培养基质量控制对维生素B12含量测定的影响

目的 GB 5413.14-2010微生物法检测维生素B₁₂中培养基的质量和配方直接影响莱士曼氏乳杆菌在整个检测过程中的活化,接种和测定。方法 为解决这一问题,本文通过比较不同配方菌株活化培养基和种子液制备肉汤培养基及不同品牌测定培养基对维生素B₁₂ 结果测定的影响。利用莱士曼氏乳杆菌对维生素B₁₂的特异性和灵敏性,定量测定质控样品中维生素B₁₂的含量,并通过质量控制措施对测定结果进行分析评价。结果 方案设计中A2种活化菌株方式所用培养基和B1品牌的维生素B₁₂测定培养基得到的拟合曲线线性更好,质控结果组间差异也更小。结论 表明培养基质量控制对维生素B₁₂检测的准确度和稳定性极为重要。     

α-淀粉酶降低青稞快消化淀粉含量工艺优化

目的:提高和增加青稞的附加值。方法:以黑青稞粉为原料,利用α-淀粉酶制备快消化淀粉含量低的青稞粉,以快消化淀粉含量为指标,通过响应面试验优化降低青稞快消化淀粉含量的最优工艺条件,并通过α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率评价其体外降糖活性。结果:α-淀粉酶制备快消化淀粉含量低的青稞粉的最佳工艺条件为α-淀粉酶添加量150 U/g、料液比1∶10 (g/mL)、酶解时间2 h、酶解温度65 ℃,此时黑青稞中快消化淀粉含量为11.6%,慢消化淀粉含量为13.0%,抗性淀粉含量为75.4%。酶解后,青稞粉对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的最高抑制率分别为75.86%,75.54%。结论:试验方法可大幅度降低青稞中快消化淀粉含量。     

液相色谱—柱后衍生法测定苹果中5种氨基甲酸酯类农药残留量的不确定性评定

目的:对苹果中5种氨基甲酸酯类农药检测结果的准确度进行分析。方法:依据NY/T 761—2008对苹果中5种氨基甲酸酯类农药残留量进行检测,并对其测定过程的不确定度进行评定和分析。结果:苹果中克百威、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、异丙威含量以其扩展不确定度形式分别表示为(0.105 7±0.007 8),(0.107 7±0.006 2),(0.109 2±0.005 8),(0.103 9±0.008 4),(0.106 1±0.007 6) mg/kg (k=2)。 结论:试验中不确定度的主要来源为标准物质、回收率、样品前处理和检测仪器,其中整体表现为U_rel(标准)＞U_rel(回收率)＞U_rel(前处理)＞U_rel(仪器)。     

玉米全粉中黄曲霉毒素B1标准物质的研制

目的 研制均匀性和稳定性满足计量要求的玉米全粉中黄曲霉毒素B₁成分分析标准物质,用于粮食及其制品中黄曲霉毒素B₁的质量控制。方法 采用高效液相色谱法对玉米全粉中黄曲霉毒素B₁候选物进行均匀性检验、稳定性考察,选取8家具有较高检测水平的实验室开展多家实验室联合定值。结果 均匀性检验通过方差分析可知,F_统计值＜F_临界值 。稳定性监测结果通过分析可知,候选物中黄曲霉毒素B₁未观测到不稳定性。确定了玉米全粉中黄曲霉毒素B₁标准值和不确定度。结论 该标准物质具有良好的均匀性,可在常温 (<25℃)下保存,在低于60℃的条件下运输。玉米全粉中黄曲霉毒素B₁标准物质定值结果为27±3μg/kg,k=2(95%置信区间),已被批准发布为国家二级标准物质。     

