不同吸氧时间高压氧治疗对脑出血大鼠血肿周围AQP4和SOD表达的影响

目的:探讨不同吸氧时间高压氧(HBO)治疗对脑出血(ICH)大鼠血肿周围水通道蛋白(AQP4)和超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响,从而探讨HBO治疗脑出血的最佳吸氧时间。方法:正常组Wistar大鼠5只,胶原酶诱导法建立Wistar大鼠脑出血(ICH)模型125只,随机分为对照组(不用高压氧干预,25只)和实验组(ICH后6小时给予高压氧干预,100只),实验组根据吸氧时间不同又分为ICH+HBO 40min组,ICH+HBO 60min组,ICH+HBO 80min组,ICH+HBO 100min组,共4个亚组,各25只。每组大鼠分别在行HBO治疗第1、3、5、7、14天后于相同时间点处死,之后采用干湿比重法测定出血灶周围脑组织含水量,用免疫组化法检测血肿周边脑组织中AQP4蛋白表达情况,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力。结果:(1)出血灶周围脑水含量:实验组较对照组相比,各时间点脑组织水含量均减少且有差异(P0.05)。(2)大鼠脑组织AQP4表达的变化:对照组大鼠的AQP4表达在ICH术后第1天开始升高,第3天持续升高,第5天达到高峰,之后逐渐下降直至第14天。HBO实验组各时间点AQP4的表达较对照组减少,差异有显著性意义(P0.05)。其中ICH+HBO 60min组第7天下降的幅度最大,较其他三组相比具有显著性意义(P0.01)。(3)大鼠脑组织SOD表达的变化:对照组和实验组SOD上调表达规律与AQP下调表达一致,其中ICH+HBO 60min组回升幅度最大,其在第14天表达的值与其他三组相比均有显著性差异(P0.01)。结论:HBO可以减轻脑水肿,其中最佳吸氧时间是60min。其机制可能与降低了出血灶周围AQP4表达水平、提高了SOD表达水平有关。     

不同疗程高压氧治疗对脑出血大鼠血肿周围Bax和Bcl-2表达的影响

目的 观察不同疗程的高压氧治疗对脑出血大鼠脑血肿周围Bax和Bcl-2表达的影响,探讨高压氧治疗脑出血的最佳疗程。 方法 将52只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常组（12只）、脑出血组（20只）和高压氧组（20只）,将各组大鼠细分为1周组、2周组、3周组、4周组4个亚组,脑出血组和高压氧组每个亚组5只,正常组每个亚组3只大鼠。对脑出血组和高压氧组采用注射胶原酶诱导大鼠尾壳核区脑出血法制备脑出血模型。高压氧组大鼠在脑出血后6 h予以高压氧治疗（压力2.0 ATA、稳压时间60 min、每日1次、每周7 d）,其余大鼠不予特殊处理。治疗结束后,采用免疫组化法进行Bax和Bcl-2的表达测定。 结果 与组内1周、2周比较,脑出血组治疗3周时的Bax显著较高（P<0.05）,治疗4周时降低（P<0.05）。与正常组同时间点比较,脑出血组和高压氧组各时间点的Bax均较高（P<0.05）。与脑出血组同时间点比较,高压氧组治疗1周［（5.2±0.2）%］、2周［（4.9±0.2）%］、3周［（4.7±0.2）%］、4周［（5.3±0.2）%］的Bax均较低（P<0.05）。脑出血组在3周内Bcl-2表达逐渐升高,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。与正常组同时间点比较,脑出血组和高压氧组各时间点的Bcl-2均较高（P<0.05）。与脑出血组同时间点比较,高压氧组各时间点的Bcl-2较高,差异有统计学意义（P<0.05）,3周时Bcl-2与Bax比值较其他疗程高,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 高压氧治疗可下调Bax表达、上调Bcl-2表达,可减少脑出血大鼠血肿周围脑组织的细胞凋亡,且连续高压氧治疗4周的疗效较为优异。     

