高速逆流色谱分离制备白胡椒中单萜类化合物

应用高速逆流色谱法分离制备了白胡椒中3种单萜类化合物。以V(叔丁基甲基醚)∶V(甲醇)∶V(水)=2∶1∶1为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,在主机转速900 r/min、流动相流速2.5 mL/min条件下,从2.76 g样品中一步分离制备得到3,7-二甲基-2-辛烯-1,6,7-三醇35 mg,对薄荷烷-1,2,8-三醇-2-O-β-D葡萄糖苷55mg,5-羟基龙脑-2-O-β-D葡萄糖苷40mg,经高效液相蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测纯度均达95.0%以上,各化合物结构经质谱和核磁共振氢谱、碳谱鉴定。研究结果表明,利用该方法可以对白胡椒中的单萜类化合物进行快速的分离和纯化,且制备量大,分离效率高。     

橘皮类黄酮的分离、纯化及结构鉴定研究

柑橘皮内含丰富的类黄酮化合物,具有多种生物学活性,受到医药、食品等行业的关注。本文通过硅胶、聚酰胺及Sephadex HL-20柱对温州蜜桔皮中类黄酮化合物进行反复分离纯化,得到5种类黄酮单体。采用LC-ESI-MS、1H-NMR和13C-NMR及红外光谱等技术对其结构进行鉴定。鉴定结果:化合物A,3,5,6,7,8,3’,4’-七甲氧基黄酮;化合物B,5,6,7,8,4’-五甲氧基黄酮;化合物C,3-羟基-5,6,7,8,3’,4’-六甲氧基黄酮;化合物D,5,6,7,8,3’,4’-六甲氧基黄酮;化合物E,橙皮素芸香糖苷。其中,化合物C是从温州蜜桔皮中首次发现的。     

HPLC-ESI-MS/MS快速鉴定蜜橘中4种多甲氧基黄酮

通过HPLC-ESI-MS/MS技术分离鉴定出蜜橘中4种多甲氧基黄酮,分别为蜜橘黄素、35,,6,7,83,’,4’-七甲氧基黄酮、5-降甲基蜜橘黄素、橘皮晶。干燥蜜橘幼果粉碎后用95%乙醇热回流提取,石油醚萃取。HPLC条件为色谱柱:XBridgeTM C18(4.6×250 mm,5μm);流动相:甲醇:水=60:40(体积比);流速:0.8 mL/min;检测波长:330 nm。MS条件:ESI+,鞘气、辅助气为N2,喷雾电压4.5 kV。     

高速逆流色谱法分离纯化艾叶中的异绿原酸A

应用制备型高速逆流色谱法(HSCCC)分离纯化艾叶中的异绿原酸A。选用弱极性溶剂体系正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水(3∶7∶4∶6,V/V)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,在流速2 m L/min,转速900 r/min,检测波长280 nm的条件下对粗提物进行制备分离,一次进样25 mg,可得到11 mg样品。利用高效液相色谱(HPLC)检测样品的纯度为99.01%。将得到的样品进行高效液相-离子阱-飞行时间质谱(LCMS-IT-TOF)、核磁共振氢谱(1H-NMR)检测确定其化学结构,并确定该样品为异绿原酸A。实验表明制备型高速逆流色谱可以成功地将艾叶中的异绿原酸A进行分离纯化,该方法分离效率高,对异绿原酸A在食品医疗领域的应用具有重要意义。     

灰树花多酚HPLC分析方法优化及组分的液质定性

通过优化检测波长、流动相以及洗脱程序,构建灰树花多酚高效液相色谱的分析测定方法,确定了最佳检测波长为280 nm,流动相为甲醇和0.1%甲酸,梯度洗脱起始流动相为甲醇:0.1%甲酸=5:95。在最优的液相分离条件下,采用液相色谱-质谱联用技术对多酚组分进行分离定性,通过对应质谱结果分析可推测其中的多酚组分,包括鞣花酸、槲皮素、4-羟基苯甲酸、没食子酸-3-O-(6`-O-没食子酰)葡萄糖苷、咖啡酰酒石酸、咖啡酸、表儿茶素没食子酸酯、5,6,7,3’,4’-五甲氧基黄酮、对香豆酰奎尼酸、间双没食子酸、去氢二阿魏酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷、3,4,5-三甲氧基苯甲酸、5-十九烷基间苯二酚、阿魏酸、对香豆酰基苹果酸以及对香豆酰基酒石酸。     

