碱酶两步法提取沙棘籽蛋白的工艺研究

以沙棘籽粕为原料,首先采用碱提酸沉法提取沙棘籽蛋白,得到最佳提取工艺参数为:pH 10、料液比1∶12、温度60℃、时间60 min;然后用碱性蛋白酶对碱提残渣中蛋白质进行酶法提取,最佳提取条件为:pH 8.5、碱性蛋白酶加酶量240 U/g、料液比1∶10、温度60℃、时间60 min。通过碱、酶两步法提取后,沙棘籽蛋白总提取率为73.86%。对沙棘籽蛋白进行氨基酸分析,其必需氨基酸组成比例较大豆分离蛋白更均匀,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸。     

榛子分离蛋白提取及其功能特性的研究

以低变性榛子饼为原料,经脱脂后采用碱提酸沉法提取榛子分离蛋白,确定了最佳提取工艺条件,并分析了榛子分离蛋白的功能特性.结果表明,提取榛子分离蛋白的最佳工艺条件为:料液比1:15,碱提pH9.0,碱提温度50℃,碱提时间70 min,酸沉pH4.5.最佳条件下榛子分离蛋白的溶解性、持水性和吸油性分别为34.0%、2.6 mL/g和2.15 mL/g,乳化性、乳化稳定性、起泡性和泡沫稳定性分别为61.2%、85.0%、86.5%和24.0%,榛子分离蛋白的等电点为4.52.     

从花生蛋白粉中提取花生分离蛋白的条件优化

采用碱提酸沉法从脱脂花生蛋白粉中提取花生分离蛋白,通过单因素试验和正交试验优化了提取工艺条件,确定最佳工艺条件为:浸提温度60℃,料液比1∶9,pH 9.0,浸提时间90 min,酸沉pH 4.5.在此条件下,蛋白质提取率达42.5%,产品纯度为95.65%.所得花生分离蛋白具有良好的功能特性.     

胡麻分离蛋白提取工艺研究

为促进胡麻分离蛋白在食品工业中应用,采用碱溶酸沉原理研究胡麻分离蛋白提取工艺。分别讨论料液比、浸提液pH值、浸提温度和时间等条件对蛋白提取率影响,确定最佳提取条件为:料液比1:13、碱提液pH值9.5、时间60、温度60℃,在此条件下,胡麻分离蛋白提取率为42%,纯度达89.37%。     

巴旦木蛋白提取工艺

以巴旦木为原料,采用碱提酸沉法和超声波辅助碱液浸提法制备巴旦木蛋白,并对其理化性质进行研究。结果表明：碱提酸沉法提取巴旦木蛋白的最佳工艺条件是料液比1:25、pH10、60℃浸提40min;超声辅助碱液浸提法提取巴旦木蛋白的最佳工艺条件是pH9.0、料液比1:20、提取时间15min、超声功率125kW,在此条件下提取率为37.16%。与碱提酸沉法比较,超声波辅助碱液提取法时间短、得率高。     

浒苔蛋白质提取工艺的研究

本试验以浒苔为原料,在测定浒苔蛋白等电点的基础上,用碱提酸沉法提取浒苔蛋白质,以单因素和正交试验确定最佳工艺条件。结果表明：浒苔蛋白质的等电点PI为3.0,提取浒苔中蛋白质最佳工艺条件为,碱提温度60℃,碱提时间120min,料液比1∶10,碱提pH值9。     

两种大豆低聚糖提取工艺比较的研究

研究了碱提酸沉法和醇法提取功能性大豆低聚糖的工艺，并通过正交试验对两种提取方法的工艺进行了优化，结果为：碱提酸沉法提取大豆低聚糖的最佳工艺为：pH9、时间1h、温度70℃、料液比1：14；而醇法提取大豆低聚糖的最佳工艺为：乙醇浓度50％、温度50℃、时间80min、料液比1：12。对两种方法进行比较，结果表明：两种方法提取大豆低聚糖的提取率基本相同，但醇法浸提大豆低聚糖的浓度明显高于碱提酸沉法。     