不同介入时间高压氧治疗对实验性脑出血大鼠出血灶周围水肿及水通道蛋白-4表达的影响

摘要 目的： 观察不同介入时间的高压氧（HBO）治疗对实验性脑出血大鼠出血（ICH）灶周围水肿及水通道蛋白-4（AQP4）表达的影响。 方法： 应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将185只雄性Wistar大鼠随机分为正常组（5只）、假手术组（60只）、脑出血对照组（60只）和高压氧治疗组（60只）,高压氧治疗组按高压氧介入时间不同分为6h介入组、1d介入组、2d介入组和3d介入组4个亚组,每组15只,再按不同的治疗次数分为高压氧治疗后1d、3d、5d组,每个时间点各5只鼠,高压氧治疗压力2.0ATA,稳压吸氧60min,1次/d,与末次高压氧治疗结束后24h处死。所有大鼠饲养在相同环境中,正常组饲养3d后处死,脑出血对照组与假手术组大鼠不进行任何治疗,参照高压氧治疗组进行分组,并于相应时间点断头取脑,采用干湿比重法测定脑组织的水含量,免疫组化法测定AQP4的表达。 结果： 高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠脑组织的水含量均高于正常组及假手术组（P<0.05）;高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠脑水含量减少（P<0.05）;高压氧治疗组间比较6h介入组较其他治疗组明显减少（P<0.05）;高压氧治疗组及脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4的表达均高于正常组及假手术组（P<0.05）;高压氧治疗组较脑出血对照组大鼠出血灶周围AQP4表达减少（P<0.05）,高压氧治疗组间比较6h介入组较其他组减少明显（P<0.05）。 结论： HBO治疗可减少出血灶周围脑组织水含量及AQP4表达,介入治疗时间以6h为最优。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察高压氧(HBO)作用下脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况,进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法沙土鼠20只,采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0.15MPaHBO治疗组、0.25MPaHBO治疗组,0.25MPa压力空气(hyperbaricair,HBA)对照组,每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型,缺血20min后再灌注3d,并用0.15MPa和0.25MPa压力的高压氧治疗(60min/d,连续3d)后,应用免疫组化LSAB方法,观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白,并且神经元发生凋亡,未见神经元表达Bcl-2蛋白;高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白,并且0.25MPa高压氧治疗组比0.15MPa高压氧治疗组变化更显著,而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化,但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白,对Bax蛋白表达则无明显作用,使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高,从而起到保护神经元的作用,这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

高压氧对脑缺血再灌注海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的 观察高压氧(HB0)作用下脑缺血再灌注海马CA，区神经元Bcl-2和Bax蛋白表达的变化情况，进一步研讨高压氧治疗脑缺血再灌注损伤、减轻神经元凋亡从而发挥保护作用的机制。方法 沙土鼠20只，采用随机数字法将实验动物分为正常对照组、缺血组、0．15MPaHBO治疗组、0．25MPaHBO治疗组，0．25MPa压力空气(hyperbaric air，HBA)对照组，每组4只动物。采用“双侧颈总动脉阻断法”前脑缺血模型，缺血20min后再灌注3d，并用0．15MPa和0．25MPa压力的高压氧治疗(60min／d，连续3d)后，应用免疫组化LSAB方法，观察高压氧对海马CA1区神经元凋亡相关基因Bcl-2和Bax的蛋白表达的影响。结果 沙土鼠脑缺血再灌注3d组海马CA1区大量神经元表达Bax蛋白，并且神经元发生凋亡，未见神经元表达Bcl-2蛋白；高压氧治疗组则大量神经元表达Bcl-2蛋白。并且0．25MPa高压氧治疗组比0．15MPa高压氧治疗组变化更显，而各组表达Bax蛋白的神经元数目无明显变化。但高压氧治疗组Bax蛋白阳性的神经元形态正常。结论 HBO暴露可诱导大量神经元表达Bcl-2蛋白，对Bax蛋白表达则无明显作用，使Bcl-2和Bax蛋白表达的比值增高，从而起到保护神经元的作用，这可视为HBO治疗脑缺血性损伤减少神经元凋亡的机制之一。     

