茭白壳提取物对小鼠溃疡性结肠炎的预防作用

本研究通过乙醇浸提、硅胶色谱层析得到茭白壳提取物（Zizania latifolia shell extract,Zlse）,探究其对小鼠溃疡性结肠炎的影响,并通过网络药理学对Zlse预防小鼠溃疡性结肠炎的机制进行初步分析。实验设置正常组、模型组、阳性对照组和Zlse低、中、高剂量处理组（Zlse-L组、Zlse-M组、Zlse-H组）,模型组、阳性对照组、Zlse组通过灌胃3.5%（质量分数）葡聚糖硫酸钠溶液建立溃疡性结肠炎模型,阳性对照组和Zlse组分别进行美莎拉嗪和Zlse灌胃处理,正常组和模型组给予0.5%（质量分数）羧甲基纤维素钠溶液灌胃,每天记录小鼠健康情况,进行疾病活动指数（disease active index,DAI）评分,比较6 组小鼠体质量变化率、DAI评分、结肠长度、苏木精-伊红染色切片、组织病理学评分、炎症因子（白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α））水平、髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活力、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活力;通过GeneCards、OMIM、TTD和DAVID数据库筛选关键靶点及重要京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）通路,构建“活性成分-靶点-KEGG通路”网络图。结果表明,相较于模型组,Zlse组体质量降低趋势显著减缓（P＜0.05）,各组结肠长度有所恢复,结肠损伤减轻,此外,Zlse组血清中各促炎症因子水平显著降低（P＜0.05）,结肠组织MPO活力显著降低（P＜0.05）,SOD活力显著升高（P＜0.05）;通过网络药理学分析获得8 个活性成分、77 个交集靶点和119 条KEGG通路,关键活性成分为小麦黄素及小麦黄素-4’-O-丁香醇醚,其中重要通路包括磷脂酰肌醇3-激酶/苏氨酸激酶信号通路、受体激活和活性氧积累等,与动物实验结果相印证。结果表明Zlse能够通过抑制促炎症因子的释放,调控结肠抗氧化防御能力,预防葡聚糖硫酸钠盐诱导的小鼠溃疡性结肠炎,且其功效与浓度呈正相关。     

基于网络药理学和分子对接探讨刺老苞防治骨质疏松症的作用机制

目的:基于网络药理学和分子对接探讨刺老苞防治骨质疏松症的作用机制。方法:通过色谱-质谱联用得到刺老苞药材的化学成分信息,然后利用Stitch数据库预测其作用的靶点。应用GeneCards等数据库获取与骨质疏松症相关的疾病靶点。通过去异存同得出两者之间的交集靶点,对交集靶点进行基因本体注释（GO）及通路富集分析（KEGG）,分子对接对预测出的核心靶点与关联化合物进行验证。结果:经色谱-质谱联用分析和数据库预测,获得159个活性成分及525个作用靶点,与1636个骨质疏松症相关靶点取交集得到150个交集靶点。通过PPI网络筛选出IL6、AKT1、MAPK1等10个关键靶点。GO分析显示生物功能578个,涉及基因调控、细胞增殖与凋亡、炎症反应等。KEGG分析显示通路127条,PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、HIF-1信号通路等可能为关键通路,乙肝、肺结核、类风湿关节炎、癌症等疾病也可能间接导致骨质疏松症。分子对接表明多数成分与关联靶点具有较好的对接能力,说明预测结果具有一定的可靠性。结论:刺老苞多种有效成分可通过促进成骨细胞的存活、增殖与分化,抑制破骨细胞的骨吸收,发挥对骨质疏松症的防治作用,PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路以及HIF-1信号通路在此过程中可能发挥重要作用,为今后分子机制的深入研究以及相应膳食补充剂的开发提供了参考。     

