肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子对骨关节炎软骨细胞作用实验研究

目的研究肿瘤坏死因子样微弱凋亡诱导因子（TWEAK）对体外培养骨关节炎（OA）软骨细胞的作用,同时探讨炎性细胞因子白细胞介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）与TWEAK之间的关系。方法体外培养OA患者原代软骨细胞,分别用TWEAK（75ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和IL-1β（5ng/mL）,TWEAK（75ng/mL）和TNF-α（5ng/mL）作用细胞48h,MTT检测细胞因子对软骨细胞的增殖作用影响;ELISA检测细胞培养上清液中MMP-13、IL-6和Fas的分泌表达。结果 MTT结果表明细胞因子刺激软骨细胞后对细胞增殖无明显影响。TWEAK和IL-1β组诱导MMP-13表达增加（P〈0.05）;TWEAK和IL-1β组,TWEAK和TNF-α组均诱导IL-6表达增加（P〈0.05）。3组Fas分泌表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 IL-1β与TWEAK,TNF-α与TWEAK分别诱导OA软骨细胞MMP-13和IL-6表达增加,可能参与关节软骨损伤和OA的病程发展。     

TWEAK对体外培养大鼠关节软骨细胞产生趋化因子的诱导作用

目的:探讨肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)对体外培养的大鼠关节软骨细胞产生趋化因子的影响,初步了解TWEAK在OA发病机制中的作用。方法:体外培养大鼠关节软骨细胞,实验组细胞用250 ng/mL TWEAK诱导,对照组则不作此处理,24、48、72 h后检测两组细胞培养液中趋化因子白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted factor,RANTES)和巨噬细胞炎性蛋白-2(macrophage inflammatory protein 2,MIP-2)的含量。结果:TWEAK诱导24、48、72 h后,实验组大鼠关节软骨细胞上清液中RANTES含量均明显高于相应对照组(P0.05),且RANTES的含量与TWEAK作用时间呈正相关(P0.05);实验组IL-8和MCP-1的含量在TWEAK诱导48、72 h后均明显高于相应对照组(P0.05),但与TWEAK作用时间无相关性(P0.05);MIP-2的浓度在TWEAK诱导48、72 h后均明显低于相应对照组(均P0.05),且其含量的降低与TWEAK作用时间呈正相关(P0.05)。结论:TWEAK能诱导体外培养的大鼠关节软骨细胞产生趋化因子(IL-8、MCP-1、RANTES),以此参与OA的发生。     

骨桥蛋白对骨关节炎软骨细胞缺氧诱导因子-2α mRNA表达的影响

[目的]本研究探讨在体外实验中,骨桥蛋白(OPN)对缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)在软骨细胞表达的影响,揭示OPN在骨关节炎(OA)发病中的作用机制.[方法]从OA患者胫骨表面切取软骨,并在体外培养纯化软骨细胞.用重组人类骨桥蛋白(rh OPN组)和小干扰RNA(siRNA组)对软骨细胞进行干预(对照组不予激活及干预),检测HIF-2α mRNA表达的变化.用抗-CD44单克隆抗体检测可能的配体-受体的相互作用.通过实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)同时定量软骨细胞OPN mRNA和HIF-2α mRNA的表达.[结果]rh OPN组与对照组相比,HIF-2α mRNA的表达水平显著降低,相反,siRNA组HIF-2α mRNA表达增加.同时,CD44抗体可以抑制OPN对HIF-2α mRNA的表达的影响.[结论]OPN可能通过CD44的相互作用,抑制OA软骨细胞HIF-2α mRNA的表达,从而发挥对OA的保护性作用.     

肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子在强直性脊柱炎患者血浆中的表达及临床意义

目的 通过检测强直性脊柱炎(AS)患者血浆中肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(TWEAK)的表达情况,探讨其在AS发病机制中的作用及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测46例AS患者及32例健康对照者血浆中TWEAK及TNF-α水平,分析TWEAK与AS的各项临床及实验室指标的相关性.结果 AS患者血浆TWEAK水平[(504.82±121.54)pg/ml]与健康对照组[(475.64±79.31)pg/ml]相比无统计学差异,但疾病活动期AS患者血浆中TWEAK水平[(521.93±85.36)pg/ml]比健康对照组高,差异有统计学意义,相关性分析结果显示疾病活动期AS患者血浆TWEAK水平与TNF-α水平呈正相关(r=0.437,P=0.033),与C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)水平无明显相关.结论 血浆TWEAK水平可能与AS疾病活动有一定关系,参与了AS的炎症反应过程.     

