葡萄酒中游离氨基酸的HPLC测定方法

近年来,人民饮食消费水平日益提高,营养保健意识也不断增强,要求饮食能促进身体健康,吃要注意三低一高食品,喝酒要选择三低三丰富的酒种。所谓三丰富中有丰富的氨基酸一项,而好的葡萄酒中就含有丰富的氨基酸,因此如何准确快速测定葡萄酒中的氨基酸就显得十分重要。氨基酸的分析方法很多,仅液相色谱法就有柱前衍生法,柱后衍生法两种。柱后衍生法需用离子交换柱及多种试剂,且分析时间长,费用较高。本实验采用柱前衍生法进行。该法具有快速、准确、费用低、易于操作等优点。1 材料与方法1.1 仪器及材料仪器:日本岛津LC-6A高效液相色谱仪,SP…     

柱前衍生RP-HPLC测定杨树花中氨基酸含量

【摘要】目的 建立一种采用柱前衍生-反相高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量的方法。方法 以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生, 采用高效液相色谱法检测杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸含量。结果 21种氨基酸线性范围为0.0019～2.7000 μmol?mL－1, R2均＞0.9990; 21种游离氨基酸的平均加样回收率在88.25％～100.04%之间、RSD 为0.57％～2.73％(n=6), 水解氨基酸的平均加样回收率在90.21％～100.01％之间、RSD 为0.52％～2.32％(n=6)。结论 该方法稳定、快速、精密度高、线性范围宽, 适合杨树花中游离氨基酸和水解氨基酸的含量测定。     

高效液相色谱法同时测定糯米酒中17种氨基酸

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)用以测定糯米酒中的17种氨基酸。采用OPA试剂柱后衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测糯米酒中17种氨基酸的含量。结果表明,该方法测定17种氨基酸的线性相关系数R在0.9990～0.9998,平均回收率为94.5%～98.7%,精密度RSD为0.51%～1.90%。该方法专属性强、操作方便、灵敏度高,可用于糯米酒和花雕酒等黄酒中17种氨基酸含量的检测。     

柱后衍生-高效液相色谱法测定青稞黄酒中的18种氨基酸

采用茚三酮柱后衍生,高效液相色谱法测定了青稞黄酒中的18种氨基酸.结果表明,18种氨基酸回收率为95.1 %～102.5 %,相关系数0.9962～0.9999,检出限0.25～4.00 μmol/L.在所分析的4种青稞黄酒样品中,氨基酸含量为456.10～760.18 mg/L.青稞黄酒中的呈味氨基酸以甜味氨基酸和涩味氨基酸为主,占76 %以上.     

微波水解-茚三酮柱后衍生离子交换色谱法测定鹌鹑蛋中的17种氨基酸

目的建立微波水解茚三酮柱后衍生离子交换色谱法同时测定鹌鹑蛋中17种氨基酸含量的分析方法。方法采用磺酸型阳离子树脂离子交换柱分离,茚三酮溶液作为柱后衍生剂,紫外可见分光光度检测器进行检测,检测波长为570nm和440nm,并对微波水解时间及温度进行条件优化。结果 17种氨基酸在一定范围内呈良好线性关系,相关系数均大于0.99;检出限为0.376～0.906mg/L。结果表明,150℃下微波水解20 min的结果与传统加热水解(110℃, 22 h)的效果基本相同。结论该方法分析时间较短,灵敏度较高,可用于鹌鹑蛋中氨基酸含量的检测。     

柱前衍生高效液相色谱法测定贝类产品中氨基酸含量

采用柱前衍生高效液相色谱法,测定了3种贝类中天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸等17种氨基酸含量。衍生试剂为6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC),流动相为醋酸盐-磷酸盐缓冲溶液、乙睛、水,梯度洗脱。色谱柱为AccQ·Tag(Waters)氨基酸分析柱,紫外检测。结果显示,氨基酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性范围10～80μmol/L,检出限为0.23μmol/L,相关系数均在0.998以上,相对标准偏差RSD在2.1%～4.8%之间,回收率在91.3%～113.2%之间。     

液相色谱柱前衍生测定大曲中的氨基酸

采用液相色谱法，以２，４－硝基氟苯为衍生剂，测定大曲中的氨基酸含量，以求通过测定氨基酸含量来达到了解其与大曲质量的关系。故文章介绍了测定方法，对不同等级的大曲，人工曲、微机曲和机械曲，以及大曲在贮存期等方面的氨基酸含量与变化进行了研究、介绍。最后认为，人工曲和机械曲的Ｔｙｒ含量较稳定，对大曲质量较有影响力的是Ａｒｇ－Ａｌａ１ｌｌｅ、Ｆｕｒ４种。     

