用快速发酵试验测定娇嫩细菌的碳水化合物反应

用肉汤法测定娇嫩细菌分解碳水化合物产酸的能力,一般需要较长的时间.某些细菌的生长须要在培养基中添加血清或其它营养成份.用快速发酵试验(Rapid Fermentation test RFT)鉴定淋病双球菌可以得到可靠的结果.作者将Brown氏法进行改良以适于鉴定其它娇嫩细菌.试验所用试剂有:①20%碳水化合物肉汤溶液:碳水化合物20.0克,蛋白胨10.0克,肉膏3.0克,氯化钠5.0克,蒸溜水1000毫升,校正pH7.0,过滤除菌.②缓冲盐     

肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的检测

目的调查本院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的情况。方法收集2010年1～5月临床分离的肠杆菌科细菌,采用K-B纸片法进行药敏试验,以三代头孢菌素、亚胺培南、美罗培南为检测药物,筛选出可能产碳青霉烯酶的菌株120株,采用改良的Hodge试验进行确证。结果在120株耐一种或多种三代头孢菌素,提示可能产生碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌中,通过表型确证试验确证为阳性的细菌有4株,肺炎克雷伯菌2株,大肠埃希菌1株,弗劳地枸橼酸杆菌1株。结论表型确证试验阳性的细菌中,如需准确辨别亚型,最好用分子生物学方法检测基因序列。     

不用血浆的细菌L型培养基

深圳长白山制药厂生产出细菌L 型培养粉,为细菌工作提供了方便.但制作分离、传代、诱导、药敏试验用平板时,仍需加入20%的灭活血浆(或血清).我科用胎盘浸液代替血浆(或血清),取得满意效果,报道如下。1.胎盘浸液的制备取全胎盘一个(勿洗掉血液),切碎,装入烧瓶内,每500g 加水1000ml,混匀,置4℃过夜,次日取出,     

血小板细菌污染的快速检测

背景 血小板细菌污染是输血致病和死亡的重要原因,估计占输血致死率的10％。具保守估计,在美国超过1/3,000份血小板浓缩物有细菌污染,由输血引起的败血症每年导致至少20～40例死亡,目前仍无筛选试验。根据特殊蛋白和衍生肽结合到细菌细胞壁肽聚糖蛋白的原理,发明一种检测血小板细菌污染的方法,并检验其可行性。方法 在通过滤过器吸取血小板标本的过程中,肽聚糖蛋白或多肽将细菌俘获。根据肽聚糖结合蛋白家族序列分析,用标记生物素合成四种多肽,用标准酶法,使     

儿童玩具消毒效果评价

为解决儿童玩具有效消毒问题,采用现场消毒试验方法对含氯消毒剂与过氧乙酸消毒剂消毒效果进行了试验观察。结果,用含有效氯500 mg/L的含氯消毒剂溶液擦拭消毒或用160 g/L过氧乙酸消毒剂自然蒸发消毒,对儿童玩具表面自然菌的杀灭率均大于90%。消毒后可使木制、橡胶、塑料、金属类儿童玩具和绒毛类儿童玩具表面上细菌总数<2 cfu/cm2。结论,用含氯消毒剂擦拭消毒和过氧乙酸熏蒸消毒处理可使消毒后各类儿童玩具表面细菌总数<2 cfu/cm2。     

在细菌学检验中同时使用电阻抗·比浊法

作者应用试验研制的仪器,同时测定培养基内细菌增长后出现的电阻抗和浊度的变化,以进行细菌鉴定。将自临床标本中分离出的细菌接种在各种不同的培养基中[如BHI(脑心浸出液肉汤)、赖氨酸、鸟氨酸、尿素培养基],并得到了各种细菌特有的增殖微分曲线,并以该曲线为标准,分别对照被检菌曲线而作出判定。结果表明,在不论哪种培养基上进行此项试验,均可高效率地对细菌作出鉴定。用本法检菌与过去的培养法的符合率是,用BHI培养基检菌133株,其符合率达84%;用赖氨酸培养基检菌201株,其符合     

2009～2011年临床分离革兰阳性球菌的耐药性分析

目的调查2009～2011年临床常见分离的革兰阳性球菌的分布及耐药性。方法用VITEK-32进行细菌鉴定和药敏试验,用纸片扩散法做药敏补充试验,用WHONET5.5统计分析。结果从临床送检标本中共分离革兰阳性菌1712株,分离的前六位细菌依次为金黄色葡萄球菌、表葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、草绿色链球菌和肺炎链球菌。葡萄球菌属中耐甲氧苯青霉素金黄色葡萄球菌(MRSA)、凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为69.0%和53.1%,D-试验阳性率为16.2%,三者均呈上升趋势。葡萄球菌、肠球菌耐药率上升,呈多重耐药。氯霉素、替考拉宁、万古霉素对革兰阳性球菌的耐药率低,未检出耐利奈唑胺的革兰阳性球菌。结论我院细菌耐药严重,进行长期的细菌监测或检测可为临床医生抗感染治疗提供参考依据,临床药师、微生物实验室及感染控制科专家应根据医院耐药监测数据及时指导临床合理用药,减少耐药菌株的传播。     