不同压力高压氧对脑出血大鼠Bcl-2/Bax比值的影响

目的:观察不同压力高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠出血灶周围组织Bcl-2/Bax比值的影响。方法:应用胶原酶诱导法建立大鼠脑出血模型,将90只雄性脑出血SD大鼠随机分为对照组、高压氧治疗组:1.0ATA组、1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组,每组18只,按不同治疗压力于造模后24h进行治疗,1次/d,各组分别于造模成功后第1、3、5天断头取脑,每个时间点各6只。免疫组织化学染色法测定Bcl-2与Bax的表达,对Bcl-2/Bax比值进行统计分析。结果:Bcl-2/Bax比值:第1天时,高压氧治疗组较对照组升高,差异有显著性意义(P0.05),1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组较1.0ATA组升高,差异有显著性意义(P0.05),2.2ATA组、2.0ATA组、1.8ATA组依次升高,1.8ATA组、2.0ATA组与2.2ATA组比较差异有显著性意义(P0.05),1.8ATA组与2.0ATA组比较差异无显著性意义(P0.05);第3天时,高压氧治疗组较对照组升高,1.0ATA组与对照组比较差异无显著性意义(P0.05),1.8ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组与对照组比较差异有显著性意义(P0.05),2.2ATA组、2.0ATA组、1.8ATA组依次升高,各组之间比较差异均有显著性意义(P0.05);第5天时,高压氧治疗组较对照组升高,差异均有显著性意义(P0.05),2.0ATA组、2.2ATA组低于1.0ATA组,差异无显著性意义(P0.05),1.8ATA组高于1.0ATA组、2.0ATA组、2.2ATA组,差异有显著性意义(P0.05)。结论:HBO治疗可提高出血灶周围脑组织Bcl-2/Bax的比值,抑制出血灶周围组织细胞凋亡,且1.8ATA在提高Bcl-2/Bax的比值上较优。     

高压氧诱导脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl—2表达的时程变化

目的 观察高压治疗脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元Bcl-2蛋白表达的时程变化。方法 沙土鼠前脑缺血20min后再灌注1d,3d,5d,用0.25MPa的高压氧（hyperbaric oxygen,HBO）治疗（60min/d)，采用LSAB免疫组化方法，检测海马CA1区神经元Bcl-2阳性神经元。结果 单纯缺血各组及压力对照组海马CA1区未见Bcl-2阳性的神经元，各HBO治疗组海马CA1区可见大量Bcl-2阳性神经元。HBO治疗前3d,Bcl-2阳性神经元最多（P＜0．01）。结论 脑缺血再灌注损伤应尽早行HBO治疗，并且疗程应充足。     

