纳豆激酶高产菌株筛选及发酵条件优化

本实验对日本产优质纳豆中分离纯化得到的15株纳豆激酶菌株进行了研究.通过对其产纳豆激酶能力的测试,筛选出1 mL发酵液产酶为900 IU的N-15株;然后通过单因素试验和正交试验,最终确定其最佳培养条件:培养基由2%蔗糖和2%豆粕组成,发酵温度为37 ℃,起始pH为7;用此优化培养基发酵菌株,菌株产酶量为1033 IU/mL,比优化前有显著的提高.     

纤维素酶产生菌黑曲霉的选育及其产酶条件的研究

进行优良纤维素酶高产菌株的选育,并研究其发酵条件.以黑曲霉菌株S1为原始出发菌株进行紫外诱变,经过单因素实验和正交实验优化突变菌株的产酶条件.获得一株高产纤维素酶黑曲霉(Aspergillus niger)菌株S12,其最佳产酶条件为:在pH6.0、培养温度28℃、培养时间96 h条件下;秸秆粉2.5 g、麦麸2.5 g、1%(NH4)2SO410mL.在此条件下,滤纸酶活力为3.79 IU/mL,羧甲基纤维素酶活力19.06 IU/mL,β-葡萄糖苷酶活力47.33 IU/mL,其酶活分别是原始菌株的1.20倍、1.70倍和1.13倍.     

培养基与分割发酵优化促进Nisin生物合成

为了提高乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）细胞生长和乳酸链球菌素（Nisin）的合成效率,以正交优化法研究培养基分批发酵和分割发酵方式对Nisin生物合成效率的影响。结果表明,优化发酵培养基配方为：5%蛋白胨,3%蔗糖,2%玉米浆,1%酵母浸粉。在此优化条件下,摇瓶培养（11 h）峰值生物量为4.9×109 CFU/mL,较对照提高43%;10 L发酵罐分批发酵峰值生物量、Nisin效价及Nisin合成速率■q分别为7.75×109 CFU/mL、2 573 IU/mL、151.4 IU/（mL·h）,较优化前分别提升38.0%、56.6%、38.2%。分批发酵培养18 h Nisin达到峰值后[■q为147 IU/（mL·h）],以不同比例分割发酵并继续培养7 h,第二次分割（25%）为Nisin合成最适发酵方式,其Nisin平均合成速率达到294 IU/（mL·h）,较分批发酵提高了100%。     

乳酸链球菌6032生产乳链菌肽条件的优化

为了提高乳链菌肽(Nisin)的效价,采用响应面法对乳酸链球菌6032生产Nisin的条件进行了优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响Nisin效价的3个主要因素:pH、温度、种龄,然后采用最陡爬坡法获得逼近最大响应区域时主要因子的水平,最后采用Box-Behnken实验设计及响应面分析确定了Nisin最佳发酵条件:pH 8.1、温度34℃、种龄22h。发酵条件优化前Nisin的效价为1602IU/mL,优化后为2618IU/mL,较优化前提高了63.4%。验证实验结果与模型预测值接近,说明通过响应面实验设计对Nisin发酵条件的优化是有效的。最后通过高效液相色谱(HPLC)对发酵液成分进行了鉴定,证明发酵液中存在Nisin。     

几丁质酶菌株L012的产酶条件研究

在前期实验的基础上,进一步对优良菌株L012的产酶条件进行了研究.结合单因素实验和正交实验结果,确定了该菌株的最佳产酶培养基组成(g/L):细粉几丁质10,淀粉3,玉米浆3,NaNO3 1.0,K2HPO4 1.05,KH2PO4 0.45,NaCl 0.1,MgSO4·7H2O 0.3,FeSO4·7 H2O 0.03,pH 7.0;最佳培养条件:起始pH 7.0,培养温度30 ℃,摇瓶装液量30 mL,摇床转速180 r/min,接种菌龄24h,接种量10％,发酵时程48 h.条件优化后,菌株L012产酶水平从原来的0.75 IU/mL提高到2.31 IU/mL.     

乳酸乳球菌乳酸亚种T0625菌株产Nisin最佳培养条件的研究

对从大白菜叶片上分离得到的一株乳酸乳球菌乳酸亚种T0625产乳酸链球菌素(Nisin)的适宜培养条件进行了研究.采用单因素分析法首先确定了T0625菌株在改良的M17G培养基中产Nisin的最适碳源、氮源、金属离子的种类,即:碳源为葡萄糖;氮源为蛋白胨、酵母膏和牛肉膏组成的混合氮源;金属离子为Mg2 .并确定了各成分的最适浓度.之后确定了装液量、接种量、起始pH和培养温度的最适指标.最终通过正交试验的方法,确定T0625产Nisin的最佳营养条件:葡萄糖2%、蛋白胨4%、酵母膏2%、牛肉膏1%、MgSO4·7H2O 0.003 mol/L、VC0.05%.T0625产Nisin的最佳发酵条件:装液量250 mL(250 mL三角瓶)、接种量7%、起始pH 6.5、35℃下发酵培养12 h.     