高速逆流色谱法分离制备孜然黄酮

应用高速逆流色谱法分离制备了孜然中的黄酮类成分。以氯仿∶甲醇∶水=4∶4∶2(v∶v∶v)为两相溶剂系统,在主机转速为850r/min、流速1.8mL/min、检测波长254nm条件下进行分离制备。所得分离收集液经高效液相色谱法检测,结果表明,从孜然黄酮粗提物中分离得到了纯度超过90%的两种黄酮类成分;经干燥得样品重分别为26mg和24mg。     

柿叶黄酮化合物分离制备

应用高速逆流色谱法和制备型高效液相色谱法分离制备柿叶黄酮化合物并进行初步结构鉴定。采用乙酸乙酯- 甲醇- 水(5:1:5,V/V)做溶剂系统,在主机转速850r/min、流速1.5mL/min、检测波长254nm 条件下进行HSCCC分离纯化,所得流分浓缩干燥后再采用制备型HPLC 分离制备柿叶黄酮化合物,所得产物采用HPLC 检测并进行显色反应、紫外图谱和质谱分析。结果表明,从柿叶粗提物中分离所得4 种化合物是以槲皮素和山奈酚为苷元的黄酮苷类化合物。     

蜂蜜黄酮类化合物检测方法建立及其在云南5种特色蜂蜜中的分布

建立蜂蜜中芦丁、杨梅酮、槲皮素、莰菲醇4种黄酮化合物含量的固相萃取-高效液相色谱检测方法。蜂蜜样品用pH2的盐酸溶液溶解、离心后,用Oasis HLB固相萃取柱吸附与净化,4种黄酮经VP-ODS色谱柱(150mm×4.6mm,5μm)分离,紫外检测器检测,检测波长270nm。流动相为甲醇-水(pH3.0)(60:40,V/V),流速0.7mL/min。检出限：芦丁、杨梅酮均为0.05mg/kg,槲皮素、莰菲醇均为0.04mg/kg;回收率：芦丁91%～92%、杨梅酮82%～85%、槲皮素84%～86%、莰菲醇86%～89%。分析云南省的5种特色蜂蜜样品,结果表明不同品种蜂蜜中4种黄酮类化合物含量差异显著,显示蜂蜜黄酮类化合物含量可作为鉴别蜂蜜品种的一个指标。     

高速逆流色谱法从小叶金钱草中分离制备三种黄酮苷类化合物

应用高速逆流色谱法分离制备小叶金钱草中的三种大极性黄酮苷。小叶金钱草乙酸乙酯萃取物经硅胶柱色谱氯仿-甲醇(1∶3)洗脱、葡聚糖凝胶70%甲醇纯化、高速逆流色谱正己烷-正丁醇-水-冰乙酸(1∶1.7∶1∶0.1,V/V/V/V)两相溶剂系统分离,在主机转速800 r/min,流速2 mL/min,检测波长254 nm条件下进行分离制备,得到3个分离组分。对所得分离产物进行高效液相色谱分析及~1H、~(13)C NMR鉴定,结果为杨梅素3,3′-二-α-L-鼠李糖苷,木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷,其纯度达到90%以上。这三种化合物均为首次从小叶金钱草中分离得到,为今后小叶金钱草的化学成分研究提供依据。     

高纯度苏丹红单体的高效逆流色谱纯化研究

建立了两种高纯度苏丹红单体的高效逆流色谱分离纯化方法。采用1 000 m L逆流色谱分离柱,V(正己烷)∶V(乙腈)=1∶1体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为45 m L/min,上样量600 mg,经过一次分离纯化(40 min),即可将苏丹红Ⅱ样品的检测纯度(280 nm下)从97.01%提高到98.42%,得率为90.8%。在254 nm和500 nm下的纯化组分检测纯度也分别可以达到98.01%和99.79%。采用同样的色谱柱,V(正己烷)∶V(乙腈)∶V(乙酸乙酯)=5∶5∶1体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为20 m L/min,上样量900 mg,经过两步分离纯化,可以将苏丹红Ⅳ的检测纯度(280 nm下)从84.67%提高到96.6%,得率为48.8%。在254 nm和500 nm下的检测纯度可以分别达到97.16%和98.32%。该方法具有快速、高效、制备量大等特点,可以为高质量苏丹红标准样品的研制提供技术支持。     