肠杆菌科细菌碳青霉烯酶耐药基因分析

目的研究耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌所产碳青霉烯酶的型别及其流行情况。方法收集重庆医科大学附属第一医院2009年11月～2010年4月临床分离的肠杆菌科细菌,用Vitek 2 Compact进行细菌鉴定、药敏试验,从中筛选出11株对碳青霉烯类抗生素耐药或中介的菌株。PCR检测blaKPC、blaIMP、blaVIM基因,阳性结果用DNA测序和BLAST比对确定基因型。结果 11株对碳青霉烯类抗生素耐药或中介的菌株均为多重耐药,除1株来自眼科外均来自ICU。PCR结果3株肺炎克雷伯菌和3株阴沟肠杆菌携带blaIMP,DNA测序比对均为blaIMP-8,未扩出blaKPC、blaVIM基因条带。结论本次筛检的11株肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别IMP-8,且已在外科ICU中局部流行。     

细菌药敏试验的临床价值及局限性

细菌耐药性的迅速发展、多重耐药细菌引起的难治性感染已构成高死亡率的重要因素。原因是细菌的天然耐药谱是相对稳定的而获得性耐药谱是多变的,按传统的经验治疗常常失败。文献报道,8h内采用合理的治疗手段可降低30天的死亡率。用体外药敏试验的结果推测药物在体内的疗效,各临床实验室开展耐药监测,用回顾性的细菌耐药资料总结出常见感染细菌的耐药规律作为初始治疗的参考,以此满足临床治疗的需要。但临床实践的事实证明体外的药敏报告有时并不能达到理想的目的,临床医生和细菌室都为之困扰,因此正确理解药敏试验的临床价值、存在的局限性及合理评价药敏试验的价值十分必要。1药敏试验的临床价值在获得感染部位真正的致病菌和操作规范的前提下,体外药物敏感试验可对抗菌药物的临床疗效进行预测,查出耐药,减少治疗错误,为个体化的治疗提供参考依据;局域性的药敏试验结果的收集统计是临床医生经验治疗循证医学的证据;临床细菌室的病原检测和药敏试验可预测爆发流行的发生,为医院感染控制提供线索。自1976年WHO号召全球各临床细菌室把每天的药敏试验结果输入WHONET的软件经统计分析获得全球和各地区细菌耐药趋势、发现新的耐药机制,为临床医生合理选择抗生素提供依据。在...     

鉴定细菌用的脱氧核糖核酸酶(DNase)试验干燥培养基的制备

DNase试验的方法,国内仅见于刘氏及朱氏专业书中。关于DN ase 试验对鉴定细菌的应用价值,Sonnenwirth、Martin、Valu、Raphael等均有介绍。为提高鉴定细菌的准确性,我们在实际工作中加以应用,感到对鉴别部分细菌可有所帮助;我们还自行制备供DNase 试验用干燥培养基,经查阅有关资料,尚未见有报道,故将制备方法、试用结果加以介绍,供同道们参考。     

硅藻土、珍珠岩细菌内毒素限量检测

目的探寻硅藻土、珍珠岩细菌内毒素含量的简便检测方法。方法采用细菌内毒素限量检测法测定生产用主要原辅材料硅藻土、珍珠岩的细菌内毒素含量,同时分别考察样品的前处理、干扰试验,与定量检测结果也作相应比较。结果样品前处理采用60℃1h水浴或放置过夜相比较无差别;样品对方法无干扰;同时与定量法比较两种方法结果一致。结论样品前处理可采用60℃1h水浴代替放置过夜,限量法可作为硅藻土、珍珠岩细菌内毒素含量检测的常规方法。     

医院病人红细胞 T 活化的发生率

多凝集是患者红细胞被大部份或全部ABO相合的正常成人血清所凝集的现象。最早发现引起多凝集的抗原是T抗原。由于绝大多数血型试剂是用正常成人血清制备,而正常成人血清中有抗T,故对T活化的患者检查血型及作其它试验时会遇到困难。在体外,将神经氨酸酶或产生神经氨酸酶的细菌与红细胞孵育,可以除去红细胞表面的唾液酸而使T活化;在体内,细菌或病毒感染产生的神经氨酸酶使T活化。红细胞上能引起多凝集的其它抗原改变有Tn、Tk和     

单克隆荧光抗体优化检测沙眼衣原体

实验室诊断病毒和某些细菌感染的传统作法是组织培养分离(TC)。这种方法费用昂贵,需几天时间才能完成,并且还要取决于临床标本中被检微生物的活力。最近,一些直接检测临床标本中的病毒或细菌抗原的试验问世。其中,用特异性单克隆抗体(McAb)进行的免疫荧光试验诊断病毒感染优于TC,快速且易于操作。结合荧光素的McAb可用于诊断衣原体感染。用种特异性或属特异性     

