芽孢杆菌产碱性蛋白酶的研究进展

本文主要综述了微生物碱性蛋白酶在国内外的应用研究和现状,综述了碱性蛋白酶的结构与功能,产碱性蛋白酶的菌株以及相应碱性蛋白酶的应用及存在的问题,并对碱性蛋白酶应用前景进行了展望。     

碱性蛋白酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究进展

筛选能产生碱性蛋白酶的微生物菌株以及对碱性蛋白酶的酶学性质进行研究,为碱性蛋白酶的广泛应用奠定了基础。本文就近年来国内外对微生物碱性蛋白酶产生菌的筛选和对碱性蛋白酶的酶学性质研究进展进行了综述。     

制备抗氧化棉籽肽用蛋白酶的筛选

本实验研究了由Alcalase碱性蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、无锡2709碱性蛋白酶、无锡精制中性蛋白酶等蛋白酶水解棉籽蛋白的水解度及水解液抗氧化活性的大小。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解能力最大,水解液清除自由基的能力也最大,实际生产中为了去除多肽的苦味物质,应先用Alcalase碱性蛋白酶水解,再用Flavourzyme风味酶作用。     

单糖及寡糖对碱性蛋白酶热失活半寿期的影响

研究采用动力学的方法,较系统地考察了2709碱性蛋白酶的热失活半寿期,探讨某些单糖及寡糖对碱性蛋白酶熟稳定性的影响.研究结果表明,某些单糖及寡糖能够明显延长2709碱性蛋白酶的热失活半寿期,对碱性蛋白酶起到稳定和保护作用,能够有效提高蛋白酶的热稳定性.     

酶水解法提高大米蛋白溶解性的研究

本研究旨在用蛋白酶水解方法改善大米蛋白的溶解性能。通过对多种蛋白酶的对比分析可知,碱性蛋白酶的水解效果好于其它蛋白酶,但正交试验结果表明,即使在优化条件下水解,单一的碱性酶水解所得大米蛋白溶解性最高达到43.12%。若先用碱性蛋白酶水解再用复合蛋白酶水解则蛋白溶解性最高达到71.46%,而碱性蛋白酶与其它酶的联合应用效果略差;若先使用复合蛋白酶后使用碱性酶则蛋白溶解性只有54.73%。表明不同酶对大米蛋白分子具有不同的水解特点。     

酶法水解梅鱼蛋白的实验研究

主要研究了碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶对小梅鱼的水解作用。采用正交试验,详细比较了温度、酶浓度、水解时间、酶比例对鱼蛋白水解度的影响。结果表明:单酶最佳水解酶为碱性蛋白酶,其水解条件:温度60℃,加酶量0.3%(以蛋白含量计),时间5h,水解度达51.02%;碱性蛋白酶与复合蛋白酶双酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度为60℃,加酶量0.3%,时间5h,水解度达57.03%;碱性蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶三酶的最佳水解条件:碱性蛋白酶与复合蛋白酶比例为3∶1,温度60℃,加酶量0.3%,反应5h后添加风味蛋白酶,其反应条件:加酶量0.3%,温度60℃,时间为6h,水解度达62.57%。     

微生物碱性蛋白酶研究进展

本文主要综述了微生物碱性蛋白酶在国内外的应用研究和现状,对微生物碱性蛋白酶的产生菌,碱性蛋白酶的应用、基因结构及性质,高产工程茵的选育技术等方面的研究进展进行了概述,并根据当前应用研究状况对微生物碱性蛋白酶在今后的发展进行了展望.     

二次旋转组合法优化酶解胡麻籽粕蛋白工艺研究

以胡麻籽粕蛋白粉为原料分别采用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶和中性蛋白酶对胡麻籽粕蛋白进行酶解以水解度和可溶性氮含量为指标对酶制剂进行筛选。通过单因素及二次旋转组合设计试验以水解度为指标,获取最佳酶解工艺。结果表明,碱性蛋白酶与风味蛋白酶对胡麻籽粕蛋白的酶解效果较好,胡麻籽粕蛋白的最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶作用底物浓度30%,碱性蛋白酶作用时间4.5 h,碱性蛋白酶添加量35 000 U,风味蛋白酶添加量3 000 U,风味蛋白酶作用时间3.5 h。     