罗格列酮对冠心病患者巨噬细胞表达核因子-κB和金属蛋白酶-9的影响

目的 探讨罗格列酮(Ros)干预在调节冠心病患者外周血单核细胞源性巨噬细胞(MDMs)表达核因子-κB(NF-κB)、金属蛋白酶-9(MMP-19)中的作用及可能机制.方法 本研究为临床病例对照研究.于2007年3月至4月间,从湘雅二医院心内科行冠脉造影患者中,选取急性冠脉综合征患者48例(ACS组)、稳定型心绞痛(SA)患者20例(对照组)为研究对象,排除脑血管意外、急性感染和创伤、肝肾功能不全、肿瘤等患者.提取外周血单个核细胞,用巨噬细胞集落刺激因子刺激,转化为MDMs;随机分亚组后,分别用0μmol/L1μmol/L,10 μmol/L,20 μmol浓度Ros干预48h;RT-PCR检测各亚组MDMs表达过氧化物酶增殖体激活受体-γ([PPAR-γ)和MMP-9 mRNA,免疫组化法检测NF-κB P65表达强度.用ANOVA检验比较组间及亚组内MDMs在表达PPAR-γ,MMP-9,NF-κB P65的差异.结果 干预前,ACS组MDMs表达PPAR-γmRNA水平低于对照组,表达NF-κB P65及MMP-9mRNA水平高于对照组;Ros干预后,ACS组及对照组PPAR-γmRNA表达明显上调,ACS组PPAR-γ的表达量与Ros浓度呈正变关系;MMP-9 mRNA表达下调,在ACs组其下调程度与Ros浓度呈反变关系;两组NF-κB P65表达量均呈现非剂量依赖性降低.结论 ACS患者外周血MDMs的PPAR-γRNA表达被抑制、NF-γB活性及MMP-9 mRNA表达增强.Ros干预可通过增加PPAR-γ的表达,从而抑制NF-κB活性和MMP-9的表达.     

血必净注射液对脂多糖诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞组织因子表达的影响及机制探讨

目的 观察血必净注射液对脂多糖(LPS)诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞(RMECs)组织因子(TF)表达的影响,并探讨其可能机制.方法 采用胰酶消化法原代培养大鼠RMECs,用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光法鉴定.取生长良好的3、4代细胞,分为对照组、LPS刺激组和血必净治疗组;采用透射电镜观察各组细胞形态,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内TF mRNA和内皮素(ET)mRNA表达,用免疫荧光法检测核转录因子-κB(NF-κB)活化程度.结果 与对照组比较,10 mg/L LPS刺激组电镜下可见细胞粗面内质网和高尔基体空泡变性明显)LPS(1～100 mg/L)刺激组TF mRNA和ET mRNA表达均随浓度增加显著上调(P<0.05或P<0.01),NF-κB核移位明显;血必净(12.5、25.0、50.0 g/L)治疗组较LPS刺激组细胞形态明显改善,TF mRNA和ET mRNA表达均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),未观察到NF-κB核移位.结论 LPS可呈剂量依赖性诱导TF mRNA和ET mRNA表达;血必净注射液可通过降低TF mRNA表达来抑制LPS诱导的微血管内皮细胞凝血系统的启动,其保护作用的机制可能与降低ET mRNA表达并抑制NF-κB活化有关.     