解析VITEK 2 COMPACT微生物全自动分析系统的质量控制

VITEK 2 COMPACT微生物全自动分析系统是由法国生物梅里埃公司生产的的一种药敏试验和快速细菌鉴定全自动分析设备,系统自带专家分析程序,具有操作方便、方法简单等特征,能够大大缩短常规药敏试验和细菌鉴定所需时间,在最短时间内获得临床用药情况和细菌鉴定试验结果,然而,这一鉴定系统适用范围较小,无法实施完全意义上的无菌操作,因此,在其应用过程中,应由药敏试验和细菌鉴定所用的仪器和试剂质量,以及程序的准确度与精密度出发,在严格执行无菌操作规范的基础上,实施更加有效的质量控制。     

改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌

摘要：目的：用改良Hodge试验检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,初步推测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的流行情况。 方法：筛选出2009年4月~2010年4月对碳青霉烯类抗生素耐药以及敏感性下降或者碳青霉烯类抗生素敏感而一种以上三代头孢菌素耐药的肠杆菌科细菌23株,用改良Hodge试验检测其碳青霉烯酶。 结果：23株菌中21株（91.3%）呈多重耐药,其中5株菌改良Hodge试验阳性,分别为肺炎克雷伯菌1株、弗劳地枸橼酸杆菌1株、大肠埃希菌1株和霍氏肠杆菌2株。 结论：改良Hodge试验阳性提示所测菌株中有产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌的存在,因此要加强对此类细菌的院内感染管理监测。     

阴沟肠杆菌等细菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

目的检测肠杆菌科细菌中除肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌以外的其它细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),以了解其检出情况和耐药性.方法采用VITEK ESBLs检测系统和双纸片协同试验同时进行ESBLs的实验.结果280株细菌中,用VITEK506卡检出ESBLs菌96株,其中大肠埃希菌34.5%,肺炎克雷伯菌43.1%,阴沟肠杆菌35.4%,产气肠杆菌25%,费劳地枸橼酸杆菌37.5%.用双纸片协同实验检出91株,检出率略低.在沙雷菌、变形杆菌、摩根菌中未检出ESBLs菌.对头孢西丁药敏试验中,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌高度敏感,而其余细菌表现耐药.结论对大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌可以用VITEK系统和双纸片协同试验作常规ESBLs的试验,而对肠杆菌科中其余的细菌是否可参照应用尚需研究.     

安徽淮北地区超广谱β-内酰胺酶细菌表型检测的底物选择

目的了解淮北地区产超广谱β-内酰胺酶细菌的表型分布及检测的最佳底物选择。方法用1999年NCCLS推荐的标准,采用纸片扩散法从147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认。结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中共检出69株产ESBLs细菌(46.9%),将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法进行确证试验,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株。结论淮北地区进行ESBLs细菌检测时,应选择头孢噻肟和头孢曲松作为初筛试验的底物,选择头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定作为确证试验的底物。     

不同方法对医院供应室环境消毒的效果

试验表明，对空气单以紫外线照射３０ｍｉｎ或臭氧消毒１２０ｍｉｎ，均不能达到消毒目的，两者联合使用可使细菌总数减至１８２ｃｆｕ／ｍ３。对物体表面，用含１００ｍｇ／Ｌ有效氯的８４消毒液或含２５０ｍｇ／Ｌ有效氯的优氯净溶液擦拭，均可将细菌总数减至合格标准（≤５ｃｆｕ／ｃｍ２）以下，而用１％煤酚皂溶液擦拭则达不到目的。     

环氧乙烷用于口岸集装箱消毒效果的研究

目的研究环氧乙烷与二氧化碳混合气体杀菌效果。方法采用载体定量杀菌试验和模拟现场消毒试验方法,对环氧乙烷混合气体杀菌效果进行了实验室和模拟现场试验观察。结果在常温常湿条件下,用50 g/m3环氧乙烷混合气体熏蒸24 h,或用100 g/m3的该混合气体熏蒸5 h,对1 m3密闭玻璃柜内菌片上大肠杆菌和金黄色葡萄球菌杀灭率可达90%以上;对菌片上枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭率仅达73%以上。在相同条件下,对集装箱模拟现场消毒效果与上述结果类似。结论环氧乙烷混合气体对集装箱内细菌繁殖体杀灭效果较好,但对细菌芽孢杀灭效果较差,需要改变消毒条件。     

去除玻璃仪器上内毒素方法的研究

为寻求有效去除玻璃仪器上细菌内毒素的方法,对消毒剂、灭菌温度、灭菌时间等 3个因素进行了正交试验比较,用动态浊度法测定处理后的试管中细菌内毒素的残存量。结果,以重铬酸钾洗液浸泡 1h、250℃干热作用 2h的最佳组合,去内毒素效果最好。为简化操作,降低成本,节省时间,优选重铬酸钾洗液浸泡 1h或强力洗消精浸泡 1h、220℃干热作用 1h,可以得到同样去除效果。该方案经试验证明经济、有效、实用性强。