急性丙烯腈中毒3例报告

丙烯腈是有机合成工业中的重要单体,广泛地用于制造腈伦纤维、丁腈橡胶、合成树脂、ABS塑料及粘合剂等。随着产量与使用量的日趋增大,急性中毒时有发生。现将我所收治三例报告如下。病例介绍     

基质金属蛋白酶-2、E-钙黏附素和DNA含量与胃癌侵袭、转移的相关性研究

目的 :探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )、E-钙黏附素 (E- cadherin)在胃癌组织中的表达和癌细胞核 DNA含量与胃癌侵袭、转移的相关性。方法 :对 83例胃癌组织、2 5例正常胃组织进行了上述 3个指标的检测。结果 :正常胃黏膜中 MMP- 2呈阴性表达 ,E- cadherin呈强阳性表达。胃癌组织中 MMP- 2表达呈阳性 ,阳性率为 78.3% (6 5 / 83) ,MMP- 2表达强度与胃癌分化程度、淋巴结转移、浸润深度、弥漫性生长、 TNM分期显著相关 (P<0 .0 5 ) ;而 E- cadherin的阳性率明显减低为16 .9% (14 / 83) ,E- cadherin表达减低与胃癌细胞分化差、浸润深度、弥漫性生长、淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 5 )。 DNA指数在胃癌组织和正常胃组织分别为 1.4 7± 0 .2 3和 0 .97± 0 .15 (P<0 .0 1) ;DNA指数与胃癌的分化程度、浸润深度、生长方式、淋巴结转移有相关性 (P<0 .0 1)。结论 :MMP- 2、E- cadherin表达和 DNA含量与胃癌浸润转移密切相关 ,三者在癌组织中水平的变化属胃癌细胞重要的恶性生物学特征 ,其检测有助于对胃癌患者的转移及预后作出判断     

慢性髓系白血病中let-7a-3甲基化态势及其临床意义

目的：探讨慢性髓系白血病（CM L ）患者中let‐7a‐3启动子的甲基化态势及其临床意义。方法建立实时定量甲基化特异性PCR （RQ‐MSP）分别检测25例对照者及52例CML患者骨髓单个核细胞中let‐7a‐3启动子未甲基化水平。结果52例CM L患者未甲基化let‐7a‐3启动子（59．6％）为阳性,而对照组仅1例（4％）阳性,两组比较差异有统计学意义（ P＜0．01）。ROC曲线分析表明,let‐7a‐3启动子未甲基化作为辅助诊断CM L有较好的特异性。未甲基化let‐7a‐3启动子水平与BCR／ABL融合基因转录水平呈显著正相关（ r＝0．641,P＝0．001）,但与患者的白细胞、血小板计数及血红蛋白水平无明显相关性（ P＞0．05）。在慢性期和加速期let‐7a‐3未甲基化水平显著高于急变期。结论 let‐7a‐3基因低甲基化水平随疾病进展而降低。     

巨噬细胞移动抑制因子在重型乙型肝炎肝组织中的表达

感染HBV可引起重型肝炎，由于其高发病率、高病死率及发病机制复杂，始终是医学研究的热点。其发病机制主要涉及机体免疫应答、内毒素与细胞因子的共同作用。Tc细胞在清除HBV的同时，不但损伤肝细胞，其免疫复合物还可激活补体系统，引起肝细胞大片坏死，尤其是内毒素血症诱导单核-巨噬细胞产生大量TNF-α、IL-6和IL-1等，可引起肝细胞膜损伤、微循环障碍及弥散性血管内凝血（DIC），从而导致肝细胞缺氧、坏死。     

恶性冬眠瘤的临床病理和免疫组化及超微结构观察

目的：了解恶性冬眠瘤独特的临床病理和免疫组化及超微结构变化。方法：收集2例恶性冬眠瘤和4例粘液性脂肪肉瘤的临床资料,所有标本光镜常规切片观察,免疫组化染色检测CKp,SMA,RMA,MyOD1,S100,PCNA,p53。冬眠瘤和粘液性脂肪肉瘤各1例取新鲜组织做透射电镜观察。结果：恶性冬眠瘤与粘液性脂肪肉瘤有显著的组织学、免疫组化和超微结构的不同;例1与腺泡状软组织肉瘤的组织学和免疫组化改变相似,唯有超微结构不同。例2免疫组化与有腺泡样结构的肉瘤不同。结论：恶性冬眠瘤的诊断主要靠超微结构的观察和免疫组化染色。     

甲基化特异性PCR技术的质量控制及改进

目的:改进甲基化特异性PCR(MSP)技术并控制实验质量.方法:采用改进的MSP法检测正常胃粘膜及胃癌组织中eaveolin-1基因的甲基化状况.运用饱和酚-氯仿抽提法提取DNA,其中石蜡包埋组织连续切片厚度为8μm;采用热启动PCR:反应体系为25μL、变性温度设定为95.5℃、循环数设定为30.结果:新鲜组织较石蜡包埋组织更适于MSP实验,但福尔马林固定石蜡包埋组织同样可用于MSP实验,并且8μm厚的石蜡包埋组织能获得较完整的DNA链.热启动PCR效果良好:25μL体系敏感性优于50μL体系,95.5℃可以使含CpG岛的DNA链解链更完全,30个循环足以扩增小于150 bp的目的片段.结论:采用改进的MSP技术,可获得较好的DNA模板,提高实验的灵敏度和成功率,更适于甲基化的研究.     

