感型凝胶,检测恩度凝胶体外释放及超声辐照对药物释放的影响;建立荷人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,分为模型组、恩度凝胶瘤体内注射组、超声靶向微泡破裂组、恩度凝胶联合超声靶向微泡破裂组,每7天治疗1次,连续3次后行肿瘤CEUS,测定肿瘤组织微血管密度,评价各种处理对肿瘤血管生成的抑制作用。结果恩度凝胶在体外平稳释放约1周,超声辐照可提高恩度凝胶的释放速率;恩度凝胶瘤体内注射联合超声靶向微泡破裂处理具有明显的抑制肿瘤血管生成作用,肿瘤CEUS峰值强度及微血管密度均明显低于模型组及恩度凝胶治疗组(P0.05)。结论超声靶向微泡破裂可阻断荷人乳腺癌裸鼠移植瘤微循环,并有效控制恩度凝胶的药物释放速率,使之释放更多药物作用于血管内皮细胞,具有明显的抑制肿瘤血管生成作用。     

载多西紫杉醇的新型超声微泡的制备及性能观察

目的制备携载多西紫杉醇的新型超声微泡,并观察其药物携载能力。方法以PLGA为膜材料,以多西紫杉醇为携载药物,采用复乳化法和冷冻干燥技术,制备载药超声微泡;选择高效液相色谱法测定制剂中药物含量及超声环境下的释放量。结果载药超声微泡样品呈白色粉末状,表面光泽且粒径较均一,载药率和包封率分别可达2.36%和61.40%,且稳定可控;模拟超声环境下药物释放量明显增加。结论所制微泡对多西紫杉醇的携载能力有明显提高,并可在超声环境下稳定释放药物。     

20 kHz超声联合微泡诱导人前列腺癌PC3细胞的细胞自噬及早期凋亡

目的探讨低频、低功率超声联合微泡造影剂诱导人雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞早期细胞凋亡及自噬。方法以频率20kHz、声功率80mW超声连续波辐照人前列腺癌PC3细胞悬液60s,之后分为单纯微泡组(A)、单纯超声组(B)、超声联合微泡组(C)、空白对照组(D),分别给予相应处理。辐照后继续培养24h,以流式细胞仪检测细胞早期凋亡情况,吖啶橙染色荧光显微镜观察细胞胞浆内酸性囊泡,透射电镜观察细胞自噬泡。结果 4组细胞早期凋亡率差异有统计学意义(P0.01);两两比较,除A组与D组差异无统计学意义(P0.05)外,余差异均有统计学意义(P0.01)。C组细胞核基本正常,胞浆内可见大量发红色荧光的酸性囊泡及大量由双层膜包裹的自噬泡或自噬体。D组细胞形态基本正常,胞浆内未见到明显自噬泡形成。结论低频低功率超声联合微泡造影剂能明显提高人雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞的早期凋亡率,并可促进细胞自噬。     

超声针联合微泡干预尿激酶溶解体外血凝块

目的 观察超声针联合微泡干预尿激酶溶解体外血凝块的效果。方法 以10 ml牛全血制备体外血凝块,将40个血凝块随机分为5组（每组8个）：对单纯超声组以超声针治疗8 min;对单纯尿激酶组注射2 ml尿激酶溶液（5 000 IU/ml）;对超声针+尿激酶组予以超声针治疗8 min+注射2 ml尿激酶溶液;对超声+生理盐水组予超声针治疗8 min+注射2 ml生理盐水;对超声针+尿激酶+微泡组于超声针+尿激酶组基础上向尿激酶溶液中加入0.01 ml自制微泡。以称重法计算各组血凝块溶解质量（W₀）及溶解率;观察大体标本溶解情况,并于扫描电镜下观察血凝块微观变化。另取9个血凝块随机分为3组（每组3个）：对照组,仅注入2 ml细胞膜特异性橙红色荧光染料1,1''-双十八烷基-3,3,3'',3''-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐（DiI）溶液;超声组,超声针治疗8 min,同时注射2 ml DiI溶液;超声+微泡组,在超声组基础上于DiI溶液中额外加入0.01 ml自制微泡。于荧光显微镜下观察DiI渗透情况。结果 干预前各组血凝块质量（W_before）差异无统计学意义（P>0.05）;干预后各组血凝块溶解质量（W₀）及溶解率差异均有统计学意义（P均<0.01）,超声+尿激酶组与超声+尿激酶+微泡组W₀及溶解率均显著高于其余3组（P均<0.05）,但该2组间差异均无统计学意义（P均>0.05）。相比单纯超声组和单纯尿激酶组,超声+尿激酶组和超声+尿激酶+微泡组血凝块明显破坏,后者更为显著。超声组和超声+微泡组血凝块组织疏松,DiI渗透深远,满视野荧光,针道扩大,表面破坏,以超声+微泡组更显著。结论 超声针能显著提高尿激酶对体外血凝块的溶解能力;联合应用微泡后溶解质量未见显著增加。     