基于Meta分析桥接网络药理学小青龙汤治疗AECOPD疗效及作用机制

基于Meta分析和网络药理学,综合评价小青龙汤联合常规西医治疗慢阻肺急性加重期（AECOPD）的疗效,初步探讨其潜在作用机制。通过检索中国知网（CNKI）、万方（Wangfang）、维普（VIP）、PubMed、Cochrane Library、Web of Science等数据库,收集小青龙汤联合常规西医治疗AECOPD的随机对照试验,根据纳入和排除标准对所有文献进行筛选,采用RevMan 5.4 软件进行Meta分析;随后通过TCMSP数据库检索筛选小青龙汤活性成分及其对应靶点,绘制小青龙汤–化合物–靶基因网络,筛选关键化合物,在TTD数据库、GeneCards数据库、OMIM数据库、DrugBank数据库检索与COPD有关的靶点基因,然后利用Excel筛选化学成分靶点与疾病靶点的交集靶点,绘制韦恩图,将交集靶点导入String数据库构建PPI网络,将小青龙汤活性成分靶点与COPD共同靶点导入David 6.8数据库进行基因本体论（GO）分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析,取前20条KEGG通路绘制潜在靶点–通路网络图。利用生物信息学技术进行分析,初步探讨其作用机制。Meta分析共纳入文献 34 篇,2 948例患者,结果显示小青龙汤联合常规西医治疗在总有效率、肺功能、动脉血气分析、中医症候总积分与中医症状体征评分、主要症状缓解时间、炎症因子水平等指标上均优于单用常规西医治疗。网络药理学共得到157种成分、150个共有靶点与130条相关通路,主要涉及HIF-1信号通路、肿瘤坏死因子信号通路、PI3K-Akt信号通路、Toll样受体信号通路等,涉及到氧化反应、炎症反应等主要生物过程。得出小青龙汤联合常规西医治疗在临床疗效上优于单用常规西医治疗方案,其潜在作用机制可能是通过抗炎、抗氧化应激过程来达到治疗AECOPD的目的。     

基于网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制

本研究运用网络药理学研究化橘红-蛹虫草复方止咳活性及作用机制。构建小鼠氨水引咳模型,评价复方的止咳活性。再利用多个在线数据库和文献检索,收集复方的活性成分、作用靶点及疾病靶点。使用Cytoscape、STRING构建复方-靶点-疾病网络与蛋白质相互作用网络,并运用Meatscape对靶点基因进行GO与KEGG富集分析。结果表明,低、高剂量组能显著减少小鼠咳嗽次数（P<0.001）,并降低小鼠血清中肿瘤坏死因子、白细胞介素1α和白细胞介素1β三种炎症因子水平,其中高剂量组存在显著差异（P<0.05,P<0.01,P<0.05）。网络药理学分析结果显示该复方能通过作用于转录因子AP-1、白细胞介素6及肿瘤坏死因子等78个靶点,调控575个GO条目与272条信号通路发挥止咳作用,其中虫草酸、虫草素、芹菜素、beta-谷甾醇及柚皮素是其重要的物质基础。结果说明,化橘红-蛹虫草复方具有止咳活性,该活性作用是复方中多种物质成分对多靶点、多通路的综合作用结果。     

荟萃分析核桃仁抗2型糖尿病机制

本研究基于荟萃法探讨了核桃仁干预2型糖尿病的作用机制。采用TCMSP数据库筛选核桃仁的主要活性成分及其潜在靶点,通过OMIM、TTD、Genecards等数据库获得2型糖尿病相关靶点,运用R3.6.2软件对活性成分靶点和疾病靶点交集,并用Cystoscope 3.7.2软件构建网络图,通过STRING等平台对交集靶点进行蛋白互作、GO功能和KEGG通路富集分析。结果获得没食子酸、没食子单宁、五没食子酰葡萄糖等11个活性成分的83个靶点,进一步与2型糖尿病相关的3015个靶点交集得到核桃成分干预2型糖尿病靶标28个,主要有双氧化酶2、凝血因子2、过氧化氢酶、IL-5和G6PD等。这些靶标涉及激素代谢过程、细胞脂质代谢过程、脂肪酸生物合成过程及胆固醇代谢、对体内体外有机物和无机物的应答反应等GO功能过程,主要参与糖尿病、癌症、循环系统、炎症等四大类17条相关通路及其它内分泌、信号传导、甲状腺和神经递质等相关KEGG通路。结果表明核桃仁可能通过PRKD1、PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ、IL5、F2、CAT、G6PD等多靶点参与MAPK信号通路、AGE-RAGE信号通路、胰岛素抵抗和PI3K-Akt信号通路等信号通路调节脂质代谢,从而实现抗2型糖尿病的作用。     