不同介入时间和不同疗程高压氧治疗对脑出血大鼠神经功能的影响

目的 观察不同介入时间和不同疗程的高压氧（HBO）治疗对脑出血（ICH）大鼠神经功能的影响。 方法 将SD大鼠60只采用自体股动脉血法制作大鼠脑出血模型,造模成功后按随机数字表法随机分为不进行HBO治疗的无HBO组和进行HBO治疗的HBO组。HBO组按脑出血造模成功后HBO介入的不同时间分为5个亚组,包括造模成功后3 h开始HBO治疗的HBO 3 h组;造模成功后6 h开始HBO治疗的HBO 6 h组,造模成功后1 d开始HBO治疗的HBO 1 d组,造模成功后2 d开始HBO治疗的HBO 2 d组,造模成功后7 d开始HBO治疗的HBO 7 d组,每个亚组6只大鼠;无HBO组也按照HBO组的分组方法分为5个亚组（均不接受HBO治疗）,包括无HBO 3 h组、无HBO 6 h组、无HBO 1 d组、无HBO 2 d组和无HBO 7 d组,每个亚组6只大鼠。分别于治疗前、治疗10 d后、治疗20 d后、治疗30 d后共4个时间点采用Longa评分法对2组（10个亚组）大鼠进行神经功能缺损评分。 结果 HBO治疗10 d、20 d、30 d后,HBO组各亚组与无HBO组同介入时间亚组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗10 d后、治疗20 d后,HBO 3 h组分别为（2.17±0.75）分和（1.00±0.63）分,分别与HBO 2 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗10 d后、治疗20 d后、治疗30 d后,HBO 3 h组与HBO 7 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗10 d、治疗20 d后,HBO 6 h组与HBO 2 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,治疗10 d后、治疗20 d后、治疗30 d后,HBO 6 h组与HBO 7 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗10 d后、治疗20 d后,HBO 1 d组与HBO 2 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗10 d后、治疗20 d后、治疗30 d后,HBO 1 d组与HBO 7 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗10 d后、治疗20 d后、治疗30 d后,HBO 2 d组与HBO 7 d组大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。HBO 3 h组、HBO 6 h组、HBO 1 d组、HBO 2 d组4个亚组的大鼠HBO治疗10 d后与组内HBO治疗20 d后大鼠神经功能评分比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;治疗30 d后,HBO组各亚组与组内治疗10 d和20 d后比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 HBO治疗可降低脑出血大鼠神经功能评分,促进神经功能的恢复,HBO介入时间以脑出血后≤1 d为最佳,且疗程越长则疗效越好。     

不同时间窗高压氧治疗对脑出血大鼠出血灶周围HIF-1α表达的影响

目的 观察不同介入时间的高压氧治疗对脑出血大鼠出血灶周围缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)表达的影响。 方法 采用胶原酶诱导法建立雄性Wistar大鼠脑出血模型,将185只大鼠按照随机数字表法分为正常组（5只）、假手术组（60只）、脑出血对照组（60只）和高压氧治疗组（60只）。高压氧治疗组再按不同的介入治疗时间分为6 h组、1 d组、2 d组和3 d组4个亚组,每组15只。高压氧治疗压力2.0 ATA,稳压吸氧60 min,每日1次。所有大鼠均饲养在相同环境中,正常组和脑出血对照组不进行特殊治疗。正常组大鼠于饲养3 d后处死,其余各组分别于高压氧治疗1 d、3 d、5 d后断头取脑,每个时间点各5只。用免疫组化法测定HIF-1α的表达。 结果 正常组大鼠脑组织HIF-1α吸光度值为（0.0725±0.064）。与正常组和假手术组组间比较,脑出血对照组和高压氧治疗组术后各介入点的HIF-1α 吸光度值均较高（P<0.05）。与脑出血对照组同时间点比较,高压氧术后6 h、1 h介入点的HIF-1α 吸光度值较低,且持续至治疗3 d、5 d,差异有统计学意义（P<0.05）。与高压氧治疗组术后6 h比较,高压氧治疗组术后1 d、2 d、3 d介入点的HIF-1α 吸光度值较高,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论 高压氧治疗可以减少出血灶周围HIF-1α表达,且介入时间以6 h为佳。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠Bcl-2、Bax表达的影响

目的：探讨电针对局灶性脑缺血再灌注（MCAO）模型大鼠缺血脑组织Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：选用雄性SD大鼠140只,随机分为正常组、假手术组各10只,剩余的120只大鼠采用改良Longa动脉线栓法制作MCAO大鼠模型,将造模成功的108只大鼠随机分为模型组和电针组各54只。电针组大鼠于造模后1 h开始电针百会、水沟及双侧后三里穴,30 min。正常组及假手术组10只大鼠及模型组、电针组各取9只大鼠于3、6、12、24、48及96 h各时点断头取缺血区脑组织行免疫组织化学S-P法检测Bcl-2及Bax蛋白阳性表达。结果：①正常组和假手术组大鼠脑组织中有少量Bcl-2及Bax蛋白阳性表达;与正常组及假手术组比较,模型组及电针组6、12、24、48及96 h点均阳性表达明显增多（P〈0.05）,于24 h达高峰,之后逐渐下降。电针组Bcl-2蛋白各时点均高于模型组,Bax明显低于模型组（P〈0.05）。结论：电针对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤有保护作用,其作用机制可能与上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达有关。     

