甲胎蛋白异质体在唐氏综合征筛查中的价值

目的评价甲胎蛋白（AFP）异质体在唐氏综合征筛查的作用。方法留取孕中期15例经确诊为唐氏综合征孕妇及50例正常孕妇的血清,运用放射免疫法及凝集素亲和电泳免疫印迹法分别测定血中AFP含量及AFP异质体（AFP-L2/3）的比率,评估AFP-L2/3比率与唐氏综合征的相关性。结果唐氏综合征孕妇血清中AFP的含量低于正常孕妇（39.3±17.5ng/ml vs54.5±16.5ng/ml,P〈0.05）,而AFP-L2/3的百分比高于正常孕妇血清中AFP-L2/3的百分比（41.8±6.9%vs35.5±4.4%,P〈0.05）。结论甲胎蛋白异质体的百分比可作为唐氏综合征筛查的血清学指标之一。     

新微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体对肝癌诊断的研究

目的探讨采用新型微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在良恶性肝病及肝癌预警中的作用。方法应用装有耦联了小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离甲胎蛋白异质体,采用化学发光法检测AFP和AFP-L3,并计算AFP-L3在AFP中的含量比例[AFP-L3(%)],分析AFP-L3(%)升高者与良恶性肝病的关系。结果肝细胞癌患者血清中AFP-L3(%)明显高于其他肝病患者,P值均<0.001,以AFP-L3(%)≥10作为诊断指标,在已经确诊为肝癌的患者中灵敏度是90.9%。结论微量离心柱法检测甲胎蛋白异质体AFP-L3在预警肝细胞癌诊断及鉴别诊断中具有重要临床价值,特别是对低甲胎蛋白含量的肝病鉴别具有重要临床价值。     

用单克隆抗体ELISA一步法检测人血清甲胎蛋白

<正> 检测人血清中甲胎蛋白(AFP)含量的方法,历经不断改进,其灵敏度已由 30000ng/ml提高到 0.1～10ng/ml,阳性率也从70％提高到90%以上。但目前所用抗体大多为异种动物免疫血清,生产工艺复杂,批间差异较大,难以标准化。单克隆抗体(McAb)的问世,为免疫学诊断提供了良好的工具。本文运用两种AFP McAb建成检测AFP的ELTSA一步法,以期开发新一代诊断试剂。     

ELISA法检测甲胎蛋白异质体用于肝癌诊断的探讨

目的应用ELISA检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3),并探讨AFP-L3浓度在HCC组与良性肝病组诊断与鉴别诊断的价值。方法用ELISA法检测137例AFP阳性的肝病患者血清AFP-L3浓度,用ROC曲线分析AFP-L3。结果 92例HCC患者AFP-L3浓度为109.04±62.51ng/mL,明显高于45例良性肝病组(25.96±49.43ng/mL)P0.001。HCC的ROC曲线面积为0.819,以AFP-L3浓度37.89ng/mL为临界值,分析HCC患者与良性肝病患者AFP-L3浓度异常的敏感性为83.7%,特异性为88.9%,诊断正确率为85.4%。结论用ELISA法检测AFP-L3浓度对HCC诊断与良性肝病鉴别诊断有较高的临床价值,操作简便,费用低廉。     

Detection of AFP -L3 in Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma

目的 应用ELISA检测甲胎蛋白异质体(AFP-L3),并探讨AFP-L3浓度在HCC组与良性肝病组诊断与鉴别诊断的价值.方法 用ELISA法检测137例AFP阳性的肝病患者血清AFP-L3浓度,用ROC曲线分析AFP-L3.结果 92例HCC患者AFP-L3浓度为109.04±62.51ng/mL,明显高于45例良性肝病组(25.96±49.43ng/mL)P＜0.001.HCC的ROC曲线面积为0.819,以AFP-L3浓度37.89ng/mL为临界值,分析HCC患者与良性肝病患者AFP-L3浓度异常的敏感性为83.7％,特异性为88.9％,诊断正确率为85.4％.结论 用ELISA法检测AFP- L3浓度对HCC诊断与良性肝病鉴别诊断有较高的临床价值,操作简便,费用低廉.     