红枣枸杞浸泡酒对小鼠润肠通便功能的研究

该实验通过对小鼠进行通便功能实验,研究了红枣枸杞浸泡酒的润肠通便作用。将小鼠随机分为7组,采用洛哌丁胺灌胃建立小鼠便秘模型,通过测定小肠推进率、首次排黑便时间、排黑便粒数以及排黑便质量,判断红枣枸杞浸泡酒对小鼠小肠运动和排便功能的影响。结果表明,该红枣枸杞浸泡酒的高剂量组（10.0 mL/kg体质量）可提高小肠墨汁推进率;低剂量组（2.5 mL/kg体质量）可缩短首粒黑便排出时间,低、高剂量组可增加5 h内排便粒数,高剂量组5 h内可增加排便质量。蒸馏酒组的四项实验结果与模型组相比均无显著性差异,结合红枣枸杞浸泡酒中功效成分分析,与蒸馏酒相比较,总黄酮、总酚及总糖含量均较高,进一步推测该浸泡酒的通便效果来自于浸泡过程中的功效成分。     

基于网络药理学与动物实验探究肉苁蓉总苷对炎症性肠病的作用机制

目的：通过网络药理学及动物实验研究，探讨肉苁蓉总苷对炎症性肠病（IBD）的潜在作用机制。方法：应用Pubchem数据库及文献收集肉苁蓉总苷中7种主要活性成分的三维结构。通过PharmMapper,UniProt,GeneCards等数据库获取活性成分相关靶点与IBD相关的基因靶点信息。再将肉苁蓉活性成分靶点和IBD的靶点绘制韦恩图，得到交集靶点，并将交集靶点上传到String数据库进行蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）筛选分析。使用DAVID数据库将肉苁蓉总苷活性成分对IBD发挥保护作用的靶点进行基因本体（GO）功能富集、京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，采用Cytoscape3.8.0软件构建“活性成分-靶点-通路网络”，预测肉苁蓉总苷治疗IBD的作用靶点与途径，并构建IBD小鼠模型进一步验证。结果：肉苁蓉总苷活性成分对IBD具有防护作用的靶点有254个，PPI分析筛选出核心靶点30个。GO功能富集和KEGG通路富集发现肉苁蓉总苷可能主要通过调控癌症通路、mTOR通路、TGF-β通路、JAK-STAT通路、AMPK通路等，进而影响细胞信号传导、增殖、分化、凋亡来发挥作用...     

鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及PI3K/Akt信号通路的影响

目的：探讨鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋 白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路的影响。方法：40 只KKAy小鼠,分为模型组和鱼油低、中、高剂 量组,每组10 只。另设10 只C57BL/6小鼠为正常对照组。灌胃12 周后,测定血糖、胰岛素、脂联素、瘦素及 PI3K/Akt信号通路中相关基因的表达水平。结果：与模型组相比,鱼油低剂量组血糖水平极显著降低（P＜0.01）, 鱼油低、中剂量组胰岛素水平显著提高（P＜0.05）,鱼油各剂量组的脂联素水平显著提高（P＜0.05）。此外,鱼油 各剂量组可上调胰岛素受体底物-1、PI3K、Akt、葡萄糖转运蛋白-4基因的表达,其中低剂量鱼油对Akt和葡萄糖转 运蛋白-4基因的调控效果更显著。结论：低剂量鱼油可能通过调节PI3K/Akt信号通路改善糖代谢。     

生姜对新型冠状病毒肺炎的防治作用探讨

采用药物生物信息学方法探讨生姜防治2019年新型冠状病毒疾病（COVID-19）的作用机制。以生姜3种活性成分（6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚）为研究对象,采用化学相似性搜索方法预测潜在作用靶蛋白,同时采用人工数据挖掘病毒性肺炎疾病相关蛋白,并用String 11.0构建蛋白相互作用网络。由交集获得生姜活性治疗病毒性肺炎疾病的核心靶蛋白,通过Omicshare和DAVID数据库分别对核心靶蛋白的基因本体富集和KEGG通路分析,采用Cytoscape构建生姜“活性成分-靶点-通路”网络图。结果显示,生姜活性成分涉及168个靶点,病毒性肺炎疾病相关蛋白有253个。由交集获得的18个核心靶蛋白与生姜防治病毒性肺炎相关。GO富集分析表明核心蛋白作用与炎症反应和免疫调节、细胞因子介导受体等有关。核心靶蛋白参与的KEGG通路有21条,涉及病毒感染、趋化因子通路和众多癌症通路等。研究结果表明生姜活性成分是通过多靶点和多通路对机体起整体调控作用。本研究为生姜防控COVID-19提供理论依据,也为饮食调理提供参考。     