气象、样品属性等因素与花生油中黄曲霉毒素B1污染水平关联性分析

目的 以2017—2018年广东省市售花生油中黄曲霉毒素B₁（AFB₁）的污染状况为例,分析特定因素对AFB₁污染的影响。方法 采集2017—2018年广东省21个地市637份花生油样品,记录其样品标签属性,并根据GB 5009.22—2016《食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》中的高效液相色谱-柱后衍生法测定样品中AFB₁含量。结合第五代欧洲中期天气预报中心全球气候大气再分析数据库（ERA5）获得的样品产地气象数据计算样品生产前1个月的平均数据,并分析其与AFB₁含量关联性。结果 广东省2017—2018年市售花生油中AFB₁总检出率为65.3%,超标率为24.6%。其中,定型包装花生油样品无超标,而散装花生油样品有较高的超标率,且AFB₁含量中位数显著高于定型包装样品。在多个气候因素中“花生油生产前1个月的平均气温水平”与散装包装样品AFB₁的超标率和含量有较强的关联,其中生产前平均气温超过25 ℃的散装包装样品AFB₁含量中位数约为气温低于22 ℃样品的3.5倍。然而其他气候因素并未展现出与AFB₁含量的相关性。结论 2017—2018年广东地区散装花生油样品AFB₁具有较高的超标率,而花生油生产前1个月平均气温是影响其AFB₁含量的重要因素。建议对广东省散装花生油的生产环境、生产方式进行重点关注并提高花生油质量,以减少居民AFB₁等危险因素的暴露风险。     

食用植物油中过氧化值和黄曲霉毒素B1调查

通过检测食用油的过氧化值、黄曲霉毒素B₁,了解餐饮业食用油的使用情况。方法 在市县地区采集具有代表性的样品共150个,过氧化值按照GB/T 5009.37—2003方法检测,黄曲霉毒素B₁ 按照GB/T 5009.23—2003方法检测。结果 过氧化值合格率为100%,黄曲霉毒素B₁检测情况为:煎炸油合格率91.7%,花生油合格率89.3%,调和油、菜籽油、大豆油、棕榈油合格率100%。煎炸油、花生油黄曲霉毒素B₁检测值范围为1.00～21.6 μg/kg、0.80～40.4 μg/kg。结论 食用油的原料质量要严格管控,防止污染,杜绝黄曲霉毒素B₁的产生。     

有色米乳酸饮料发酵工艺优化及抗氧化和降血糖活性研究

目的:开发具有较好抗氧化及降血糖活性的有色米乳酸饮料产品。方法:以黑米和紫米为主要原料,考察有色米比例构成、乳酸菌发酵粉添加量、发酵时间、料液比对有色米乳酸饮料感官评分值、总酚含量、铁离子还原能力、ABTS自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制率的影响。结果:有色米乳酸饮料最佳发酵工艺条件为紫米和黑米质量比(m_紫米∶m_黑米)1∶5,料液比1∶8 (g/mL),乳酸菌发酵粉添加量5%,发酵时间40 h,此条件下有色米乳酸饮料感官评分值为83.6±2.51,ABTS自由基清除能力为(145.02±7.88) mmol TE/g·DW,铁离子还原能力(FRAP)为 (33.41±1.70) mmol Fe²⁺/g·DW,总酚含量为(4 208.78±281.26) μg GAE/g·DW,α-葡萄糖苷酶抑制率为(13.94±0.01)%。结论:有色米乳酸饮料呈紫红色,口感柔和,酸甜味适中,具有较好的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。     

卵白蛋白肽复合酶法制备工艺优化及解酒效果

目的:验证卵白蛋白肽的解酒活性,提高鸡蛋产品的附加值。方法:用碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合酶解卵白蛋白,以乙醇脱氢酶(ADH)激活率为指标,采用响应曲面法优化酶解工艺。通过检测卵白蛋白肽的总抗氧化性、水解度、氨基酸组成及相对分子质量,评估卵白蛋白肽的解酒效果。结果:最佳酶解工艺条件:酶解时间5 h,复合酶用量3 100 U/g,酶解温度50 ℃,料液比(m_卵白蛋白∶V_蒸馏水)3.5∶25 (g/mL),在此条件下得到的卵白蛋白肽ADH激活率为(22.71±0.15)%,总抗氧化能力值为(9.51±0.03) U/mL,水解度为(29.28±0.16)%。卵白蛋白肽富含谷氨酸(9.554 3%)、丙氨酸(3.863 3%)、亮氨酸(5.764 7%)等有益于提高解酒活性的氨基酸,小分子肽(＜1 000 Da)含量超过88.77%。结论:使用复合酶解法制备的卵白蛋白肽具有良好的抗氧化活性和解酒效果。     

