初发系统性红斑狼疮患者调节性T细胞的变化

目的 探讨初发系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4 T细胞中FOXP3和CD25的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞仪检测CD4 FOXP3 、CD4 CD25 、CD4 CD25high T细胞表达,同时检测CD4 FOXP3 T细胞中CD25及CD4 CD25highT细胞中FOXP3的表达.结果 活动组SLE患者CD4 CD25 T细胞显著低于对照组和低活动组(P＜0.05).活动组患者CD4 CD25highT细胞明显低于低活动组患者(P＜0.01).初发SLE患者CD4 FOXP3 T细胞明显高于对照组(P＜0.01).活动组SLE患者CD4 FOXP3 T细胞中CD25表达显著低于对照组和低活动组(P＜0.05).同时活动组SLE患者CD4 CD25highT细胞中FOXP3表达的平均荧光强度较对照组显著降低(P＜0.05).活动组患者治疗后CD4 CD25highT细胞显著增高(P＜0.05).结论 初发活动期SLE患者CD4 T细胞中CD25high和FOXP3表达不一致可能在SLE患者免疫失衡中发挥作用.     

急性髓系白血病患者外周血CD4+CD25highFOXP3+调节性T细胞变化及临床意义

目的:观察急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia,AML)患者外周血中调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg细胞)的变化,探讨其在AML发病中的作用及临床意义.方法:应用流式细胞术检测31例初诊AML患者(初诊组)、23例经化疗取得完全缓解患者(CR组)及20例健康人群(对照组)外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞、CD4+FOXP3+ T细胞占CD4+细胞的比例,同时还分析了外周血CD4+/CD8+比值、NK细胞及血清乳酸脱清酶(LDH)水平.结果:与对照组相比较,AML患者初诊组及CR组外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞和CD4+FOXP3+ T细胞均升高(P＜0.01).与初诊组相比较,CR组CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞无显著降低(P＞0.05),CD4+FOXP3+T细胞明显下降(P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞的升降与CD4+FOXP3+T细胞呈正相关(r=0.86;P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞及CD4+FOXP3+ T细胞比例与CD4+/CD8+比值呈负相关(r分别为-0.54、-0.52;P＜0.01)、与NK细胞比例呈负相关(r分别为-0.41、-0.43;P＜0.05),而与LDH水平呈正相关(r分别为0.51、0.57;P＜0.05).结论:CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞增多可能是AML患者免疫功能受抑的重要原因之一,其变化对于AML的预后判断有一定的意义.CD4+FOXP3+ T细胞的作用类似于CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞,其在AML疗效评价方面可能更有价值.     

Graves'病和桥本氏甲减患者外周血Th1、Th2、Th17、Treg细胞的变化

目的:探讨Graves'病和桥本氏甲减患者外周血中Th1、Th2、Th17细胞和CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的比例及其意义.方法:选择新诊断但未治疗的Graves'病(GD)患者25例、桥本氏甲减25例和正常对照者25例,通过流式细胞技术测定其外周血中Th1、Th2、Th17和CD4+CD25...     

CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞在与原因不明反复自然流产的相关性研究

目的探讨外周血中CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr）在原因不明反复自然流产（URSA）发病中的作用。方法应用三色荧光标记流式细胞术检测21例原因不明反复自然流产妇女（URSA组）、20例正常妊娠妇女（正常对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr及T细胞亚群水平的表达情况。结果URSA组妇女外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr表达率为（1.36±0.61）%,明显低于正常对照组（5.59±1.02）%,两组比较差异显著（P（0.05）,但两组相比较外周血中T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋水平无显著差异（P（0.05）。结论原因不明反复自然流产的发生可能与患者外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr数量减少有关。     

FOXP3基因对ApoE-knockout小鼠动脉粥样硬化的影响

目的:研究FOXP3对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法:构建FOXP3-siRNA慢病毒载体,免疫磁珠分选Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞。利用Westernblot方法对构建的载体进行功能性研究。实验动物分为阴性对照组、阳性对照组、FOXP3-siRNA慢病毒注射组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组。比较各组小鼠的斑块面积和不同组织Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目和功能;利用ELISA法检测各组脾细胞炎性因子浓度;利用RT-PCR和Westernblot分析不同组织中FOXP3转录水平和Foxp3蛋白表达水平。结果:与对照组和Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞注射组比较,FOXP3-siRNA慢病毒注射组小鼠斑块面积明显增加(P<0.05);Foxp3+ CD4+ CD25+Treg细胞的数目显著减少(P<0.05),功能下降;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平降低(P<0.05)。与对照组和FOXP3-siRNA慢病毒注射组比较,输注Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞组斑块面积显著减小(P<0.01);Foxp3+ CD4+ CD25+ Treg细胞的数目显著增加(P<0.01),功能增强;Foxp3蛋白表达和FOXP3转录水平增高(P<0.01)。结论:FOXP3可能通过调控体内炎症反应而产生抗动脉粥样硬化作用。     