核因子-κB途径介导脑源性神经营养因子促进多发性骨髓瘤细胞分泌基质金属蛋白酶-9

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)通过核转录因子(NF)-κB诱导多发性骨髓瘤(MM)细胞基质金属蛋白酶(MMP)-9分泌的具体机制.方法 培养人MM细胞株RPMI 8226,使用明胶酶谱法检测.RPMI 8226细胞分泌的活性MMP-2、MMP-9水平的变化,用化学发光凝胶电泳迁移率分析(EMSA)法检测RPMI 8226细胞中NF-κB的活性.结果 以25、50、100和200μg/L浓度的BDNF刺激RPMI 8226细胞24 h后,其活性MMP-9的分泌水平分别为2.03±0.48、2.99±0.46、4.63±0.62和5.62±1.29μg/L,均明显高于对照组(P＜0.01),而MMP-2的表达在各浓度组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).当BDNF作用浓度为100μg/L时,预先分别用1 mmol/L的NF-κB抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸脂(PDTC)和500 nmol/L的BDNF高亲和力受体TrkB的酪氨酸抑制剂K252a处理15 min和1 h后,K252α和PDTC(P＜0.001)均能显著抑制RPMI 8226细胞MMP-9的分泌(光密度值分别为867.52±101.81、727.98±92.05,对照组为1159.01±233.15,与对照组比,P值均＜0.01).随着BDNF浓度的升高,NF-κB的活化作用明显增强,于100μg/L BDNF加K252α预处理1 h后,6、12、24 h的3个时间点K252α均能明显抑制BDNF对NF-κB的激活作用(P＜0.05),且随BDNF作用时间的延长而增强.结论 BDNF促进MM细胞血管新生的能力可能是通过NF-κB信号转导途径激活MMP-9而实现的.     

预诱导与全反式维甲酸并脑源性神经营养因子体外诱导骨髓基质干细胞向神经元样细胞的分化

背景:骨髓基质干细胞可定向诱导分化为神经元样细胞,但目前培养的方法尚不统一.目的:采用预诱导与全反式维甲酸和脑源性神经营养因子为培养体系,拟在体外诱导大鼠骨髓基质干细胞向神经细胞分化.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-12/2008-06在新疆医科大学第一附属医院医学研究中心干细胞室完成.材料:清洁级雄性SD大鼠2只,由新疆医科大学动物试验中心提供.方法:采用贴壁法体外分离培养大鼠骨髓基质干细胞,经反复传代细胞逐渐纯化.取生长状态良好的第3代骨髓基质干细胞,按8×107L-1密度接种后,改换含10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20 μg/L表皮生长因子的神经干细胞培养体系进行预诱导,48 h后去除预诱导液,加入含10 μg/L脑源性神经生长因子、1 μmol/L全反式维甲酸的神经干细胞培养体系定向诱导骨髓基质干细胞分化为神经细胞.以未诱导的骨髓基质干细胞作为对照.主要观察指标:流式细胞仪检测第3代骨髓基质干细胞表面标志的表达,诱导后免疫荧光染色和流式细胞仪检测巢蛋白阳性的表达,免疫荧光染色鉴定神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达.结果:第3代骨髓基质干细胞CD29,CD44表达率分别为97.1%,99%,CD45表达率为0.5%,CD34呈阴性表达.预诱导48 h后巢蛋白阳性率为24%,而对照组仅为4.6%.诱导48 h后,巢蛋白染色呈阳性,并可见大量神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞出现;对照组均呈阴性表达.结论:神经干细胞培养体系联合全反式维甲酸与脑源性神经生长因子,可在体外高效、稳定地诱导骨髓基质干细胞转化为神经元样细胞,并进一步向神经元和神经胶质细胞方向分化.     

