优化灵芝真菌发酵条件的研究

通过摇瓶试验研究确定转速、接种量、通气量为影响灵芝真菌罐上发酵培养的影响因素,以菌体量、胞外多糖产量为目的产物,利用L9（34）正交试验进行7L发酵罐发酵条件优化,分析得出灵芝真菌培养的最佳工艺条件为：转速200r／min、接种量15％、通气量200L／h;菌丝体最大产量为7．35g／L,胞外多糖干重最高产量为0．92g／L。菌体量与胞体多糖产量存在线性关系,得到回归方程为y=0．0275x＋0．5968。     

离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量

建立了离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量的方法。采用乙腈沉淀乳制品中蛋白,取上清液稀释10倍,过RP柱去除脂肪后,离子色谱测试,梯度淋洗,外标法定量。在0．1mg／L-2．0mg／L范围内,浓度与其峰面积呈良好的线性关系,回归方程为y=O．53x,相关系数（r^2）0．9996,检出限,为0．1mg,L,方法回收率96．2％-107．7％,RSD〈3．4％。     

三种药用真菌灵芝、灰树花和姬松茸富锌能力的初步研究

对三种药用真菌灵芝、灰树花和姬松茸的富锌能力进行比较，在三种药用真菌中灵芝对于锌的富集能力最强．锌浓度在240mg／L时，菌丝锌含量达到6．42mg／g，富集率达30．39％；灰树花的富集能力最弱，富集率最高仅为1．66％．锌浓度超过100mg／L后有明显的抑制作用；姬松茸的富集能力也较强，锌浓度在300mg／L时富集率达到最大7．53％，茵丝锌含量也达到了4．07mg／g，相比较而言灵芝与姬松茸较适合作为富锌的载体。     

NaNO2-Al（NO3）3显色分光光度法测定香椿叶总黄酮的含量

采用NaNO2-Al（NO3）3显色分光光度法测定香椿叶提取液中总黄酮含量，并对测定条件进行研究。结果表明：以芦丁为标样，以NaNO2-Al（NO3）3为显色剂，碱性条件下在510nm处测定显色液的吸光度确定总黄酮的含量，黄酮含量在12．032mg／L～96．256mg／L范围内，服从比耳定律，回归方程A=0．0119C-0．0084，相关系数R^2=0．9998，方法的回收率为96.33％～101．20％，相对标准偏差（RSD）为1．26％；本方法简便、快速。     

固体碱催化制备生物柴油的气相色谱分析法

建立了气相色谱法测定固体碱硅酸钠制备的生物柴油中多种脂肪酸甲酯的方法,确立了最佳分析条件。采用PEG-20M弹性石英毛细管色谱柱,FID检测器,以邻苯二甲酸二乙酯为内标,恒温测定生物柴油中棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯和亚油酸甲酯的含量。结果表明．棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯和亚油酸甲酯分别在0．75～15mg／mL、0．75～15mg／mL、0．9～18mg／mL、1．3～26mg／mL浓度范围内呈良好的线性关系（R〉0．9909）,回收率为96．01％～102．51％（n=5）,精密度试验RSD=I．34％～2．51％。该方法准确可靠、快速简便、重现性好。     

高效液相色谱法测定圣女果中维生素C的含量

建立了一种高效液相色谱测定圣女果中维生素C含量的方法。色谱中采用Hypersil-C18色谱柱,0．1％草酸作流动相,流速1．0mL／min,紫外检测器,检测波长254nm。维生素C在20-100mg／L内有良好的线性关系,线性回归方程为y=51．59x-55．12,相关系数R2=0．9998;5,回收率为97．88％-101．52％,相对标准偏差等于0．15％。所用测定方法简便、快速,能准确测定圣女果中维生素C的含量。     

高效液相色谱法测定山西老陈醋中的川芎嗪

实验通过酸与有机溶剂交替萃取,建立高效液相色谱法（HPLC）测定食醋中川芎嗪的方法。将山西老陈醋样品萃取液浓缩后进行HPLC分析,川芎嗪标准溶液在1μg／mL～100μg／mL内与峰面积线性良好,回归方程：A=55．059C＋0．7339,R^2=0．9999。精密度试验RSD=0．577％,重现性试验RSD=2．744％,平均回收率=85．44％,RSD为7．11％。该方法样品处理简单,分离效果好,测定结果准确度高,可用于山西老陈醋中川芎嗪含量的定量分析。     

固体碱催化制备生物柴油的气相色谱分析法

建立了气相色谱法测定固体碱硅酸钠制备的生物柴油中多种脂肪酸甲酯的方法,确立了最佳分析条件。采用PEG-20M弹性石英毛细管色谱柱,FID检测器,以邻苯二甲酸二乙酯为内标,恒温测定生物柴油中棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯和亚油酸甲酯的含量。结果表明．棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯和亚油酸甲酯分别在0．75～15mg／mL、0．75～15mg／mL、0．9～18mg／mL、1．3～26mg／mL浓度范围内呈良好的线性关系（R〉0．9909）,回收率为96．01％～102．51％（n=5）,精密度试验RSD=I．34％～2．51％。该方法准确可靠、快速简便、重现性好。     