分散固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定植源性油料油脂中67种除草剂

目的 建立分散固相萃取结合液相色谱-串联质谱同时测定油料油脂中67种除草剂残留的检测方法。方法 选取花生、大豆、油菜籽、花生油、大豆油及菜籽油为典型基质试样,经1%甲酸-乙腈提取,通过乙二胺基-N-丙基和无水MgSO₄分散固相萃取净化。以甲醇和5 mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸）为流动相梯度洗脱,采用C₁₈色谱柱分离,ESI离子源正负离子模式同时进行多反应监测（MRM）,基质标准曲线外标法定量。结果 基质加标试验结果表明,0.000 5~0.08 mg/L浓度范围内67种除草剂线性良好,决定系数（R²）均>0.992,定量限（LOD）为0.005~0.02 mg/kg。3个加标水平下（LOD、2LOD、10LOD）的回收率为62.3%~118.1%,RSD（n=6）均<15%。结论 本方法稳定性高、特异性强、灵敏、准确、高效,可以用于油料油脂中多种除草剂残留的定性定量检测。     

检测角度对激光诱导荧光光谱技术检测花生油AFB1污染的影响研究

近年来,近红外光谱、高光谱等快速无损检测技术,被广泛应用于农产品中黄曲霉毒素B₁(Aflatoxin B₁, AFB₁)的检测。但这些方法主要是根据黄曲霉改变样品本身的结构结合化学计量学方法间接检测样品中AFB₁,无特异性。因此,本研究拟利用研发的激光诱导荧光(laser induce fluorescence, LIF)技术获取污染AFB₁花生油的荧光光谱,建立精确无损检测花生油中AFB₁的定性、定量方法。首先,人工制备7种不同AFB₁污染水平的花生油样品,同时设置对照组。其次利用研发的LIF系统从不同角度检测样品的荧光光谱信号。最后,对获取的光谱进行分析。结果显示,三个检测角度的荧光强度在400-800 nm内均随着AFB₁污染水平的增加而增加,定性和定量的结果均是当检测荧光角度为90度时表现最优。表明当检测角度为90度时,LIF技术可以作为一种快速、精确的方法来判定花生油中AFB₁污染水平。     

利用枯草芽孢杆菌发酵生产环磷腺苷的工业化试验

为了实现环磷腺苷的发酵生产,对一株枯草芽孢杆菌Bacillus.subtilis jsim-1277在摇瓶、自控罐、20 M3发酵罐上的发酵条件进行了试验。结果表明,最适宜发酵条件是p H 6.7,且添加K2HPO41.0 g/d L,Na F 0.05 g/d L;在摇瓶、自控罐、大型发酵罐产苷分别为7.17、6.01、7.10 g/L。     

江香薷活性成分香芹酚对指状青霉的抑菌作用

以指状青霉菌(Penicillium digitatum)为供试菌,研究江香薷活性成分香芹酚的抑菌活性及其抑菌机理。本文采用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC),以此评价香芹酚对指状青霉菌的抑菌效果;并通过研究香芹酚对指状青霉的菌丝形态变化、孢子萌发率、细胞膜渗透性和菌体内可溶性糖含量,阐述香芹酚对指状青霉菌的抑菌机理。结果表明:香芹酚对指状青霉菌的MIC、MFC分别为0.125 mg/mL和0.25 mg/mL;经不同浓度香芹酚处理后的指状青霉,菌丝形态发生明显改变,孢子萌发率显著降低,细胞膜渗透性增强,菌体内可溶性糖含量降低。说明香芹酚能有效抑制指状青霉菌的孢子萌发,破坏细胞膜结构完整性,内含物外渗,降低营养物质含量,影响病原菌正常生长发育,从而发挥抑菌效果。     

基于纳米金棒刻蚀的多色可视化传感器应用于乌头碱快速检测

目的基于纳米金棒刻蚀的多色可视化传感器快速检测乌头碱。方法采用H2O2-辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)-3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)体系的氧化产物TMB2+刻蚀纳米金棒,产生不同颜色的溶液,并将其与酶联免疫吸附测定法联用,构建一种酶联免疫多色可视化传感器应用于乌头碱快速半定量分析。结果在最优条件下,纳米金棒溶液的局域表面等离子体共振吸收峰的位移与乌头碱浓度在5~35ng/L范围内呈现较好的线性关系,检出限为1.67ng/L。结论该方法具有快速、选择性好、灵敏度高、裸眼可视化半定量等优点,对乌头碱的快速检测有一定的实际应用价值。     

