HCV-RNA和抗-HCV的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义

目的:探讨抗-HCV和HCV-RNA的联合检测在丙型肝炎确诊中的临床意义。方法:采用ELISA法检测抗-HCV及实时荧光定量PCR检测HCV-RNA。结果:在急性丙型肝炎组中抗-HCV和HCV-RNA同时阳性所占百分率(29.8%)显著低于慢性丙型肝炎患者(62.3%)(P<0.05);抗-HCV阴性和HCV-RNA阳性在急性丙型肝炎组所占百分率(58.3%)显著高于慢性丙型肝炎患者(24.6%)(P<0.05);经相关性分析,ALT含量与HCV-RNA含量呈正相关性(r=0.725,P<0.05)。结论:临床抗-HCV和HCV-RNA的联合检测有助于丙型肝炎的早期明确诊断。     

基因扩增产物的固相杂交-酶联显色方法的建立

建立基于基因扩增技术的简便、快速的病毒核酸定量检测方法．将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的病毒基因产物,与通过共价键结合在微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交,然后通过辣根过氧化物酶标记的抗生物素进行酶联显色,读取光密度值．应用本方法对血清中乙型、丙型肝炎病毒核酸定量检测,灵敏度分别可达１－５拷贝／反应．此方法简便、快速、特异性好、敏感性高、半定量指标客观,可广泛应用于肝炎病毒感染的临床诊断和疗效评价．     

延边地区丙型肝炎患者合并TT病毒感染的检测

检测丙型肝炎患者血清标本中的TT病毒 (transfusiontransmittedvirus,TTV) ,了解延边地区丙型肝炎患者合并TTV感染状况。采用ELISA检测抗TTVIgG和巢式PCR检测丙型肝炎病毒 (HCV)感染患者血清中TTVDNA。采用全自动生化分析仪检测患者血清谷氨酸氨基转移酶 (ALT)和谷氨酸草酰乙酸氨基转移酶 (AST)。 4 5例丙型肝炎患者抗TTVIgG阳性率为 37.8% (17/45 ) ,巢式PCR阳性率为 4 2 .2 % (19/45 )。延边地区HCV感染患者重叠感染TTV较常见。     

皖南地区丙型肝炎病毒治疗前后HVR1区碱基变异数量的研究

目的研究皖南地区丙型肝炎病毒治疗前后高变区1(HVR1)碱基变异数量与病情变化和治疗效果之间是否具有相关性。方法应用速率法和荧光定量PCR法,检测皖南地区141例慢性丙型肝炎患者血清ALT水平和HCV RNA的载量。应用RT-PCR法进行HCV基因型和治疗前后的HVR1区域序列的检测。结果 141例患者的血清ALT与HCV RNA两指标间采用Spearman等级相关分析显示,rs=0.213,P=0.011,差异具有统计学意义,存在正相关。通过HCV基因1型、2型和未分型3组的HVR1碱基变异数量的单因素方差分析,显示组与组之间差异具有统计学意义。结论慢性丙型肝炎患者治疗前后的HVR1序列碱基变异数量的分析,对治疗效果、病情变化及预后发展等方面的评估具有重要的指导意义。     

一株丙型肝炎病毒缺陷株NS5A基因片段的序列分析

Ｑ丙型肝炎是由丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）引起的一种严重的传染病。丙型肝炎病毒主要通过输血和应用不洁的血液制品传播,所以利用敏感、特异的检测方法筛选献血员对丙型肝炎的预防尤为重要。现在第二代ＨＣＶ检测试剂已大批应用,加入ＮＳ５Ａ抗原的第三代试剂也正在研制中...     

丙型肝炎病毒基因分型研究进展及临床意义

丙型肝炎是经血或血制品传播的急慢性肝炎类疾病,可转化为肝硬化或肝癌.其致病因子丙型肝炎病毒是一种高异质性RNA病毒,可根据其基因变程度的不同分为多个基因型与亚型,其基因分型与地理分布,病情进展及干扰素的治疗效果有关,近年来发展出了多种检测基因分型的方法.本文就近年来丙型肝炎基因分型的各种检测方法作一比较并综述了基因分型的临床意义,为临床对各种检测方法的选择提供一定的依据.     

应用PCR方法检测部分血液制品中HCV-RNA

应用市售丙型肝炎ＰＣＲ检测试剂盒,对１９９４ １９９６年用不同病毒灭活工艺生产的人凝血因子类制品、人静注丙球和人血白蛋白进行ＨＣＶ ＲＮＡ检测。结果表明,检测六种血液制品共２１批,１批阳性,占４８％。     

巢式荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统HCV方法的构建

目的 建立丙型肝炎病毒5′NCR基因的巢式荧光定量RT-PCR检测方法 ,用于中枢神经系统感染超低浓度HCV的准确和快速定量检测.方法 选择高度保守区5′NCR基因片段,设计并合成相应的特异性引物和探针,建立巢式荧光定量RT-PCR检测中枢神经系统感染样本中的超低浓度HCV正负链RNA的方法 .并对32例血清HCV抗体检查阴性的病毒性脑炎患者脑脊液有核细胞和外周血单个核细胞(PBMC)进行检测.结果 可特异性地检出脑脊液有核细胞及PBMC中HCV正负链RNA,最低检出浓度均可达7.85 copies/μl,与其他单股正链RNA病毒如登革热病毒(DEV)无交叉反应.32例血清HCV抗体检查阴性样本脑脊液有核细胞和PBMC中 HCV 5′NCR正链片段阳性的分别为1例(1/32)和2例(2/32),负链片段阳性的分别为1例(1/32)和0例(0/32).结论 本方法 的构建适用于中枢神经系统感染超低浓度HCV正负链RNA检测,且快速有效、敏感性和特异性较高,不易出现假阳性,可有效提高检出率,进一步完善目前临床常规检测HCV的方法 .     

