粗壮脉纹胞菌复合多菌种发酵茶粕产纤维素酶的研究

用粗壮脉纹胞菌分别复合东方伊莎酵母、里氏木霉、绿色木霉、乳酸杆菌固态发酵已去除茶皂素的茶粕,通过测定发酵产物中3种纤维素酶：外切葡聚糖酶（C1）、内切葡聚糖酶（Cx）、β-葡萄糖苷酶（β-G）及总酶滤纸酶（filter paper activity,FPA）的酶活力来探讨其分解粗纤维素的协同作用。粗壮脉纹胞菌和绿色木霉混合发酵产生的C1酶酶活力较粗壮脉纹胞菌单菌发酵提高了51.09%,粗壮脉纹胞菌和绿色木霉复合发酵较单菌发酵延长了其纤维素酶分泌的周期,96 h时FPA酶活力达到2.782 U/g;粗壮脉纹胞菌复合里氏木霉、绿色木霉混合发酵组在发酵10 d后对茶粕粗纤维的最终降解率分别达到了64.19%和61.59%;接种量对单菌和混合菌发酵产纤维素酶影响总体趋势是随着接种量增加酶活力提高,但粗壮脉纹胞菌单菌发酵纤维素酶酶活力在接种量超过9 mL/100 g后开始下降。表明粗壮脉纹胞菌复合里氏木霉、绿色木霉混合发酵降解纤维素具有协同作用。     

山西老陈醋发酵阶段一株产酶芽孢杆菌的分离与鉴定

从山西老陈醋酒化阶段和醋化阶段分离筛选产淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶的芽孢杆菌。初筛以水解圈与菌落直径的比值为衡量标准;复筛采用DNS法和福林酚法对分离菌株的粗酶提取液进行淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶酶活力的测定。结果表明:获得1株芽孢杆菌JX4-13。该株菌的淀粉酶、酸性蛋白酶和纤维素酶酶活力均相对较高。经形态观察、生理生化反应及16SrDNA鉴定,菌株JX4-13为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

浓香型大曲水解酶系及测定方法的研究

对浓香型大曲的分解酶体系中的液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶和木聚糖酶测定方法作了全面的研究。研究发现，（1）大曲不同部位的液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶含量不同，它们主要存在于曲外层。（2）pH值对大曲水解酶活力有影响。发现液化型淀粉酶、糖化型淀粉酶受pH影响较大，而对酸性蛋白酶、纤维素酶、木聚糖酶活力影响较小。（3）测定了不同等级曲的水解酶活力。     

灵芝发酵过程中营养物质及相关酶活性变化研究

研究了灵芝摇瓶发酵过程中主要营养成分、pH值、电导率及淀粉酶和Cx酶活力的变化趋势。在灵芝深层发酵过程中,pH值、可溶性固形物、总糖、还原糖、游离氨基态氮含量呈下降趋势,胞外粗多糖、可溶性蛋白质含量、Cx酶活力呈增加趋势,发酵至第4d淀粉酶活力最大。     

香菇深层发酵胞外酶活力的研究

本实验研究了香菇菌丝深层发酵过程中发酵液胞外酶纤维素酶、淀粉酶、半纤维素酶、蛋白酶活性的变化。结果表明：与碳水化合物降解相关的酶（纤维素酶、淀粉酶及半纤维素酶）活性变化趋势基本相同,在发酵的第6～8d出现第一个峰值,并于第13～14d出现第二个峰值,且第二个峰值大于第一个峰值;蛋白酶分泌量在第8d达高峰值,随后蛋白酶活性迅速下降;菌丝生物量与发酵液胞外酶活性变化有较大的相关性关系,菌丝生物量于发酵的第13d达到最大值,与碳水化合物降解相关的酶纤维素酶、淀粉酶及半纤维素酶分泌量均在发酵的第13～14d达最大值。     

金耳胞外酶代谢研究

以金耳（Tremella aurantialba）菌种及其伴生菌毛韧革菌（Stereum hirsutum）菌株为材料,进行液体培养,研究毛韧革菌在纯培养及与金耳混合培养过程中纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、蛋白酶和木质素酶的活性变化。结果表明,在液体培养过程中,毛韧革菌和混合菌丝除未检测到过氧化物酶外,其它胞外酶活性均呈现出一定的趋势变化。毛韧革菌胞外羧甲基纤维素酶、滤纸纤维素酶、半纤维素酶、淀粉酶、果胶酶、蛋白酶、漆酶、愈创木酚氧化酶和邻苯二酚氧化酶活性峰值分别出现在培养第 2、2、2、2、6、6、10、10、12 天,酶活力分别为 10.051、3.188、20.971、14.781、3.254、7.619、26、11、9 U/mL,混合菌丝上述胞外酶活性峰值分别出现在第 2、2、4、2、6、6、8、8、12 天,酶活力分别为 14.674、3.633、26.067、15.270、5.756、8.650、32、22、14 U/mL。比较分析,混合菌丝胞外酶活性在一定程度上要高于毛韧革菌的纯培养,说明混合培养时两者具有互作关系,可以提高对培养基质的降解利用能力。     

高大毛霉液体发酵培养基的优化及产酶特性研究

采用正交实验确定高大毛霉(MHC-7)最佳发酵培养基组成为:黄豆粉3%、可溶性淀粉0.4%、硫酸镁0.2%、磷酸二氢钾0.2%、蔗糖0.3%和黄泔水.通过对MHC-7胞内蛋白酶、α-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、谷氨酰胺酶、纤维素酶、脂肪酶活力测定,结果表明,产蛋白酶、α-淀粉酶、α-半乳糖苷酶和谷氨酰胺酶的峰值时间分别是36、48、42、48h,纤维素酶和脂肪酶在72h内酶活力一直呈上升趋势.     

树舌灵芝发酵特性的研究

研究了树舌灵芝摇瓶发酵过程中生物量、pH值、电导率、胞外粗多糖、纤维素酶活力的变化趋势。结果表明,在树舌灵芝发酵过程中,生物量和pH值均在5d后趋于稳定,电导率先下降3d后逐步上升,胞外粗多糖、纤维素酶活力均在3d时达最大值,此后逐渐下降,5d后基本趋于稳定。     

纤维素酶的CMC酶活测定条件的研究

研究和分析了羧甲基纤维素酶(CMC酶)活性测定法的实验条件.通过单因素实验对酶促反应时间、酶促反应温度、pH、测定波长、底物浓度、粗酶液和底物添加量六个影响因素进行了研究.最后结合正交实验、方差分析和多重比较.确定了纤维素酶活力测定的最佳条件组合.结果表明,在pH6.2、粗酶液和底物添加量各为2mL的情况下,影响纤维素酶活力测定的主次因素依次为酶促反应时间、酶促反应温度、测定波长和底物浓度.纤维素酶活力测定的最佳条件为:在酶促反应温度为40℃,pH6.2,底物浓度为10g/L,粗酶液和底物添加量各为2mL,酶促反应时间30min,测定波长为520nm.     

酸性纤维素酶酶活力的测定

用DNS法测定酸性纤维素酶活力。分析了酶促反应时间、pH、酶液稀释度、温度对酶活力测定结果的影响。研究表明，该纤维素酶酶促反应的最适条件为：酶促反应时间为30min，最适、pH为5．0，酶液稀释至130倍，最适温度50℃。最适条件下的酶活力为1685IU／g。