食品中牛磺酸的测定

对食品中牛磺酸的各种测定方法进行了介绍,并对各自的优劣性进行了比较,荧光法和半日磺酸酰氯柱前衍生法具有选择性好,操作简便,不需要昂贵的仪器,氨基酸自动分析法和高效液相色谱法（包括OPA柱前和柱后衍生法）要求设备比较严格,薄层色谱法简单实用。     

PITC柱前衍生高效液相色谱法测定黄酒中17种氨基酸方法研究

建立了柱前衍生高效液相色谱法同时测定黄酒中17种氨基酸的方法。方法采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,色谱柱为C18(4.6×250mm,5μm),乙酸钠-乙腈-水混合体系梯度洗脱,紫外检测器,检测波长254nm,40min内17种氨基酸得到良好的分离。在0.025～1.25mmol/L范围内其浓度与响应值具有良好的线性关系,相关系数大于0.99;样品的平均加标回收率在78.6～118.1%之间,相对标准偏差在0.45%～3.30%范围;检出限为0.259～0.925μmol/L,定量限为0.863～3.083μmol/L。相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言,该方法在可操作、低成本、易推广等方面具有明显优势,可供黄酒中氨基酸测定方法行业标准制定提供参考。     

柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸的含量

建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定氨基酸保健饮品中16种氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、牛磺酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、赖氨酸)的分析方法.采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,RP-HPLC经梯度洗脱后检测饮料中16种氨基酸的含量.使用DiamonsilTMCl8色谱柱(250 min×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 moL/L乙酸钠,B为乙腈;流速为1.0 mL/min;检测波长为254 nm;柱温40 ℃;进样量20"L.在各氨基酸的线性范围内,16种氨基酸的线性相关系数r在0.9996～0.9999,平均回收率为96.0%～104.0%.日内精密度RSD为0.51%～1.87%,日间精密度RSD为0.52%～1.89%.结果表明本方法专属性强.操作方便,灵敏度高,可用于饮料中氨基酸的含量检测.     

OPA-FMOC柱前衍生反相液相色谱法测定氨基酸含量

采用邻苯二甲醛一氯甲酸芴甲酯(OPA-FMOC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定样品中氨基酸含量,以HypersilC18为分析柱,采用荧光检测器,17min内16种氨基酸完全分离。分离效果,重现性,线性范围均令人满意。     

液相色谱法与氨基酸分析仪法测定人乳中水解氨基酸的比较研究

目的研究氨基酸自动分析仪法和液相色谱法测定人乳中水解氨基酸含量的比较。方法采用液相色谱柱前衍生和氨基酸分析仪测定人乳中水解氨基酸,液相色谱法选用C18+柱和AQC进行衍生,氨基酸分析仪采用阳离子交换柱和柱后茚三酮衍生。结果两种方法的方法学参数无明显差异,所测结果差异均在4.65%以内。结论两种方法均可采用,可作为互相验证的方法。     

茚三酮柱后衍生法测定软香酥糕点中氨基酸含量及其营养评价

采用酸水解除去脂肪的软香酥糕点样品,以茚三酮为衍生试剂,采用柱后衍生高效阳离子交换色谱法,分析其氨基酸的种类与比例,并对其营养成分进行评价。软香酥糕点蛋白质的水解液中共检测出17种氨基酸,总量为7.96g/100g;其中7种为人体必需氨基酸,总含量为3.55g/100g,占氨基酸总量的44.54%;软香酥糕点蛋白质的氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)、必需氨基酸指数(EAAI)分别为0.930、0.474、88.54。     

反相高效液相法测定发酵豆粕中的17种氨基酸含量

采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生反相高效液相色谱法测定豆粕和发酵豆粕中17种氨基酸含量,以氨基酸 C18色谱柱为分析柱,采用紫外检测器,35 min内能够很好的分离17种氨基酸。氨基酸峰面积与氨基酸浓度之间的线性关系较好,加标回收率较高。试验结果表明本方法操作简单、灵敏度高,适用于豆粕和发酵豆粕中氨基酸的测定。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定 草本水杨梅叶中氨基酸含量