核转录因子FOXP3在肺癌组织中的表达及意义

目的： 检测核转录因子FOXP3在不同病变肺组织中的表达，分析CD4+ CD25+ 调节性T细胞在不同病变肺组织中的浸润情况，并进一步探讨不同病理类型的肺癌组织中FOXP3表达的异同。方法: 使用RT-PCR及Western blotting方法，检测21例肺癌、7例支气管扩张、5例炎性假瘤、3例结核球以及15例病灶旁手术切除正常肺组织共153份标本中FOXP3 mRNA及蛋白的表达。结果: 肺癌、肺良性病变及病灶旁正常肺组织FOXP3 mRNA及蛋白的表达阳性分别为41/63、8/45、0/45（P<0.05），肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达，分析其平均吸光度A值之间有显著差异（P<0.01）。病灶旁正常肺组织FOXP3 mRNA及蛋白无表达。不同病理类型肺癌组织中均有FOXP3 mRNA及蛋白的表达，分析其平均吸光度A值之间无显著差异（P>0.05）。结论: FOXP3可作为CD4+ CD25+调节性T细胞的一种标志物。肺癌与肺良性病变组织均有FOXP3 mRNA及蛋白表达，FOXP3在肺癌组织中表达强于肺良性病变组织。     

II型胶原蛋白对CIA大鼠外周血CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞的影响

目的:观察Ⅱ型胶原蛋白对胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)的影响。方法:建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠类风湿性关节炎(CIA)模型。采用流式细胞术分别检测正常对照组、模型组、Ⅱ型胶原蛋白治疗组和雷公藤多苷组大鼠外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠外周血CD4+T细胞亚群中CD25+FOXP3+Treg的水平明显下降(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,Ⅱ型胶原蛋白治疗组大鼠外周血CD25+FOXP3+Treg显著升高(P<0.05或P<0.01);而CD25+FOXP3-T细胞和CD25-FOXP3+T细胞的水平则明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:II型胶原蛋白治疗CIA大鼠的可能途径是升高外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg的水平。     

颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞检测及意义

目的探讨颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg细胞)的变化及意义。方法入选50例颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者,同时以正常人群(30例)为对照。用流式细胞分析法测定外周血中CD4+CD25+FOXP3+占CD4+细胞的比例,定量PCR检测转录因子FOXP3的mRNA水平,ELISA检测外周血血浆Treg相关细胞因子IL-10、IL-6和TGF-β的表达。结果颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血Treg/CD4+T细胞比例和FOXP3的mRNA水平显著低于正常人群组。颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者的IL-10和TGF-β水平低于正常人群组,IL-6水平高于正常人群组。结论颅内动脉粥样硬化性脑梗死患者外周血Treg比例减少,对炎症反应的抑制作用减弱,由此可以推测Treg细胞参与了颅内动脉粥样硬化性脑梗死的发生发展。     

CD4~+CD25~+FOXP3~+Treg细胞与急性移植物抗宿主病的关系

背景:CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞具有免疫抑制作用,推测可能减少异基因造血干细胞后急性移植物抗宿主病的发生率。目的:观察粒细胞集落刺激因子动员前后,供者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比率变化,并探讨CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与异基因造血干细胞移植后发生急性移植物抗宿主病的关系。方法:以异基因造血干细胞移植受者90例及其供者为研究对象,供者皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子(5μg/kg),1次/12 h,连续5 d后,采集干细胞;分别于动员前后采集供者外周血,流式细胞仪检测其中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞含量,及受者接受移植物中此类细胞含量;根据接受CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞数分为高剂量组(细胞比例≥5%)及低剂量组(细胞比例5%),比较两组移植后急性移植物抗宿主病的发生率。结果与结论:供者在应用粒系集落刺激因子动员前后CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例分别为11.3%和1.5%,差异有显著性意义(P0.05);急性移植物抗宿主病阳性组所接受移植物中该群细胞比例为3.4%,阴性组为15.7%,差异有显著性意义(P0.05);移植造血重建后高剂量组急性移植物抗宿主病的发生率为18.4%,低剂量组急性移植物抗宿主病的发生率为48.1%,二者差异有显著性意义(P0.05)。因而,粒系集落刺激因子应用能降低正常人外周血中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例;CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞增加可以降低急性移植物抗宿主病的发生率。     