高压氧对脑外伤大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 研究高压氧对于脑外伤大鼠神经细胞凋亡的作用。方法 采用改进的Feency自Fh落体法建立脑外伤模型，72只大鼠随机分为正常对照组、脑外伤组、高压氧治疗组。在预定时间点采用TUNEL法和免疫组化法观察3组细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果 高压氧治疗组伤后第1，7，24天细胞凋亡率均低于脑外伤组。各时间点Bcl-2染色阳性细胞率均高于脑外伤组，各时间点Bax染色阳性细胞率均低于脑外伤组。结论 高压氧可明显提高Bcl-2的表达，抑制Bax的表达，进而抑制细胞凋亡。     

高压氧和氯化血红素联合干预对一氧化碳中毒大鼠脑半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响

目的：观察高压氧和氯化血红素联合治疗对急性一氧化碳中毒大鼠脑海马内凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响，并与单纯应用高压氧治疗进行比较。方法：实验于2005-01／05在华北煤炭医学院解剖学实验室完成。取200只雄性SD大鼠随机分成4组各50只：①模型组：大鼠放入染毒罐，然后向罐内注入体积分数为0．998一氧化碳气体，60min后取出。②高压氧组：造模同模型组，造模后立即进行高压氧治疗，0，2MPa，升压30min，稳压给氧60min，减压40min。1次／d。③高压氧＋氯化血红素组：除给予高压氧组同样的处理外，于一氧化碳中毒后立即腹腔注射氯化血红素30mol／kg，3次／d。④对照组：不作任何处理。4组均于造模后1，3，5，7和14d各处死10只大鼠，分别行免疫组化染色和免疫蛋白印迹法，观察大鼠脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数和灰度值的变化。结果：200只大鼠全部进入结果分析。①脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数：模型组各个时间点显著高于对照组（P〈0．05），中毒后5d达高峰[（87．9&;#177;1．4）个／视野，P〈0．05]；高压氧组和高压氧＋氯化血红素组各个时间点阳性细胞数均低于模型组（P〈0．05）；而高压氧＋氯化血红素组低于高压氧组（P〈0．05）。②脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的灰度值：模型组各个时间点显著高于对照组（P〈0．05），中毒后5d达高峰（89．1&;#177;1．4）；高压氧组和高压氧＋氯化血红素组各个时间点均低于模型组（P〈0．05）；而高压氧＋氯化血红素组低于高压氧组（P〈0．05）。结论：急性一氧化碳中毒后大鼠脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达升高，高压氧和氯化血红素联合治疗显著降低其表达，效果优于单纯高压氧治疗。     