诊断丙型肝炎的第二代酶标试剂简介

<正>丙型肝炎是世界性流行疾病,危害很大,中老年患病率较高,正常人群中平均0.3％抗—HCV阳性。主要以接触、输液方式传播,在输液性肝炎中,90％以上是丙型肝炎。丙型肝炎感染后,潜伏期为2—26周不等,急性丙型肝炎临床症状较轻,重症丙型肝炎较为少见,但发展成慢性肝炎的比例较大,并可发展成肝硬化和肝癌。过去对丙型肝炎的诊断主要采用     

慢性丙型肝炎患者治疗前后血清中IL-18、IFN-γ及IL-4的表达及意义

目的:研究慢性丙型肝炎患者治疗前后血清中白介素-18(IL-18)、干扰素-γ(IFN-γ)及白介素-4(IL-4)的表达情况,探讨IL-18、IFN-γ在及IL-4在慢性丙型肝炎发病中的作用及可能临床意义。方法:酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例正常人,42例慢性丙型肝炎患者治疗前后血清中IL-18、IFN-γ在及IL-4水平。结果慢性丙型肝炎患者血清IL-18表达高于健康对照组(380.3±27.2pg/mlvs104.1±10.9pg/ml,P<0.05),血清IFN-γ表达也高于健康对照组(3.2±0.4IU/mlvs1.2±0.2IU/ml,P<0.05),而慢性丙型肝炎患者与健康对照组间IL-4表达无统计学差异(23.8±2.7pg/mlvs23.5±2.9pg/ml,P>0.05)。慢性丙型肝炎患者血清IL-18表达与谷丙转氨酶具有正相关性(r1=0.701,P<0.05);IFN-γ表达与谷丙转氨酶均具有正相关性(r2=0.629,P<0.05)。治疗前慢性丙型肝炎患者应对组血清中IL-18及IFN-γ表达高于无应答组(380.3±27.2pg/mlvs280.1±19.8pg/ml,P<...     

丙型肝炎病毒临床检测方法的研究及临床意义

丙型肝炎病毒(HCV)是输血后肝炎的主要病原体,丙型肝炎易复发和慢性化.检测HCV标志物,可有效地筛选献血员,保证输血安全,降低丙型肝炎病毒感染率.本文就丙型肝炎病毒的检测方法以及其临床意义作一简要概述.     

丙型肝炎病毒(HCV)在组织内的检测及其应用意义

概述了检测组织中ＨＣＶ核酸与蛋白的各种方法以及ＨＣＶ在肝脏定位分布的特点,并总结了检测组织中的ＨＣＶ在丙型肝炎病变、肝细胞肝癌、ＨＣＶ抗病毒治疗效果和ＨＣＶ致病机理等方面研究的应用。     

应用基因重组抗原诊断丙型肝炎研究

丙型肝炎病毒(Hepatis C virus,HCV)感染者的血液中病毒含量极低,还没有适当的方法可以直接检测病毒。现在常用免疫学方法测定特异性抗体[1]或利用 PCR 技术检测病毒核酸。由于 HCV基因组变异高达33%,PCR检测易发生假阳性和假阴性。同时由于丙肝抗原高度的变异性[2],虽然目前ELISA方法应用广泛,但是单一的诊断抗原已不能满足临床要求,需要多价抗原联合应用作为诊断试剂。目前,在我国流行的丙型肝炎病毒主要是Ⅱ型和Ⅲ型,国外的丙型肝炎诊断试剂研制单位主要是以Ⅰ型为主[3],而且进口的丙型肝炎诊断试剂昂贵,不适合在我国大量使…     

树鼩驯养繁殖实验动物标准及丙型肝炎动物模型技术平台建设的探讨

目前用于生物医学研究的树鼩大多数来源于野生捕获,由于个体间的差异较大,其实验结果的均匀性和可重复性较差,亟待解决树鼩人工饲养设施条件、繁殖关键技术、动物质量标准等一系列基础科学问题。许多文献报道了树鼩与其他实验动物比较,在肝病研究中具有巨大的开发应用潜力,在丙型肝炎动物模型研究中,亟待解决丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养体系、HCV病毒感染剂量与感染途径、HCV病毒对树鼩体外、体内感染后病毒核酸检测、抗体检测和病理检测等技术方法的建立及动物模型评价标准问题。本文就上述问题系统性地进行初步报道,旨在为树鼩早日实现实验动物化和丙型肝炎疾病研究中应用提供科学依据。     