实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病miR-125b的表达及临床应用

目的 采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qPCR)法检测急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)中微小RNA-125b(microRNA-125b,miR-125b)转录本含量,初步评价其在AML临床诊断中的意义. 方法 建立扩增miR-125b转录本的SYBR Green I染料法qPCR,对miR-125b转录本克隆质粒进行扩增,评价其在AML诊断中的特异性、重复性和灵敏性.并对69例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测并评价其临床相关性. 结果 该方法能定量检测骨髓标本中miR-125b的表达水平,熔解曲线呈单峰,在108～ 103 copies/μL范围内有良好的线性关系(R2=0.999)并且检测重复性良好.结果显示69例AML患者中miR-125b表达水平明显高于25例对照组,差异有显著统计学意义(P=0.001).在初发AML的不同亚型中,M3型的miR-125b表达水平高于其他亚型,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-125b表达水平与非M3型AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性(P＞0.05).4例初诊AML患者在获得完全缓解后miR-125b表达水平均较治疗前有所降低. 结论 所建立的实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测骨髓单个核细胞标本中miR-125b的表达水平,为进一步临床应用研究奠定了方法学基础.miR-125b异常高表达是AML中的一个常见分子事件,检测其表达可能有助于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测.     

甲基化特异性PCR检测PRAME基因启动子低甲基化30例及其临床应用

目的 建立实时定量甲基化特异性PCR(RQ-MSP)法检测急性髓系白血病(AML)患者黑色素瘤优先表达的抗原(PRAME)基因低甲基化水平,初步评价其临床意义.方法 用亚硫酸氢盐修饰后的基因组DNA为模板,建立EvaGreen染料法RQ-MSP检测PRAME基因低甲基化水平方法,检测18例(对照组)和30例(AML组)患者的骨髓单个核细胞中PRAME基因启动子低甲基化水平.结果 RQ-MSP融解曲线呈单一峰,标准品 5×107～5×102 copy/μL重复性良好;AML患者PRAME基因低甲基化水平(0.96～4 508.96,中位772.42)明显高于对照组(0～100.00,中位25.29),差异有统计学意义(P＝0.002).结论 建立的PRAME基因低甲基化RQ-MSP法特异性、重复性和灵敏性良好,可用于AML初诊和病情监测.     

离心前后乳糜血标本白蛋白测定比较

乳糜血标本是临床生化检测中最常见的不合格血液标本.乳糜微粒致血浆颜色呈乳白色或混浊状,可在光照射下生成云雾状的牛奶样浑浊,干扰采用分光光度法检测的许多生化测定项目.湿化学溴甲酚绿法测定血清白蛋白其原理是通过染料溴甲酚绿结合白蛋白形成蓝绿色络合物,于630 nm处测定吸光度值,计算样品中自蛋白浓度.     

急性髓系白血病患者外周血CD4+CD25highFOXP3+调节性T细胞变化及临床意义

目的:观察急性髓系白血病(Acute myelogenous leukemia,AML)患者外周血中调节性T细胞(Regulatory T cells,Treg细胞)的变化,探讨其在AML发病中的作用及临床意义.方法:应用流式细胞术检测31例初诊AML患者(初诊组)、23例经化疗取得完全缓解患者(CR组)及20例健康人群(对照组)外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞、CD4+FOXP3+ T细胞占CD4+细胞的比例,同时还分析了外周血CD4+/CD8+比值、NK细胞及血清乳酸脱清酶(LDH)水平.结果:与对照组相比较,AML患者初诊组及CR组外周血CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞和CD4+FOXP3+ T细胞均升高(P＜0.01).与初诊组相比较,CR组CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞无显著降低(P＞0.05),CD4+FOXP3+T细胞明显下降(P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞的升降与CD4+FOXP3+T细胞呈正相关(r=0.86;P＜0.01).CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞及CD4+FOXP3+ T细胞比例与CD4+/CD8+比值呈负相关(r分别为-0.54、-0.52;P＜0.01)、与NK细胞比例呈负相关(r分别为-0.41、-0.43;P＜0.05),而与LDH水平呈正相关(r分别为0.51、0.57;P＜0.05).结论:CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞增多可能是AML患者免疫功能受抑的重要原因之一,其变化对于AML的预后判断有一定的意义.CD4+FOXP3+ T细胞的作用类似于CD4+CD25highFOXP3+ Treg细胞,其在AML疗效评价方面可能更有价值.