高压氧对两种实验性脑出血大鼠模型出血灶周围水肿及水通道蛋白-4表达的影响

目的:探讨高压氧(HBO)对两种实验性脑出血大鼠模型血肿周围水肿及水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响。方法:将126只健康雄性SD大鼠随机分为5组:①假手术组6只(SHG);②自体血诱导脑出血(A-ICH)对照一组30只;③胶原酶诱导脑出血(C-ICH)对照二组30只;④A-ICH模型加高压氧治疗(A-ICH+HBO)实验一组30只;⑤C-ICH模型加高压氧治疗(C-ICH+HBO)实验二组30只,后4组又随机分为术后24h、48h、72h、5d、7d五个时间点组,每组6只大鼠。高压氧治疗自术后24h开始,1次/d。于相应时间点将大鼠处死,进行脑水肿和AQP-4的测定。结果:A-ICH模型成功率为65%,C-ICH模型成功率为75%。两对照组和两实验组大鼠脑组织含水量各时间点均高于假手术组,(A-ICH+HBO)经高压氧治疗后各时间点(24h、48h、72h、5d、7d)含水量均低于(A-ICH组),差异除24h组外均有显著性意义(P<0.05)。(C-ICH+HBO)经高压氧治疗后仅在ICH后48h和5d两个时间点与C-ICH对照组差异有显著性意义(P<0.05)。A-ICH+HBO和C-ICH+HBO组相比,前者水肿改善更早、更明显,尤其在72h时,差异显著(P<0.05)。脑出血后大鼠脑组织中AQP-4在各组均有表达,假手术组呈低表达状态,A-ICH和C-ICH两个对照组在脑出血后24h开始升高,48h达到高峰,72h后开始逐渐降低,7d时表达水平同假手术相近,但仍高于假手术组,A-ICH组与C-ICH组相比AQP-4表达更显著,但除72h组外其他时间点两组间无显著性差异(P>0.05)。(A-ICH+HBO)组各个时间点脑出血周围AQP-4的表达与A-ICH比较显著降低,差异具有显著性意义(P<0.05)。但(C-ICH+HBO)组AQP-4低表达仅在48h和72h与C-ICH组有差异(P<0.05)。A-ICH+HBO组与C-ICH+HBO组相比AQP-4改善的较早、且明显,尤其在48h和72h差异显著(P<0.05)。结论:HBO通过下调AQP-4的表达可有效减轻脑水肿。比较两种ICH模型发现,A-ICH模型在高压氧治疗中的敏感性更高,更适合高压氧在治疗脑出血水肿方面的研究。     

Bcl-2/Bax在百草枯中毒鼠肺组织中的表达及三七总皂苷的保护作用

目的 探讨急性百草枯(PQ)中毒鼠肺组织病理损伤变化和肺组织中抗凋亡基因(Bcl-2)、促凋亡基因(Bax)的表达及三七总皂苷(PNS)的保护作用.方法 150只SD雄性鼠分为正常对照组(C组,30只)、百草枯中毒组(PQ组,60只)及三七总皂苷保护组(PNS组,60只).PQ组和PNS组一次性灌胃PQ 25 mg/kg染毒,C组予等体积生理盐水灌胃.其中PNS组于染毒前15 min以PNS 50 mg/kg阴茎静脉注射保护,以后每日1次给药直至处死前;PQ组、C组分别在同时间点予与等体积生理盐水.观察各组大鼠在中毒后6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d肺组织病理改变,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定鼠肺组织Bcl-2和Bax mRNA的表达.结果 PNS组Bcl-2 mRNA的表达在6 h、12 h及1 d各亚组高于相应点PQ组,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组Bax mRNA的表达在6 h、12 h、1 d及3 d各亚组高于相应点PNS组,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组Bcl-2/Bax比例为促凋亡的Bax基因占优势;PNS组Bcl-2/Bax比例亦为促凋亡的Bax基因占优势,但这种优势不如PQ组明显.PQ组肺病理损伤评分在6 h、12 h、1 d及3 d各亚组均高于PNS相应组,差异有统计学意义(P<0.05),C组Bcl-2、Bax mRNA几乎不表达,肺组织病理大致正常,与PQ组及PNS组相比差异有统计学意义(P<0.00).结论 Bcl-2/Bax基因不均衡表达参与PQ中毒所致肺损伤,PNS对百草枯中毒所致肺损伤有保护作用.     

高压氧诱导脑缺血再灌注海马CA1区神经元Bcl-2表达的时程变化

目的观察高压氧治疗脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元Bcl-2蛋白表达的时程变化。方法沙土鼠前脑缺血20min后再灌注1d,3d,5d,用0.25MPa的高压氧(hyperbaricoxygen,HBO)治疗(60min/d),采用LSAB免疫组化方法,检测海马CA1区神经元Bcl-2阳性神经元。结果单纯缺血各组及压力对照组海马CA1区未见Bcl-2阳性的神经元,各HBO治疗组海马CA1区可见大量Bcl-2阳性神经元。HBO治疗3d,Bcl-2阳性神经元最多(P<0.01)。结论脑缺血再灌注损伤应尽早行HBO治疗,并且疗程应充足。     