基于氧化型3,3’,5,5’-四甲基联苯胺纳米材料的比色和光热双模式检测谷胱甘肽

目的 建立基于氧化型3,3'',5,5''-四甲基联苯胺(3,3'',5,5'' -tetramethylbenzidine, TMB)的比色和光热双模式谷胱甘肽(glutathione, GSH)检测方法,用于食品中谷胱甘肽含量的快速检测。方法 利用普鲁士蓝(Prussian blue, PB)的过氧化物酶活性催化TMB与过氧化氢反应生成蓝绿色且具有光热转化性能的氧化型TMB。而GSH能将氧化型TMB还原为无色的TMB,使溶液吸光度值和光热转化产生的温升与GSH含量呈线性相关,实现比色法和光热法双模式定量检测GSH。结果 检测最优pH为3.5,反应时间为5 min,PB质量浓度为1 mg/mL,过氧化氢质量浓度为2.5 μL/mL,TMB质量浓度为15 mg/mL,光热照射时间为70 s,照射功率为3.5 W,最优条件下比色法检出限为14.8 μg/mL,光热法为1.1 μg/mL,光热检测灵敏度较比色法提高约13倍,检测可在10 min内完成,实际样品加标回收率在84~119%之间。结论 该方法具有良好的重复性、特异性和准确性,可用于保健食品、果蔬中GSH的快速检测。     

‘鲁赫’与野生刺蔷薇花精油成分比较

本研究提取‘鲁赫’刺蔷薇花和野生刺蔷薇花精油并测定其精油得率,比较其挥发性成分和脂肪酸组成。结果表明:‘鲁赫’刺蔷薇花精油得率明显高于野生刺蔷薇花(p0.05);采用气相色谱-质谱联用技术对两种刺蔷薇花挥发性成分进行分离鉴定,经分析可以明确‘鲁赫’刺蔷薇花中含有已知成分70种,野生品种中的68种成分。主要挥发性成分为二十烷、二十五烷、三十烷和邻苯二甲酸二丁酯四种,经分析得挥发性成分组成及含量无明显差异(p0.05);气相色谱法测定脂肪酸组成及含量,‘鲁赫’与野生刺蔷薇花均检测出29种脂肪酸成分,其中癸酸、棕榈油酸、反式油酸、二十碳酸含量较为丰富。‘鲁赫’刺蔷薇花作为改良品种与传统野生刺蔷薇花相比保留了野生刺蔷薇花原有特性。     

广东省常见发酵茶中黄曲霉毒素B1污染现状及暴露评估

目的了解广东省市售包括黑茶、红茶、乌龙茶等发酵茶中黄曲霉毒素B1(AFB1)的污染含量水平,并评估其饮用健康风险。方法按照简单随机抽样方法确定样品量,在广东省4个片区选取9个地市的超市商店、批发市场、茶叶行等市售环节以及网店,分别采集黑茶、红茶、乌龙茶等发酵茶类样品共260份,按GB 5009.22—2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》第一法同位素稀释-液相色谱-串联质谱法测定其中的AFB1含量。运用暴露限值(MOE)法和数学模型法,结合2012年广东省居民营养与健康状况调查数据、AFB_1浸出率数据,评估人群从饮用茶叶摄入AFB1的膳食暴露量情况。结果 260份发酵茶类样品中AFB1的总体检出率为1.15%(3/260),检出值范围为0.26~0.56μg/kg。3份检出AFB_1的样品均为普洱茶熟茶样品。3种发酵茶类别间的检出率差异无统计学意义(P0.05)。代入发酵茶中AFB_1的含量平均值计算,广东省总人群、广东省茶叶消费人群经茶叶摄入AFB_1的平均膳食暴露量分别为0.000 352、0.000 981 ng/kg BW;代入AFB1含量最大值计算的膳食暴露量为0.005 73、0.016 0 ng/kg BW。MOE值均10 000,按欧洲食品安全局推荐的MOE结果判定依据,表明广东省居民经茶叶摄入的AFB1对健康造成危害的风险低。以广东省人群乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率为11.1%计算,广东省人群由于茶叶AFB1的膳食暴露引发肝癌的风险为0.000 010 9~0.000 674例/10万人,表明目前茶叶中的AFB_1对广东省居民产生的健康风险低。结论广东省市售发酵茶中AFB_1的检出率低、检出值低,对广东省总人群和茶叶消费人群的平均膳食暴露风险低,具有较高的饮用安全性。     