核桃仁预防动脉硬化性心血管疾病的网络药理学分析

采用网络药理学与分子对接方法探讨核桃仁中活性成分预防动脉硬化性心血管疾病（ASCVD）的作用机制。通过TCMSP筛选得到34种核桃仁主要活性成分,并利用SwissTargetPrediction数据库预测其潜在靶点,用Genecards、OMIM及DRUGBANK数据库筛选ASCVD相关靶点。利用STRING数据库以及Cytoscape软件建立蛋白-蛋白互作（PPI）网络图提取核心靶点。运用Metascape数据库对潜在靶点进行GO富集及KEGG通路分析。富集分析发现,核桃仁可调节PPAR信号通路、粘附连接、血小板活化、脂肪细胞中脂解的调节等信号通路来发挥作用。通过分子对接技术验证了关键成分（槲皮素、杨梅素、鞣花酸、山萘酚）与核心靶标（AKT1、EGFR、SRC、CCND1、ERBB2）具有较好的结合活性。结果表明,核桃仁可能通过调控细胞增殖与炎症反应参与发挥延缓ASCVD的作用。     

姜黄素对幽门螺杆菌及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响

对姜黄素抑制幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200 μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也有明显的抑制作用,半数抑制浓度为1.735 mmol/L。通过噻唑蓝实验分析姜黄素对人胃GES-1细胞和Hp感染人胃GES-1细胞的影响。结果显示,短时间内（12 h）较低浓度（68 μmol/L）姜黄素对人胃GES-1细胞增殖无明显影响,但姜黄素浓度的增加和作用时间的延长可使细胞存活率明显下降。经68 μmol/L姜黄素作用12 h后,损伤模型组细胞形态有一定程度的复原,细胞存活率略有升高,但不显著（P＞0.05）;高浓度（136、680 μmol/L）姜黄素会导致细胞存活率明显下降。因此,姜黄素对Hp生长和脲酶活力有明显的抑制作用,但不足以缓解Hp对人胃GES-1细胞的损伤作用。     

黄酒和竹叶青酒抗氧化活性比较

通过采用抗亚油酸过氧化活性、清除DPPH自由基活性、清除超氧阴离子活性、还原力4个指标,分为低、中、高3个剂量组、空白对照和阳性对照,对黄酒和竹叶青酒的抗氧化活性进行比较研究,并用福林-酚法测定其中酚类物质的含量。结果表明,黄酒和竹叶青酒均具有较强的抗亚油酸过氧化活性、清除自由基活性和还原能力,且均存在一定的量效关系。同时,酚类物质的测定结果表明,黄酒和竹叶青酒中酚类物质的含量分别为165.1μg/mL和85.2μg/mL,这在一定程度上解释了黄酒的抗氧化活性高于竹叶青酒。     

玫瑰茄水提物抗贫血作用的研究

初步探究玫瑰茄水提物的抗贫血作用机制。建立IDA大鼠模型,随机分成4组,对IDA大鼠灌胃低、中、高剂量的玫瑰茄水提物。30d后,解剖大鼠,取十二指肠和肝脏。利用Q-PCR和Westernblot技术分别检测试验大鼠十二指肠中二价金属转运体(DMT-1)、膜铁转运蛋白(FPN-1)、膜铁转运辅助蛋白(Hp)及其mRNA的表达量,肝脏铁调素(Hepcidin)及其mRNA的表达水平。结果表明,与低铁对照组比较,玫瑰茄水提物低、中剂量组对DMT-1、FPN-1、Hp表达量的下调幅度不超过9%,mRNA的表达水平则超过50%,低、中剂量均对Hp mRNA无显著性差异;高剂量组对DMT-1、FPN-1、Hp及其mRNA表达量的下调程度不一。低剂量组Hepcidin-25的表达量是低铁对照组的1.61倍;高剂量组的表达量则下调了65.79%;各剂量组均抑制了相关mRNA的表达。因此,玫瑰茄水提物通过提供有效成分促进机体铁的吸收,从而影响IDA大鼠的DMT-1、FPN-1、Hp、Hepcidin-25及其mRNA的表达,维持机体铁稳态。     