FOXP3的研究进展

在免疫调节机制中，CD4^＋CD25^＋Treg细胞和FOXP3转录因子成为近十年来的一个研究热点。CD4^＋CD25^＋Treg细胞在免疫调节中的重要作用已经得到了肯定，FOXP3被证实是CD4^＋CD25^＋Treg细胞的发育和功能起关键作用的调节子。目前认为，至少在鼠类，FOXP3是CD4^＋CD25^＋Treg细胞区别于CD4^＋CD25^-T细胞的一个较特异性的标志。影响FOXP3诱导表达的因素很多，FOXP3介导的免疫调节机制也涉及多种分子，对FOXP3的更深入研究有助于发挥其在免疫调节中的重要作用。     

Association between functional alterations of senescence and senility and disorders of gait and balance

OBJECTIVES:

Declines in cognition and mobility are frequently observed in the elderly, and it has been suggested that the appearance of gait disorders in older individuals may constitute a marker of cognitive decline that precedes significant findings in functional performance screening tests. This study sought to evaluate the relationship between functional capacities and gait and balance in an elderly community monitored by the Preventive and Integrated Care Unit of the Hospital Adventista Silvestre in Rio de Janeiro, RJ, Brazil.

METHODS:

Elderly individuals (193 females and 90 males) were submitted to a broad geriatric evaluation, which included the following tests: 1) a performance-oriented mobility assessment (POMA) to evaluate gait; 2) a mini-mental state examination (MMSE); 3) the use of Katz and Lawton scales to assess functional capacity; 4) the application of the geriatric depression scale (GDS); and 5) a mini-nutritional assessment (MNA) scale.

RESULTS:

Reductions in MMSE, Katz and Lawton scores were associated with reductions in POMA scores, and we also observed that significant reductions in POMA scores were present in persons for whom the MMSE and Katz scores did not clearly indicate cognitive dysfunction. We also demonstrated that a decline in the scores obtained with the GDS and MNA scales was associated with a decline in the POMA scores.

CONCLUSIONS:

Considering that significant alterations in the POMA scores were observed prior to the identification of significant alterations in cognitive capacity using either the MMSE or the Katz systems, a prospective study seems warranted to assess the predictive capacity of POMA scores regarding the associated decline in functional capacity.     

Alterations of regular and mature monocytes are distinct,and dependent of intensity and duration of exercise

Circulating monocytes comprise functionally distinct regular (CD14^bright+) and mature (CD141^low+) cells. Cell surface receptors were determined by three colour flow cytometry in 8 healthy control subjects. Compared to regular monocytes, mature monocytes had lower levels of the high affinity Fcy receptor 1 (CD64), complement receptor 3 (CDllb), CD45RO and higher levels for HLA-DR, LFA-1 (CD11a/CD18), interleukin-2 receptor (CD25), CD45RA and the Fc receptor 3 (CD16). Both regular and mature monocytes were measured before and up to three hours after four different types of exercise (Ex) in endurance trained athletes (n=9-16). Immediately after anaerobic exercise of I min with a maximal lactate concentration (la_max) of I2.3 (SD I.4) mmol · l^–1 and exhaustive exercise of 24 (SD 8) min with a maximal lactate concentration (la_max) of 7.4 (SD 2.6) mmol· l^–1 mature monocytes increased more than regular monocytes. Exhaustive endurance exercise of 87 (SD 21) min [la_max 3.7 (SD I.0)] led to a similar increase of regular and mature monocytes. 15–33 min after a 100km run regular monocytes increased significantly, whereas mature monocytes decreased. Up to three hours after the end of all exercises mature monocytes fell below pre-exercise values. In conclusion, duration and intensity of exercise alter distinct maturation stages of monocytes differently. It is probable that the avidity of adhesion molecules like LFA-1 to their endothelial ligands is increased to enable the firm attachment to the endothelium.     

男性乳腺发育症临床病理分析及雌,孕激素受体检测

对１１３例男性乳腺发育症进行临床病理分析。同时检测其中３０例乳腺组织中雌激素受体和孕激素受体分布情况，结果发现两者阳性率分别为８０．０％和８３．３３％。结合文献讨论了男性乳腺发育症的发生与高血清激素浓度及乳腺组织高受体水平的关系。     

T、B细胞表型抗体免疫组化敏感性与特异性分析

目的：探讨Ｔ、Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤免疫表型染色的特异性和交叉反应性。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法对６２例非霍奇金淋巴瘤进行ＣＤ２０、ＣＤ７４、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３免疫表型测定。结果：发现Ｂ细胞表型抗体ＣＤ２０和ＣＤ７４对Ｂ细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达８８．２％～１００％,但ＣＤ７４的特异性不强,与Ｔ细胞有２６．７％（４／１５）～３５．７％（５／１４）的交叉反应,而ＣＤ２０表现出高度的特异性,交叉反应为０。Ｔ细胞表型抗体ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３对Ｔ细胞非霍奇金淋巴瘤染色阳性率达８５．７％～１００％,但ＣＤ４５ＲＯ和ＣＤ４３对Ｂ细胞的交叉反应高达４０％（６／１５）～４７．１％（８／１７）,特异性不强,而多克隆抗体ＣＤ３与Ｂ细胞仅有５．９％（１／１７）的交叉反应,表现出明显的特异性。结论：提示在进行Ｔ、Ｂ细胞免疫表型划分时,应使用一组包括ＣＤ２０、ＣＤ７４,ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４３和ＣＤ３等抗体,ＣＤ３是一种具有高度敏感性和高度特异性的Ｔ细胞标志抗体,值得推荐。     