TRPM4通道抑制剂9-菲酚在骨关节炎软骨细胞中的作用

目的研究TRPM4信号通道抑制剂-9-菲酚对骨关节炎(OA)软骨细胞的肥大分化及软骨组织的降解的作用,并研究9-菲酚对OA软骨细胞凋亡的影响,从而为治疗OA提供实验依据。方法选取因OA进行膝关节置换而截下的胫骨平台关节软骨,消化成软骨细胞进行细胞培养。软骨细胞均分为6组,一组不加药作为对照组,其余分别加入不同量的。9-菲酚干预1 d培养后细胞分别进行RT-q PCR,检测Runx-2、MMP-13(软骨细胞肥大指标)及COL Ⅱ、Aggrecan(软骨代谢指标);采用TUNEL染色荧光显微镜检测及Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测9-菲酚干预1 d后OA软骨细胞凋亡情况。结果 RT-q PCR显示:无法判断9-菲酚对软骨细胞代谢的影响;而软骨细胞肥大指标Runx-2、MMP13的m RNA较对照组表达水平有升高趋势,可见在m RNA水平上,9-菲酚可能促进软骨细胞肥大。TUNEL染色荧光显微镜检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为2×10~(-5) mol/L组较对照组凋亡率明显下降(P<0.05),其他浓度组与对照组比较均无统计学差异,但均有凋亡率下降的趋势。Annexin V和7-AAD标记流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率发现,9-菲酚浓度为1×10~(-5) mol/L、2×10~(-5) mol/L、4×10~(-5) mol/L时较对照组凋亡率均有所下降(P<0.05),而在另外两组有下降趋势。结论 9-菲酚在细胞水平上对OA软骨细胞的肥大分化有促进作用,可能促进OA的进展。同时9-菲酚可以抑制OA软骨细胞的凋亡,在OA治疗方面可能具有积极意义。     

脂多糖对血管平滑肌细胞表达MMP-9的影响及可能机制

目的探讨脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)对培养的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth musch cell,VSMC)表达基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的影响及可能的分子机制。方法贴块法进行血管平滑肌细胞培养,细胞免疫化学检测MMP-9的蛋白表达及核因子NF-κB激活情况,原位分子杂交分析MMP-9mRNA表达。结果LPS是MMP-9的强诱导物,可在蛋白及mRNA水平诱导MMP-9的表达,LPS对其诱导作用强度与LPS的浓度呈正相关。与正常组比较LPS刺激15min即有NF-κB p65核转移,30min达高峰,1h后减弱。结论LPS诱导平滑肌细胞MMP-9表达,其作用呈浓度时间依赖性,MMP-9表达升高可能与LPS激活NF-κB有关。MMP-9表达升高和NF-κB激活提示LPS在动脉粥样硬化发病过程中可能起一定作用。     

Expression of 92-kD type IV collagenase/gelatinase (gelatinase B) in osteoarthritic cartilage and its induction in normal human articular cartilage by interleukin 1.

We report here that a 92-kD gelatinolytic metalloproteinase is expressed as protein and mRNA in human osteoarthritic cartilage, but not in normal adult articular cartilage. Western immunoblotting demonstrated that the 92-kD gelatinolytic activity corresponded to 92-kD type IV collagenase/gelatinase (gelatinase B); mRNA for gelatinase B was identified by Northern blotting. Chondrocytes from normal cartilage also exhibited mRNA for 72-kD type IV collagenase/gelatinase (gelatinase A), tissue collagenase, and stromelysin-1, and these mRNAs were increased in osteoarthritic cartilage. Regional analysis of osteoarthritic cartilage samples from four individuals revealed that gelatinase B mRNA was expressed in grossly fibrillated areas; two of four nonfibrillated cartilage samples failed to exhibit the mRNA, but did have increased levels of mRNA for other neutral metalloproteinases. IL-1 alpha treatment of normal human cartilage explants or isolated chondrocytes induced increased levels of gelatinase B and increased mRNA for tissue collagenase and stromelysin-1. Under identical conditions, mRNA levels for gelatinase A were not increased indicating that regulation of this enzyme in human articular chondrocytes is distinct from that of other metalloproteinases. Our data showing expression of gelatinase B in fibrillated cartilage suggest that it is a marker of progressive articular cartilage degradation in osteoarthritis.     

基质金属蛋白酶9、血管内皮生长因子与肺癌病理类型和TNM分期的关系及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌患者血清中含量与病理类型及TNM分期的关系及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法 检测腺癌、鳞癌及不同TNM分期中肺癌患者血清MMP-9及VEGF的含量;并进行相关统计学处理.结果 ①肺腺癌患者血清中MMP-9的含量明显高于鳞癌(856.70±85.10)μg/L vs(623.20±75.20)μg/L(P<0.05);VEGF的含量在肺腺癌和鳞癌患者之间差异无统计学意义(334.20±47.20)ng/L vs(324.50±42.43)ng/L(P>0.05).②Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期肺癌患者血清中MMP-9含量不同(602.80±78.40)μg/L vs(714.50±79.30)μg/L vs(880.50±72.90)μg/L vs(934.50±73.80)μg/L(P<0.05),随着分期的进展MMP-9含量逐渐增高,TNM分期与血清中MMP-9含量呈正相关(rs=0.520,P<0.01);VEGF各期间含量(251.10±72.43)ng/L vs(261.30±67.21)ng/L vs(279.10±74.67)ng/L VS(313.20±75.23)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05),随着分期的进展VEGF逐渐增高,TNM分期与血清中VEGF含量呈正相关(rs=0.620,P<0.01).③MMP-9与VEGF呈高度的正相关(rs=0.740,P<0.01).结论 MMP-9及VEGF参与了肺癌的发生发展,与病理类型及TNM分期密切相关.     

