响应面法优化鱼籽多肽酶解液脱色工艺

采用活性炭对鱼籽多肽酶解液进行脱色,以脱色率和多肽回收率为评价指标,分别考察活性炭用量、时间、温度、p H对脱色效果的影响,在单因素实验的基础上,采用响应面法优化鱼籽多肽酶解液的脱色工艺。结果表明:鱼籽多肽最佳脱色工艺条件为10.5%(m/m)、时间41 min、温度55℃、p H2.8,在此条件下,脱色率77.51%±1.49%、多肽回收率82.26%±2.82%,与理论值差异不显著。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好,多肽回收率高,为鱼籽多肽产品后期研发提供依据。     

超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽工艺的优化

以大豆分离蛋白为原料,采用超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽,以单因素实验为基础,选择复合酶添加量、酶解时间、酶解温度以及酶解p H为自变量,大豆多肽得率为响应值,采用响应面分析法研究各自变量及其交互作用对大豆多肽得率的影响,并对大豆多肽的相对分子质量分布进行测定。结果表明,影响大豆多肽得率的各因素强弱顺序为:酶解温度复合酶添加量酶解时间酶解p H;超声辅助复合酶酶解制备大豆多肽的最佳工艺条件为超声功率180 W、超声时间10 min、超声温度35℃、碱性蛋白酶与中性蛋白酶质量比3∶1、复合酶添加量2.04%、酶解时间4.0 h、酶解温度59℃、酶解p H 8.0,在此条件下大豆多肽得率为63.27%,相对分子质量大部分集中在1 000以下。     

酶解小黑豆乳清多肽抗肿瘤作用的研究

研究以小黑豆乳清为原料,比较木瓜蛋白酶、537酸性蛋白酶、Prote AX蛋白酶三种蛋白酶水解多肽产物的分子量分布及其对小鼠H22肿瘤细胞生长抑制作用.结果表明,Prote AX酶解多肽的分子量分布明显不同于另外两种多肽,且对小鼠H22肿瘤细胞生长抑制率最高,当Prote AX酶解多肽浓度为40mg/mL时,可达51.36％.用Prote AX酶解多肽喂食用氨基比林-亚硝酸钠(AP-NaNO2)诱导的肝损伤模型小鼠,结果显示,与模型组相比,该多肽可以显著降低肝脏MDA和血清ALT、AST活性(p＜0.05),并提高肝脏GSH-Px活性(p＜0.05).肝脏组织切片结果显示,模型组小鼠大部分肝细胞形态不正常,细胞损伤严重,出现明显的癌前期病变;而小黑豆乳清多肽高剂量组动物的肝细胞形态基本正常,接近正常肝组织;提示Prote AX蛋白酶解多肽可以抑制AP-NaNO2诱导的肝细胞损伤和癌前期病变.     

酶解条件对鹰嘴豆多肽抗氧化活性的影响

以鹰嘴豆蛋白粉为原料制备鹰嘴豆蛋白抗氧化活性肽,采用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶分别对鹰嘴豆蛋白进行酶解,测定了不同酶作用下的鹰嘴豆多肽抗氧化活性,确定木瓜蛋白酶是酶解鹰嘴豆蛋白的最适蛋白酶。研究了温度、p H、底物浓度、酶添加量等酶解条件对产物抗氧化活性的影响。结果表明,不同的酶解条件对鹰嘴豆多肽的抗氧化活性具有显著影响,最优酶解条件为:温度60℃,p H 6.0,底物浓度3.0%,酶的添加量3.0%,在此条件下酶解180 min,制得的鹰嘴豆多肽具有较高的抗氧化活性,其多肽含量高达71.31%。     

酶解乳清蛋白制备降胆固醇活性肽的工艺研究

利用生物酶技术酶解乳清蛋白,制备具有降胆固醇活性的多肽,通过响应面试验、二次旋转回归设计建立回归模型,以胆固醇胶束溶解度抑制率为评价指标,对乳清蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,乳清蛋白的最佳酶解条件为：酶解时间8.5 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 8.0、加酶量4.7%、乳清蛋白含量5.8%,在此条件下,酶解乳清蛋白得到的活性肽的胆固醇胶束溶解度抑制率为18.21%。     

复合酶解法制备山楂绞股蓝乳清多肽复合饮料的工艺优化

以鲜牛乳为原料制备乳清,通过单因素实验、正交试验、响应面试验,结合测试多肽的胆固醇胶束溶解度抑制率,优化复合酶酶解乳清蛋白的工艺和多肽复合饮料的配方。结果表明,采用中性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶分段酶解乳清蛋白制取乳清蛋白肽的最佳工艺条件是酶添加总量6%、酶比例3:1,酶解总时间4 h,分段酶解时间比1:1。响应面法优化得到该饮料的最佳配方参数为山楂含量2.8%、枸杞含量1.56%、绞股蓝含量0.24%、柠檬酸含量0.05%、蜂蜜含量5.11%,经过调配、均质、杀菌等环节,得到pH为4.30、感官性能与稳定性较佳、具有原料风味、酸甜度适中、橙红色色泽均匀且不分层的山楂绞股蓝乳清多肽复合饮料。     