慢性丙型肝炎肝细胞及细胞器病变特点研究

目的观察不同炎症程度的丙型肝炎肝细胞及细胞器超微结构,了解不同炎症程度的丙型肝炎患者肝细胞超微结构特征。方法收集6例经肝穿刺活检病理确诊的轻度、中度、重度丙型肝炎肝组织标本各2例,同时选取2例肝移植中的正常供肝组织作为对照,对照光镜特点,对各病例电镜下的肝细胞器超微结构特点进行分析总结。结果光镜下观察到轻度慢性丙型肝炎以肝细胞水肿变性为主;中度慢性丙型肝炎以汇管区炎症为主伴淋巴滤泡形成;重度慢性丙型肝炎肝小叶内易见肝细胞点状坏死,纤维组织增生并可见弓形纤维或假小叶形成。电镜下观察到与正常肝细胞相比较,轻度慢性丙型肝炎病例中肝细胞胞浆内粗面内质网减少、滑面内质网增多;中度慢性丙型肝炎表现为肝细胞胞浆内脂滴稍增多,部分伴脂滴融合,胞浆内局灶可见胶原纤维;而重度慢性丙型肝炎的肝细胞内可见线粒体凝聚、融合和变性,糖原增多,脂滴进一步呈大泡型脂变并融合,细胞核内可见包涵体形成。结论不同炎症程度的丙型肝炎肝细胞具有不同的超微结构特征。     

乙型肝炎病毒e抗原定量检测的性能验证和临床应用探索

乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen, HBeAg)的定量检测对乙型肝炎临床诊疗具有一定的重要性,但其定量检测还未成为常规检验项目。本研究对HBeAg定量检测系统进行性能验证,比较HBeAg定量和定性检测的相关性和一致性,分析HBeAg定量结果和乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA, HBV DNA)的关系,为HBeAg定量检测在临床诊疗的应用提供依据。通过收集710例2019年3月至5月于复旦大学附属华山医院就诊的慢性乙型肝炎患者血清样本,参照美国临床实验室标准化协会(The Clinical & Laboratory Standards Institute, CLSI)相关文件的要求,对雅培ARCHITECTi4000SR全自动免疫分析仪检测的HBeAg定量试剂的精密度、分析灵敏度、线性范围/可报告范围、携带污染率进行验证和评价;采用化学发光微粒子免疫检测技术(chemiluminescence microparticle immuno assay, CMIA)对618例患者进行HBeAg定性和定量检测;采用荧光定量PCR对慢性乙型肝炎患者进行HBV DNA检测,比较HBV DNA和HBeAg定量结果的相关性。本研究证实HBeAg定量试剂检测性能验证结果良好;HBeAg定量和定性检测相关性良好;126例同时有HBeAg定量检测和HBV DNA定量检测的结果显示,两种方法呈正相关且一致性良好。HBeAg定量检测可用于常规实验室检测来辅助HBV感染的临床诊疗。     

全自动直接定量法与定量比值法检测红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶活性的比较

目的:与定量比值法比较,探讨全自动直接定量法检测红细胞葡糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)活性的可行性。方法:同时采用定量比值法(即硝基四氮唑蓝定量法)和全自动直接定量法,检测219例肝素抗凝静脉血标本的红细胞G-6-PD活性。结果:定量比值法检测G-6-PD缺乏的阳性率为9.13%,全自动直接定量法检测的G-6-PD缺乏阳性率为9.58%,两种方法检测结果无显著性差异(P>0.05)。结论:定量比值法简单易行,适用于卫生条件有限的基层医疗单位;全自动直接定量法快速准确,是一种可批量检测的理想筛选方法。     

miRNA qPCR检测方法研究进展及其应用

miRNA是目前国际研究的热点领域之一,而miRNA表达检测是miRNA研究的基础内容。针对miRNA序列短小的特点,开发出了多种检测方法,其中miRNA qPCR定量检测是应用最广泛的方法。就miRNA抽提,miRNA qPCR定量检测原理及miRNA qPCR定量检测流程包括引物设计、反应体系设置、内参基因筛选等方面进行了深入探讨,并对miRNA定量检测研究方法的发展趋势进行了展望,以期为研究者进行miRNA qPCR定量检测提供参考。     

丙型肝炎病毒感染标志检测临床意义的研究现状

随着丙型肝炎病毒分子生物学研究的深入，相继建立了多种ＨＣＶ感染标志的检测方法。本文就ＩｇＧ抗－ＨＣＶ，ＨＣＶＲＮＡ和ＩｇＭ抗－ＨＣＶ检测在丙型肝炎诊断，预后估计及抗病毒药物疗效评价方面的意义作简要综述。     

丙型肝炎病毒RNA和丙型肝炎病毒抗体在慢性丙型肝炎干扰素治…

干扰素是慢性丙型肝炎抗病毒治疗的首选药物。近年来,丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ和抗－ＨＣＶ检测方法的建立为干扰素疗效监测提供了新的手段。本文就这方面的进展作简要综述。