目的采用柱前衍生反相高效液相色谱法对草本水杨梅叶中氨基酸进行测定。方法样品以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂,与草本水杨梅叶中氨基酸柱前衍生,采用Ultimate Amino Acid氨基酸分析专用柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-水(80:20,V:V),B为乙腈-三水合乙酸钠缓冲溶液(7:93,V:V,p H 6.5),梯度洗脱;柱温35℃,流速1.0 m L/min,检测波长为254 nm。结果 20种氨基酸在0.039~1.250 mmol/L内呈良好的线性关系(r20.9996)。20种游离氨基酸平均回收率在96.51%~108.06%之间,RSD在0.36%~2.08%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在95.29%~102.13%之间,RSD在0.85%~2.45%之间(n=6)。结论该方法可用于草本水杨梅中氨基酸的检测,其灵敏度高且准确,具有良好的重复性及稳定性。     

反相高效液相色谱法测定葡萄酒中23种氨基酸的研究

采用2,4-二硝基氟苯衍生化法衍生葡萄酒中的游离氨基酸,以反相高效液相色谱法对葡萄酒中23种氨基酸进行了测定,方法简单、迅速,39min即可完成23种氨基酸的分离,精密度及回收率实验结果令人满意.     

液相色谱法与氨基酸分析仪法测定人乳中 水解氨基酸的比较研究

目的：研究氨基酸自动分析仪法和液相色谱法测定母乳中水解氨基酸含量的比较。方法：采用液相色谱柱前衍生和氨基酸分析仪测定母乳中水解氨基酸,液相色谱法选用C18 柱和AQC进行衍生,氨基酸分析仪采用阳离子交换柱和柱后茚三酮衍生。结果：两种方法的方法学参数无明显差异,所测结果差异均在4.65 %以下。结论：两种方法均可采用,可作为互相验证的方法。     

柱前衍生反相高效液相色谱法测定狭叶红景天中氨基酸含量

目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法(reversed-phase high-performance liquid chromatography,RP-HPLC)测定狭叶红景天中游离及水解氨基酸种类及含量。方法以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂;色谱柱采用Ultimate Amino Acid氨基酸柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相A为80%(V:V)的乙腈-水溶液,流动相B为7%(V:V)的乙腈-CH_3COONa溶液(pH=6.5);检测波长为254 nm。结果 21种氨基酸在0.0019~2.700mmol/L内呈良好的线性关系(r~20.9990)。游离氨基酸平均回收率在97.80%~116.82%之间,RSD在1.93%~2.47%之间(n=6);水解氨基酸平均回收率在99.26%~111.23%之间,RSD在1.70%~2.23%之间(n=6)。结论柱前衍生RP-HPLC法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,适合对狭叶红景天中氨基酸含量的测定。     

基于高效液相色谱法的桑蚕丝氨基酸定量分析及其增重鉴别的研究

本实验建立了一种利用高效液相色谱测定桑蚕丝氨基酸含量的方法,并且该方法可以判断桑蚕丝是否经过增重处理,经增重处理的桑蚕丝在6mol/L盐酸水解后,通常会出现絮状不溶物质,且四种主要氨基酸的含量远小于正常蚕丝的四种主要氨基酸的含量.增重的桑蚕丝红外谱图在酰胺Ⅰ带(1619cm-1)和酰胺Ⅱ带(1507cm-1)处峰面积的比值发生明显的变化,且波动范围较大.     

高效液相色谱法测定玉米蛋白粉中游离氨基酸含量

建立高效液相色谱法同时测定玉米蛋白粉中17种游离氨基酸含量的方法。样品用盐酸溶液(0.1 mol/L)提取,采用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基-氨基甲酸酯(AQC)为衍生剂衍生。应用Nova-PakTM C_(18)柱,以10 mmol/L醋酸铵缓冲液、乙腈和超纯水为流动相进行梯度洗脱,柱温为37℃,检测波长为248 nm,外标法定量。结果表明,17种游离氨基酸线性关系良好,其中16种游离氨基酸在0.002 5~0.5μmol/mL范围内具有良好的线性关系,胱氨酸浓度在0.006 3~1.25μmol/mL范围内线性关系良好,相关系数在0.999 1~0.999 9之间,回收率为95.10%~105.21%,RSD为1.36%~4.39%。该方法灵敏度高、重现性好、操作简单,可用于检测玉米蛋白粉中游离氨基酸含量。