Nisin产生菌N-21的分离鉴定与选育

从新鲜牛奶中分离出21株产乳酸球菌,经抑菌试验选出抑菌能力最强菌株SN-21,经鉴定SN-21菌株为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis).以SN-21为出发菌株,经硫酸二乙酯和紫外线诱变处理,获得了一株nisin高产菌株N21(1514.0 IU/mL).经发酵条件研究,在蔗糖1%,蛋白胨1%,牛肉膏0.35%,酵母膏0.35%,KH2PO4 1%,NaCl 0.2%,MgSO4.7H2O0.02%,pH 6.5的优化条件下N21的nisin效价达到了1862.0 IU/mL.     

高产纤维素酶生二素链霉菌的鉴定与选育研究

从朽木中分离到1株产纤维酶活力高的NC-7菌株,经形态观察和生理生化测定,初步鉴定为放线菌,链霉菌属,生二素链霉菌(Streptomyces ambofaciens)。采用硫酸二乙酯60min与紫外70s、硫酸二乙酯60min与紫外80s的复合诱变方法对NC-7孢子进行诱变,得到产纤维酶活力高的2株菌,即X402菌株、P303菌株,其FPA酶活力分别为2.85IU/mL、2.52IU/mL,比NC-7出发菌株分别提高38.95%、22.44%;CMC酶活力分别为4.83IU/mL、5.29IU/mL,比NC-7出发菌株提高13.21%、23.92%。     

高效液相色谱法检测食品中Nisin的方法研究

乳酸链球菌素(Nisin)是一种天然食品防腐剂。本文以乳制品、酱制品和熟肉制品共14种食品为研究对象,采用高效液相色谱仪(HPLC)定性定量评价其Nisin的回收率,优化提取溶剂、色谱条件,进而验证HPLC的精密度、稳定性、重复性和检出限。结果表明:当草莓味优酸乳、辣蒜酱和蜜汁鱼仔称样量为20 g时,提取溶剂为乙腈+稀盐酸,其中稀盐酸百分比分别为60%、40%和60%,经超声、水浴提取;在HPLC紫外检测波长220 nm下,梯度洗脱16 min,得到回收率分别为90.40%、93.51%和104.50%;RSD均小于1.6%;精密度高;稳定性好;重复性好;检出限分别为194 IU/mL、205 IU/mL和198 IU/mL。     

一株产细菌素乳酸菌的筛选及其细菌素特性研究

从传统发酵食品中筛选出了3株发酵液具有较强抗菌活性的乳酸菌。其中鉴定并命名为Lactobacillus plantarum WZS02的菌株所产的细菌素,经121℃处理30 min后活性仅降低了8%左右。使用离子交换和制备液相色谱对该菌所产细菌素进行了初步的分离纯化。测定了细菌素WZS02的效价和抑菌谱,以1 mg/m L的Nisin标准品(1 000 IU/mg)作为参照,以大肠杆菌为指示菌时,菌株WZS02的发酵液效价为9 097 IU/m L,以金黄色葡萄球菌最为指示菌,发酵液效价为2 796 IU/m L。因此,该细菌素对革兰氏阴性及阳性均具有较强的抗菌活性,具备较大的应用潜力。     

乳酸链球菌素工业生产过程的稳定性研究

目的 为提高乳酸链球菌素(nisin)在工业生产中的稳定性,研究不同温度、pH值、酸对nisin稳定性的影响,优化制备工艺,提高其稳定性.方法 建立高效液相色谱快速检测Nisin效价的方法并进行可靠性验证;将nisin水溶液分别于不同pH、不同温度条件下作用一定时间,定期监测其效价;使用不同的酸制备nisin成品,定期...     

乳链菌肽效价测定方法的研究

对琼脂扩散法测定乳链菌肽效价的条件进行了研究,利用标准曲线的斜率和y轴截距评价测定的精确度和灵敏度。结果表明,当使用检测培养基（一）,溶壁小球菌作为检测指示菌,菌悬液浓度约107ctu／ml,检测培养基琼脂浓度0.75％,琼脂层厚度2mm时,测定结果有较高的精确度、灵敏度;吐温20的添加使精确度略有下降。     