生物柴油中游离甲醇含量测定方法

介绍了一种测定生物柴油中游离甲醇的方法，它基于游离的甲醇被高锰酸钾氧化生成甲醛。甲醛与乙酰丙酮反应生成的衍生物在410nm处用紫外可见分光光度法测定。结果表明，甲醇在0-0．132mg／25mL范围内具有良好的线性关系俾=O．9967），回收率为95．05％-97．10％，精密度试验中相对标准偏差RSD值=0．522％（n=5）。此方法成本低，准确度高，重现性好，适于作为生物柴油中游离甲醇含量测试方法。     

软饮料中Vc含量的测定

利用I3-与抗坏血酸的定量反应关系,提出了碘酸钾与碘化钾在弱酸性条件下成I3-来间接测定软饮料中抗坏血酸的紫外分光光度法,最大吸收波长290nm,KIO3含量在0～5．0×10－6mol／L范围内线性良好,回归方程为A＝1．25×105C＋0．065,线性相关系数v＝0．9999,表观摩尔吸光系数ε290＝1．25×105L／mol．cm．精密度高,回收率在96％～100％。     

灵芝发酵麸皮粗多糖的组成及抗氧化活性分析

为研究灵芝发酵麸皮粗多糖组成及抗氧化活性,对比分析了灵芝发酵前后麸皮粗多糖的体外抗氧化活性和组分,并通过高效液相色谱、傅里叶红外光谱初探灵芝发酵麸皮粗多糖的结构。结果表明:灵芝发酵麸皮粗多糖（GWBP）在4.0 g/L浓度下的DPPH、羟基自由基清除率和还原力分别为91.37%、95.74%和0.92,显著高于未发酵麸皮粗多糖（WBP）（P<0.05）。GWBP组分中黄酮、多酚、蛋白含量分别为5.41、12.74和206.41 mg/g,显著高于WBP（P<0.05）。GWBP是一种吡喃糖,主要由葡萄糖、木糖和核糖等组成,分子量为4.172×103 Da。灵芝液态发酵可以提高麸皮粗多糖的抗氧化活性,改变粗多糖的组成成分。本研究为灵芝发酵麸皮粗多糖天然抗氧化的开发提供参考。     

灵芝液体发酵产胞内多糖的培养基优化

以菌丝生物量及菌丝胞内多糖为指标,用液体发酵方法培养灵芝菌丝并获得菌丝胞内多糖,通过单因素及正交试验,研究了碳源、氮源、微量元素对灵芝菌丝生长及多糖产量的影响。结果表明:灵芝液体发酵生产菌丝多糖最适合培养基组合为:麦芽糖2.0%、酵母提取粉2.0%、ZnSO40.015%、VB10.10%、KH2PO40.2%、MgSO40.05%、pH 6.0,菌丝多糖产量高达6.64%。     

利用生化方法鉴定灵芝原生质体融合子的研究

以美大灵芝和信州灵芝为出发菌株,采用化学融合法将两种灵芝原生质体进行融合,利用生化方法进行检测。结果表明:融合子胞外多糖含量与美大和信芝两亲本相比分别增加了332.80%和22.86%,胞内三萜含量与美大和信芝相比分别增加了36.21%和113.16%,胞外三萜含量与美大和信芝相比分别增加了23.17%和46.31%;采用琼脂糖凝胶电泳实验对融合子及亲本DNA进行检测,融合子DNA移动速度比亲本慢,说明融合子分子量大于两亲本,两亲本遗传物质发生重组。     

PVA固定化细胞发酵灵芝醋酸饮料的研究

以灵芝培养液为主要基质，添加适量酒精以固定化醋酸菌发酵灵芝醋酸饮料。对醋酸菌的筛选、灵芝菌液及酒精的添加量等因素对产品质量的影响进行了研究。通过正交试验得到最佳发酵工艺参数：醋酸菌W-3；灵芝培养液添加量25％；醪液酒精浓度4％。采用PVA固定化醋酸菌以优化工艺进行了50批次发酵实验，固定化细胞粒子机械性能良好，醋酸转化率及产品风味良好。     

灵芝生物转化蛋白核小球藻发酵粗多糖的抑瘤实验

在灵芝基础培养基中添加小球藻粉,灵芝能对小球藻细胞进行生物破壁,同时进行牛物转化：藻粉添加量以10g／L为最佳,产生的多糖最高达0．29mg／L。提取转化的多糖,并与灵芝多糖、小球藻提取多糖的混合物进行抗肿瘤实验：结果表明,产生的转化多糖抗肿瘤效果最好,仡最适剂量（0．2g／kg&#183;d）时,抑瘤率为76．2％。     