马铃薯淀粉废水中蛋白质的提取研究

实验采用碱提酸沉法与超滤相结合从马铃薯淀粉废水中提取蛋白质。通过单因素实验和响应曲面法优化碱提酸沉工艺,结果表明,碱提酸沉法提取马铃薯淀粉废水蛋白质的最佳工艺参数为:碱提pH9.35,碱提时间59min,酸沉pH3.41,酸沉时间10min。在此条件下蛋白质提取率可达54.24%。酸沉液采用10ku超滤膜进一步提取蛋白,最终总提取率可达93.42%。     

橡胶籽蛋白提取工艺研究

研究了碱提酸沉法提取橡胶籽蛋白的工艺条件,通过Plackett Burman试验设计筛选出对橡胶籽蛋白提取有显著影响的因素为pH、提取温度和料液比.在单因素试验的基础上,采用响应面法优化,得到最佳工艺条件为:碱提pH9.8,提取温度57.7℃,料液比1∶43.5,酸沉pH 4.4.在最佳工艺条件下,橡胶籽蛋白提取率达70.64％,纯度为83.56％.     

脱脂麦胚蛋白的分离制备

本文对脱脂麦胚蛋白的分离制备分别用碱法和酶法进行了对比研究.结果表明,碱法制备脱脂麦胚蛋白的最佳工艺条件:pH值10,时间60min,温度45℃,固液比1:16,提取率为78.97%,酸沉条件:pH值4.2,得率为66.16%;木瓜蛋白酶法制备脱脂麦胚蛋白的最佳工艺条件:pH值5,时间60min,温度60℃,加酶量3000U/g,提取率可达97.98%,酸沉条件:pH值4.2,得率为78.15%.     

响应面法优化草菇抗氧化肽的酶法制备工艺

以草菇为原料提取蛋白质,蛋白酶酶解蛋白制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验基础上,结合响应面法优化草菇抗氧化肽的提取工艺。通过超滤分离纯化获得不同分子量的肽段,采用DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力法测定超滤组分的抗氧化活性。结果表明:中性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解工艺条件为酶解时间3.70 h,加酶量3.81%,底物质量浓度3.11 g/100 mL,在此条件下,酶解产物的DPPH自由基清除率为69.85%±2.52%。通过超滤分级制备所得分子量最小的肽段F1（<3 kDa）具有最高的抗氧化活性,其DPPH自由基清除率、Fe2+螯合率和还原力分别为78.81%±1.56%、91.05%±1.65%、0.47±0.02。草菇抗氧化肽可作为潜在的天然抗氧化剂来源得到开发利用。     

体外模拟消化芝麻蛋白产生多肽的抗氧化性分析

为证实芝麻蛋白在人体内消化可产生抗氧化肽,采用体外模拟消化芝麻蛋白,分析芝麻蛋白水解产生多肽的组成与抗氧化活性。结果显示:在体外模拟消化模型中,芝麻蛋白在1 h内丧失原有亚基结构,最终水解为相对分子质量在15 kDa以下的多肽;水解产生的多肽具有抗氧化性,其中胃蛋白酶水解产生的多肽具有较强的DPPH自由基清除能力,而胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶的水解有助于提升多肽的ABTS自由基清除能力。上述结果表明,芝麻蛋白在人体内消化会产生抗氧化肽,不同消化阶段的芝麻多肽组成有差异,从而造成抗氧化活性的差别。     

响应面法优化鹿骨多肽酶解工艺及其体外抗氧化活性

目的:筛选鹿骨蛋白最适提取温度和最佳酶解工艺并检测其抗氧化活性。方法:根据鹿骨蛋白的蛋白浓度筛选出最适提取温度,根据水解度（DH）通过单因素及响应面实验设计筛选鹿骨多肽的最佳酶解工艺,并通过测定鹿骨多肽对DPPH自由基、羟自由基的清除能力来评价鹿骨多肽的抗氧化活性。结果:最佳提取温度为95 ℃,通过响应面法优化及实际验证确定了胃蛋白酶和胰蛋白酶最佳酶解工艺分别为胃蛋白酶酶用量6200 U/g,温度37.3 ℃,pH2.0,时间3.2 h,此时的水解度为11.23%;胰蛋白酶酶用量6300 U/g,温度37.2 ℃,pH8.1,时间4.0 h,此时的水解度为23.09%。鹿骨多肽对DPPH自由基、羟自由基具有清除能力,其IC₅₀值分别为:3.72、2.24 mg/mL。结论:本实验得到了鹿骨蛋白最佳提取温度并确定鹿骨多肽最佳酶解工艺,且鹿骨多肽对DPPH自由基、羟自由基具有良好的清除能力,说明鹿骨多肽具有良好的抗氧化活性。     

