纤维素酶产生菌的选育研究和形态鉴定

兴隆山国家自然保护区位于甘肃省兰州榆中县内,森林覆盖,雨水充沛,温凉湿润,区内分布着丰富的微生物资源。从兴隆山采集了不同环境的土样,用羧甲基纤维素钠刚果红法初筛,并结合液体发酵复筛测其CMC酶活和滤纸酶活(FPA),最终选育出15株纤维素酶产生菌,其中6株菌不但酶活较高,且生长迅速。经形态学初步鉴定这6株菌分别是1株青霉、3株木霉、1株根霉、1株放线菌,放线菌27-1A产中性纤维素酶。     

大曲中放线菌和青霉产酶初探

以从大曲和糟醅中分离出的放线菌和青霉为研究对象,用淀粉培养基和纤维素刚果红培养基对两种菌分别进行初筛,根据透明圈和菌落直径之比大小筛选出产淀粉和纤维素酶的菌株,进一步通过固体发酵培养并测定淀粉酶和纤维素酶活,筛选出三株分解淀粉和纤维素的菌株命名为放线菌F1,青霉Q4,青霉Q5,其中青霉Q4的两种酶活力都较高,α-淀粉酶活达到1160u/g干曲,内切纤维素酶活达到301.83u/g干曲,滤纸酶活达到48.26u/g干曲。     

组成型纤维素酶高产菌的筛选及产酶条件优化

从富含植物纤维素的土样中筛选得到一株组成型纤维素酶产生茵LC-9,结合Biolog微生物自动鉴定仪和16S rDNA序列分析,该茵株鉴定为Bacillus subtilis.通过发酵与产酶条件优化,确定了菌株最佳培养条件.在优化条件下发酵35 h后,内切纤维素酶活力可达1 301.4U/ml,,木聚糖酶活力可达289.2 U/mL.该菌株产酶发酵周期短,无需纤维素类物质的诱导,推测为一株新型组成型多功能纤维素酶高产菌株.     

一株高产纤维素酶菌的筛选

从校园树林腐木,发霉的衣物和牛场粪便中采样,经富集培养,刚果红染色法初筛,筛选出透明圈较大的菌株6株。经过发酵产酶及酶活力测定获得高产纤维素酶野生菌株有3株,其中酶活最高的是好氧湿牛粪1菌株（HSN1）,其CMC酶活是0.230IU,FPA酶活0.154IU,它的粗酶液崩解滤纸效果十分明显。经形态学初步鉴定,该菌株应为放线菌。     

白酒酒醅中纤维素酶产生菌的产酶活力与其生理生化特性的研究

以白酒酒醅中筛选出的产纤维素酶的细菌为研究对象,利用相关分析和通径分析研究了纤维素酶产生菌的生理生化特性与其产酶活力之间的关系.相关分析和通经分析结果表明:细胞长宽比和葡萄糖产酸指标与纤维素酶活力具有明显的负相关性;淀粉水解实验指标与纤维素酶活力具有明显的正相关性;细胞长宽比对细菌产纤维素酶的负向直接作用最大;葡萄糖产酸指标对纤维素酶活力有较强的负向直接作用;葡萄糖产气和酪蛋白实验指标对纤维素酶具有较强的正向直接作用;同时各个指标还通过其他指标对纤维素酶活力具有间接作用.     

响应面法优化放线菌产纤维素酶发酵条件

采用紫外与60Co-γ射线诱变获得的高产纤维素酶菌株系为研究对象,研究产纤维素酶的发酵条件,结果表明:通过单因素实验,确定复合碳源,蛋白胨,KH2PO43个因素的取值范围。利用SAS9.1软件对碳源、氮源以及KH2PO4进行响应面分析。结果表明:X1(氮源)=4.05g,X2(复合碳源)=3.69g,X3(KH2PO4)=4.68%,CMCase最大酶活为94.8688IU/mL。     

酒醅中纤维素酶产生菌的生理生化特性及与其产酶活力的相关性

以白酒酒醅中筛选出的产纤维素酶的细菌为研究对象,测定了这些细菌的细胞长宽比、糖发酵实验、淀粉水解实验等生理生化特性指标和它们产纤维素酶活力的大小,并利用相关分析和主成分分析研究了生理生化特性指标与纤维素酶活力之间的关系。相关分析结果表明,纤维素酶产生菌的各种生理生化特性指标之间,及这些生理生化特性指标与细菌产纤维素酶活力之间均存在着不同程度的相关性。主成分分析结果表明,纤维素酶活力与细胞长宽比和利用葡萄糖产酸之间存在着明显的负相关性,而与其淀粉水解能力、利用乳糖产酸和柠檬酸盐试验指标之间存在明显的正相关性。     