亲和吸附纯化甲胎蛋白异质体方法的建立

目的 利用小扁豆凝集素(LCA)建立基于微量离心柱的甲胎蛋白异质体L3(AFP-L3)的纯化方法.方法 采用硫酸铵分级沉淀的方法由小扁豆中提取凝集素,偶联到活化的琼脂糖凝胶4B(sephrose 4B)上,灌注离心柱,制备AFP-L3亲和吸附离心管.血清加入离心管后经吸附和洗脱,便可获得纯化的AFP-L3.随机选取10例AFP阳性患者血清,应用亲和吸附纯化法纯化AFP-L3后应用电化学发光法检测,并与传统的亲和免疫电泳方法相比较.结果 10例患者血清经纯化后,AFP-L3检测结果有8例＞5 ng/ml,亲和免疫电泳有6例呈现阳性反应.结论 成功建立基于微量离心柱的亲和吸附纯化AFP-L3的方法,该方法具有较高的灵敏度,重复性好并且操作简便更利于临床实验室应用.     

甲胎蛋白异质体联合甲胎蛋白、高尔基体蛋白73在原发性肝癌中的诊断价值研究

目的 探究甲胎蛋白异质体联合甲胎蛋白、高尔基体蛋白73对原发性肝癌的诊断价值.方法 对肝癌患者214人(其中手术切除肿瘤后的患者54人),肝硬化患者242人,慢性肝炎患者236人,健康体检者88人的血清样本用酶联反应吸附实验测定甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体和高尔基体蛋白73的水平.结果 原发性肝癌患者甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体和高尔基体蛋白73的水平明显高于肝硬化患者、慢性肝炎患者以及健康体检者.已切去肿瘤的患者测定出AFP、甲胎蛋白异质体、GP-73水平较未切去者低.单纯用肿瘤标志物检测,效果欠佳.结论 甲胎蛋白异质体联合甲胎蛋白、高尔基体蛋白73的水平与原发性肝癌的发生有密切的联系,因此对原发性肝癌的早期检出和疾病的治疗具有积极影响.     

免疫层析法快速测定鸡肉和鸡蛋中磺胺类药物残留

目的：用免疫层析试纸条法快速测定鸡蛋及鸡肉中磺胺类药物残留。方法：采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金标记抗磺胺类药物母核结构单克隆抗体,磺胺类药物竞争物包被于硝酸纤维素膜,制成免疫层析快速检测试纸条。结果：该方法可以在15分钟内完成对磺胺类药物的半定量残留检测,检测磺胺间甲氧嘧啶（SMM）、磺胺对甲氧嘧啶（SMD）、磺胺二甲氧嘧啶（SDM）的灵敏度为10ng/ml,肉眼判定检测限为20ng/ml,样品中回收率在85%～95.6%之间;检测磺胺嘧啶（SDZ）的灵敏度为10ng/ml,肉眼判定检测限为40ng/ml,样品中的回收率在44.8%～60.9%之间。用本方法与高效液相色谱法（HPLC）对来自动物试验的鸡肉和鸡蛋样品进行对比检测,具有较高的符合率。结论：该方法灵敏度高,检测快速、准确,无需特殊仪器设备,可作为磺胺类药物残留的快速筛选方法。     

基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究

目的构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器。方法首先在玻碳电极（GCE）表面修饰一层羧基化碳纳米管（CNTs）,然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,最后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点。结果修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇。在优化的条件下（pH7.0,温浴时间25min）,制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25ng/ml内,检测限0.02ng/ml。结论成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法。     

塑料试管固相放射免疫法测定甲胎蛋白

本文将甲胎蛋白(AFP)特异的抗体IgG包被在塑料管内壁,建立了一种快速、简便、高灵敏、特异的固相竞争放射免疫分析(RIA)法测定AFP。标准曲线范围为10～800ng/ml,最小检出值和正常值均<10ng/ml。批内CV％为7.1％,批间CV％为10.3％。本文与液相RIA法平行测定61扮样品的AFP浓度(10.1～3030ng/ml)。经统计学处理,两者之间具有良好的直线相关,表明本文建立的方法可以替代液相RIA法测定AFP,并适用于大批样品和自动化检测。     