高速逆流色谱法分离制备刺梨黄酮成分

应用高速逆流色谱法分离制备了刺梨中的黄酮类成分。以氯仿- 甲醇- 水(4:4:2,V/V)为两相溶剂系统,在主机转速为800r/min、流速1.0ml/min、检测波长254nm 条件下进行分离制备,所得分离收集液经高效液相色谱法检测,结果表明,从刺梨黄酮粗提物中分离得到了纯度分别为75.6%、95.1%、73.5%、89.1%、87.7% 的五种黄酮类成分;经干燥得对应样品重分别为21、8 、11、20、55mg。该法具有简便、快速的优点。     

高速逆流色谱分离铁皮石斛中芥子酸的研究

运用高速逆流色谱技术从铁皮石斛中分离制备出芥子酸,为石斛属内首次分离得到。分离采用的溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4∶6∶3∶7,体积比),上相做固定相,下相做流动相,流速2 m L/min,转速800 r/min,检测波长280 nm。单次进样石斛提取物200 mg,分离出纯度为93.11%的芥子酸20.34 mg,固定相保留率46.67%。体外抗氧化结果显示,芥子酸有较强的DPPH自由基清除能力,IC50为0.046 mg/m L。     

AB-8大孔吸附树脂精制芦柑皮总黄酮及黄酮类化合物的分离

目的：研究AB-8大孔吸附树脂精制芦柑皮总黄酮的工艺条件及芦柑皮黄酮类化合物的分离纯化。方法：采用AB-8大孔吸附树脂动态法精制芦柑皮总黄酮,考察上样液总黄酮质量浓度、pH值、上样流速、洗脱液乙醇体积分数对吸附解吸性能的影响;然后将精制的芦柑皮总黄酮经硅胶柱层析、半制备高效液相等技术进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化学结构。结果：AB-8大孔树脂精制芦柑皮总黄酮的最佳工艺条件为上样液总黄酮质量浓度3.03 mg/mL、上样液pH 3.0、上样流速3.0 BV/h、洗脱液乙醇体积分数为90%,最优条件下可使芦柑皮总黄酮的纯度从17.8%提高到63.1%;此外,从精制的芦柑皮黄酮中分离到8 个黄酮类化合物,分别鉴定为：橘皮素、川陈皮素、4’,5,7,8-四甲氧基黄酮、5-去甲基-橘皮素、橙黄酮、橙浸膏、柚皮苷、橙皮苷。结论：AB-8大孔树脂能很好地富集纯化芦柑皮总黄酮,该法简单、可行;从精制的芦柑皮黄酮中分离到8 个黄酮类化合物,其中,4’,5,7,8-四甲氧基黄酮、5-去甲基-橘皮素、橙浸膏、柚皮苷、橙皮苷首次从芦柑皮中分得。     

高速逆流色谱分离纯化苦荞中芦丁、槲皮素

利用乙醇溶液提取苦荞麸皮中总黄酮,将得到的苦荞黄酮粗提物用DA-201大孔树脂进行初步纯化。以 得到的黄酮初步纯化产物为原料,应用高速逆流色谱对其中的芦丁和槲皮素进行分离、纯化。所用两相溶剂体系 为乙酸乙酯-正丁醇（4∶1∶5,v/v）,上相为固定相,下相为流动相,流速2 mL/min,转速850 r/min,检测波长 254 nm。所得产物经高效液相色谱检测,结果表明得到芦丁纯度为99%,槲皮素纯度为94%。表明该法分离制备苦 荞麸皮中芦丁、槲皮素简便,所得产物纯度高。     

柑、橘、橙果皮中天然羟基化多甲氧基黄酮的转化率研究

柑橘果皮中的多甲氧基黄酮,尤其是羟基化多甲氧基黄酮具有抗癌、抗炎等一系列显著的生物活性。本文建立一种有效分析柑橘种属羟基化多甲氧基黄酮的方法,对柑(芦柑)、橘(柳叶橘)、橙(赣南脐橙)果皮采用乙酸乙酯回流提取2次,继而分别用正己烷-甲醇(体积比1∶1)分别萃取,减压浓缩成浸膏,进行梯度洗脱的HPLC-UV分析。结果表明,柑橘种属果皮中多甲氧基黄酮主要集中于甲醇层,约占柑皮鲜重0.54%,橘皮、橙皮中含量略低。柑橘种属果皮中羟基化多甲氧基黄酮主要发生在黄酮母核A环5位上。柑皮中羟基化多甲氧基黄酮主要为5-羟基川陈皮素(141.39±1.84)μg/g、5-羟基橘皮素(19.67±1.24)μg/g、5-羟基甜橙黄酮(13.98±2.24)μg/g、5-羟基-3,6,7,8,3′,4′-六甲氧基黄酮(4.95±1.08)μg/g,转化率分别达到15.28%,3.87%,39.12%和17.15%,转化水平显著高于橘皮和橙皮。橘皮中未检出5-羟基甜橙黄酮,橙皮中未检出5-羟基橘皮素。研究(羟基化)多甲氧基黄酮提取、检测及天然羟基化转化率,对深入挖掘柑橘原料资源,开发预防慢性疾病产品具有重要指导意义。     