纳米水平分子成像与诊疗一体化研究进展与挑战

分子成像能以非侵入性的方式重现活体细胞的生理功能和生物学过程,提高疾病的早期和特异性诊断水平。纳米颗粒/材料具有物理性质可控性高、易于表面修饰、血液循环时间长和可功能化等优点,在疾病诊断与治疗中显示出巨大潜力。但如何阐明纳米材料多功能间的内在联系、解决其代谢及安全性等关键机制难题、实现纳米颗粒/材料多功能性到临床多功能性的转化,成为目前研究的短板。本文就纳米颗粒/材料在分子成像及诊疗一体化中的应用现状、最新研究进展、面临的挑战和未来前景进行述评。     

韧带和肌腱的生物力学和力学生物学研究

国际韧带和肌腱研讨会(The International Symposium on Ligaments and Tendons,ISI&T)于2000年在美国佛罗里达州奥兰多市首次召开。研讨会的宗旨是引起对韧带和肌腱研究的重视,并为生物工程师、生物学家、临床医师提供一个可以分享、评论、讨论韧带和肌腱最新研究成果的论坛。从2000年起,国际韧带和肌腱研讨会已经开展了15届;每届研讨会上涌现了大量令人振奋的关于当前韧带和肌腱研究热点和未来挑战的讨论。多年来,韧带和肌腱领域内的研究数量大幅增加,研究质量不断提升。为纪念《医用生物力学》杂志创刊30周年,本文总结过去30年里韧带和肌腱研究的主要进展,包括组织力学、力学生物学、损伤与治愈机制、组织修复和再生。     

Morphology and cytochemistry of leucocytes and thrombocytes of six species of fish

Cytochemical reactions of blood leucocytes and thrombocytes from six species of fish, rainbow trout (Onchorhynchus mykiss), coho salmon (Onchorhynchus kisutch), white sturgeon (Acipenser transmontanus), goldfish (Carassius auratus), striped bass (Morone saxatulis), and channel catfish (Ictalurus punctatus) were determined. Because the staining reactions were generally similar to the reactions found in mammalian leucocytes with similar morphological features, it is reasonable to classify fish leucocytes using the same terminology as is used for mammalian leucocytes. However, in some species leucocytes with features similar to mammalian eosinophils or basophils were not found. In goldfish leucocytes were found that had segmented nuclei and unstained, moderately refractile cytoplasmic granules. These cells were classified as segmented, granular leucocytes. Although these cells do not appear similar to any mammalian or avian leucocyte, the pattern of positive cytoplasmic alkaline phosphatase staining and negative granular staining is similar to that of equine eosinophils.     

小鼠肺细小动脉平滑肌细胞原代培养和鉴定以及低氧对其增殖与凋亡的影响

 目的：建立一种方法简单、重复性好、培养周期短的小鼠肺细小动脉平滑肌细胞（PASMCs）原代培养及传代方法,并初步探索低氧下小鼠PASMCs的增殖与凋亡情况。方法：无菌条件显微镜下分离小鼠肺细小动脉,经胶原酶I消化结合血清铺底法培养PASMCs。传代过程中弃除对细胞损伤大的离心步骤。倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学法和免疫荧光染色法进行α-平滑肌肌动蛋白鉴定,CCK-8显法及TUNEL法测定低氧下PASMCs的增殖与凋亡情况。结果：形态学观察、免疫细胞化学法和免疫荧光染色法鉴定均表明培养的细胞为PASMCs。与大鼠传代后的PASMCs典型的“峰-谷”样生长相比,传代后的小鼠PASMCs形态各异,没有此典型“峰-谷”规律。原代培养后5~7 d即传代,依据细胞活性可传3~5代。CCK-8法显示,与常氧组24 h比较,低氧组A值升高（P＜0.05）。TUNEL法结果显示低氧24 h后凋亡率较常氧组下降（P＜0.05）。结论：胶原酶I消化结合血清铺底法培养小鼠PASMCs,方法简单,培养周期短,重复性好,是一种值得推广的小鼠PASMCs体外培养方法。低氧可以促进小鼠PASMCs的增殖,抑制小鼠PASMCs的凋亡。