透明质酸对人骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白和CD44表达的影响

背景：软骨进行性破坏为晚期骨关节炎的特征性病变,骨关节炎相关因子透明质酸、骨桥蛋白、CD44在骨关节炎软骨中表达增加。目的：通过透明质酸干预体外培养的人膝骨关节炎软骨细胞,探讨透明质酸对人膝骨关节炎软骨细胞CD44与骨桥蛋白表达的影响。方法：将软骨标本进行体外培养获取纯化的软骨细胞,分为3组：空白对照组、透明质酸干预组（100 mg/L）和透明质酸酶干预组（200 mg/L）。培养48 h后,采用Real-time Q PCR检测软骨细胞骨桥蛋白mRNA,CD44mRNA表达水平。用SPSS 17.0统计软件包分析骨桥蛋白mRNA和CD44 mRNA经透明质酸干预前后表达的差异。结果与结论：透明质酸组的骨桥蛋白mRNA表达水平较空白组高,透明质酸酶组的骨桥蛋白mRNA表达水平较空白组低;透明质酸组及透明质酸酶组的CD44 mRNA表达水平均较空白组低。结果提示透明质酸可以上调骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白的表达;透明质酸在骨关节炎软骨细胞内对CD44表达的影响具有双相性,其影响结果可能与透明质酸的相对分子质量有关。     

JAK2/STAT3信号转导通路参与调节IL-6介导的肺腺癌细胞株中MMP-10的表达

目的研究Janus激酶2（JAK2）及信号转导和转录激活子3（STAT3）途径对IL-6介导的肺腺癌细胞（A549）中基质金属蛋白酶10（MMP-10）表达调节的作用,探讨MMP-10的调节机制。方法待生长状况良好的A549细胞融合生长至50%～70%时,分别用0,12.5,25,50ng/mlIL-6及AG490（JAK2特异性抑制剂）＋25ng/mlIL-6处理A549细胞24h后,采用实时RT-PCR技术检测JAK2、STAT3和MMP-10mRNA的表达水平;应用Westernblot检测MMP-10蛋白的表达水平。结果25ng/mlIL-6组STAT3mRNA表达水平较0ng/ml组高43.87%（P〈0.05）,AG490＋25ng/mlIL-6组较25ng/mlIL-6组低36.73%（P〈0.01）;AG490＋25ng/mlIL-6组MMP-10mRNA表达水平较25ng/mlIL-6组高43.21%（P〈0.01）;12.5,25,50ng/mlIL-6组的MMP-10蛋白水平显著高于0ng/ml组（P〈0.05）,且峰值出现在25ng/ml组;与25ng/mlIL-6组相比,MMP-10蛋白水平在AG490＋25ng/mlIL-6组明显降低（P〈0.05）。结论JAK2/STAT3信号转导途径可能参与调节IL-6介导的肺癌细胞株A549中MMP-10的表达。     

老年脑梗死患者肺炎衣原体感染与血清基质金属蛋白酶-9的相关性

目的 探讨老年脑梗死患者并发肺炎衣原体感染与血清基质金属蛋白酶-9（serum matrix metalloproteinase-9,MMP-9）水平的相关性。方法 老年脑梗死患者106例,依据是否合并肺炎衣原体感染分为感染组48例,非感染组58例,分别检测2组入院即刻以及入院第2、4、6、13天血清MMP-9水平,分析2组MMP-9水平差异及MMP-9水平与肺炎衣原体感染的相关性。结果 感染组入院即刻及入院第2、4天MMP-2水平（（346±119）、（459±147）、（354±109）μg/L）高于非感染组（（226±85）、（357±137）、（278±105）μg/L）（P〈0.05）,2组入院第6、13天MMP-9水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 老年脑梗死患者并发肺炎衣原体感染与血清MMP-9水平有一定相关性。     