微量离心柱法分离检测AFP-L3在肝癌预警中的应用

本文利用微量离心柱法分离检测甲胎蛋白异质体（AFP-L3），在肝癌预警和早期诊断中具有重要价值。现报道如下。     

AFP电化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种快速、特异、灵敏的检测人甲胎蛋白（AFP）的电化学发光免疫分析法。方法用链霉亲和素包被的磁性微粒、生物素标记的抗AFP单克隆抗体、钌复合物标记配对的抗AFP单克隆抗体组成AFP电化学发光免疫分析法试剂,在电化学发光免疫分析仪上对其准确性、灵敏度、特异性等效能进行方法学评价,同时用所建方法与进口的同类电化学发光免疫分析法试剂（Roche）对80例肝癌患者血清AFP检测结果进行相关性分析。对218名健康志愿者血清AFP进行了正常值调查。结果自建电化学发光免疫分析法检测AFP的批内精密度在2.8%～4.5%之间,批间精密度在3.2%～9.8%之间,分析灵敏度为0.605ng/ml。与进口同类试剂比较,直线回归方程为y=0.9936x-0.4566（r=0.9877,P〈0.05）。分析测量范围为0.605～1452.0ng/ml,自建试剂与CEA和CA199无交叉反应。自建电化学发光免疫分析法检测AFP的正常参考值为〈6.7ng/ml。结论自建AFP电化学发光免疫分析法特异性高,灵敏度好,与进口同类试剂检测结果相关性达0.9877。确定的实验室正常参考范围接近进口同类试剂,具备产业化的潜能。     

甲胎蛋白异质体及其在原发性肝癌临床诊断中的应用

甲胎蛋白异质体作为较甲胎蛋白更特异、敏感性更好的肝癌标记物已为人们所认识,它在原发性肝细胞癌的鉴别诊断、早期诊断、预后及术后预后中的临床应用为提高肝癌病人的存活率起了重要作用.本文主要介绍AFP异质体的结构、检测方法及临床应用.     

C肽光激化学发光免疫分析试剂盒的研制

目的:研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清C肽(C peptide)的快速检测试剂盒.方法:采用夹心法建立C peptide AlphaLISA试剂盒.结果:自制C肽试剂盒灵敏度为0.06ng/ml.,可测范围为(0.06～22)ng/ml.批内与批间的精密度分别为4.0%～4.8%,5.6%～...     

血清AFP、AFP-L3及GP73在原发性肝癌诊断和鉴别诊断中的应用评价

目的研究血清甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)和高尔基体蛋白73(GP73)单独和联合检测在原发性肝癌诊断和鉴别诊断中的应用价值。方法选取中国科技大学附属第一医院2017年1月至2019年6月共263例血清标本,其中原发性肝癌患者76例、乙型肝炎肝硬化失代偿期患者40例、乙型肝炎肝硬化患者44例、慢性乙型肝炎患者43例、乙肝病毒携带者30例及同期健康体检者30例,采用酶联免疫分析法检测血清标本GP73水平,采用微量离心柱法分离血清标本的AFP-L3,用罗氏化学发光法同时检测AFP与AFP-L3水平,并计算AFP-L3在AFP中的比率。比较6组AFP、AFP-L3、GP73的表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析,比较三个项目单项和联合检测的灵敏度、特异性及准确率。结果AFP和GP73、AFP-L3在PHC患者的血清中均可被检测,且血清水平均显著高于其他各组(P<0.01),但PHC和LC失代偿期GP73均为高表达,分别为203.75ng/mL和157.61ng/mL(两者比较P>0.05)。单项指标分析,AFP的灵敏度最高(77.60%),ROC曲线下面积最大(0.803),AFP-L3的特异性和准确率最高,分别为98.90%和82.89%;在联合检测中,AFP联合AFP-L3特异性达到98.40%,准确率为85.38%;结论单项检测AFP的灵敏度较高,AFP-L3的特异性高,对于肝癌与非肝癌的鉴别诊断非常有价值;而联合检测中,AFP联合AFP-L3组合最佳,有助于临床医生减少误诊率,降低职业风险。     

直接竞争ELISA检测大米样品中的重金属镉

目的直接竞争ELISA方法检测大米样品中重金属镉。方法用纳米Ti O2对微波消解处理的大米样品中的重金属镉进行富集,通过比较不同p H值和不同洗脱体积来优化纳米Ti O2富集方法,再用直接竞争ELISA检测重金属镉的含量。结果在p H为9时,纳米Ti O2对重金属镉有良好的吸附性,20 mg/ml的EDTA·2Na可将纳米Ti O2吸附的镉定量洗脱。用纯化后的镉单克隆抗体建立直接竞争ELISA检测方法,并进行灵敏度和特异性分析,其灵敏度(IC50)为19 ng/ml,检测限(IC10)为2.1 ng/ml,检测范围(IC20~IC80)为3.6~98.2 ng/ml。用优化后的直接竞争ELISA对富集洗脱后的镉溶液进行检测,检测效果满足国家检测标准。结论本研究对6份市售大米样品采用微波消解和富集,通过直接竞争ELISA检测其镉含量,所得结果与仪器法测定结果一致,可用于实际样品的快速检测。     