HPLC评价Nisin物化特性及其在食品中提取研究

乳酸链球菌素(Nisin)是一种天然防腐剂,采用高效液相色谱法(HPLC)定性定量评价其溶解度、稳定性、生物利用度及在食品中提取回收率的研究。结果表明:当稀盐酸pH=2,50 ℃时,Nisin溶解度最大为30.22 mg/mL;Nisin在温度超过50 ℃时易失活,(4±0.5) ℃利于减缓降解;Nisin在生物条件下利用度为100%,是一种无毒、无害的多肽。在4种食品中,辣蒜酱中Nisin最为稳定,以15 mL乙腈、10 mL稀盐酸(pH=2)为提取溶剂,超声20 min、50 ℃下水浴40 min为处理条件,得到Nisin保留时间为19.067 min;峰分型尖锐明显且基线平稳;标准曲线线性关系好,回收率为92.54%,RSD<3%。     

复合防腐剂在冰鲜鸭肉保鲜中的应用

以番鸭的胴体分割肉为原料,经过不同的保鲜液浸泡处理后,进行真空包装,研究不同保鲜剂对冰鲜鸭保藏性能的影响.通过感官指标、理化指标、微生物指标的测定,结果表明:乳酸链球菌素(Nisin)、乙酸、乳酸和抗坏血酸的配合性使用,能有效延长冰鲜鸭肉的冷藏保鲜时间;冰鲜鸭保藏的最佳工艺参数为Nisin0.05%+乙酸2%+乳酸10%+抗坏血酸2%.     

乳酸链球菌发酵培养基的优化

对乳酸链球菌发酵产生乳酸链球菌素(Nisin)的培养基进行了优化研究,根据代谢发酵控制原理,采用二次回归正交旋转组合设计,考查了乳酸链球菌摇瓶发酵培养基中4种主要成分对乳酸链球菌素(Nisin)产量的影响,通过DPS软件获得最佳发酵培养基配比为蔗糖0.4%,蛋白胨1.2%,酵母浸出膏0.4%,KH2PO4 0.5%。     

基于微囊细胞耦合发酵生产Nisin泡沫分离条件的研究

研究嗜热乳链球菌（Streptococcus thermophilus）6032海藻酸盐-壳聚糖-海藻酸盐（ACA）液芯微囊细胞发酵生产Nisin泡沫分离的影响因素,探索最佳分离条件。在单因素试验的基础上,以Nisin富集比作为评价指标,采用正交试验对泡沫分离Nisin的条件进行优化。结果表明,通气速率和泡沫层高度是影响分离效果的显著因素。为获得较多的Nisin,且不影响发酵,同时兼顾分离效果,确定最佳分离条件为：分离pH值为6,泡沫层高11 cm,通气速率为0.15 L/min,分离时间60 min。在该最佳条件下,Nisin回收率为83.89%,Nisin富集比为8.4,细胞富集比为0.221。     

西式火腿肠复配防腐剂的研制

目的：研究适用于西式火腿肠的安全、高效的复配防腐剂。方法：通过针对3种稀释火腿肠主要腐败菌的抑菌实验和以pH值、挥发性盐基氮(TVB-N)及细菌菌落总数为指标的保鲜实验对10组复配防腐剂进行筛选。结果：保鲜效果最好为0.225% Nisin＋0.225%柠檬酸＋0.195% 溶菌酶,其次为0.375% Nisin＋0.375%柠檬酸,再次为0.375% Nisin＋1.125%山梨酸钾和0.375% Nisin＋0.075% EDTA。结论：复配防腐剂的最佳配方为0.225% Nisin＋0.225%柠檬酸＋0.195%溶菌酶。     

Nisin、姜油协同高氧气调包装熟肉保鲜效果的研究

将熟猪肉采用Nisin和姜油处理,结合60%O2+20%CO2+20%N2和80%O2+20%CO2高氧气调包装,于低温和常温条件下贮藏,研究高氧气调包装对熟猪肉制品的保鲜效果,以空气包装的熟肉制品为对照。结果表明:高氧气调包装可显著抑制熟肉制品贮藏期间菌落总数的上升和感官品质的下降,贮藏后期能有效抑制TBA值的上升,防止肉制品的氧化;0.05%乳酸链球菌素、0.08%姜油结合80%O2+20%CO2高氧气调包装,可使肉制品达到最佳的保藏效果,低温下(0～4℃)至少可以保藏28d,常温下可以保藏15d。     

营养因素对乳酸乳球菌DL-203生长及其Nisin生物合成的影响

对Nisin高产菌株乳酸乳球菌DL—203的营养要求及其 对Nisin生物合成的影响进行了研究。结果表明,乳链菌 肽的生物合成与DL-203的生长呈极显著正相关,乳酸 乳球菌DL—203生长和合成Nisin的最佳碳源和氮源分 别为蔗糖和大豆蛋白胨,其适宜浓度均为15～20g/L。磷 酸盐对乳酸乳球菌DL—203生长及其Nisin生物合成具 有极大的促进作用,其中以Na_2HPO_4效果最好,其浓度 在224mmol/L以下时对菌体生长和Nisin生物合成具有 较大的促进作用。