灵芝发酵小麦的营养特性与抗氧化能力

采用灵芝对小麦进行固态发酵,并对发酵前后小麦的营养成分和抗氧化能力进行了测定与比较。结果表明,小麦发酵后,蛋白质、粗脂肪、总可溶性物质、可溶性蛋白和可溶性糖的质量分数分别比发酵前提高8.1%、14.9%、837%、197%和537%,氨基酸组成与矿物质含量也发生了改变。小麦发酵后抗氧化能力显著提高。灵芝发酵小麦水提物的DPPH·清除能力、羟基自由基清除率、铁氰化钾还原力和超氧阴离子自由基清除率均显著高于小麦水提物(P 0.05)。灌胃灵芝发酵小麦水提物,可以提高D-半乳糖致衰小鼠血清和肝脏中的SOD、GSH-Px等抗氧化酶活力,降低MDA含量,说明灵芝发酵小麦可提高小鼠对氧自由基的抵抗能力,降低氧自由基过氧化损伤,延缓D-半乳糖的致衰作用。     

灵芝菌液体发酵玉竹产水溶性多糖的工艺优化和抗氧化性研究

为探究灵芝菌发酵玉竹产水溶性多糖工艺及多糖的抗氧化能力,该研究利用灵芝菌液体发酵玉竹,以多糖提高率为评价指标,通过单因素试验及响应面试验对其发酵工艺进行优化,并测定发酵前后多糖的抗氧化能力。结果表明,最佳发酵条件为玉竹添加量6%、豆粕添加量为2%、KH2PO4添加量0.15%、MgSO4·7H2O添加量0.15%、接种量8.7%、发酵时间4 d及发酵温度30 ℃。在此优化条件下,发酵液多糖含量达到5.91 mg/mL,较未发酵的培养基（3.41 mg/mL）提高了73.48%。抗氧化试验表明,在相同浓度下,发酵后多糖（PAF）对比发酵前多糖（PBF）的ABTS+·、DPPH·、OH·清除率均有所提高。其中,PAF对DPPH和OH·的半抑制浓度（IC50）值分别为2.77 mg/mL、0.54 mg/mL,PBF对DPPH·和OH·的IC50值分别为7.94 mg/mL、1.57 mg/mL。结果表明,PAF具有更强的体外抗氧化能力。     

破壁与去壁灵芝孢子粉的化学成分与抗氧化活性比较

本研究以去壁灵芝孢子粉与破壁灵芝孢子粉为原料,探究不同孢子壁加工工艺对灵芝孢子粉化学成分及抗氧化活性的影响。实验对比了两种灵芝孢子粉的水分、灰分、膳食纤维、蛋白质、总三萜、总多糖、微量元素、氨基酸等主要指标及其体外抗氧化活性。结果表明,去壁灵芝孢子粉在灰分、水溶性膳食纤维、蛋白质、总多糖、总三萜和水解氨基酸的含量分别是2.227%、8.810%、15.922%、12.129%、2.556%、6.744%,均高于破壁灵芝孢子粉,其中总多糖含量较破壁提高了近12倍。三萜的色谱图显示,去壁孢子粉中含有更丰富的萜类物质。对比两种孢子粉醇提相与水提相的抗氧化活性,去壁灵芝孢子粉醇提相显示出最强的抗氧化活性,在2 mg/mL的浓度下,总还原力和DPPH自由基清除率分别为1.114和89.860%;在0.5 mg/mL的浓度下,其ABTS+自由基清除率为99.714%,与同浓度下V_C阳性对照组结果相当;在10 mg/mL浓度时,羟基自由基清除率达到84.301%。因此,去壁技术提高了灵芝孢子粉中关键物质含量,增强了其抗氧化能力。     

酸浸高压法破壁对灵芝孢子中三种主要成分变化影响的研究

研究酸浸高压法对未破壁灵芝孢子中灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇含量的影响,与未经酸浸高压的未破壁及已破壁的灵芝孢子进行含量比较。以无水葡萄糖为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝多糖含量进行测定;以齐墩果酸为对照品,用紫外–可见分光光度法,对灵芝孢子的灵芝总三萜含量进行测定;以麦角固醇为对照品,用反相高效液相色谱法,对灵芝孢子的麦角固醇含量进行测定,根据结果对三种成分含量进行比较。结果表明,经酸浸高压的未破壁灵芝孢子,其灵芝多糖的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁及已破壁灵芝孢子,其灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于未经酸浸高压的未破壁灵芝孢子。酸浸高压法可作为一种新的灵芝孢子破壁方法,该法获得的灵芝多糖、灵芝总三萜和麦角固醇的含量明显高于对照组。     

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子（Ganoderma lucidum spore,GLS）为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。