高压氧和氯化血红素联合干预对一氧化碳中毒大鼠脑半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响

目的:观察高压氧和氯化血红素联合治疗对急性一氧化碳中毒大鼠脑海马内凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的影响,并与单纯应用高压氧治疗进行比较。方法:实验于2005-01/05在华北煤炭医学院解剖学实验室完成。取200只雄性SD大鼠随机分成4组各50只:①模型组:大鼠放入染毒罐,然后向罐内注入体积分数为0.998一氧化碳气体,60min后取出。②高压氧组:造模同模型组,造模后立即进行高压氧治疗,0.2MPa,升压30min,稳压给氧60min,减压40min。1次/d。③高压氧 氯化血红素组:除给予高压氧组同样的处理外,于一氧化碳中毒后立即腹腔注射氯化血红素30mol/kg,3次/d。④对照组:不作任何处理。4组均于造模后1,3,5,7和14d各处死10只大鼠,分别行免疫组化染色和免疫蛋白印迹法,观察大鼠脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数和灰度值的变化。结果:200只大鼠全部进入结果分析。①脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数:模型组各个时间点显著高于对照组(P<0.05),中毒后5d达高峰犤(87.9±1.4)个/视野,P<0.05犦;高压氧组和高压氧 氯化血红素组各个时间点阳性细胞数均低于模型组(P<0.05);而高压氧 氯化血红素组低于高压氧组(P<0.05)。②脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达的灰度值:模型组各个时间点显著高于对照组(P<0.05),中毒后5d达高峰(89.1±1.4);高压氧组和高压氧 氯化血红素组各个时间点均低于模型组(P<0.05);而高压氧 氯化血红素组低于高压氧组(P<0.05)。结论:急性一氧化碳中毒后大鼠脑海马区半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达升高,高压氧和氯化血红素联合治疗显著降低其表达,效果优于单纯高压氧治疗。     

荷叶黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 观察荷叶黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 将4月龄雄性Wistar大鼠50只,随机分为对照组（10只）、模型组（20只）和治疗组（20只）。建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,模型组和治疗组大鼠于冠状动脉结扎和再灌注前1min分别由左心腔缓慢注射生理盐水、荷叶黄酮（60mg／kg）。2h后处死动物,应用苏木精-伊红染色观察组织形态学的改变,应用免疫组织化学方法测定心肌组织中Bax蛋白、Bcl-2蛋白及Caspase-3的表达。结果 治疗组细胞水肿较模型组明显减轻。与模型组比较,治疗组Bax及Caspase-3蛋白的表达均明显降低,而Bcl-2蛋白的表达明显升高（F=3．33～4．17,q=3．34～8．03,P〈0．05）。结论 荷叶黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2、下调Bax和Caspase-3的表达,减少细胞凋亡有关。     

高压氧对急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠学习记忆能力及脑组织髓鞘碱性蛋白的影响

目的观察高压氧（HBO）对急性一氧化碳中毒（COP）迟发性脑病大鼠学习记忆及脑组织髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。 方法选取雄性SD大鼠45只,经Morris水迷宫筛选后,分为正常对照组（NC组）11只、急性一氧化碳中毒组（COP组）17只和急性一氧化碳中毒高压氧治疗组（HBO组）17只。COP组和HBO组采用分次腹腔注射CO气体法建立大鼠急性COP迟发性脑病模型,NC组采用相同方法腹腔注射等量空气。造模成功后,HBO组大鼠进行HBO治疗,NC组及COP组均给予常压饲养。与造模成功后第1天至造模成功后第21天对3组大鼠进行水迷宫测试,观察其学习记忆能力的变化情况,并于造模成功后第21天检测3组大鼠脑组织中MBP的表达情况。 结果造模后21d内,COP组迟发性脑病发病9只（64.3%）,HBO组发病4只(26.7%）,2组间差异有统计学意义（P<0.05）。HBO组大鼠平均逃避潜伏期为（6.20±1.98）s,与COP组的（10.61±4.82）s比较,差异有统计学意义（P<0.05)。造模成功后第21天,COP组和HBO组大鼠脑组织MBP的表达均低于NC组（P<0.05）;COP组大鼠脑组织MBP的表达低于HBO组（P<0.05）。3组大鼠脑组织灰度值比较,NC组显著优于COP组和HBO组（P<0.05）,而HBO组亦显著优于COP组（P<0.05）。 结论HBO治疗能改善急性COP迟发性脑病大鼠学习记忆能力,减轻脑组织脱髓鞘损伤。     