原发性肝癌患者血清中AFP-L3、GP73检测的评价

目的探讨血清中甲胎蛋白异质体(AFP-L3)和高尔基体蛋白73(GP73)在原发性肝癌(PLC)诊断中的价值。方法选择137例肝病患者血清,依据病理诊断将所有病例分为PLC组与良性肝病组,采用ELISA法检测血清AFP-L3、GP73浓度,分析两组病例AFP-L3以及GP73浓度差异,运用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析AFP-L3、GP73在PLC鉴别诊断中的价值。结果 PLC组AFP-L3浓度(109.04±62.51ng/mL)明显高于良性肝病组(25.96±49.43ng/mL),P<0.001;绘制AFP-L3浓度诊断PLC的ROC曲线,曲线下面积为0.819,以AFP-L3浓度37.89ng/mL为临界值,AFP-L3浓度诊断PLC的敏感性为83.69%,特异性为88.88%。PLC组GP73浓度(131.27±26.15ng/mL)明显高于良性肝病组(80.77±16.38ng/mL),P<0.001;绘制GP73浓度诊断PLC的ROC曲线,曲线下面积为0.826,以GP73浓度110.46ng/mL为临界值,GP73诊断PLC的敏感性为76.09%,特异性为84.44%。结论应用AFP-L3浓度在PLC与良性肝病鉴别诊断中具有较高的灵敏度与特异度,而采用GP73浓度诊断PLC虽敏感性较低,但却具有很高的特异性。     

血清孕酮放射免疫测定试剂盒的研制

制备人孕酮放射免疫试剂盒的特异性抗血清,首先要合成孕酮-11α-半琥珀酰-BSA结合物,形成完全抗原,依据动物体的免疫反应规律,制备高质量的抗孕酮抗血清。采用氯胺T法标记孕酮;TCL分离。制备去人激素血清,建立了竞争结合分析法。通过方法学和可靠性的测定,说明该方法具有较高的灵敏度、特异性、准确性,相关系数r=0.996。检测了50名正常中、青年男子,测定值为0～1.85ng/ml,正常女性范围:滤泡期为0.14～1.65ng/ml,黄体期2.07～32ng/ml,绝经期0.2～1.7ng/ml,妊娠期:随着妊娠月份的增加,孕酮浓度也增加,最高可达280ng/ml。经临床验证,该试剂盒符合稳定、可靠、灵敏、适用的要求。     

亲和电泳酶免疫法快速测定AFP异质体

目的 建立AFP异质体快速检测新方法,以促进其在临床上的普及,方法。方法 采用亲和电泳结合单合隆双抗体夹心酶免疫分析法。结果 本法可在6h内得同结果,灵敏度为1ng/mL,高、中、低浓度AFP样本的结合型AFP（AFP－h),平均CV为5.57%。临床应用表明,总AFP主其异质体（AFP－h）诊断原发性肝癌（PHC）的敏感性分别为73.5%和90.2%,特异性分别为63.5%和89.3%;准确度分别为84.6%和94.3%。结论 本法简便快速、使过去亲和交叉免疫电泳自显影法的70h缩短为6h,而且灵敏度高,重复性好;AFP-h百分比与AFP含量无关;AFP－h诊断PHC的敏感性、特异性和准确度均优于AFP,并具有排除转移性肝癌和肝血管瘤的功能。     

血清可溶性白细胞介素6受体的检测及其临床意义

以夹心ELISA方法检测30名正常对照者,22份可抽提核抗原(ENA)抗体阳性血清及49名Grave病患者血清sIL-6R水平.结果表明;本方法的灵敏度为80pg/ml,批内及批间误差分别为7.5%和9.6%.正常对照组、Grave病缓解组、Grave病未缓解组及ENA抗体阳性组的血活sIL-6R浓度分别为185.55±53.0ng/ml、191.65±62.0ng/ml、241.67±69.0ng/ml和264.86±108.53ng/ml.经统计学处理Grave氏病未缓解组和ENA抗体阳性组sIL-6R水平明显高于正常对照组对,Grave病缓解组与上常对照组血清sIL-6R浓度无差异提示slL-6R检测在ENA抗体产生中的作用和Grave病监测病情中的价值.