血浆基质金属蛋白酶-9与血管假性血友病因子浓度在急性脑梗死早期诊断中的意义

目的研究血浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血清血管假性血友病因子(vWF)浓度在急性脑梗死发病早期(6 h)的变化。方法检测脑功能损害体征持续存在1 h,年龄75岁患者的MMP-9、vWF浓度,根据最终诊断区分脑梗死组及非梗死组,比较MMP-9、vWF浓度的变化。结果急性脑梗死早期外周血MMP-9、vWF水平即有升高,如果以MMP-9160μg/L、vWF150μg/L为标准对急性脑梗死早期(6 h)进行诊断,发病4～6 h的敏感性和特异性为92.3%和92.9%。结论以MMP-9160μg/L、vWF150μg/L为标准对急性脑梗死发病后4 h诊断有较高的特异性和敏感性,值得临床推广。     

Independent expression of fibril-forming collagens I, II, and III in chondrocytes of human osteoarthritic cartilage.

Normal and osteoarthritic human articular cartilage was investigated by in situ hybridization for expression patterns of the fibrillar collagens type I, II, and III to evaluate phenotypic changes of articular chondrocytes related to the disease. In 11 out of 20 samples, a defined subset of chondrocytes in the superficial and upper middle zone of osteoarthritic cartilage showed significant levels of cytoplasmic alpha 1 (III) mRNA, whereas strong signals of alpha 1 (II) mRNA were found in the upper and lower middle zone, partially overlapping with the zone of alpha 1 (III) mRNA-expressing cells. The extent of type II and III collagen expression depended on the integrity of the extracellular matrix surrounding the chondrocytes, and the location within the articular cartilage. No alpha 1 (I) mRNA was detectable in osteoarthritic original articular cartilage. The alpha 1 (I) probe did, however, reveal signals in pannus-like tissue, osteophytes, and bone cells. In normal articular cartilage, no detectable levels of cytoplasmic mRNA for alpha 1(I), alpha 2 (I), or alpha 1 (III) were seen. Using specific mono- and polyclonal antibodies, we found deposition of type III collagen but hardly any of type I collagen in the superficial zone of osteoarthritic cartilage that is consistent with the in situ hybridization results. These results indicate a phenotypic alteration in a defined subset of chondrocytes in conditions of diseased cartilage, expressing and synthesizing collagen type III independently from type I collagen, but in part simultaneously with type II collagen.     

大鼠髁突软骨细胞凋亡与胰岛素样生长因子1的影响

背景：胰岛素样生长因子 1 参与了髁突软骨生长与改建,是软骨发育关键因子。目的：探索胰岛素样生长因子 1 对体外培养大鼠髁突软骨细胞凋亡的作用,以及对凋亡相关因子 Bcl-2 和 BaxmRNA 及蛋白表达变化的影响。方法：体外培养并鉴定出生后 1,28 d 大鼠髁突软骨细胞后,将每个年龄组的髁突软骨细胞分别分为实验组和对照组。饥饿培养 24 h 后,实验组加入 100 μg/L 重组大鼠胰岛素样生长因子 1 细胞因子孵育 48 h,对照组正常培养。结果与结论：与对照组相比,实验组加入重组胰岛素样生长因子 1 后,髁突软骨细胞数量增多,增殖速度显著增加（P 〈 0.05）。实时 PCR 和 Western blot 检测显示,加入重组胰岛素样生长因子 1 培养 48 h 后,各组髁突软骨细胞中 bcl-2 mRNA 和蛋白表达增加,bax mRNA 和蛋白表达减少（P 〈 0.05）。提示胰岛素样生长因子 1 可以促进新出生及青春期大鼠髁突软骨细胞增殖,抑制其凋亡,并可能通过 Bcl-2 和 Bax 介导抑制凋亡。