紫外可见分光光度法测定鸡精调味品中呈味核苷酸二钠的不确定度评定

目的评定紫外可见分光光度法测定鸡精调味料中呈味核苷酸二钠的不确定度。方法根据SB/T 10371-2003《鸡精调味料》采用紫外可见分光光度法对鸡精调味品中呈味核苷酸二钠进行测定,依据不确定度评定规程,建立不确定度评定的数学模型,进而对整个测量过程中不确定度展开系统性评价。结果当鸡精调味品中呈味核苷酸二钠测定量为1.520 g/100 g时,其扩展不确定度为0.0246 g/100 g (P=95%, k=2),测量结果为(1.520±0.0246) g/100 g。结论方法重复性实验引入的不确定度是鸡精调味品中呈味核苷酸二钠测量不确定度的主要贡献因子。     

液相色谱-四级杆飞行时间质谱筛选代谢对羟基苯乙酮的芽胞杆菌

目的使用液相色谱-四级杆飞行时间质谱筛选代谢对羟基乙酮的芽胞杆菌。方法以20种不同芽胞杆菌为研究材料,采用液相色谱-四级杆飞行时间质谱(liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry,LC-QTOF-MS)技术,通过分子特征提取和谱库检索,获得总体代谢物信息。结果筛选出1株能够代谢对羟基苯乙酮的芽胞杆菌,为福氏芽胞杆菌FJAT-10032,测试结果中,该化合物精确分子量为136.0522,与Metlin谱库检索得分为90.97,占菌株FJAT-10032总代谢物相对含量为1.39%。结论福氏芽胞杆菌能够产生对羟基乙酮,本研究为该菌的开发和利用提供理论依据。     

2’-岩藻糖基乳糖的功能、合成及应用研究进展

2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL)在母乳低聚糖(human milk oligosaccharides,HMOs)中含量最高,研究证明2’-FL具备调节婴儿肠道菌群平衡、抵抗病原体的黏附、免疫调节和促进婴儿大脑神经发育等功能。合成2’-FL的方法有化学合成法、酶法合成法与全细胞合成法。2’-FL已经进入商业化生产阶段,其产业化受到产量、成本、品质及安全等因素的制约,需要在合成宿主、碳源的选择等方面进一步开展相关研究。2’-FL已被美国和欧洲联盟等国家批准可添加至婴幼儿配方食品及膳食补充剂中,研究证明添加了2’-FL的婴幼儿配方奶粉在营养成分和功效上更贴近母乳。本文综述了2’-FL的结构、母乳中的含量及其生理功能,总结了现阶段2’-FL的制备方法和应用情况,展望了2’-FL未来的研究方向,为2’-FL在婴幼儿配方食品中的开发及应用提供理论支持。     

基于恒电位法快速测定肉汤中5’-鸟苷酸

方法 以Ru(bpy)22+/SMWCNTs/Au复合材料修饰的玻碳电极为媒介，筛选出与电子发生还原反应的靛蓝作为显色剂，研究了溶液pH和靛蓝添加量体积比对靛蓝电化学还原性能的影响，经过条件优化后构建一种使靛蓝脱色生成隐色体靛白的双电极体系恒电位装置。结果 在最佳检测条件下，当5’-鸟苷酸线性范围在0~0.6 mmol/L时，靛蓝脱色率随5’-鸟苷酸浓度的增大而呈线性上升(r2=0.9614)，该方法在肉汤样品中5’-鸟苷酸的检测过程中，显示出与电化学传感器技术高度相似的结果。结论 本方法能够有效地在实际应用过程中现场检测鲜味核苷酸，因其操作简便、便携微型化，在未来的食品质量检测领域将具有较大的市场优势和应用价值。