限制性酶解乳清蛋白功能性质研究

探究乳清蛋白在碱性蛋白酶限制性水解下功能性质变化。以乳清蛋白的溶解性,乳化性、乳化稳定性,起泡性、起泡稳定性为考察指标,确定乳清蛋白的等电点及分析不同水解度下乳清蛋白功能性质在p H调控下的变化。结果表明:乳清蛋白的等电点为4.8。乳清蛋白进行限制性酶解后功能性质有了很大提高,其中溶解性在DH14、p H10下达到最大值,较原蛋白提高了14.55%;起泡性在DH14、p H4下达到最大值,较原蛋白提高了107.5%;起泡稳定性在DH4、p H4下达到最大值,比原蛋白提高了8.66%;乳化性在DH14、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了56.1%;乳化稳定性DH4、p H12下达到最大值,比原蛋白提高了50.42%。     

具有α-淀粉酶抑制活性的白芸豆多肽的制备及其热稳定性研究

以白芸豆为原料,酶法制备多肽。以α-淀粉酶抑制率为指标,比较酸性、中性和碱性蛋白酶的酶解效果。结果表明:3.350酸性蛋白酶的酶解效果最好。通过加酶量、酶解p H值、酶解温度和酶解时间的单因素试验和正交试验,得到制备白芸豆多肽的最佳工艺条件为:加酶量3 200 U/g、酶解p H 2.2、酶解温度55℃、酶解时间60 min,此条件下白芸豆多肽α-淀粉酶抑制率为80.82%。热稳定性研究表明,白芸豆多肽的热稳定性高于α-淀粉酶抑制剂(α-amylase inhibitor,α-AI)粗提液,该多肽在85、90℃条件下的α-淀粉酶抑制活性能保持更长时间。凝胶电泳分析表明白芸豆多肽的分子质量为7.53~9.09 ku。     

酶法亚麻粕多肽的制备

以亚麻粕为主要原料,采用双酶分步水解法制备亚麻粕多肽。通过单因素试验和正交试验对亚麻粕多肽的制备工艺进行优化。最佳酶解工艺为:料液比为1∶12(g/m L)先用10%的纤维素酶、p H4.8、50℃下预处理2h;再用2%的碱性蛋白酶在p H10.0、60℃下水解3h,此时多肽得率为58.32%。     

酶法亚麻粕多肽的制备

以亚麻粕为主要原料,采用双酶分步水解法制备亚麻粕多肽。通过单因素试验和正交试验对亚麻粕多肽的制备工艺进行优化。最佳酶解工艺为:料液比为1∶12(g/m L)先用10%的纤维素酶、p H4.8、50℃下预处理2h;再用2%的碱性蛋白酶在p H10.0、60℃下水解3h,此时多肽得率为58.32%。     

花芸豆多肽提取工艺的研究

研究以花芸豆为原料,用碱性蛋白酶水解制备花芸豆多肽,在单因素实验的基础上,通过正交实验对酶解温度、酶解时间、p H、加酶量等酶解条件进行优化。结果表明:制备花芸豆多肽的最佳工艺条件:酶解温度60℃、酶解时间4 h、加酶量2000 U/g、p H为7.5,此条件下花芸豆多肽浓度可达0.954 mg/m L。本文提供了一种花芸豆多肽的提取方法,旨在为今后花芸豆多肽的深度开发利用奠定基础。     

魔芋多肽酶解法制备工艺研究

采用碱溶酸沉法提取魔芋飞粉中的蛋白质,再用碱性蛋白酶对提取出的魔芋蛋白进行酶解,探究魔芋多肽的最佳制备工艺。该试验以蛋白质提取率为指标,先确定出魔芋蛋白的最佳提取工艺,再以多肽提取率(TCA–SN)和水解度(DH)为双指标,通过单因素试验和正交试验来优化魔芋多肽制备工艺。结果表明:魔芋蛋白的等电点为p H 3.8,最佳提取条件为酶解p H 8.5、酶解温度50℃、酶用量3 500 U/g、酶解时间150 min。在该组合条件下得到的多肽得率和水解度分别为11.98%和9.19%。     

复合酶法制备大鲵多肽的研究

为了制备具有生物活性的大鲵多肽,本研究以大鲵肌肉为原料,采用单因素实验与响应面分析法,以水解度和多肽得率为指标,对不同蛋白酶及其不同组合、酶添加量、酶解时间、温度、料液比和初始p H对大鲵肌肉酶解的影响进行了研究。结果表明,风味蛋白酶和中性蛋白酶为最佳酶解组合;最佳酶解工艺条件为:风味蛋白酶和中性蛋白酶添加量均为6000 u/g,酶解温度55℃,酶解时间3 h,料液比(w/w)1∶8,初始p H=6.86。优化条件下多肽得率为90.28%。     