超短波对大鼠晶状体上皮细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察小剂量超短波对大鼠晶状体上皮细胞（LEC）凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平的影响。 方法将健康4周龄Wistar大鼠36只（共72只眼）按随机数字表法选取4只大鼠(8只眼)作为正常组，16只大鼠（32只眼）作为实验组（接受小剂量超短波照射，每次7min，1次/日），16只（32只眼）作为对照组（不接受超短波照射），分别于实验第1、3、6和9周四个观察时间点同步处死实验组和对照组大鼠（每个时间点4只大鼠8只眼）。采用无菌操作摘取大鼠双眼，并在手术显微镜下分离晶状体，制备大鼠晶状体石蜡切片，进行免疫组化链霉亲和素-生物素复合物(SABC）染色，应用图像分析技术对LEC的Bcl-2及Bax蛋白表达水平进行检测，所得数据使用SPSS 13.0版统计软件进行分析处理。 结果实验组，在照射1、3、6和9周后的Bcl-2表达平均积分光密度（AIOD）值分别为（0.391±0.014）、（0.447±0.006）、（0.417±0.011）、（0.275±0.007），而Bax表达的AIOD值分别为（0.180±0.015）、（0.155±0.007）、（0.167±0.003）、（0.251±0.016）。照射1周后，实验组与对照组比较，组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）；照射3周实验组与对照组相比，其Bcl-2蛋白表达显著增加（P<0.01），且Bax明显减少（P<0.01）；实验组照射6周后的Bcl-2与照射3周后的相比，有所下调但仍较对照组的表达高，且差异有统计学意义（P<0.01），而实验组Bax的表达有所上调但较对照组表达低，且差异有统计学意义（P<0.01）；照射9周后, 实验组的Bcl-2表达明显下降，且远低于对照组（P<0.01），Bax表达亦较对照组明显增加（P<0.01）。对照组上述各时间段大鼠的Bcl-2及Bax的表达与正常组相比，均无明显变化（P&rt;0.05）。 结论小剂量超短波对大鼠LEC的凋亡在一定时间内有保护作用，但随着作用时间的延长可能引起LEC损伤。     

高压氧对持续局灶性脑缺血细胞凋亡的影响及其作用机制

目的 探讨高压氧(HBO)对持续性局灶性脑缺血细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 选择4～5个月龄SD大鼠65只,随机分为缺血组、HBO组和假手术组。观察脑梗死灶体积、凋亡细胞数量及凋亡调控基因蛋白表达的变化。结果 HBO组与缺血组相比,6 h～10 d各相应时间点梗死灶体积均明显缩小,差异均有极显著性意义(P均<0.01);HBO 组缺血48 h后,TUNEL 阳性凋亡细胞数较缺血组明显减少(P<0.01);HBO 组与缺血组相比,在缺血6 h～10 d各时间点 Bcl-2阳性细胞增加;差异有显著性意义;Bax阳性细胞在缺血6 h～10 d各时间点均减少,差异有显著性意义。结论 脑缺血早期暴露于高压氧可以减少局灶性脑缺血梗死灶体积;高压氧能抑制脑缺血细胞凋亡,其作用与上调Bcl-2蛋白、下调Bax蛋白表达有关。