Suppressive effect of functional drinking yogurt containing specific egg yolk immunoglobulin on Helicobacter pylori in humans

Helicobacter pylori is a human pathogen that infects over 50% of the population worldwide. It is the most important etiologic agent of gastroduodenal ulcers and malignancies. Helicobacter pylori urease enzyme is considered the main factor for the organism's colonization in the gastroduodenal mucosa. Hens immunized with the purified urease produce a highly specific anti-H. pylori urease immunoglobulin (IgY-urease) in their egg yolks. Immunoglobulin Y-urease was stable at 60 to 65 degrees C for 30 min and at pH 4.0 for 7 h. Its activity was lost at 80 degrees C for 20 min and at pH 2 for 4 h. Specially designed functional drinking yogurt containing Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium spp. with 1% egg yolk IgY-urease was produced commercially. Immunoglobulin Y-urease activity showed stability in the product up to 7 d, and then decreased to 85% after 3 wk of storage. A clinical study was conducted to determine the effectiveness of IgY-urease yogurt to suppress infection in humans. Forty-two volunteers who tested positive for H. pylori using a 13C-urea breath test were recruited. A total of 450 mL of IgY-urease (test group) or IgY-urease-free yogurt (control group) was consumed in 150-mL portions 3 times daily for 4 wk. Volunteers were tested after 2 and 4 wk; urea breath test values significantly decreased in the test group compared with the control group. The results indicate that suppression of H. pylori infection in humans could be achieved by consumption of drinking yogurt fortified with IgY-urease.     

Antagonistic activities of lactobacilli against Helicobacter pylori growth and infection in human gastric epithelial cells

Lactobacilli have positive effects on bowel microflora and health in humans and animals. In this study, the antagonistic activities of Lactobacillus gasseri Chen, and L. plantarum 18 were assessed by agar plate diffusion assay and tests that determined the growth and urease activity of Helicobacter pylori cocultured with lactobacilli and the adherence of H. pylori to human gastric epithelial cells in the presence of lactobacilli. The results showed that the 2 Lactobacillus strains had significant anti-H.pylori activity, and this activity may be contributed by the cell-free supernatants (CFS) of lactobacilli and live Lactobacillus strains in vitro. The antagonistic activity of the CFS against H. pylori depended on the pH and the presence of metabolites, such as organic acids and proteases. Our results also indicated that 2 Lactobacillus strains could inhibit H. pylori adherence human gastric epithelial cells. PRACTICAL APPLICATION: Helicobacter pylori causes chronic gastritis, peptic ulcer disease, and gastric cancer, and it infects about 50% of the world's population. Lactobacilli have been reported to have an inhibitory effect on H. pylori and can be used as probiotic to manufacture dairy products preventing H. pylori infection.     

In vitro screening of lactobacilli with antagonistic activity against Helicobacter pylori from traditionally fermented foods

Helicobacter pylori may cause stomach diseases such as chronic gastritis, peptic ulcer, and gastric cancer, and several studies reported that lactobacilli have inhibitory effects on H. pylori. In this study, 38 Lactobacillus strains were screened for anti-H. pylori activity using in vitro methods, including survivability under the simulated gastric conditions, agar plate diffusion, urease activity, coaggregation, autoaggregation, and hydrocarbon analysis. The results indicate that 2 Lactobacillus strains showed potential anti-H. pylori activity in vitro. Lactobacillus plantarum 18 had the largest zone of inhibition and markedly reduced the urease activity of H. pylori. Lactobacillus gasseri Chen had higher coaggregation rate (58.15%) and hydrophobicity (59.27%) compared with the other strains. Further research is needed to verify the activities of these strains against H. pylori.     

PCR方法快速检测食品中幽门螺杆菌

目的：建立一种快速、特异、灵敏的幽门螺杆菌检测方法。方法：以尿素酶基因序列为靶位点设计引物,进行PCR 扩增,建立幽门螺杆菌PCR 检测方法。以食品中常见致病菌作参考菌株作特异性检测,分别对幽门螺杆菌菌悬液及鲜牛奶中幽门螺杆菌菌悬液进行梯度稀释,提取DNA 后做灵敏度检测。结果：PCR 方法能够有效对幽门螺杆菌进行快速检测,具有较强的特异性,灵敏度较高(8CFU/mL)。结论：该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测食品中污染的幽门螺杆菌。