固态混菌发酵优化纤维素酶系技术

纤维素生物资源是世界上最丰富的可再生有机原料,纤维素的有效降解需要纤维素酶酶系间协同作用,采用单菌产纤维素酶存在酶系不完整和酶活力不高的缺陷。固体发酵生产纤维素酶具有能耗小,成本低等优点,利用产纤维素酶微生物的混菌发酵建立新的发酵工艺,可优化纤维素酶系结构组成,提高水解纤维素糖化率。介绍了固态混菌产纤维素酶的进展和主要趋势,并对其存在的问题进行了分析和展望。     

高温放线菌GPL1纤维素酶的酶学性质研究

对高温放线菌GPLl产生的纤维素酶系进行了酶学性质研究,结果表明该酶系的Cx酶、Cl酶和β-葡萄糖苷酶三个酶组分的活性分别为7.11IU、0.052IU和0.47 IU.三个酶组分的最适作用温度分别为65℃、60℃和70℃、最适pH分别为7.0、7.5和5.5,Cx酶在低于70℃的温度和pH大于6.0的条件下有较好的稳定性,Cl酶在低于65℃的温度和pH大于7.0的条件下有较好的稳定性,β-葡萄糖苷酶在低于65℃的温度和pH大于6.0的条件下有较好的稳定性.Ca2 、Fe2 和Ba2 对Cx酶有弱抑制活性,Mg2 、Cu2 、Ag 、Mn2 、Zn2 、Co2 对Cx酶有较强的激活作用.Cx酶的Km值为6.19 mg/mL,Vmax为6.39 mg/mL.     

绿色木霉液体发酵产纤维素酶的培养基优化

研究液体摇瓶发酵产纤维素酶的最佳培养基组成。通过单因素实验确定了培养基中氮源、碳源和诱导碳源的种类,采用正交试验确定了培养基中4种主要营养成分的组成。结果表明,摇瓶液体发酵产纤维素酶的最佳产酶培养基的种类和组成为：有机氮源蛋白胨和无机氮源硫酸铵的含量分别为11g／L和13g／L,葡萄糖6g/L,磷酸二氢钾10．5g/L,爆破的稻草为13．4g/L;纤维素酶的滤纸酶活为19．22U／mL。     

解淀粉芽孢杆菌利用农业废弃物产纤维素酶的研究

主要综述了纤维素酶的来源、组成和催化机理,以及能合成纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌的研究。     

绿色木霉Sn-9106固态发酵中药残渣产纤维素酶研究

对绿色木霉Sn-9106固态发酵中药残渣产纤维素酶的可行性进行了研究.以滤纸酶为纤维素酶活性指标,麸皮、蛋白胨、KH2PO4添加量为影响因子,先采取单因素实验确定3种影响因子的最佳浓度,然后通过相应面法(RSM)优化产酶最佳条件.结果表明,当最大酶活力为12.3 IU/g时所需固体发酵基质中麸皮、蛋白胨及KH2PO4的浓度分别为19.80g/L、2.06g/L、2.90g/L,与优化前培养基相比,纤维素酶产量提高了近3倍.     

纤维素酶的增效与保护问题浅析

本文从探讨酶的活性本质入手，提出酶的增效与保护，实质是如何使酶的活性中心处于酶蛋白质三维立体构象的最佳位置，并使该位置因竞争性抑制剂的加入而保持稳定的问题，通过考察酶的组成，浓度，ｐＨ值，温度，无机离子，有机溶剂及表面活性剂等对纤维素酶活力的影响因素，筛选出可使纤维素酶增效并保持稳定的助剂。同时还了纤维素酶微囊化的途径，为降低纤维素酶加工成本提供了参考依据。     

Lactose enhances cellulase production by the filamentous fungus Acremonium cellulolyticus

Acremonium cellulolyticus is a fungus that produces cellulase and has been exploited by enzyme industry. To promote cellulase production by A. cellulolyticus strain C-1, we evaluated the effects of the saccharides: Solka Floc (cellulose), soluble soybean polysaccharide (SSPS), pullulan, lactose, trehalose, sophorose, cellobiose, galactose, sorbose, lactobionic acid, and mixtures as carbon sources for cellulase production. Solka Floc with SSPS enhanced cellulase production. Lactose as the sole carbon source induced cellulase synthesis in this fungus, and the synergistic effects between lactose and Solka Floc was observed. Various enzyme activities and the protein composition of crude enzyme produced by cultures with or without addition of lactose were analyzed. The results showed that lactose addition greatly improves the production of various proteins with cellulase activity by A. cellulolyticus. To our knowledge, this is the first report on production of cellulases by lactose in the A. cellulolyticus.     