橘皮素的提取分离、改性及对人体肝星状细胞LX-2的抑制作用

通过分离纯化及改性得到橘皮素和5-去甲氧基橘皮素,并研究其对人体肝星状细胞株LX-2的抑制作用。通过无水乙醇提取、氯仿萃取从陈皮中得到多甲基黄酮混合物,再以不同浓度的乙酸乙酯和石油醚的混合液为洗脱剂,采用硅胶柱层析分离纯化多甲基黄酮混合物,得到橘皮素纯品。将橘皮素置于盐酸乙醇溶液中回流,对所得产物进行纯化即可得5-去甲氧基橘皮素,采用质谱和核磁共振谱进行结构确证。利用人体肝星状细胞株LX-2细胞作为工具细胞,研究其生物活性。结果表明,5-去甲氧基橘皮素在12.5 μmol/L条件下对人肝星状细胞株LX-2的抑制率即可达到50%,而橘皮素需要在近150 μmol/L条件下才能达到50%的抑制率,即改性后的橘皮素对人体肝细胞的抑制有效率增加了10 倍以上。     

HPLC同时测定豆制品中常见的3种食品添加剂

采用反相高效液相色谱法快速、准确测定豆制品中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠。3种添加剂在Zorbax sb-C18色谱柱上分离,甲醇-乙酸铵溶液(5∶95,V∶V)为流动相洗脱,流速1.0mL/min,15min内实现良好分离。方法检出限为0.5mg/kg,变异系数为0.67%～1.23%,回收率在97.7%～99.7%。该方法简便准确,适合豆制品的日常检测。     

pH区带逆流色谱法分离纯化吴茱萸中的吴茱萸碱和去氢吴茱萸碱

目的分离纯化吴茱萸中的活性成分。方法应用p H区带逆流色谱,以氯仿-乙酸乙酯-甲醇-水(3:1:3:3,v/v)为两相溶剂体系,上相加入10 mmol/L盐酸作为固定相;下相加入5 mmol/L三乙胺作为流动相,转速850 r/min,流速2.0 m L/min,检测波长254 nm,所得馏分经HPLC检测,并经电喷雾电离(ESI)质谱和核磁共振谱(NMR)鉴定化合物的结构。结果从2 g吴茱萸粗提物中一次性分离得101 mg吴茱萸碱和304 mg去氢吴茱萸碱,其纯度为90.0%和93.1%。结论此法简便、快捷、重现性好、上样量大,适于制备性分离吴茱萸碱和去氢吴茱萸碱。     

高速逆流色谱法分离制备金银木叶中芦丁

应用高速逆流色谱法分离制备金银木叶中的芦丁,经过选择优化,确定以乙酸乙酯-正丁醇-水(5∶2∶5,v∶v)为两相溶剂系统,以上相为固定相,下相为流动相,在主机转速800 r/min,流速2 m L/min,检测波长256 nm条件下进行分离制备,得到4个分离组分。对所得分离产物进行高效液相检测,发现组分II为芦丁,其纯度达到96%以上,得率为10.7%。本实验从金银木叶中分离制备芦丁,方法简便,所得产物纯度高,为进一步扩大金银木的开发应用提供了理论依据。     

油菜花粉中黄酮苷类的制备分离和鉴定

以油菜蜂花粉80%乙醇超声提取液中的正丁醇萃取物为黄酮苷分离样品,乙酸乙酯:正丁醇:水=2:1:3(体积比)为溶剂体系,主机转速900 r/min,上相为固定相,下相为流动相,1.5 mL/min流速,30℃条件下,400 mg样品经高速逆流色谱制备分离,所得产物经HPLC检测,5 h内得到2个黄酮苷单体和1个黄酮苷混合物,经UV、MS、1H-NMR和13C-NMR结构鉴定为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1()()()2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(89.1 mg,纯度98.2%)和山奈酚-3-O-新橙皮糖苷(41.9 mg,纯度96.3%),其中山奈酚-3-O-新橙皮糖苷属首次从油菜花粉中制备分离得到,另外对混合物中所含2个黄酮苷进行了HPLCMS分析和结构推断.