多羟基化合物对碱性蛋白酶热失活半寿期的影响

在现代食品工业中,酶的应用几乎涉及到食品加工的各个领域.随着酶制剂日益广泛的应用,经济效益显著.蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称,而碱性蛋白酶则适宜在碱性条件(pH 9～11)下水解动植物蛋白质,广泛存在于动植物及微生物中.本文应用动力学的方法,较系统地考察了2709碱性蛋白酶的热失活半寿期,探讨多羟基化合物对碱性蛋白酶热稳定性的影响.研究结果表明,某些多羟基化合物能够明显延长2709碱性蛋白酶在较高温度下的半寿期,对碱性蛋白酶起到稳定和保护作用,能够有效提高蛋白酶的热稳定性.     

4种常用蛋白酶对牛骨蛋白的酶解动力学研究

对碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶水解牛骨蛋白的动力学特征进行较为系统的研究。以酶解初速度为评价指标,得到了4 种酶的最佳反应温度与pH 值,其中碱性蛋白酶最佳温度为55℃,pH11.7;中性蛋白酶最佳温度为45℃,pH7.3;胃蛋白酶最佳温度为30℃,pH1.5;胰蛋白酶最佳温度为55℃,pH9.3。4种蛋白酶按Km 值排序从小到大依次是：胃蛋白酶＜胰蛋白酶＜碱性蛋白酶＜中性蛋白酶;Vmax 从大到小依次是：胃蛋白酶＞碱性蛋白酶＞胰蛋白酶＞中性蛋白酶。     

蛋白酶在乙醇溶液中的性质及构象

对碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶在乙醇溶液中的性质和构象进行了研究。研究结果表明,在乙醇溶液中,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶催化反应的最适温度有不同程度下降,下降幅度为5～10℃;它们的最适pH与在缓冲液体系中相差不大。2种蛋白酶在醇溶液中的稳定性随着乙醇浓度的升高而下降,特别是当乙醇浓度上升至60%,2种蛋白酶的稳定性均迅速下降。在相同的乙醇浓度下,木瓜蛋白酶的稳定性比碱性蛋白酶高。当乙醇浓度为60%时,木瓜蛋白酶的半衰期是碱性蛋白酶的21倍。圆二色谱研究表明,在乙醇溶液中碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的二级结构均发生了明显变化,荧光光谱表明,在乙醇溶液中2种蛋白酶的荧光强度均有明显减弱,表明它们的三级结构均发生明显变化。     

五种蛋白酶对牡蛎酶解产物滋味特性的影响

以牡蛎为研究对象,在水解度一致的情况下,探究胰蛋白酶、动物蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶对牡蛎酶解产物感官、肽分子量和游离氨基酸的影响。结果表明:五种酶解产物均具有较强的鲜味。碱性蛋白酶酶解产物在五种酶解产物中整体感官评价最佳。分子量<5 kDa肽比例从大到小是胰蛋白酶(74.99%)、动物蛋白酶(73.44%)、中性蛋白酶(71.53%)、碱性蛋白酶(68.46%)和风味蛋白酶(58.77%)。五种酶解产物中游离氨基酸百分比均呈现出谷氨酸百分比最高、组氨酸百分比最低的特点。游离氨基酸总量从高到低分别为胰蛋白酶(22.816 mg/g)、中性蛋白酶(20.775 mg/g)、风味蛋白酶(20.530 mg/g)、动物蛋白酶(16.287 mg/g)、碱性蛋白酶(16.232 mg/g)。胰蛋白酶、动物蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解产物中TAV大于1的游离氨基酸数量分别为10、8、8、9和11种。5种蛋白酶酶解产物中,TVA值最大的氨基酸均是谷氨酸。     

Comparative study on the effect of acid and alkaline protease enzyme treatments on wool for improving handle and shrink resistance

Wool is commonly treated with alkaline protease enzyme to improve handle and shrink resistance. The limitations associated with the usage of this enzyme on wool are excessive weight and strength losses and pH sensitive enzyme activity, etc. Wool is generally stable if processed in acidic conditions rather than alkaline conditions. This study explores the possibility of using acid protease enzyme to improve handle and shrink resistance of wool. The acid protease enzyme is applied on acid and alkaline peroxide bleached wool fabrics using optimized process parameters, and the results are compared with alkaline protease enzyme treated wool fabric. The acid protease treated fabrics show 30% higher softness than alkaline protease treated fabrics with 72% and 62% lower weight and strength losses, respectively. The alkaline peroxide bleaching prior to acid protease treatment provides 100% and 67% higher whiteness and shrinkage resistance, respectively, to wool than the acid peroxide bleaching. The action of the enzymes on wool and shrink resistance and handle of the treated fabrics is characterized using SEM, FT‐IR and KES‐F method.     