纤维素酶和木聚糖酶对玉米皮膳食纤维组成和功能特性的影响

研究了纤维素酶和木聚糖酶单独处理及结合处理对酶法去淀粉和蛋白质后的玉米皮膳食纤维(DF1)的组成、溶胀性、持水力和持油能力的影响,并确定了适宜的酶解条件。     

复合酶法提取苦瓜叶总黄酮的研究

以苦瓜叶为原料,采用复合酶法从苦瓜叶中提取黄酮.通过对单一酶和复合酶辅助提取的实验效果比较,得到了纤维素酶和果胶酶组成的复合酶为最佳复合酶,通过单因素试验和正交试验确定复合酶提取苦瓜叶中总黄酮的最佳工艺条件:纤维素酶浓度为0.8mg/mL,果胶酶浓度为0.5mg/mL的情况下,提取温度为55℃、提取介质pH4.5的条件下酶解140min,苦瓜叶总黄酮的提取率可达到3.13％,与直接醇提工艺相比较,总黄酮提取率提高了30％以上.对苦瓜叶中黄酮有效成分进行提取研究,为合理有效利用苦瓜叶这一废弃物提供参考依据,具有重要的理论意义和实际应用价值.     

黑曲霉液体发酵香菇残次品产纤维素酶的培养基优化

为了充分综合利用香菇资源,该实验以黑曲霉（Aspergillus niger）为菌种,对香菇残次品进行液体发酵,在单因素试验的基础上,以羧甲基纤维素酶活作为响应值,采用响应面法对黑曲霉产纤维素酶的液体发酵培养基组成进行优化。结果表明,最佳发酵培养基组成为：香菇与水的比例为1∶9（g∶mL）,麦芽糖添加量为0.9 g/L,蛋白胨添加量为0.7 g/L,酵母膏添加量为0.5 g/L。在此优化条件下,纤维素酶活比培养基优化前提高了22.5%。     

麦麸品种与提取方式对阿拉伯木聚糖结构及抗氧化性的影响

目的：利用不同方式提取不同品种小麦麸皮中的阿拉伯木聚糖（arabinoxylan,AX）,对提取的AX进行结构表征并比较其抗氧化性。方法：分别利用碱提、超声辅助木聚糖酶提和超声辅助纤维素酶提法从不同品种小麦麸皮（‘百农207’‘百旱207’‘冠麦1号’‘华育198’和‘华育166’）中提取AX,测定其化学组成,对比其分子质量、分子结构、热稳定性及抗氧化性能。结果：3?种提取方式中,碱提法得率较高,且总糖质量分数较高;酶提法则能更大程度地保留多酚,这可能是酶提AX抗氧化性较好的原因,但在一定程度上降低了AX的分子质量,且酶提AX单糖组分比例与碱提AX差异较大,糖苷键连接方式也更复杂;两种酶提法相比,超声辅助木聚糖酶提AX得率和总糖质量分数更高,但超声辅助纤维素酶提AX多酚质量分数更高,且二者单糖比例及糖苷键连接方式也不同;此外,不同品种麸皮AX的分子质量、单糖比例、糖苷键连接方式及比例不同。结论：碱提、超声辅助木聚糖酶提和超声辅助纤维素酶提3种方法从小麦麸皮中提取得到的AX结构及活性存在明显差异,酶提法相对碱提法AX得率和分子质量较低,但多酚含量较高、抗氧化性能较好;超声辅助木聚糖酶提较...     

超微粉碎预处理沙柳原料酶解条件优化

研究了超微粉碎预处理技术在沙柳原料酶水解中的应用。沙柳原料经过超微粉碎处理后,通过正交实验设计优化原料的稀酸高温预处理条件,得到最佳的预处理参数为：原料粒度（15μm）、固液比1：12、温度160℃、H2SO4 0．5％、时间20min;经过预处理的沙柳原料通过混料实验设计法对纤维素酶的复配条件进行优化,得到最佳的纤维素酶系比例为：滤纸酶活（FPU）：CMC酶活（IU）：β-葡萄糖苷酶（IU）：木聚糖酶（IU）=1．52：5．35：29．55：1,该酶系比例的纤维素酶比使用单一商品纤维素酶水解效率提高了28％以上。     

Changes in the biodegradability of ryegrass and legume fibres by chemical and biological pretreatments

Two moderately lignified lignocellulosic substrates, ryegrass (Lolium perenne L) and lucerne (Medicago sativa L) stems, were modified by treatment with different chemical and biological reagents. The reagents were chosen to have effects on one or more of the components of the cell wall. The residues were analysed for yield of DM, composition of carbohydrate and non-carbohydrate constituents and degradability as determined by both rumen liquor and a pepsin/cellulase method. The results were compared with the previous results for a highly lignified substrate, barley straw. Both degradability methods again gave results with similar ranking, and the rumen liquor method was more efficient than the pepsin/cellulase method. In these series, only cellulase treatment gave residues with decreased degradability. Treatments attacking the core lignin gave residues with the greatest increase in degradability, but the changes were not as pronounced as for the straw-owing to the lower inherent lignin contents. Some differences between the grass and the legume may be due to the higher protein and lower esterified phenolic acid content of the lucerne.