载氧脂质微泡体外释氧效果

目的评价载氧脂质微泡在缺氧溶液及离体静脉血中的释氧能力,观察超声辐照对微泡释氧量的影响。方法制备载氧脂质微泡,放置不同时间后(0.5、3.0、24.0h),检测微泡在极度缺氧溶液(0.4mg/L)中释氧量的改变;观察超声辐照条件下中度缺氧溶液溶解氧浓度(DO)值的变化;将载氧脂质微泡与离体静脉血混合后,检测静脉血p(O2)值的变化。结果载氧脂质微泡放置不同时间(0.5、3.0、24.0h)后释氧能力无明显改变(P>0.05);超声辐照能显著增加微泡的释氧量(P<0.05);载氧脂质微泡可有效增加离体静脉血p(O2)(P<0.05)。结论载氧脂质微泡能稳定载氧达24.0h;超声辐照下,微泡的释氧量明显增加;载氧脂质微泡能显著增加离体血p(O2),有望成为一种血浆代用品。     

对比观察脂质纳泡与微泡在高强度聚焦超声消融兔肝中的增效作用

目的观察正常兔肝中脂质纳泡与微泡对高强度聚焦超声(HIFU)消融效果的影响,探讨纳泡的应用价值。方法采用机械振荡法联合低速离心制备纳泡,观察和分析纳泡及微泡的形态、大小及分布。18只健康新西兰兔随机分为3组:HIFU+生理盐水组、HIFU+微泡组及HIFU+纳泡组,耳缘静脉注入各溶液15s后开始HIFU辐照,辐照功率为180 W,辐照时间5s,观察HIFU辐照前后回声变化,检测靶区组织的凝固性坏死体积以及微细结构变化,并作统计学分析。结果制备的脂质纳泡粒径均一,纳泡、微泡的平均粒径分别为(588.00±53.02)nm、(3058.00±545.20)nm;HIFU+微泡组与HIFU+纳泡组,靶区凝固性坏死体积[(124.26±16.72)mm3,(121.35±11.25)mm3]差异无统计学意义(P0.05),但均显著大于HIFU+生理盐水组(62.49±4.54)mm3(P均0.05);各组坏死组织微细结构均严重破坏。结论脂质纳泡具有与微泡相同的HIFU增效作用,为纳泡在HIFU技术中的深入研究提供实验依据。     

载阿霉素的液-固相变型原位凝胶注射治疗兔VX2肝癌HIFU消融后残癌

目的观察载阿霉素液一固相变型原位注射凝胶（DOX-ISFI）治疗高强度聚焦超声（HIFU）消融兔、,x2肝癌后残癌的疗效。方法以24只兔建立VX2肝癌模型,对肿瘤行HIFU不全消融,随机分为HIFU消融与DOX—ISFI联合治疗组（HIFU＋DOX—ISFI组）、HIFU消融与空白液一固相变原位注射凝胶联合治疗组（HIFU＋N—ISFI组）,每组12只,比较两组肿瘤生长率、PCNA表达情况,并以冰冻切片荧光显像观测药物瘤内分布。结果处理后HIFU＋DOX—ISFI组肿瘤生长明显减慢,其生长率明显低于HIFU＋N—ISFI组（P〈O．05）;HIFU十D0X-ISFI组肿瘤增殖指数明显低于HIFU＋N—ISFI组（P〈0．05）;荧光显像姓示药物从注射中心向剧围呈阶梯状分布。结论DOXISFI能钉效治疗HIFUiVX2肝癌后的残癌。     

超声辐照联合微泡消融活体犬心肌

目的探讨低能量超声辐照联合微泡消融活体犬心肌的可行性。方法将20只杂种犬随机分为超声联合微泡组(US+MB组)、单纯超声组(US组)、单纯微泡组(MB组)和对照组,每组5只。在心腔内超声(ICE)监控下,将自制多功能ICE导管送入犬左心室。对US+MB组犬于左心室前壁注射0.1ml微泡,以0.3 W/cm2声能对注射部位辐照30s;US组以相同条件辐照,但不注射微泡;MB组仅注射微泡;对照组仅插入导管,不进行其他处理。术后第3天处死动物,进行心脏形态学及组织学观察。结果肉眼见US+MB组微泡注射部位心肌出现苍白色消融灶,镜下见心肌细胞核固缩、核碎裂等特征;US组、MB组及对照组动物心脏形态学及组织学均未见明显异常。结论微泡能提高超声消融效果,实现低能量超声消融心肌组织,减少心内膜损伤,提高心肌消融的安全性。