蛋清粉酶解制备蛋清肽工艺优化研究

筛选了用于酶解蛋清粉的蛋白酶,并对碱性蛋白酶酶解蛋清制备活性肽的最佳工艺条件进行了优化。单因素试验结果表明酶解温度50℃、酶解p H值9.5和10%的底物浓度可以获得较佳的酶解产物抗氧化活性,正交试验表明,p H值9.5,底物浓度10%和反应温度50℃,酶解产物清除DPPH自由基能力最强;在p H值10.5,底物浓度5%和反应温度50℃时,酶解产物具有最佳的还原力0.514。基质辅助激光解析串联飞行时间质谱对酶解产物多肽分析结果表明,蛋清肽的分子量集中在2100-5000。     

影响单酶法制备核桃多肽的因素研究

为寻求核桃多肽的最佳制备方法,以酶法水解核桃蛋白为基础,通过单因素和正交试验对核桃多肽制备工艺进行优化。结果表明,在酶解时间3 h、酶解温度38℃、p H 6.8、酶添加量4%、底物浓度为2.4%时,核桃多肽的抗氧化活性最佳,此时DPPH清除率可达92.35%。     

中性蛋白酶酶解缢蛏制备多肽工艺条件优化

本实验利用中性蛋白酶对缢蛏进行酶解制备多肽,以多肽含量为指标,在单因素实验基础上采用正交实验对鲜缢蛏的酶解工艺进行优化。结果表明,中性蛋白酶最优酶解工艺条件为:p H7、酶添加量1200 U/g、料液比(m∶v)为1∶2.5、温度40℃、时间2 h,在此工艺条件下多肽含量为(79.2±0.7)mg/g。     

枸杞多肽的制备及其抗氧化活性研究

研究了中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合水解制备枸杞活性肽的工艺条件,并采用离子交换层析和凝胶柱层析对酶解产物进行纯化,以制备具有较高抗氧化活力的枸杞多肽.以DPPH·清除率为指标,通过响应面优化得到最佳酶解工艺条件:酶解温度51℃,中性蛋白酶与木瓜蛋白酶质量比1∶2.65,酶解时间4.3 h,p H=7.0.此条件下得到的枸杞多肽对DPPH·清除率为(23.32±0.47)%.分别采用DEAE阴离子交换层析和Sephadex G-25凝胶柱层析对枸杞多肽进行分离,最终获得DPPH·和OH·清除率分别为(72.65±1.84)%和(58.72±1.88)%的A-1组分,该组分的DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和OH·清除能力均随浓度的增大而提高.     

澳洲秃参酶解制备多肽的工艺优化

以澳洲秃参为原料,考察了适宜酶解用酶的种类。以优化的复合酶,通过单因素和正交实验,研究了在不同加酶量、酶解时间、温度、p H的条件下,酶解液中多肽的得率。得到了优化的酶解条件,并对酶解产物进行了氨基酸组成检测。实验结果表明,采用优化的复合酶配方,澳洲秃参最优酶解工艺为:酶解温度55℃、p H7.5、料液比1∶5、加酶量1500 U/g蛋白,酶解时间3 h,多肽得率可达18.6%;酶解产物中氨基酸总量占干重约78%,其中必需氨基酸占干重的21%,四种呈味氨基酸总和占干重41%。本实验的结果为未来以澳洲秃参为原料研制保健品和调味品奠定了基础。     

中性蛋白酶酶解核桃饼粕制备抑菌多肽的研究

以核桃饼粕为材料,研究中性蛋白酶的酶解条件对核桃饼粕蛋白多肽液抑菌性的影响。通过单因素试验及正交试验,研究了酶的添加量、p H、时间、温度及底物浓度对多肽液抑菌性的影响,并用葡聚糖凝胶层析柱对多肽液进行分离,测定其抑菌性。结果表明:当中性蛋白酶酶解核桃饼粕制备抑菌性多肽的酶解条件为酶添加量16 000 U/g,酶解p H 8.0,酶解温度45℃,酶解时间5 h时,多肽液具有较好的抑菌活性,且对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为20.55,19.85和20.05 mm;经葡聚糖凝胶层析分离,其多肽分子量越小,抑菌性越强。     

水牛乳酶解液ACE抑制率及其稳定性研究

利用胰蛋白酶和胃蛋白酶模拟胃肠道,在不同pH、不同温度下,测定水牛乳酶解液的ACE抑制率的稳定性影响,并对酶解液中多肽分子量分布以及各种氨基酸成分和含量进行分析。结果表明,水牛乳酶解液具有很好的胃蛋白酶耐受性,在pH 3~8,温度≤60℃范围内制备的酶解液ACE抑制率具有良好的稳定性;水牛乳酶解液冻干粉中多肽含量为38.2%,95%的相对分子质量在2 000 Da以下,其中谷氨酸和亮氨酸的含量比较高。