辣木叶蛋白质酶解产物的制备及其抗菌活性研究

为了研究辣木叶蛋白及其酶解产物的抗菌活性,利用碱提酸沉法提取辣木叶中的蛋白质,并分析其氨基酸组成;分别采用6种单酶和3种复合酶对辣木叶蛋白进行酶解,考察辣木叶蛋白及其酶解产物的抑菌活性,确定最佳蛋白酶。通过二倍稀释法,研究有效抑菌组分对不同菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。结果显示:辣木叶蛋白提取率为32.67%±0.45%,必需氨基酸占氨基酸总量的39.27%。抑菌活性研究表明辣木叶蛋白仅对金黄色葡萄球菌显示抑菌活性,抑菌圈大小为(7.67±0.24) mm;胃蛋白酶结合胰蛋白酶分步酶解蛋白所得酶解产物抑菌能力均高于其他几种蛋白酶,酶解产物对化脓性链球菌的抑菌活性最强,抑菌圈大小为(10.83±0.62) mm,且其对金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌及化脓性链球菌的MIC分别为5、10、2.5 mg/mL。说明辣木叶蛋白及其酶解产物均有抗菌活性,双酶酶解法制备的酶解产物具有较强的抑菌性及广抑菌谱。     

Antioxidant activities of enzymatic‐hydrolysed proteins of dromedary (Camelus dromedarius) colostrum

This work investigated the antioxidant activities of dromedary colostrum proteins before and after hydrolysis by pepsin, trypsin, α‐chymotrypsin, pancreatin and papain. The enzymatic hydrolysis affected the degrees of hydrolysis, electrophoretic profiles, molecular weight distribution and hydrophobic/hydrophilic properties of the generated peptides. The antioxidant activities were evaluated using four antioxidant assays, including 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2′‐azinobis(3‐ethylbenzothiazoline‐6‐sulfonic acid) (ABTS) radical‐scavenging activities, ferric reducing power and ferrous ion chelating activity. Interestingly, the antioxidant activities of dromedary colostrum proteins were enhanced after enzymatic hydrolysis. The highest antioxidant potential was obtained by pancreatic hydrolysates (P ≤ 0.05). These results suggest that dromedary colostrum protein hydrolysates are an important source of natural antioxidant peptides.     

杜仲籽粕水解肽的制备及其抗氧化活性分析

以碱提酸沉得到的杜仲籽粕蛋白为原料,以水解度和总抗氧化能力（T-AOC）为指标,在单因素实验的基础上,以酶添加量、酶解时间和底物浓度为考察因素,采用Box-Behnken法进行三因素三水平响应面试验优化设计得出杜仲籽粕水解肽的制备最佳工艺参数,并对得到的杜仲籽粕水解肽进行体外抗氧化测定。结果表明,中性蛋白酶为最优蛋白酶,最佳酶解条件为酶添加量10000 U/g,酶解时间1.50 h,底物浓度20 g/L,在该条件下的水解度为47.45%±1.50%,T-AOC为30.62±0.59 μmol/g;最佳工艺下得到的杜仲籽粕水解肽,对DPPH自由基、超氧阴离子自由基以及ABTS自由基清除率的IC₅₀值分别为0.731、4.258、0.407 mg/mL,表现出良好的抗氧化性,为杜仲籽粕高值化利用及抗氧化肽功能产品开发提供理论依据。     

酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离与稳定性研究

目的：研究酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离和稳定性,为其开发应用提供基础数据。方法：超滤分离酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽,比色法测定其抗氧化能力。结果：超滤分级后得到分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽对O2－•、•OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的IC50分别为18.85 mg/mL、3.13 mg/mL、35.23 μg/mL。该抗氧化肽经过4 h胃蛋白酶+胰蛋白酶处理前后对DPPH自由基清除率分别为81.05%、82.26%;在pH 4、8条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率分别为98.02%、11.80%（100 μg/mL）;在温度95 ℃条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率为87.11%（100 μg/mL）;用浓度为1.0 mol/L的NaCl处理6 h,相比对照组,对DPPH自由基清除率由51.58%下降到22.68%（60 μg/mL）。结论：超滤后得到的分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的抗氧化能力比酶解原液有一定提高;且在酸性、高温、脱盐处理后对DPPH自由基的清除能力保持较好;胃肠道消化酶对其DPPH自由基清除能力的影响不显著（P＞0.05）。     

基于乳清蛋白粉水解产物抗氧化活性优化酶解工艺

通过提高乳清蛋白粉水解产物(Whey protein powder hydrolysate,WPPH)的抗氧化活性,对乳清蛋白粉的酶解工艺进行优化。首先以WPPH水解度及抗氧化活性(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、羟自由基清除率、总抗氧化能力)为指标,从4种蛋白酶中筛选得到酶解效果较好的胰蛋白酶和菠萝蛋白酶。然后通过单因素与正交试验确定双酶协同水解乳清蛋白粉的最适酶解条件。结果表明:复合酶最优酶解条件为菠萝蛋白酶和胰蛋白酶以1:1的比例同时添加,pH6.0、温度50℃、酶底比0.3%、底物浓度3 g/100 mL、酶解时间2.5 h,在此条件下WPPH水解度达到34.24%,分子量低于1000 Da的肽段占比在50%以上,DPPH自由基清除率91.42%±0.51%、羟自由基清除率80.85%±0.47%、总抗氧化能力(46±0.65)μmol/L。在本研究确定的酶解工艺条件下,乳清蛋白粉水解产物具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

舟山海域4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合物自由基清除活性与抑菌活性研究

对马鲛鱼、带鱼、鳀鱼、梅童鱼碱性蛋白酶酶解蛋白亚铁螯合多肽自由基清除活性和抑菌活性进行研究,结果表明:4种低值鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽(Low value fish enzymatic hydrolysates protein ferrous chelatingpeptides,LEFP)均出现不同程度的清除羟自由基、超氧阴离子、二苯基苦基苯肼(DPPH)等自由基的活性;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对超氧阴离子的清除作用均较弱;羟自由基清除活性较强的是梅童鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;DPPH自由基清除活性较强的是马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽;4种低值鱼酶解产物亚铁螯合多肽对待测菌株有不同程度的抑菌作用。其中带鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽对3个被测菌株都表现出明显的抑菌活性,而马鲛鱼酶解蛋白亚铁螯合多肽则没有明显的抑菌活性。     

生物解离大豆蛋白酶解物体外模拟消化抗氧化活性变化

挤压膨化大豆在生物解离过程中,通过酶解（碱性蛋白酶、风味蛋白酶）产生的大豆蛋白酶解物（soybean protein hydrolysate,SPH）有良好的抗氧化活性,因此,需要探索模拟胃肠道（gastrointestinal,GI）消化对蛋白酶解物抗氧化活性的影响。分别以蛋白酶（碱性蛋白酶、风味蛋白酶）酶解得到的SPH和经过模拟GI消化后的产物作为研究对象,采用水解度、氨基酸组成、分子质量分布、氧化自由基吸收能力（oxidative radical absorption capacity,ORAC）、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力及2,2’-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS）阳离子自由基清除能力对样品抗氧化活性进行分析。结果显示：相对于风味蛋白酶酶解,采用碱性蛋白酶进行酶解时抗氧化活性更高;但是经过模拟GI消化后,风味蛋白酶酶解得到的SPH抗氧化活性更高,ORAC为69.15 μmol/mg、DPPH自由基清除能力为27.29%、ABTS阳离子自由基清除能力为56.21%,肽的相对含量更高,为75.86%,并且肽中具有抗氧化活性的氨基酸含量更高,分子质量小于1 kDa的肽相对含量最高,为17.35%。