氨基硅烷修饰的磁性纳米粒子固定化碱性蛋白酶

用3-氨丙基三乙氧基硅烷对四氧化三铁磁性纳米粒子表面进行修饰,以戊二醛作为交联剂固定化碱性蛋白酶。结果表明：在经过表面修饰的磁性纳米粒子具有较好的磁分离能力,碱性蛋白酶能有效地结合在修饰后的粒子表面。固定化酶的最佳条件：酶添加量为7000U/g、反应温度为40℃、时间为1.5h;固定后酶活力可达3352U/g,回收率为48%,在反复使用5次以后,依然能保持34.2%的酶活力。     

地衣芽孢杆菌2709 蛋白酶分离纯化研究

对产自地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)2709 的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE 阴离子交换层析、凝胶层析4 步纯化,最终获得电泳纯的酶。以去酰胺度及酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行优化。结果发现：提纯酶的比活力达61069U/mg,纯化倍数为38.7,活性回收率为19.3%,去酰胺度为20.9%。并研究该酶的基本酶学特性,结果发现：该酶最适作用pH 值为10.0,最适反应温度为50℃。40℃保温2h 后该酶保持80% 以上的活力,在pH8～11 之间有较高的pH 值稳定性。     

山羊乳酪蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

为了制备山羊乳酪蛋白活性肽,选用中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,采用对比和正交试验方法,研究了山羊乳酪蛋白单酶和复合酶的酶解工艺,测定了山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数,优选出了山羊乳酪蛋白的酶解工艺参数。结果表明：山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数为8.5379 mmol/g。单酶中胰蛋白酶和中性蛋白酶对山羊乳酪蛋白的水解度较大,木瓜蛋白酶较小。胰蛋白酶对山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺：加酶量2500 U/g,pH 7.5,50 ℃下酶解2 h。中性蛋白酶和胰蛋白酶复合以及中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶三种酶复合的水解度较大,其水解度、平均肽链长度和平均相对分子量分别为17.34%、21.16%,5.77、4.73和692、567 u。     

Actinomucor elegans、Aspegillus oryzae和Rhizopus oligosporus产蛋白酶条件及蛋白酶性质的比较

比较了腐乳生产菌株Actinomucor elegans、豆酱和酱油生产菌株Aspegillus oryzae以及天培生产菌株Rhizopus oligosporus产生蛋白酶的条件和所产蛋白酶的性质。结果表明,不同的菌株产酶条件及蛋白酶的性质有较大的差异:少孢根霉主要产生酸性蛋白酶,在pH2.5-4.0的酸性介质中、32℃条件下培养时产酶能力较强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0时酶活力最高,在pH5.0附近最稳定;米曲霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,所产生的蛋白酶活力显著高于少孢根霉和毛霉,米曲霉在酸性条件下产酸性蛋白酶能力强,在中性条件下产中性蛋白酶能力强,在碱性条件下产碱性蛋白酶能力强,在28-32℃时产酶能力强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛范围内有很强的活力,在pH6.0-8.0的范围内稳定性强;毛霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,但酶活力明显低于米曲霉,毛霉在中性偏酸性(pH5.5)的介质中产酸性蛋白酶的能力较强,但介质的酸碱度对毛霉产中性及碱性蛋白酶没有影响,在28℃时产酸性、中性和碱性蛋白酶的能力都比较强,毛霉所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛pH范围内有活力,在pH5.0-6.0时酶活力最高,在pH5.0-7.0时稳定强。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

微生物碱性蛋白酶研究进展

本文综述了微生物碱性蛋白酶研究现状、高产菌株的选育、基因结构及功能，并根据当前研究状况对微生物碱性蛋白酶在今后的发展进行了展望。